生検は、私はあなたが知っていると思うように、関心のある臓器から組織のビットを除去し、この場合、それは乳腺です。生検サンプルは、遺伝子発現解析などを行う場合、組織の一部を採取して組織学的分析を行う場合、乳腺の顕微鏡レベルで構造を見る場合に非常に有用であり、ホルモン作用に関連するシグナル伝達経路などを決定するのにも非常に有用です。乳腺組織サンプリングを行う際に注意する必要がある注意の1つは、本当に代表的なサンプルを採取しましたか?なぜなら、ブドウの群れのような小葉を捕獲したり、本当に正常を表さない個々の胞を捕獲したりすることがあるので、乳腺生検を行うときに持っている希望は、乳の生産を担当する機能的組織を言うだけの空想的な言葉である花座組織を収集することです。を示すサンプルです。
乳腺の感覚神経終末のほとんどは皮膚に関連しているので、最初の切開を行う領域の適切な準備を行い、皮膚を麻酔するために、皮膚自体に関連する感覚神経終末の方法はほとんどないことを認識し、理解することが重要です動物が感じる不快感は、主に皮膚に関連しています。だから、この組織で行うことができる様々なことがあり、実際には、動物に供給されたものと牛乳タンパク質出力または牛乳成分の出力の応答を観察することから得られるかもしれないものと比較して、その動物がどのように機能するかについてのより多くの情報を収集することができます。記載されているすべての方法は、バージニア工科大学の施設動物ケアと使用委員会によって承認されました。
予定された生検の1日前に、動物、特に乳房を洗浄してスクラブし、肥料および汚れた材料を除去する。動物の健康、体調、行動を評価します。健康な牛のみを使用してください。
牛を完全に搾乳する。動物をスクイーズシュートに移し、理想的には搾乳から2時間以内に、腺でのミルクの存在を最小限に抑えます。動物をヘッドゲートで拘束する。
後方および前方の動きを防ぐために、牛の頭にロープホルターを置きます。動物の頭を片側に引っ張り、クイックリリースノットを使用してロープをスクイーズシュートに結んで頭を所定の位置に保持します。70%イソプロピルアルコール綿棒で注射領域をきれいにし、生検の15〜20分前に頸静脈を介して、体重1キログラム当たり1.1〜2.2ミリグラムのフルニシンメグルミンを静脈内に投与する。
頸静脈を見つけます。頸部溝の基部に圧力を加えて頸静脈を上げる。シリンジに泡がないことを確認します。
上げられた頸静脈に針を挿入し、0.5ミリリットルの血液を注射器に2回引き込み、内容物と混ぜます。注射器に血液が見つからない場合は、針を移動します。針が静脈に存在する場合は、内容物を注入します。
針をそっと取り出し、注射部位に優しい圧力でガーゼを塗布し、出血を防ぎます。シラジン塩酸塩を静脈内に投与し、生検の約5〜10分前に尾骨血管の体重1キログラム当たり0.01〜0.05ミリグラムを投与し、沈着の確立に十分な時間を確保する。尾を上げ、70%イソプロピルアルコール綿棒で注射の領域をきれいにします。
シリンジに泡がないことを確認します。針を尾血管に挿入し、0.2ミリリットルの血液を注射器に引き込み、内容物と混ぜて針が容器に入るようにします。針が常駐している場合は、注射器の内容物を注入します。
針をそっと取り出します。注射部位に穏やかな圧力でガーゼを適用します。トラゾリンのようなアルファ2の逆転を手元に持つことは本当に重要であり、これは乳牛がキシラジンの影響に敏感であり、キシラジンの過剰摂取は肺水腫を引き起こす可能性があり、乳牛にとって致命的である可能性があるため、牛に過剰沈下の兆候を見守り、適切な量のトラゾリンが与えられる可能性があるためです。
私たちは、私たちの牛が手順の間に立つことを望んでいます。あまりにも多くのキシラジンは、彼らが座って引き起こす可能性があります。助手は、手順の尾を縛って、通常、結合組織の収集を最小限に抑え、腺水槽への浸透を避けるために、上部領域で、乳房上の生検部位を選択する。
生検中にこれらの血管を避けるために、皮膚を観察し、特別な注意を払って触診し、皮下の大きな血管を特定します。生検部位の周りの15%15センチメートルの正方形の領域から毛髪をクリップし、ポビドンヨウ素、0.75%利用可能なヨウ素、またはクロルヘキシジングルコン酸スクラブで生検領域を準備する。70%イソプロピルアルコールを少なくとも3回交互に取り除き、目に見える破片をすべて取り除きます。
無菌スクラブ溶液とイソプロピルアルコールを円形に塗布し、裏返しのアプローチを使用します。消毒スクラブ溶液が皮膚に少なくとも5分間接触していることを確認してください。18G針をセットした蝶の注入を使用して、切開部位で皮下2%のリドカイン塩酸塩の6ミリリットルを沈着し、ラインブロックを作成します。
より深い組織に浸透しないでください。局所麻酔薬を3〜5分間拡散させ、切開前にスクラブ溶液とアルコールの別の繰り返しを行う。待っている間に、生検器具を準備する。
鎮痛を提供するという点でやりたいことは、皮膚の感覚を落とす。なぜなら、皮膚や皮下組織に対する神経の内在が増え、気圧ではストレッチ受容体の話しかなく、皮膚や皮下組織と同じ外科的痛みを感じないというからです。実際、局所麻酔薬をパンキマに通すことになってしまうと、処置中に出血するリスクが高まる可能性があります。
生検ツールを扱う際や切開に無菌技術を使用してください。目に見える汚染をすべて取り除き、無菌の外科用手袋を適用するために手を洗います。手術器具を使用順に無菌領域に配置します。
数10メス、滅菌ガーゼを持ち、ホメオスタシス用の生検器具と無菌タオルを組み立てます。手順1、コア生検器具。外科用手袋を使用してコア生検器具を組み立てます。
7つの無菌部分を無菌ドレープに置きます。ピース2のドッキングシステムにブレードを挿入します。ピース 2 の上に 3 個を挿入し、ドッキング ステーションが揃うようにします。
ブレードの最後の端をピース4のドッキングシステムに取り入れます。4個を前方に押し出し、ピース4がピース3の隣にあるかどうかを観察します。デバイスにピース5を挿入します。
ドッキング ステーションが揃っていることを確認します。ピース2の上部にピース6を挿入します。ドッキング ステーションが揃っていることを確認します。
ドッキングステーションにロックネジを差し込みます。ロックねじを覆うために、ピース3を前方に押し出します。工具を起動し、4個前に押し出し、刃を工具の外側に観察します。
4個戻してブレードをツールに引き込みます。牛が十分に鎮静され、生検部位が十分に麻酔されていることを確認し、反応を確実にしないように皮膚をつまむ。数10メスを使用して、皮膚および皮下組織を通して2〜3センチメートルの垂直切開を近位から遠位にします。
無菌技術を使用してコードレスドリルに生検器具を取り付けます。バイオプシーツールにドリルを配置し、工具がドリルにしっかりと取り付けられているかどうかを確認します。すべての手順の間に個々の尾を高めることによって十分な拘束を保障する。
時計回りの回転と低速を使用してドリルをオンにします。7.5センチメートル前後の生検ツール全体を切開部を通して乳房に進めます。ドリルをオフにし、手動でツールの4を拡張し、時計回りの回転と低速を使用してドリルをオンにし、乳房から組織コアを含む器具を取り外します。
無菌タオルを使用して傷口に20分以上強い圧力をかける。カニューレを組織に挿入します。この部分を前に押してツールをアクティブにします。
時計回り回転を遅くして回転します。組織サンプルはカニューレの内部に入るようになりました。ピンセットを使用して生検ツールから組織を取り除きます。
サンプルを1つのXリン酸緩衝生理食塩液に入れ、組織の量を評価します。生検後10分ごとに牛のバイタルサインを少なくとも30分間服用してください。生検部位への圧力の20分後に出血がないか確認してください。
血液の滴がある場合は、さらに5〜10分間圧力をかけ続けます。すべての出血が止まった後、5ミリメートル間隔でステンレス製のステープルを使用して切開を閉じます。生検領域にエアロゾル包帯を塗布する。
処置後50分間動物を観察する。手順2、針生検器具。デバイスの製造元の指示に従います。
滅菌技術を使用してパッケージから生検針を取り除きます。損傷が見られた場合は、針を捨てます。針をデバイスに取り付けます。
カバーを閉じて、デバイスをコック。牛が十分に鎮静され、生検部位が十分に麻酔されていることを確認し、反応を確実にしないように皮膚をつまむ。10個のメスを使用して、皮膚および皮下組織を1〜2センチメートル垂直に切開します。
生検針を皮膚から約10〜13センチメートルの切開部位に挿入します。生検針装置を活性化して組織を収集します。乳房から針を取り出します。
少なくとも20分間、滅菌タオルを使用して傷口に即時強い圧力を加えます。針から組織を取り出した後、切開を閉じるには先に説明した手順に従う。全体のプロシージャは、動物ごとに、終了するのに約45分かかります。
血栓は、生検された四半期から取り除く必要があります。また、可能であれば、牛乳の収量と食物摂取量を観察する必要があります。常に、処置の前、中、および後に動物の健康と幸福を確保する。
動物に投与されたすべての薬物を文書化する。生検後7~10日間、牛乳中の血液の存在を確認します。その後の搾乳時に生検四半期から血栓を手で取り除き、完全なミルク除去が起こることを確認する。
ミルクの収量を観察し、可能であれば、外科的ステープルが取り除かれるまで、個々の毎日の飼料摂取量を観察する。手術用ステープルが取り除かれるまで、体温、呼吸数と心拍数、および態度について1日2回動物を監視します。生検部位の腫脹、圧痛、および外科的ステープルが取り除かれるまで排液の兆候がないか、1日2回確認してください。
これらが観察された場合は、獣医師に相談してください。治癒率に応じて、生検の10〜14日後に切開部位からステープルを取り除く。局所感染や全身感染の兆候が見られる場合は、獣医師に相談してください。
だから、生検が取られるとすぐに、血液とその組織への栄養素と酸素の供給を中断したので、その組織コアを取り除き、何らかの形で組織活動を止めるのに非常に速くなければ、実験室で後で測定できる濃度は、生検時にその動物で何が起こっていたのかを本当に反映していないかもしれません。通常、我々は急速に組織を除去し、その活性を維持しようとする液体窒素でそれを凍結します。もう一つは、その組織で行うことができます, これは実際に私たちが収集した組織で行ったことです, 培養システム内のその組織に存在する細胞を単離し、成長することができます.
私たちの場合、その組織内にある上皮細胞に興味を持っていますが、それらは実際に牛乳成分を合成して分泌する細胞であるため、それらの組織片の細胞は培養中に配置され、実際にはまだ現在も成長しています。動物は、処置後10日間1日2回観察した。処置中または術後期間に合併症は起こらず、牛の重要なパラメータは通常の制限内に残った。
線形モデルは、生検の10日前に、動物が1日あたり23.35キログラムの牛乳を生産したことを示しています。動物は生検の10日前から10日後までの牛乳収量に有意な変化を示さなかった。牛の乳腺生検は、動物が短い回復時間を持つことを可能にする、最小限の侵襲的な手順です。
したがって、この生検手順は、動物に対して繰り返し対策を講じる可能性のある多くの栄養試験やその他の試験で使用できるため、例えば、4つの異なる栄養治療を伴う4つの期間がある場合、各期間の終わりにこれらの牛を4回簡単に生検することができ、各期間の間におそらく1週間の休息時間を可能にします。動物が正常な生産に戻ることを保証する。
