Протокол разработки модели остеотомии бедренной кости у крыс-альбиносов Wistar

Резюме

Здесь мы представляем протокол для ятрогенного перелома ствола бедренной кости крыс-альбиносов Wistar и наблюдения за развитием мозоли. Эта модель остеотомии бедренной кости может помочь исследователям оценить процесс заживления переломов и изучить, как препарат может повлиять на заживление переломов.

Аннотация

Заживление переломов – это физиологический процесс, приводящий к регенерации костных дефектов скоординированным действием остеобластов и остеокластов. Остеоанаболические препараты могут увеличить восстановление переломов, но имеют ограничения, такие как высокая стоимость или нежелательные побочные эффекты. Потенциал заживления костей препарата может быть первоначально определен исследованиями in vitro , но для окончательного доказательства концепции необходимы исследования in vivo . Наша цель состояла в том, чтобы разработать модель остеотомии бедренной кости грызунов, которая могла бы помочь исследователям понять развитие образования мозоли после перелома ствола бедренной кости и которая могла бы помочь установить, обладает ли потенциальный препарат свойствами заживления костей. Взрослые самцы крыс-альбиносов Wistar были использованы после разрешения Институционального комитета по этике животных. Грызунов обезболивали, а в асептических условиях создавались полные поперечные переломы на средней трети стволов бедренных костей с помощью открытой остеотомии. Переломы были уменьшены и внутренне зафиксированы с помощью интрамедуллярных K-проводов, и было разрешено вторичное заживление переломов. После операции в течение 5 дней давали внутрибрюшинные анальгетики и антибиотики. Последовательные еженедельные рентгеновские снимки оценивали образование мозоли. Крыс приносили в жертву на основе радиологически заранее определенных временных точек, а развитие перелома мозоли анализировали рентгенологически и с помощью иммуногистохимии.

Введение

Кость представляет собой плотную соединительную ткань, состоящую из костеобразующих клеток, остеобластов и костно-резорбирующих клеток, остеокластов. Заживление переломов – это физиологический процесс, приводящий к регенерации костных дефектов скоординированным действием остеобластов и остеокластов¹. Когда есть перелом, остеобластная и остеокластическая активность в месте перелома являются одними из важных факторов, которые определяют заживление кости². Когда заживление перелома отклоняется от своего нормального течения, это приводит к задержке союза, неправильному объединению или непрофсоюзированию. Говорят, что перелом....

протокол

Эксперименты на животных были проведены после получения этического одобрения от Институционального комитета по этике животных (IAEC), AIIMS, Нью-Дели, Индия (286/IAEC-1/2021).

1. Предоперационная процедура

1. Домашний самец крыс-альбиносов Wistar в возрасте 6-8 недель, весом от 150 до 200 г каждый, в Центральном животноводческом учреждении (CAF) в отдельных индивидуальных клетках. Это гарантирует отсутствие хирургической травмы / травмы места перелома, когда несколько крыс делят клетки.
2. Держите крыс при температуре 23 ° C ± 2 ° C в среде с контролируемой влажностью с относительной влажностью 50% ± 5%, подве....

Результаты

Это исследование было предпринято для разработки модели остеотомии бедренной кости у крыс-альбиносов Wistar. Эта модель может быть использована для оценки заживления костей, а также остеогенного эффекта перспективного остеоанаболического препарата в заживлении костей. Соблюдались ста?.......

Обсуждение

Этот метод ясно описывает детали, необходимые для разработки модели остеотомии переломов у крыс-альбиносов Wistar. Эта модель может быть использована для оценки остеогенного эффекта перспективного остеоанаболического препарата в заживлении переломов, а также для понимания тонкостей за.......

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
Alcohol	Raman & Weil Pvt. Ltd, Mumbai, Maharashtra, India	MFG/MD/2019/000189	Sterillium hand disinfectant
Artery forceps	Nebula surgical, Gujarat, India	G.105.05S	5", straight
Bard-Parker handle	Nebula surgical, Gujarat, India	G.103.03	Size number 3
Betadine solution	Win-medicare New Delhi, India	UP14250000001	10% w/v Povidone iodine solution
Cat's-paw skin retractor	Nebula surgical, Gujarat, India	908.S	Small
EDTA	Sisco research laboratories Pvt. Ltd, Maharashtra, India	43272	Disodium salt
Eosin	Sigma Aldrich, Merck Life Sciences Pvt Ltd, Mumbai, Maharashtra, India	115935	For preparing the staining solution
Forceps (plain)	Nebula surgical, Gujarat, India	115.06	6", plain
Forceps (toothed)	Nebula surgical, Gujarat, India	117.06	6", toothed
Formaldehyde	Sisco research laboratories Pvt. Ltd, Maharashtra, India	84439	For preparing the neutral buffered formalin
Haematoxylin	Sigma Aldrich, Merck Life Sciences Pvt Ltd, Mumbai, Maharashtra, India	104302	For preparing the staining solution
Hammer	Nebula surgical, Gujarat, India	401.M
Injection Cefuroxime	Akumentis Healthcare Ltd, Thane, Maharashtra, India	48/UA/SC/P-2013	Cefuroxime sodium IP, 1.5 g/vial
Injection Ketamine	Baxter Pharmaceuticals India Private Limited, Gujarat, India	G/28-B/6	Ketamine hydrochloride IP, 50 mg/mL
Injection Xylazine	Indian Immunologicals Limited, Hyderabad, Telangana, India	28/RR/AP/2009/F/G	Xylazine hydrochloride USP, 20 mg/mL
Injection Lignocaine	Jackson laboratories Pvt Limited, Punjab, India	1308-B	2% Lignocaine Hydrochloride IP, 21.3 mg/mL
Injection Tramadol	Intas Pharmaceuticals Limited, Ahmedabad, Gujarat, India	MB/07/500	Tramadol hydrochloride IP, 50 mg/mL
K-wire	Nebula surgical, Gujarat, India	166 (1mm)	12", double ended
Mechanical drill for inserting K-wire	‎Bosch, Germany	06019F70K4	GSR 120-LI Professional
Metzenbaum cutting scissors	Nebula surgical, Gujarat, India	G.121.06S	6", straight
Needle holder	Nebula surgical, Gujarat, India	G.108.06	6", straight
Ophthalmic ointment	GlaxoSmithKline Pharmaceutical Limited, Bengaluru, Karnataka, India	KTK/28a/467/2001	Neomycin, Polymixin B sulfate and Bacitracin zinc ophthalmic ointment USP
Osteotome (chisel)	Nebula surgical, Gujarat, India	1001.S.10	10 mm, straight
Periosteal elevator	Nebula surgical, Gujarat, India	918.10.S	10 mm, straight
Pliers cum wire cutter	Nebula surgical, Gujarat, India	604.65
Reynold’s scissors	Nebula surgical, Gujarat, India	G.110.06S	6", straight
Standard semi-synthetic diet	Ashirvad Industries, Chandigarh, India	No catalog number available	Detailed composition provided in materials used
Steel cup for keeping betadine for application	Local purchase	No catalog number available
Steel tray with lid for autoclaving instruments	Local purchase	No catalog number available
Sterile gauze	Ideal Healthcare Industries, Delhi, India	E(0047)/14/MNB/7951	Sterile, 5cmx5cm, 12 ply
Sterile marble block for support	Local purchase	No catalog number available	Locally fabricated; autoclavable
Syringe and needle (1 mL)	Becton Dickinson India Pvt. Ltd., Haryana, India	REF 303060	1 mL sterile Syringe with 26 G x 1/2 (0.45 mm x 13 mm) needle
Syringe and needle (2 mL)	Becton Dickinson India Pvt. Ltd., Haryana, India	REF 307749	2 mL sterile syringe with 24 G x 1'' (0.55 mm x 25 mm) needle
Syringe and needle (10 mL)	Hindustan Syringes & Medical Devices Ltd. Faridabad, India	334-B(H)	10 mL sterile syringe with 21 G x1.5" (0.80 mm x 38 mm) needle
Surgical blades (size no.15)	Paramount Surgimed Ltd, New Delhi, India for Medline Industries Inc, IL, USA	REF MDS15115E	Sterile, Single use
Surgical blades (size no.24)	Paramount Surgimed Ltd, New Delhi, India for Medline Industries Inc, IL, USA	REF MDS15124E	Sterile, Single use
Sutures	Healthium Medtech Pvt Ltd, Bangalore, Karnataka, India	SN 3318	4-0, 16 mm, 3/8 circle cutting needle, monofilament polyamide suture
Wax block in aluminium tray	Locally fabricated	No catalog number available	30 cm x 30 cm x 4 cm aluminium tray containing wax (to prevent animal from slipping)
X-ray machine	Philips India Ltd, Gurugram, Haryana	SN19861013	Model: Philips Digital Diagnost R 4.2