Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.
* Эти авторы внесли равный вклад
Гипоксия является отличительной чертой микроокружения опухоли и играет решающую роль в прогрессировании рака. В этой статье описывается процесс изготовления гипоксического рака на чипе на основе технологии 3D-печати клеток для повторения патологии рака, связанной с гипоксией.
Рак микроокружения оказывает значительное влияние на прогрессирование заболевания. В частности, гипоксия является ключевым фактором выживания при раке, инвазии и хеморазистанции. Хотя для изучения патологии рака, связанной с гипоксией, было разработано несколько моделей in vitro, сложное взаимодействие микроокружения рака, наблюдаемое in vivo, еще не было воспроизведено из-за отсутствия точного пространственного контроля. Вместо этого были предложены подходы к 3D-биофабрикации для создания микрофизиологических систем для лучшей эмуляции экологии рака и точной оценки противоопухолевого лечения. Здесь мы предлагаем подход к 3D-клеточной печати для изготовления гипоксического рака на чипе. Вызывающие гипоксию компоненты в чипе были определены на основе компьютерного моделирования распределения кислорода. Концентрические кольца Рак-строма были напечатаны с использованием биолинь, содержащих клетки глиобластомы и эндотелиальные клетки, для рекапитуляции типа солидного рака. Полученный чип реализовал центральную гипоксию и усугубил злокачественность при раке с образованием репрезентативных патофизиологических маркеров. В целом, ожидается, что предлагаемый подход к созданию микрофизиологической системы с твердым раком и миметикой преодолеет разрыв между моделями in vivo и in vitro для исследований рака.
Микроокружение рака является критическим фактором, стимулирующим прогрессирование рака. Множественные компоненты, включая биохимические, биофизические и клеточные сигналы, определяют патологические особенности рака. Среди них гипоксия тесно связана с выживаемостью при раке, пролифрацией и инвазией1. Из-за неограниченного роста и деления раковых клеток питательные вещества и кислород непрерывно истощаются, и генерируется гипоксический градиент. В условиях низкого содержания кислорода клетки активируют молекулярный каскад, связанный с гипоксией индуцируемым транскрипционным фактором (HIF). Этот процесс индуцирует некротическое ядро, запускает мет....
1. Компьютерное моделирование образования градиента кислорода
Гипоксический рак на чипе был разработан с использованием автоматизированной технологии 3D-печати клеток для повторения гипоксии и патологии, связанной с раком(рисунок 1). Транспортировка и потребление кислорода моделировались с использованием 3D-геом.......
В этом исследовании мы описываем процесс изготовления гипоксического рака на чипе на основе технологии 3D-печати клеток. Формирование гипоксического градиента в проектируемом чипе было предсказато с помощью компьютерного моделирования. Среда, которая может индуцировать гетерогенный.......
Авторы не раскрывают информацию.
Это исследование было поддержано Национальным исследовательским фондом Кореи (NRF), финансируемым Министерством образования (No 2020R1A6A1A03047902 и NRF-2018H1A2A1062091) и правительством Кореи (MSIT) (No. NRF-2019R1C1C1009606 и NRF-2019R1A3A3005437).
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
Cells | |||
Human umbilical vein endothelial cells | Promocell | C-12200 | |
U-87 MG cells | ATCC | ATCC HTB-14 | |
Disposable | |||
0.2 μm syringe filter | Sartorius | 16534-K | |
10 mL disposable syringe | Jung Rim | 10ml 21G32 | |
10 mL glass vial | Hubena | A0039 | |
10 mL Serological pipette tip | SPL lifescience | 91010 | |
15 mL conical tube | SPL lifescience | 50015 | |
18G plastic needle | Musashi engineering | PN-18G-B | |
20G plastic tapered dispense tip | Musashi engineering | TPND-20G-U | |
22x50 glass cover | MARIENFIELD | 0101142 | |
25 mL Serological pipette tip | SPL lifescience | 90125 | |
3 mL disposable syringes | HENKE-JET | 4020-X00V0 | |
40 µm cell strainer | Falcon | 352360 | |
5 mL Serological pipette tip | SPL lifescience | 91005 | |
50 mL conical tube | SPL lifescience | 50050 | |
50 mL Serological pipette tip | SPL lifescience | 90150 | |
50N precision nozzle | Musashi engineering | HN-0.5ND | |
Aluminum foil | SINKWANG | ||
Capillary tips | Gilson | CP1000 | |
Cell-scrapper | SPL lifescience | 90030 | |
Confocal dish | SPL lifescience | 200350 | |
Parafilm | Bemis | PM996 | |
Pre-coated histology slide | MATSUNAMI | MAS-11 | |
Reservoir | SPL lifescience | 23050 | |
T-75 cell culture flask | SPL lifescience | 70075 | |
Equipment | |||
3DX printer | T&R Biofab | ||
Autoclave | JEIOTECH | AC-12 | |
Centrifuger | Cyrozen | 1580MGR | |
Confocal laser microscopy | Olympus Life Science | FV 1000 | |
Fluorescence microscope | FISHER SCEINTIFIC | O221S366 | |
Forcep | Korea Ace Scientific | HC.203-30 | |
Hand tally counter | KTRIO | ||
Hemocytometer | MARIENFIELD | 0650030 | |
Incubator | Panasonic | MCO-170AIC | |
Laminar flow cabinet | DAECHUNG SCIENCE | CB-BMMS C-001 | |
Metal syringe | IWASHITA engineering | SUS BARREL 10CC | |
Operating Scissors | Hirose | HC.13-122 | |
Oven | JEIOTECH | OF-12, H070023 | |
Positive displacement pipette | GILSON | NJ05652 | |
Refrigerator | SAMSUNG | CRFD-1141 | |
Voltex Mixer | DAIHAN scientific | VM-10 | |
Water bath | DAIHAN SCIENTIFIC | WB-11 | |
Water purifier | WASSER LAB | DI-GR | |
Materials | |||
0.25 % Trypsin-EDTA | Gibco | 25200-072 | |
10x PBS | Intron | IBS-BP007a | |
4% Paraformaldehyde | Biosesang | ||
70% Ethanol | Daejung | 4018-4410 | |
Anti-CD31 antibody | Abcam | ab28364 | |
Anti-HIF-1 alpha antibody | Abcam | ab16066 | |
Anti-SHMT2/SHMT antibody | Abcam | ab88664 | |
Anti-SOX2 antibody | Abcam | ab75485 | |
Bovine Serum Albumin | Thermo scientific | J10857-22 | |
Collagen from porcine skin | Dalim tissen | PC-001-1g | |
DAPI (4',6-Diamidino-2-Phenylindole, Dihydrochloride) | Thermofisher | D1306 | |
Endothelial Cell Growth Medium-2 | Promocell | C22011 | |
Fetal bovine serum | Gibco | 12483-020 | |
Goat anti-Mouse IgG (H+L) Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor 488 | Theromofisher | A-11001 | |
Goat anti-Rabbit IgG (H+L) Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor 594 | Theromofisher | A-11012 | |
High-glucose Dulbecco’s Modified Eagle Medium(DMEM) | Hyclone | SH30243-0 | |
Hydrochloric acid | Sigma-Aldrich | 311413-100ML | |
Live/dead assay kit | Invitrogen | L3224 | |
Mouse IgG1, kappa monoclonal [15-6E10A7] - Isotype Control | Abcam | ab170190 | |
Penicillin/streptomycin | Gibco | 15140-122 | |
Phenol red solution | Sigma-Aldrich | P0290-100ML | |
Poly(ethylene-vinyl acetate) | Poly science | 06108-500 | |
Polydimethylsiloxane | Dowhitech | sylgard 184 | |
Rabbit IgG, polyclonal - Isotype Control | Abcam | ab37415 | |
Sodium hydroxide solution | Samchun | S0610 | |
Triton X-100 | Biosesang | TRI020-500-50 | |
Trypan Blue | Sigma-Aldrich | T8154 | |
Software | |||
COMSOL Multiphysics 3.5a | COMSOL AB | ||
IMS beamer | in-house software | ||
SolidWorks Package | Dassault Systems SolidWorks Corporation |
Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи
Запросить разрешениеThis article has been published
Video Coming Soon
Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены