Биопсия, как я думаю, большинство из вас знает, это удаление немного ткани из органа, представляющих интерес, и в данном случае, это молочная железа. Образец биопсии очень полезен, если вы собираетесь делать такие вещи, как анализ экспрессии генов, если вы собираетесь делать что-то вроде взять часть ткани и сделать гистологический анализ, чтобы посмотреть на структуру на микроскопическом уровне молочной железы, также очень полезно определить такие вещи, как сигнализация путей, связанных с действием гормонов, например, , Так что один из предохожений, что вы должны быть в курсе, когда вы делаете какой-либо выборки молочных тканей, вы взяли образец, который действительно репрезентативным? Потому что, вы можете захватить лобулы, которые были бы, как скопление винограда, или вы можете захватить некоторые отдельные альвеолы, которые действительно не представляют собой нормальные, так что, надежда, что у вас есть, когда вы делаете вашу биопсию молочной железы является то, что вы собираете паренхимальной ткани, которая является просто причудливое слово, чтобы сказать функциональные ткани, ответственные за производство молока , образец, который является репрезентативным.
Большинство сенсорных нервных окончаний в молочной железе связаны с кожей, и поэтому важно понимать и ценить, что, как только вы сделали надлежащую подготовку области, где вы собираетесь сделать первоначальный разрез, чтобы анестезировать кожу, то есть очень мало на пути каких-либо сенсорных нервных окончаний, связанных с паренхимальной ткани себя , и поэтому дискомфорт, что животное будет чувствовать себя в основном связано с кожей. Таким образом, есть множество вещей, которые можно сделать с этой тканью, и это на самом деле позволяет собрать больше информации о том, как это животное работает, по сравнению с тем, что может быть получено от простого наблюдения за тем, что кормили животное и ответы на выход молочного белка или выход молочного компонента. Все описанные методы были одобрены Вирджинийского технологического институционального комитета по уходу за животными и использованию.
За день до запланированной биопсии, мыть и скраб животных, в частности, вымя, чтобы удалить навоз и загрязненный материал. Оцените здоровье, физическое состояние и поведение животного. Используйте только здоровых коров.
Полностью доить корову. Перемести животное в желоб сжатия, в идеале в течение двух часов после доения, чтобы свести к минимуму присутствие молока в железах. Сдерживайте животное головными воротами.
Поместите веревку недоуздок на голову коровы, чтобы предотвратить движение назад и вперед. Потяните голову животного в одну сторону и привяжу веревку к выдавливать желоб, используя быстрый узел релиза, чтобы держать голову на месте. Очистите область инъекций с 70% изопропилового спиртового тампона и ввемите флуниксина меглюмином от 1,1 до 2,2 миллиграмма на килограмм массы тела внутривенно, через яремную вену, за 15-20 минут до биопсии.
Найдите яремную вену. Поднимите яремную вену путем применения давления у основания яремной канавки. Проверьте, чтобы убедиться, что в шприце нет пузырьков.
Вставьте иглу в поднятую яремную вену и нарисуйте 0,5 миллилитров крови в шприц дважды и смешайте с содержимым. Если в шприце нет крови, передислоцив иглу. Если игла обитает в вену, ввимите содержимое.
Аккуратно снимите иглу, нанесите марлю с нежным давлением на место инъекции, чтобы предотвратить кровотечение. Администрирование ксилазина гидрохлорид внутривенно, от 0,01 до 0,05 миллиграммов на килограмм массы тела в сосуде копчигея примерно за пять-десять минут до биопсии, чтобы дать достаточно времени для создания седиации. Поднимите хвост и очистить область инъекций с 70%isopropyl спирта тампон.
Проверьте, чтобы убедиться, что в шприце нет пузырьков. Вставьте иглу в хвостовой сосуд, нарисуйте 0,2 миллилитров крови в шприц и смешайте с содержимым, чтобы игла была резидентом в сосуде. Если игла является резидентом, ввимите содержимое шприца.
Аккуратно удалите иглу. Нанесите марлю с нежным давлением на место инъекции. Это действительно важно иметь альфа два разворота под рукой, как толазолин, это потому, что молочные коровы чувствительны к воздействию ксилазина, и передозировка ксилазина может вызвать отек легких, которые потенциально могут быть фатальными для молочной коровы, так что следите за вашей коровы для признаков чрезмерного седитации, и если они происходят, то соответствующее количество толазолина может быть дано.
Мы хотим, чтобы наши коровы стояли во время процедуры. Слишком много ксилазина может заставить их сесть. У помощника связать хвост для процедуры, выбрать место биопсии на вымя, как правило, в верхней области, чтобы свести к минимуму сбор соединительной ткани и избежать проникновения в цистерну железы.
Наблюдайте и пальпировать кожу с особым вниманием, чтобы определить любые крупные подкожные кровеносные сосуды, чтобы избежать этих сосудов во время биопсии. Обрезать волосы от 15 на 15 сантиметров квадратной площади вокруг места биопсии, подготовить биопсии области с povidone-йод, 0,75 процента доступны йода, или хлоргексидин глюконат скраб. Альтернатива 70%изопропиловый спирт по крайней мере три раза, чтобы удалить все видимые и невидимые мусора.
Нанесите асептический раствор скраба и изопропиловый спирт круговыми движениями, используя подход наизнанку. Убедитесь, что антисептический раствор скраб остается в контакте с кожей, по крайней мере пять минут. Используйте набор настоя бабочки с иглой 18 G, чтобы внести шесть миллилитров из двух процентов лидокаина гидрохлорид подкожно на месте разреза, чтобы создать линейный блок.
Не проникать в более глубокие ткани. Разрешить местной анестезии для диффузного в течение трех-пяти минут, выполнить еще одно повторение скраб раствора и алкоголя до разреза. Ожидая, подготовить инструменты биопсии.
То, что вы хотите сделать с точки зрения предоставления анальгезии десенсибилизировать кожу. Это потому, что у нас больше нервной иннервации кожи и подкожных тканей, и в паренхиме, мы действительно говорим только о растяжения рецепторов, и они не чувствуют хирургической боли так же, как кожа и подкожные ткани делать. В самом деле, если вы в конечном итоге положить местной анестезии через в паренхиму, вы можете увеличить риск кровотечения во время процедуры.
Используйте асептические методы при обработке инструментов биопсии и для разреза. Вымойте руки, чтобы удалить все видимые загрязнения и применять стерильные хирургические перчатки. Упорядочить хирургические инструменты в стерильной области в порядке использования.
Иметь номер 10 скальпель, стерильную марлю, и собрать инструмент биопсии и стерильное полотенце для гомеостаза. Процедура одна, основной инструмент биопсии. Соберите основной инструмент биопсии с помощью хирургических перчаток.
Поместите семь стерильных частей на стерильную драпировку. Вставьте лезвие в систему стыковки на второй части. Вставьте часть три поверх части 2, гарантируя, что док-станция будет выравниваться.
Вовлечь последний край лезвия в систему стыковки части четыре. Нажмите вперед кусок четыре и наблюдать, если кусок четыре рядом с кусок три. Вставьте пятый фрагмент на устройство.
Убедитесь, что док-станция выровнена. Вставьте шестой кусок в верхней части второй части. Убедитесь, что док-станция выровнена.
Вставьте запирающий винт в док-станцию. Нажмите вперед кусок три, чтобы покрыть замок винт. Активируйте инструмент, толкая вперед кусок четыре и наблюдать лезвие за пределами инструмента.
Потяните кусок четыре назад, чтобы втянуть лезвие в инструмент. Убедитесь, что корова достаточно под наркозом и место биопсии достаточно анестезируется, щепотку кожи, чтобы обеспечить никакую реакцию. Сделайте двух-трехсантиметровый вертикальный разрез через кожу и подкожные ткани от проксимальных до дистальных с использованием скальпеля номер 10.
Прикрепите инструмент биопсии к беспроводной дрель с использованием стерильных методов. Поместите сверло против инструмента биопсии и проверьте, прочно ли инструмент прикреплен к сверле. Обеспечь адекватную сдержанность, имея человека поднять хвост во время всех процедур.
Включите сверло с использованием вращения по часовой стрелке и низкой скорости. Заранее весь инструмент биопсии около 7,5 сантиметров в вымя через разрез в то время как инструмент вращается. Выключите сверло и вручную удлинйте часть 4 инструмента, включите дрель с помощью вращения по часовой стрелке и низкой скорости, удалите инструмент, содержащий ядро ткани, из вымя.
Нанесите сильное давление сразу на рану с помощью стерильного полотенца, по крайней мере 20 минут. Вставьте канюлю в ткань. Нажмите кусок вперед, чтобы активировать инструмент.
Поверните в медленном вращении по часовой стрелке. Образец ткани в настоящее время внутри канюлы. Удалите ткань из инструмента биопсии с помощью пинцета.
Храните образец в одном X фосфат буферного солевого раствора и оценить количество ткани. Прими жизненно важные признаки коровы каждые 10 минут после биопсии, по крайней мере 30 минут. Проверьте наличие кровотечения после 20 минут давления на месте биопсии.
Если есть капли крови, продолжайте оказывать давление в течение дополнительных 5 до 10 минут. Закройте разрезы с использованием скобок из нержавеющей стали с интервалом в пять миллиметров после того, как все кровотечения прекратились. Нанесите аэрозольную повязку на область биопсии.
Наблюдайте за животным в течение 50 минут после процедуры. Процедура 2, инструмент биопсии иглы. Следуйте инструкциям производителя для устройства.
Удалите биопсию иглы из пакета с помощью стерильных методов. Откажитесь от иглы, если какие-либо повреждения наблюдаются. Прикрепите иглу к устройству.
Закройте крышку и петух устройства. Убедитесь, что корова достаточно под наркозом и место биопсии достаточно анестезируется, щепотку кожи, чтобы обеспечить никакую реакцию. Сделайте один-два сантиметра вертикального разреза через кожу и подкожные ткани от проксимальных до дистальных с использованием числа 10 скальпеля.
Вставьте биопсию иглы в разрезе, около 10 до 13 сантиметров от кожи. Активируйте устройство биопсии иглы для сбора ткани. Удалите иглу из вымя.
Нанесите немедленное сильное давление на рану с помощью стерильного полотенца, по крайней мере 20 минут. После удаления ткани с иглы, следуйте описанной ранее процедуре, чтобы закрыть разрез. Вся процедура занимает около 45 минут, чтобы закончить, на животное.
Сгустки крови должны быть удалены из четверти биопсии. Кроме того, необходимо по возможности наблюдать за урожайностью молока и приемом пищи. Всегда обеспечим здоровье и благополучие животного до, во время и после процедуры.
Документировать все препараты, вводимые животным. Проверьте наличие крови в молоке в течение семи-10 дней после биопсии. Сгустки крови ручной полосы из биопсии квартала при последующих доениях и обеспечить полное удаление молока происходит.
Наблюдайте за выходом молока, и, если возможно, индивидуальное ежедневное потребление кормов до тех пор, пока хирургические скобы не будут удалены. Мониторинг животных два раза в день для температуры тела, дыхания и сердечных сокращений, и поведение, пока хирургические скобы были удалены. Проверьте место биопсии два раза в день на отек, нежность, и любые признаки дренажа, пока хирургические скобы были удалены.
Если они наблюдаются, обратитесь к ветеринару. Удалите скобы из места разреза через 10-14 дней после биопсии, в зависимости от скорости заживления. Обратитесь к ветеринару, если какие-либо признаки местной или системной инфекции наблюдаются.
Итак, как только биопсия сделана, вы прервали кровоснабжения и, следовательно, питательные вещества и кислород к этой ткани, и поэтому, если вы не очень быстро удаляете это ядро ткани, и каким-то образом останавливаете активность тканей, концентрации, которые вы могли бы измерить в более поздний момент времени в лаборатории, могут не отражать то, что происходит в этом животном во время биопсии. Как правило, мы бы быстро удалить ткани, и вспышки заморозить его в жидком азоте, чтобы попытаться сохранить эту деятельность. Другая вещь, которую можно сделать с этой тканью, и это на самом деле то, что мы сделали с тканью, которую мы собрали, было можно изолировать и расти клетки, которые присутствуют в этой ткани в системе культуры.
В нашем случае, мы заинтересованы в эпителиальных клетках, которые находятся в этой ткани, потому что это клетки, которые на самом деле синтезируют и выделяет компоненты молока, и поэтому, эти клетки из этих частей ткани были помещены в культуру, и на самом деле, они все еще растут сегодня. Зверей наблюдали два раза в день в течение 10 дней после процедуры. Никаких осложнений не произошло ни во время процедуры, ни в послеоперационный период, при этом жизненно важные параметры коров остаются в пределах нормы.
Линейные модели показывают, что за 10 дней до биопсии животные производили 23,35 килограмма молока в день. За 10 дней до 10 дней после биопсии у животных не произошло существенных изменений в урожайности молока. Биопсия молочной железы крупного рогатого скота является минимально инвазивной процедурой, позволяющей животному иметь короткое время восстановления.
Таким образом, эта процедура биопсии может быть использована во многих испытаниях питания и других типах испытаний, где мы могли бы использовать повторные меры на животных, так что, например, если у нас есть четыре периода с четырьмя различными питательными процедурами, мы могли бы легко биопсии этих коров четыре раза в конце каждого периода, что позволяет, возможно, неделю отдыха между каждым периодом , чтобы убедиться, что животные возвращаются обратно в нормальное производство.
