Лабораторная и полевая культура личинок башмачка Crepidula fornicata

Резюме

В статье представлены методы культивирования личинок брюхоногих моллюсков Crepidula fornicata в малообъемной лабораторной системе и в системе мезокосма окружающей среды и морской воды, которые могут быть развернуты в полевых условиях.

Аннотация

Брюхоногий моллюск Crepidula fornicata широко используется для изучения биологии, физиологии и экологии развития личинок. Выводковые личинки велигера этого вида собирали путем сифона на сито после естественного выпуска взрослыми особями, распределяли по культуре в плотности 200/л и скармливали Isochrysis galbana (штамм T-ISO) в концентрации 1 x 10⁵ клеток/мл. Рост скорлупы и приобретение способности к метаморфозу были задокументированы у личинок братьев и сестер, выращенных в вентилируемых культурах объемом 800 мл, предназначенных для уравновешивания с окружающим воздухом или определенными атмосферными газовыми смесями. В отличие от этих лабораторных условий культивирования; Данные о росте и компетентности также были собраны для личинок, выращенных в проточном мезокосме морской воды объемом 15 л, расположенном в полевой популяции репродуктивных взрослых особей. Темпы роста и сроки метаморфической компетентности в лабораторных культурах были аналогичны тем, о которых сообщалось в ранее опубликованных исследованиях. Личинки, выращенные в полевых условиях, росли гораздо быстрее и метаморфизировались раньше, чем сообщалось о каких-либо лабораторных исследованиях. В совокупности эти методы подходят для изучения развития личинок в заранее определенных контролируемых условиях в лаборатории, а также в естественных условиях в полевых условиях.

Введение

Тапочка, Crepidula fornicata (Gastropoda: Calyptraeidae), широко представлена в современной и исторической исследовательской литературе из-за ее полезности в качестве модели развития и из-за ее широкого воздействия в качестве инвазивного вида. Она послужила основополагающим примером спирального развития в классическую эпоху экспериментальной эмбриологии^{1 и} пережила возрождение интереса с применением современных инструментов визуализации и геномики для анализа механизмов раннего развития лофотрохозоидов ^2,3. С другой стороны, другие исследования были сосредоточены на воздействии....

протокол

1. Рутинные маневры по созданию и поддержанию личиночных культур C. fornicata

ПРИМЕЧАНИЕ: Этот метод начинается с галлона (3,8 л) банки морской воды, содержащей взрослых особей C. fornicata , которые только что выпустили выведенных личинок велигера. Взрослые особи могут быть собраны в полевых условиях или получены от поставщика, указанного в Таблице материалов. Взрослые особи — это протандровые гермафродиты, которые живут в брачных стаях с сидячими самками на дне стаи. Не разбивайте стопки для взрослых. Сезонность воспроизводства и методы подготовки взрослых особей к нересту вне сезона были ....

Результаты

Рост личинок и приобретение способности к метаморфозу измеряли в 4 одновременных репликациях культур объемом 800 мл, каждая из которых содержала 160 личинок, полученных из родственной партии личинок, которые вылупились из одной яичной массы и которых кормили Isochrysis galbana с плотностью 1 .......

Обсуждение

Несмотря на то, что личинки C. fornicata относительно легко поддаются культивированию по сравнению с другими планктотрофными морскими личинками, внимание к основам надлежащей практики культивирования по-прежнему имеет важное значение^17,19. Здоровые личи?.......

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
Bucket, Polyethylene, 7 gallon	US Plastic	16916	for mesocosm
Crepidula fornicata	Marine Biological Laboratory, Marine Resources Center	760	adult broodstock
Hotmelt glue, Infinity Supertac 500	Hotmelt.com	INFINITY IM-SUPERTAC-500-12-1LB	good for bonding polyethylene
Jar, glass, 32 oz, with polypropylene lid	Uline	S-19316P-W	for 800 mL ventilated cultures
Nitex mesh, 236 µm	Dynamic Aqua Supply Ltd.	NTX236-136	for mesocosm
Nut, hex, nylon, 10-32 thread	Home Depot	1004554441	for fastening tubing barbs
Rivets, nylon, blind, 15/64" diameter, 5/32"-5/16" grip range, pack of 8	NAPA auto parts	BK 6652844	4 packs needed per mesocosm
Tubing barb 1/8" x 10-32 thread	US Plastic	65593	2 needed per culture jar
Tubing, polyethylene, 2.08 mm OD	Fisher Scientific	14-170-11G	for ventilating gas stream inside culture jar
Tubing, Tygon, 1/8"x3/16"x1/32"	US Plastic	57810	fits barbs for ventilating cultures