이 방법은 단단하고 연약한 조직 재생 필드에 있는 중요한 질문에 대답하는 것을 도울 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 마우스를 사용하면 뼈 재생에 대한 상세한 분석을 할 수 있다는 것입니다. 완전히 마취 된 성인 마우스로 시작합니다.
10%의 요오드 용액으로 수술 부위를 조심스럽게 면도하고 소독하십시오. 이어서 오른쪽 팔다리에 0.5%의 리도카인 염산염을 투여한다. 그런 다음, 숫자 15 메스와 오른쪽 하반신에 15 밀리미터 세로 피부 절개를 한 후, 무딘 기본 근육을 분리, 모든 periosteum을 제거하지 않도록주의.
그런 다음 가위로 비골을 자른다. 좁고 얇은 집게로 발목을 잡고 27 게이지 바늘을 사용하여 발 뒤꿈치에서 약 5 밀리미터 떨어진 뼈에 구멍을 만듭니다. 바늘은 그 순서대로 피부, 뼈 및 피부를 관통해야 합니다.
바늘이 완전히 침투하면 바늘이 약 15 밀리미터되도록 젖꼭지로 팁과 뿌리를 잘라냅니다. 같은 방식으로 또 다른 구멍을 만드십시오, 약 2 ~ 3 밀리미터 근위. 다음으로, 발목 주위를 잡고, 같은 방식으로 무릎 아래에 25 게이지 바늘을 전달합니다.
바늘이 침투 한 후, 젖꼭지로 팁과 뿌리를 잘라. 같은 방식으로 또 다른 구멍을 만드십시오, 약 2 ~ 3 밀리미터 탈구. 확장 방향과 평행하도록 사용자 지정된 산만기를 배치합니다.
장치의 홈을 채우기 에 충분한 중합 치과 수지로 바늘과 장치를 고정합니다. 중합화가 완료될 때까지 기다립니다. 그런 다음, 주변 조직을 손상시키지 않도록 매우 조심하면서, 식염수 용액을 적용하는 동안 매우 얇은 절단 디스크를 사용하여 경골 의 다이아피의 중간을 잘라.
4-0 나일론 봉합사로 상처를 닫습니다. 수술 직후 진통을 위해 부프레노르핀의 피하 주사를 주세요. 대기 시간 및 주의 산만 속도에 대한 다양한 보고서가 있지만 여기에 대표 프로토콜이 표시됩니다.
5 일의 대기 시간 기간 후, 산만 절차를 시작합니다. 확장의 경우 빠른 확장 나사에 부착된 핀을 사용합니다. 확장 나사에 부착된 노란색 화살표 방향으로 핀을 이동합니다.
꼬리를 새끼 손가락과 손바닥으로 잡고, 집게 손가락과 엄지 손가락으로 확장 장치를 고정합니다. 1분기 회전을 위해 0.2밀리미터의 노란색 화살표 방향으로 핀을 이동하여 확장을 수행합니다. 8일 동안 12시간마다 0.2밀리미터의 속도로 계속 길어지며 총 간격은 3.2밀리미터입니다.
이 이미지는 모델에서 산만 한 후 4 주 동안 일반적인 방사선 촬영 결과를 보여줍니다. 새로 형성 된 뼈는 산만 사이트에서 볼 수 있습니다. 헤마톡시린과 에신 염색 결과는 여기에서 볼 수 있습니다.
새로 형성된 뼈 다리를 관찰하고 새로 형성된 뼈는 토착 뼈와 쉽게 구별될 수 있었다. 우리는 사용자 정의 만든 산만을 사용하여 개발 된 마우스 티비알 DO 모델을 제시했다. 마우스 DO 모델을 사용하면 보다 자세한 분석을 용이하게 합니다.
그것은 녹아웃 마우스를 사용 하 여 실험에 특히 적합.