Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области регенерации твердых и мягких тканей. Основным преимуществом этой техники является то, что использование мыши позволяет детально провести анализ регенерации костей. Начните с полностью анестезированой взрослой мыши.
Тщательно побрить и дезинфицировать хирургическую область с 10%йодный раствор. Затем ввемит 0,5%лидокаин гидрохлорид в правой нижней конечности. Затем, сделав 15-миллиметровый продольный разрез кожи на правой нижней ноге с числом 15 скальпеля, прямо отделить основные мышцы, заботясь, чтобы не удалить все periosteum.
Затем вырежьте малоберцовую кость ножницами. Возьмитесь за лодыжку узкими тонкими типсами и используйте 27-го калибра иглы, чтобы сделать отверстие в кости, около пяти миллиметров от пятки. Игла должна проникать в кожу, кости и кожу в этом порядке.
Когда игла полностью проникает, вырезать кончик и корень с щипцом, так что игла составляет около 15 миллиметров. Сделайте еще одно отверстие таким же образом, около двух-трех миллиметров проксимальной. Далее, держать вокруг лодыжки, и пройти 25-го калибра иглы под коленом таким же образом.
После иглы проникает, вырезать кончик и корень с щипцом. Сделайте еще одно отверстие таким же образом, около двух-трех миллиметров дистал. Поместите изготовленный на заказ отвлекающий элемент таким образом, чтобы он был параллельным направлению расширения.
Исправить иглы и устройство с достаточным полимеризации зубной смолы для заполнения канавки устройства. Подождите завершения полимеризации, которая должна занять около пяти минут. Затем, будучи очень осторожным, чтобы не повредить окружающие ткани, вырезать середину диафиза голени с помощью очень тонкой резки диска при применении солевого раствора.
Закройте рану 4-0 нейлоновым швом. Дайте подкожные инъекции бупренорфина для анальгезии сразу после операции. Существуют различные отчеты о периоде задержки и скорости отвлечения внимания, но здесь показаны репрезентативные протоколы.
После пятидневного периода задержки начните процедуру отвлечения внимания. Для расширения используйте штифт, прикрепленный к винту быстрого расширения. Перемести булавку в сторону желтой стрелки, прикрепленной к удлинию винта.
Держите хвост с мизинцем и ладонью, и исправить расширение устройства с указательным пальцем и большим пальцем. Выполните расширение, перемещая штифт в направлении желтой стрелки 0,2 миллиметра за четверть поворота. Продолжайте удлинение со скоростью 0,2 миллиметра каждые 12 часов в течение восьми дней, что приведет к полному разрыву в 3,2 миллиметра.
На этом снимке показаны типичные результаты рентгенографии через четыре недели после отвлечения в модели. Новообразованная кость замечена в месте отвлечения. Гематоксилин и эозин окрашивания результаты видны здесь.
Наблюдался недавно сформированный костный мост, и новообразованную кость можно было легко отличить от родной кости. Мы представили мышь tibial DO модель, разработанная с использованием на заказ отвлекающий. Использование мыши DO модель облегчает более подробный анализ.
Он особенно подходит для экспериментов с использованием нокаут мышей.
