Sığır meme bezi biyopsisi teknikleri

Biyopsi, sanırım çoğu niçin bildiğiniz, bir parça mendilin ilgilendiği organdan alınmasıdır ve bu durumda, meme bezidir. Biyopsi örneği çok faydalıdır, eğer gen ekspresyonu analizi gibi şeyler yapacaksanız, bazı dokuları alıp histolojik analiz yapmak, meme bezinin mikroskobik seviyesindeki yapıya bakmak gibi şeyler yapacaksanız, örneğin hormon eylemiyle ilgili sinyal yolları gibi şeyleri belirlemek çok yararlıdır, örneğin. Herhangi bir meme dokusu örneği alırken dikkat etmeniz gereken uyarılardan biri de gerçekten temsili bir örnek almış olmanızdır. Çünkü, bir lobule yakalayabilirsiniz, üzüm kümesi gibi, ya da normali temsil etmeyen bazı bireysel alveolleri yakalayabilirsiniz, yani, meme biyopsisini yaparken sahip olduğunuz umut, parankimal doku toplamanızdır, ki bu sadece süt üretiminden sorumlu fonksiyonel doku yutacak süslü bir kelimedir. , temsileden bir örnek.

Meme bezindeki duyusal sinir uçlarının çoğu deri ile ilişkilidir, ve bu yüzden bunu fark etmek ve takdir etmek önemlidir, ilk kesiyi yapacağınız alanın doğru hazırlanmasını yaptıktan sonra, cildi anesteziye, parenkimal dokunun kendisiyle ilişkili herhangi bir duyusal sonun yolunda çok az şey vardır. , ve böylece hayvan hissedeceksiniz rahatsızlık çoğunlukla deri ile ilişkilidir. Yani, bu dokuyla yapılabilecek çeşitli şeyler var, ve aslında bu hayvanın nasıl çalıştığı hakkında daha fazla bilgi toplamasına olanak sağlıyor, sadece hayvana ne yedirdiğini gözlemlemekten elde edilebilenlerle karşılaştırıldığında ve süt proteini çıktısı veya süt bileşeni çıkışındaki tepkilerle karşılaştırıldığında. Açıklanan tüm yöntemler Virginia Tech Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanmıştır.

Planlanan biyopsiden bir gün önce, gübre ve kirli malzemeyi temizlemek için hayvanı, özellikle memeleri yıkayın ve ovalayın. Hayvanın sağlığını, fiziksel durumunu ve davranışını değerlendirin. Sadece sağlıklı inekler kullanın.

İneği tamamen sağ. Bezleri süt varlığını en aza indirmek için ideal sağım iki saat içinde, sıkmak oluk içine hayvan taşıyın. Bir baş kapısı ile hayvan dizginlemek.

Geriye ve ileriye doğru hareketi önlemek için kafasına bir ip halter yerleştirin. Hayvanın başını bir tarafa çekin ve başı yerinde tutmak için hızlı bir serbest bırakma düğümü kullanarak ipi sıkma kanalına bağlayın. Enjeksiyon alanını %70 oranında İzopropil alkol bezi ile temizleyin ve biyopsiden 15 ila 20 dakika önce juguler ven yoluyla vücut ağırlığının kilogramı başına 1,1 ila 2,2 miligram flunixin meglumine verin.

Şah damarını bul. Juguler oluğun tabanında basınç uygulayarak juguler ven yükseltin. Şırıngada kabarcık olmadığından emin olun.

İğneyi yükseltilmiş şah damarına yerleştirin ve şırıngaya 0,5 mililitre kan çekin ve içindekilerle karıştırın. Şırıngada kan gözü kdeğilse, iğneyi değiştirin. İğne damarda ikamet ederse, içindekileri enjekte edin.

İğneyi hafifçe çıkarın, kanamayı önlemek için enjeksiyon bölgesine hafif basınçla gazlı bez uygulayın. Sedasyon un kurulması için yeterli zaman tanımak için biyopsiden yaklaşık 5 ila 10 dakika önce koksikeal damardaki vücut ağırlığının kilogramı başına 0,01 ila 0,05 miligram xylazine hidroklorür intravenöz olarak uygulayın. Kuyruk kaldırın ve% 70 izopropil alkol bezi ile enjeksiyon alanı temizleyin.

Şırıngada kabarcık olmadığından emin olun. İğneyi kuyruk kabına yerleştirin, şırıngaya 0,2 mililitre kan çekin ve iğnenin damarda yerleşik olduğundan emin olmak için içindekilerle karıştırın. İğne yerleşikse, şırınga içeriğini enjekte edin.

İğneyi yavaşça çıkarın. Enjeksiyon bölgesine hafif basınçla gazlı bez uygulayın. Bu gerçekten önemli bir alfa iki ters elde, tolazoline gibi, süt ksilazin etkilerine duyarlı olmasıdır, ve ksilazin aşırı doz da pulmoner ödem neden olabilir, hangi potansiyel süt için ölümcül olabilir, bu yüzden aşırı sedasyon belirtileri için izlemek ve bu oluşursa, o zaman tolazoline uygun miktarda verilebilir.

İneklerimizin bir ameliyat sırasında ayakta durmasını istiyoruz. Çok fazla xylazine onları oturup neden olabilir. Prosedür için kuyruk kadar bir asistan kravat var, meme biyopsi sitesi seçin, genellikle bir üst alanda bağ dokusu toplama en aza indirmek ve bezi sarnıcı içine nüfuz önlemek için.

Biyopsi sırasında bu damarları önlemek için herhangi bir büyük deri altı kan damarlarını belirlemek için özel bir dikkat ile cilt gözlemlemek ve palpe. Biyopsi bölgesinin etrafındaki 15 x 15 santimetre karelik bir alandan saç çekin, biyopsi alanını povino-iyot, yüzde 0,75 mevcut iyot veya klorheksidin glukonat scrub ile hazırlayın. Tüm görünür ve görünmez enkaz kaldırmak için en az üç kez% 70 izopropil alkol alternatif.

Aseptik scrub solüsyonu ve isopropil alkolü ters yönlü bir yaklaşım la dairesel bir hareketle uygulayın. Antiseptik scrub çözeltisinin ciltle en az beş dakika temas halinde kaldığından emin olun. Bir çizgi bloğu oluşturmak için kesi yerinde deri altı mililitre lidokain hidroklorür altı mililitre yatırmak için bir 18 G iğne ile bir kelebek infüzyon seti kullanın.

Derin dokulara girmeyin. Lokal anestezinin üç ila beş dakika boyunca dağlanmasına izin verin, kesiden önce fırçalama solüsyonu ve alkolün tekrarını daha yapın. Beklerken biyopsi aletlerini hazırlayın.

Analjezi sağlama açısından yapmak istediğiniz şey cildi duyarsızlaştırmaktır. Çünkü deride ve deri altı dokularda daha fazla sinirsel innervasyon var, ve parankimde, biz gerçekten sadece streç reseptörlerinden bahsediyoruz, ve bunlar cerrahi acıyı deri ve deri altı dokularla aynı şekilde hissetmiyorlar. Aslında, eğer parenkim içine lokal anestezi koyarak sonunda, işlem sırasında kanama riskini artırabilir.

Biyopsi araçlarını kullanırken ve kesi için aseptik teknikler kullanın. Görünür deki tüm kontaminasyonu gidermek ve steril cerrahi eldivenleri uygulamak için ellerinizi yıkayın. Cerrahi aletleri steril bir alanda kullanım sırasına göre düzenleyin.

10 numara neşter, steril gazlı bez ve biyopsi aleti ve homeostaz için steril bir havlu monte edin. Birinci işlem, çekirdek biyopsi aleti. Çekirdek biyopsi aletini cerrahi eldivenler kullanarak monte edin.

Yedi steril parçayı steril bir perdeye yerleştirin. Bıçağı ikinci parçaya yerleştirme sistemine yerleştirin. İkinci parçanın üzerine üç parça yerleştirin ve yerleştirme istasyonunun hizalanmasını sağlar.

Bıçağın son kenarını dördüncü parçanın yerleştirme sistemine titretin. Dördüncü parçayı öne doğru itin ve dördüncü parçanın üçüncü parçanın yanında olup olmadığını gözlemleyin. Parça beş'i cihaza takın.

Yerleştirme istasyonunun hizalandığından emin olun. Parça altıyı ikinci parçanın üstüne yerleştirin. Yerleştirme istasyonunun hizalandığından emin olun.

Kilitleme vidasını yerleştirme istasyonuna takın. Kilitleme vidasını örtmek için üçüncü parçayı öne doğru itin. Aleti etkinleştirin, ileri parça dört itin ve bıçağı aletin dışına gözlemleyin.

Bıçağı aletin içine çekmek için parça dört geri çekin. İnek yeterince yatıştırıcı ve biyopsi sitesi yeterince anestezi olduğundan emin olun, hiçbir reaksiyon sağlamak için cilt çimdik. Proksimaldan distal bir sayı 10 neşter kullanarak deri ve deri altı dokular aracılığıyla 2-3 santimetre dikey kesi olun.

Biyopsi aletini steril teknikler kullanarak kablosuz bir matkapla takın. Matkabı biyopsi aletine karşı yerleştirin ve aletin matkabına sıkıca bağlanıp bağlanmadınkontrol edin. Tüm işlemler sırasında bir bireyin kuyruğu nu yükseltmesini sağlayarak yeterli kısıtlamayı sağlayın.

Saat yönünde dönüş ve düşük hız kullanarak matkabı açın. Tüm biyopsi aletini, araç dönerken kesi den meme içine yaklaşık 7,5 santimetre ilerletin. Matkabı kapatın ve aletin dördüncü parçasını manuel olarak uzatın, saat yönünde dönüş ve düşük hız kullanarak matkabı açın, meni çekirdeğini içeren aleti memeden çıkarın.

En az 20 dakika steril bir havlu kullanarak yaraya hemen güçlü bir basınç uygulayın. Kanülleri dokuya yerleştirin. Aracı etkinleştirmek için parçayı ileri doğru itin.

Saat yönünde yavaş bir dönüşle döndürün. Doku örneği artık kanülün içinde. Cımbız kullanarak biyopsi aracından dokuyu çıkarın.

Bir X fosfat tamponlu tuzlu örnek tutun ve doku miktarını değerlendirmek. En az 30 dakika boyunca biyopsi den sonra her 10 dakikada bir hayati belirtilerini alın. Biyopsi bölgesinde 20 dakikalık basınçtan sonra kanama olup yok.

Kan damlaları varsa, ek bir beş ila 10 dakika için basınç uygulamaya devam edin. Tüm kanamalar durduktan sonra beş milimetre aralıklarla paslanmaz çelik zımba kullanarak kesileri kapatın. Biyopsi bölgesine aerosol bandaj uygulayın.

İşlemden sonra hayvanı 50 dakika gözlemleyin. İkinci işlem, iğne biyopsisi aleti. Cihaz için üreticinin yönergelerini izleyin.

Steril teknikler kullanarak biyopsi iğnesini paketten çıkarın. Herhangi bir hasar görülürse iğneyi atın. İğneyi cihaza takın.

Kapağı kapatın ve cihazı horoz. İnek yeterince yatıştırıcı ve biyopsi sitesi yeterince anestezi olduğundan emin olun, hiçbir reaksiyon sağlamak için cilt çimdik. Proksimaldan distal bir sayı 10 neşter kullanarak deri ve deri altı dokular aracılığıyla bir ila iki santimetre dikey kesi olun.

Biyopsi iğnesini deriden yaklaşık 10 ila 13 santimetre uzaklıktaki kesi bölgesine yerleştirin. Doku toplamak için biyopsi iğne cihazı etkinleştirin. İğneyi memeden çıkarın.

En az 20 dakika steril bir havlu kullanarak yaraya hemen güçlü basınç uygulayın. İğneden doku çıkardıktan sonra, kesi kapatmak için daha önce açıklanan prosedürü izleyin. Tüm prosedürün tamamlanması yaklaşık 45 dakika sürer, hayvan başına.

Kan pıhtılaşmasının çeyrek biyopsiden çıkarılması gerekiyor. Ayrıca, mümkünse süt verimi ve gıda alımını gözlemlemek gerekir. İşlem öncesi, sırasında ve sonrasında her zaman hayvanın sağlığını ve sağlığını sağlayın.

Hayvanlara verilen tüm ilaçları belgele. Biyopsiden sonra 7-10 gün boyunca sütte kan olup yok. Sonraki sağımlarda biyopsi yapılan çeyrekten elde şeritli kan pıhtıları ve tam süt çıkarma işleminin gerçekleşmesini sağlar.

Süt verimini gözlemleyin ve mümkünse cerrahi zımbalar çıkarılana kadar günlük yem alımını gözlemleyin. Cerrahi zımba lar çıkarılana kadar hayvanı günde iki kez vücut ısısı, solunum ve kalp atışları ve tavırları için izleyin. Biyopsi bölgesini günde iki kez şişlik, hassasiyet ve cerrahi zımbalar çıkarılana kadar herhangi bir drenaj belirtisi için kontrol edin.

Bunlar gözlenirse, bir veterinere danışın. Biyopsiden 10 ila 14 gün sonra, iyileşme hızına bağlı olarak zımbaları kesi bölgesinden çıkarın. Lokal veya sistemik enfeksiyon belirtileri görülürse bir veterinere danışın.

Biyopsi yapılır alınmaz, kanı ve dolayısıyla o dokuya besin ve oksijen kaynağını böldüniz, ve eğer doku çekirdeğini çıkarmakta ve bir şekilde doku aktivitesini durdurmakta çok hızlı değilseniz, laboratuvarda daha geç bir zamanda ölçebildiğiniz konsantrasyonlar biyopsi sırasında o hayvanda neler olup bittiğini tam olarak yansıtmayabilir. Tipik olarak, biz hızla doku kaldırmak istiyorsunuz, ve flaş sıvı nitrojen içinde bu aktiviteyi korumak için denemek için dondurmak. Bu dokuyla yapabileceğimiz bir diğer şey, ve bu aslında topladığımız dokuyla yaptığımız bir şey, bir kültür sisteminde ki dokuda bulunan hücreleri izole edip büyütebiliyor olmamızdı.

Bizim durumumuzda, bu dokunun içindeki epitel hücreleriyle ilgileniyoruz, çünkü bunlar süt bileşenlerini sentezleyen ve salgılayan hücreler, ve böylece, bu doku parçalarından elde edilen hücreler kültüre yerleştirildi, ve aslında, bugün hala büyüyorlar. Hayvanlar işlemden sonra 10 gün boyunca günde iki kez gözlemlendi. İşlem sırasında veya ameliyat sonrası dönemde herhangi bir komplikasyon meydana gelmemiş ve hayati parametreleri normal sınırlar içinde kalırken.

Lineer modeller, biyopsiden 10 gün önce hayvanların günde 23,35 kilogram süt ürettiğini gösteriyor. Hayvanlar biyopsiden 10 gün öncesine kadar süt veriminde önemli değişiklikler göstermedi. Sığır meme bezi biyopsisi minimal invaziv bir işlemdir, hayvan kısa bir iyileşme süresi için izin.

Bu nedenle, bu biyopsi prosedürü birçok beslenme denemelerinde ve hayvanlar üzerinde tekrarlanan önlemler alabileceğimiz diğer denemelerde kullanılabilir, bu nedenle, örneğin, dört farklı beslenme tedavisi ile dört adet yaparsak, bu her dönemin sonunda dört farklı kez kolayca biyopsi yapabiliriz, bu da belki her dönem arasında bir haftalık dinlenme süresi ne kadar izin verir. , hayvanların normal üretimlerine geri dönmelerini sağlamak.