Экстракорпоральное поколение мышиный плазмоцитов дендритных клеток из общего предшественники лимфоидных клеток с использованием Feeder System АС-6

Shiun Chang; Li-Mei Pai; Chien-Kuo Lee

doi:10.3791/53211

АВТОРЫ

СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

Войдите в систему

Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

Method Article

Экстракорпоральное поколение мышиный плазмоцитов дендритных клеток из общего предшественники лимфоидных клеток с использованием Feeder System АС-6

DOI:

10.3791/53211

⸱

November 23rd, 2015

Shiun Chang¹, Li-Mei Pai²^,³, Chien-Kuo Lee¹

¹Graduate Institute of Immunology, National Taiwan University College of Medicine, ²Department of Biochemistry, Chang Gung University College of Medicine, ³Molecular Medicine Research Center, Chang Gung University College of Medicine

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Резюме

In this study we present an in vitro culture system that can efficiently generate pDCs by co-culturing common lymphoid progenitors with AC-6 feeder cells in the presence of Flt3 ligand.

Аннотация

Плазмоцитов дендритные клетки (PDCs) являются мощным типа интерферона (ИФН-I), производящие клетки, которые активируются в ответ на инфекцию или во время воспалительных реакций. К сожалению, исследование функции PDC препятствует их низкой частоты в лимфоидных органах, а существующие методы экстракорпорального поколения DC преимущественно в пользу производства CDCs над PDCs. Здесь мы представляем уникальный подход эффективно генерировать PDCs из общих лимфоидных клеток-предшественников (CLPS) в пробирке. В частности, протокол, описанный подробно, как очистить CLPS из костного мозга и генерировать PDCs по сокультивировани гамма-облученной АС-6 фидерных клеток в присутствии лиганда Flt3. Уникальной особенностью этой системы культуры является то, что CLPS мигрировать под AC-6 клеток и стать булыжником площадь формирования клеток, важным шагом для расширения PDCs. Морфологически различные контроллеры домена, а именно PDCs и CDCs, были получены примерно через 2 недели с составом 70-90% PDCs в оптимальных условиях. Как правило, количество генерируемых PDCs этим методом, примерно в 100 раз количества CLPS семенами. Таким образом, это новая система, с которым решительно генерировать большое количество PDCs, необходимых для облегчения дальнейших исследований в развитие и функции этих клеток.

Введение

Дендритные клетки (ДК) являются профессиональными антиген-представляющими клетками, которые играют важную роль в регулировании иммунного ответа ^1. В то время как контроллеры домена являются гетерогенными, они могут быть классифицированы на две популяции, обычный РС (CDCs) и плазмоцитов ДК (PDCs) ^2,3. В дополнение к лимфоидных органов, CDCs и PDCs также найдены в тканях, включая легкие, кишечник и кожу ^2. Морфология CDCs и PDCs отличается, с CDCs проявляющих дендритных-выступы и форма PDCs быть более плазмы клеток, как. Кроме того, общий мыши округ Колумбия, CD11c, более высокий уровень экспрессии на CDCs чем на PDCs. Кроме того, CDCs ....