Bovine Brustdrüse Biopsie-Techniken

Eine Biopsie, wie ich denke, die meisten von Ihnen wissen, ist die Entfernung von ein bisschen Gewebe aus dem Organ von Interesse und in diesem Fall ist es die Brustdrüse. Die Biopsie-Probe ist sehr nützlich, wenn Sie Dinge wie Genexpressionsanalyse tun werden, wenn Sie Dinge wie etwas wie das Gewebe nehmen und eine histologische Analyse machen, um die Struktur auf der mikroskopischen Ebene der Brustdrüse zu betrachten, auch sehr nützlich, um Dinge wie Signalwege im Zusammenhang mit Hormon-Aktion zu bestimmen, zum Beispiel , so eine der Warnungen, die Sie beachten müssen, wenn Sie jede Art von Brustgewebe Probenahme, haben Sie eine Probe genommen, die wirklich repräsentativ ist? Weil, Sie können eine Lobule erfassen, die wie ein Cluster von Trauben wäre, oder Sie können einige einzelne Alveolen erfassen, die wirklich nicht das Normale darstellen, also, die Hoffnung, die Sie haben, wenn Sie Ihre Brustbiopsie tun, ist, dass Sie parenchymales Gewebe sammeln, was nur ein schickes Wort ist, um das funktionelle Gewebe zu sagen, das für die Milchproduktion verantwortlich ist. , eine Repräsentative Stichprobe.

Die meisten sensorischen Nervenenden in der Brustdrüse sind mit der Haut verbunden, und so ist es wichtig zu erkennen und zu schätzen, dass, sobald Sie die richtige Vorbereitung des Bereichs getan haben, wo Sie den ersten Schnitt machen werden, um die Haut zu beästhesieren, dann gibt es sehr wenig in der Art von sensorischen Nervenenden, die mit dem parenchymalen Gewebe selbst verbunden sind , und so ist das Unbehagen, das das Tier fühlen würde, meist mit der Haut verbunden. Es gibt also eine Vielzahl von Dingen, die mit diesem Gewebe getan werden können, und es ermöglicht es tatsächlich, mehr Informationen darüber zu sammeln, wie dieses Tier funktioniert, im Vergleich zu dem, was man aus der einfachen Beobachtung dessen, was dem Tier zugeführt wurde, und die Reaktionen in Milchprotein-Output oder Milchkomponente-Output erhalten könnte. Alle beschriebenen Methoden wurden vom Virginia Tech Institutional Animal Care and Use Committee genehmigt.

Einen Tag vor der geplanten Biopsie waschen und schrubben Sie das Tier, insbesondere das Euter, um Gülle und verschmutztes Material zu entfernen. Bewerten Sie die Gesundheit, den körperlichen Zustand und das Verhalten des Tieres. Verwenden Sie nur gesunde Kühe.

Die Kuh vollständig melken. Bewegen Sie das Tier in die Quetschrutsche, idealerweise innerhalb von zwei Stunden nach dem Melken, um die Milchpräsenz in den Drüsen zu minimieren. Halten Sie das Tier mit einem Kopftor zurück.

Legen Sie einen Seilhalter auf den Kopf der Kuh, um Rückwärts- und Vorwärtsbewegungen zu verhindern. Ziehen Sie den Kopf des Tieres zur Seite und binden Sie das Seil mit einem Schnellspannknoten an die Quetschrutsche, um den Kopf an Ort und Stelle zu halten. Reinigen Sie den Injektionsbereich mit einem 70%isopropyl alkoholabstrich und verabreichen Sie Flunixin-Meglimin 1,1 bis 2,2 Milligramm pro Kilogramm Körpergewicht intravenös, über die Jugularvene, 15 bis 20 Minuten vor der Biopsie.

Suchen Sie die jugularVene. Heben Sie die juguläre Vene durch Anwendung von Druck an der Basis der Jugularnut an. Stellen Sie sicher, dass sich keine Blasen in der Spritze befinden.

Setzen Sie die Nadel in die erhöhte Jugularvene und ziehen Sie 0,5 Milliliter Blut zweimal in die Spritze und mischen Sie mit dem Inhalt. Wenn kein Blut in der Spritze angezeigt wird, verschieben Sie die Nadel. Wenn die Nadel in der Vene befindet, injizieren Sie den Inhalt.

Entfernen Sie die Nadel vorsichtig, tragen Sie Gaze mit sanftem Druck auf die Injektionsstelle auf, um Blutungen zu verhindern. Xylazinhydrochlorid intravenös verabreichen, 0,01 bis 0,05 Milligramm pro Kilogramm Körpergewicht im Steißbeingefäß etwa fünf bis zehn Minuten vor der Biopsie, um genügend Zeit für die Sedierung zu haben. Heben Sie den Schwanz an und reinigen Sie den Injektionsbereich mit einem 70%isopropyl Alkoholabstrich.

Stellen Sie sicher, dass sich keine Blasen in der Spritze befinden. Setzen Sie die Nadel in das Schwanzgefäß ein, ziehen Sie 0,2 Milliliter Blut in die Spritze und mischen Sie sie mit dem Inhalt, um sicherzustellen, dass sich die Nadel im Gefäß befindet. Wenn die Nadel in der Hand ist, injizieren Sie den Spritzeninhalt.

Entfernen Sie die Nadel vorsichtig. Gaze mit sanftem Druck auf die Injektionsstelle auftragen. Es ist wirklich wichtig, eine Alpha-zwei-Umkehr auf der Hand zu haben, wie Tolazolin, dies ist, weil Milchkühe empfindlich auf die Auswirkungen von Xylazin sind, und eine Überdosierung von Xylazin kann Lungenödeme verursachen, die potenziell tödlich für die Milchkuh sein könnten, also beobachten Sie Ihre Kuh auf Anzeichen einer Übersedation und wenn diese auftreten, dann kann die entsprechende Menge an Tolazolin gegeben werden.

Wir wollen, dass unsere Kühe während eines Verfahrens stehen. Zu viel Xylazin kann dazu führen, dass sie sich hinsetzen. Lassen Sie einen Assistenten den Schwanz für das Verfahren binden, wählen Sie die Biopsiestelle auf dem Euter, in der Regel in einem oberen Bereich, um die Ansammlung von Bindegewebe zu minimieren und das Eindringen in die Drüse Zisterne zu vermeiden.

Beobachten und palepaten Sie die Haut mit besonderer Aufmerksamkeit, um große subkutane Blutgefäße zu identifizieren, um diese Gefäße während der Biopsie zu vermeiden. Schneiden Sie das Haar aus einer 15 mal 15 Zentimeter großen Fläche um die Biopsiestelle, bereiten Sie den Biopsiebereich mit einem Povidon-Jod, 0,75 Prozent verfügbarem Jod oder Chlorhexidin-Gluconat-Peeling vor. Wechseln Sie den 70%isopropyl Alkohol mindestens dreimal ab, um alle sichtbaren und unsichtbaren Trümmer zu entfernen.

Tragen Sie die aseptische Peelinglösung und den Isopropylalkohol in einer kreisförmigen Bewegung auf, indem Sie den Inside-Out-Ansatz verwenden. Stellen Sie sicher, dass die antiseptische Peeling-Lösung mindestens fünf Minuten in Kontakt mit der Haut bleibt. Verwenden Sie ein Schmetterlingsinfusionsset mit einer 18 G Nadel, um sechs Milliliter von zwei Prozent Lidocainhydrochlorid subkutan an der Einschnittstelle zu deponieren, um einen Linienblock zu erstellen.

Dringen Sie nicht in die tieferen Gewebe ein. Lassen Sie das Lokalanästhetikum für drei bis fünf Minuten diffundieren, führen Sie eine weitere Wiederholung der Peeling-Lösung und Alkohol vor dem Einschnitt. Während des Wartens bereiten Sie die Biopsieinstrumente vor.

Was Sie in Bezug auf die Bereitstellung von Analgesie tun möchten, ist die Haut desensizipieren. Das ist, weil wir mehr neuronale Innervation auf die Haut und subkutane Gewebe haben, und im Parenchym, wir sprechen wirklich nur über Dehnungsrezeptoren, und diese fühlen sich nicht chirurgische Schmerzen wie die Haut und das subkutane Gewebe tun. In der Tat, wenn Sie am Ende setzen Lokalanästhetikum durch in das Parenchym, Sie können Ihr Risiko von Blutungen während des Verfahrens erhöhen.

Verwenden Sie aseptische Techniken beim Umgang mit den Biopsiewerkzeugen und für den Schnitt. Waschen Sie die Hände, um alle sichtbaren Verunreinigungen zu entfernen und tragen Sie sterile chirurgische Handschuhe auf. Ordnen Sie die chirurgischen Instrumente in einem sterilen Bereich in der Reihenfolge der Anwendung an.

Haben Sie eine Nummer 10 Skalpell, sterile Gaze, und montieren Sie das Biopsie-Instrument und ein steriles Handtuch für Homöostase. Verfahren eins, Kernbiopsieinstrument. Montieren Sie das Kernbiopsieinstrument mit chirurgischen Handschuhen.

Die sieben sterilen Stücke auf einen sterilen Vorhang legen. Setzen Sie die Klinge in das Dockingsystem auf Stück zwei ein. Legen Sie Stück drei auf Stück zwei ein, um sicherzustellen, dass sich die Dockingstation ausrichtet.

Schließen Sie die letzte Kante der Klinge in das Dockingsystem von Teil vier ein. Schieben Sie Stück vier nach vorne und beobachten Sie, ob Stück vier neben Stück drei ist. Stück fünf auf das Gerät legen.

Stellen Sie sicher, dass die Dockingstation ausgerichtet ist. Stück sechs in die Oberseite des zweiten Stücks einfügen. Stellen Sie sicher, dass die Dockingstation ausgerichtet ist.

Stecken Sie die Verriegelungsschraube in die Dockingstation. Schieben Sie Stück drei nach vorne, um die Verriegelungsschraube zu bedecken. Aktivieren Sie das Werkzeug, schieben Sie Stück vier nach vorne und beobachten Sie die Klinge außerhalb des Werkzeugs.

Ziehen Sie Stück vier zurück, um die Klinge in das Werkzeug zurückzuziehen. Stellen Sie sicher, dass die Kuh ausreichend sediert ist und die Biopsiestelle ausreichend beästhetisiert ist, kneifen Sie die Haut, um keine Reaktion zu gewährleisten. Machen Sie einen zwei bis drei Zentimeter großen vertikalen Schnitt durch die Haut und subkutane Gewebe von proximal bis distal mit einem Skalpell der Zahl 10.

Befestigen Sie das Biopsieinstrument mit sterilen Techniken an einem Akkubohrer. Stellen Sie den Bohrer gegen das Biopsiewerkzeug und überprüfen Sie, ob das Werkzeug fest am Bohrer befestigt ist. Sorgen Sie für eine angemessene Zurückhaltung, indem Sie den Schwanz während aller Verfahren von einem Individuum erheben.

Schalten Sie den Bohrer mit einer Drehung im Uhrzeigersinn und einer niedrigen Geschwindigkeit ein. Bewegen Sie das gesamte Biopsiewerkzeug durch den Schnitt um 7,5 Zentimeter in das Euter, während sich das Werkzeug dreht. Schalten Sie den Bohrer aus und verlängern Sie manuell Stück vier des Werkzeugs, schalten Sie den Bohrer mit Drehung im Uhrzeigersinn und einer niedrigen Geschwindigkeit ein, entfernen Sie das Instrument, das den Gewebekern enthält, aus dem Euter.

Tragen Sie mit einem sterilen Handtuch für mindestens 20 Minuten sofort starken Druck auf die Wunde auf. Setzen Sie die Kanüle in das Gewebe ein. Schieben Sie das Stück nach vorne, um das Werkzeug zu aktivieren.

Drehen Sie in einer langsamen Drehung im Uhrzeigersinn. Gewebeprobe befindet sich jetzt in der Kanüle. Entfernen Sie das Gewebe aus dem Biopsiewerkzeug mit einer Pinzette.

Bewahren Sie die Probe in einer ein X-Phosphat-gepufferten Saline auf und bewerten Sie die Gewebemenge. Nehmen Sie die Vitalzeichen der Kuh alle 10 Minuten nach der Biopsie für mindestens 30 Minuten. Überprüfen Sie nach 20 Minuten Druck auf die Biopsiestelle auf Blutungen.

Wenn es Bluttropfen gibt, weiterhin Druck für weitere fünf bis 10 Minuten ausüben. Schließen Sie die Einschnitte mit Edelstahlklammern in Abständen von fünf Millimetern, nachdem alle Blutungen aufgehört haben. Tragen Sie einen Aerosolverband auf den Biopsiebereich auf.

Beobachten Sie das Tier 50 Minuten nach dem Eingriff. Verfahren zwei, Nadelbiopsie-Instrument. Befolgen Sie die Anweisungen des Herstellers für das Gerät.

Entfernen Sie die Biopsienadel mit sterilen Techniken aus der Packung. Entsorgen Sie die Nadel, wenn Schäden festgestellt werden. Befestigen Sie die Nadel am Gerät.

Schließen Sie die Abdeckung und cock das Gerät. Stellen Sie sicher, dass die Kuh ausreichend sediert ist und die Biopsiestelle ausreichend beästhetisiert ist, kneifen Sie die Haut, um keine Reaktion zu gewährleisten. Machen Sie einen ein bis zwei Zentimeter großen vertikalen Schnitt durch die Haut und subkutane Gewebe von proximal bis distal mit einem Skalpell der Zahl 10.

Setzen Sie die Biopsienadel in die Einschnittstelle ein, etwa 10 bis 13 Zentimeter von der Haut entfernt. Aktivieren Sie das Biopsienadelgerät, um das Gewebe zu sammeln. Entfernen Sie die Nadel aus dem Euter.

Tragen Sie den sofortigen starken Druck auf die Wunde mit einem sterilen Handtuch für mindestens 20 Minuten. Nach dem Entfernen des Gewebes aus der Nadel, folgen Sie dem zuvor beschriebenen Verfahren, um den Schnitt zu schließen. Das gesamte Verfahren dauert ca. 45 Minuten, pro Tier.

Blutgerinnsel müssen aus dem Viertel biopsied entfernt werden. Auch ist es notwendig, die Milchleistung und die Nahrungsaufnahme zu beobachten, wenn möglich. Sorgen Sie immer vor, während und nach dem Eingriff für die Gesundheit und das Wohlbefinden des Tieres.

Dokumentieren Sie alle den Tieren verabreichten Medikamente. Überprüfen Sie das Vorhandensein von Blut in der Milch für sieben bis zehn Tage nach der Biopsie. Blutgerinnsel aus dem biopsied Viertel bei nachfolgenden Melken handziehen und sicherstellen, dass eine vollständige Milchentfernung erfolgt.

Beobachten Sie die Milchleistung und, wenn möglich, die individuelle tägliche Futterzufuhr, bis chirurgische Heftklammern entfernt wurden. Überwachen Sie das Tier zweimal täglich auf Körpertemperatur, Atmung und Herzfrequenz und Verhalten, bis chirurgische Klammern entfernt wurden. Überprüfen Sie die Biopsiestelle zweimal täglich auf Schwellungen, Zärtlichkeit und Anzeichen einer Drainage, bis die chirurgischen Klammern entfernt wurden.

Wenn diese beobachtet werden, konsultieren Sie einen Tierarzt. Entfernen Sie die Heftklammern von der Einschnittstelle 10 bis 14 Tage nach der Biopsie, abhängig von der Heilungsrate. Konsultieren Sie einen Tierarzt, wenn Anzeichen einer lokalen oder systemischen Infektion beobachtet werden.

Sobald also die Biopsie genommen ist, haben Sie das Blut und damit die Nährstoff- und Sauerstoffversorgung zu diesem Gewebe unterbrochen, und wenn Sie also nicht sehr schnell bei der Entfernung dieses Gewebekerns sind und irgendwie die Gewebeaktivität stoppen, sind die Konzentrationen, die Sie zu einem späteren Zeitpunkt im Labor messen könnten, möglicherweise nicht wirklich reflektierend, was in diesem Tier zum Zeitpunkt der Biopsie vor sich ging. In der Regel würden wir das Gewebe schnell entfernen und blitzen es in flüssigem Stickstoff einfrieren, um zu versuchen, diese Aktivität zu erhalten. Die andere Sache, die man mit diesem Gewebe tun kann, und das ist eigentlich etwas, das wir mit dem Gewebe tun, das wir gesammelt haben, war, dass man die Zellen, die in diesem Gewebe in einem Kultursystem vorhanden sind, isolieren und wachsen kann.

In unserem Fall interessieren wir uns für die Epithelzellen, die sich in diesem Gewebe befinden, denn das sind die Zellen, die die Milchkomponenten tatsächlich synthetisieren und absondern, und so wurden diese Zellen aus diesen Gewebeteilen in Kultur gesetzt, und tatsächlich wachsen sie noch heute. Die Tiere wurden nach dem Eingriff zweimal täglich für 10 Tage beobachtet. Während des Eingriffs oder während der postoperativen Periode traten keine Komplikationen auf, wobei die Vitalparameter der Kühe innerhalb der normalen Grenzen blieben.

Die linearen Modelle zeigen, dass die Tiere zehn Tage vor der Biopsie 23,35 Kilogramm Milch pro Tag produzierten. Die Tiere zeigten keine signifikanten Veränderungen der Milchleistung von 10 Tagen vor bis 10 Tage nach der Biopsie. Die Rinder-Brustdrüsenbiopsie ist ein minimal-invasives Verfahren, das dem Tier eine kurze Erholungszeit ermöglicht.

Daher kann dieses Biopsieverfahren in vielen Ernährungsversuchen und anderen Arten von Studien verwendet werden, bei denen wir wiederholte Maßnahmen an den Tieren anwenden könnten, so dass wir, wenn wir beispielsweise vier Perioden mit vier verschiedenen Ernährungsbehandlungen haben, diese Kühe am Ende jedes Zeitraums leicht viermal biopsien könnten, was vielleicht eine Woche Ruhezeit zwischen den einzelnen Zeiträumen ermöglicht. , um sicherzustellen, dass die Tiere wieder zu ihrer normalen Produktion zurückkehren.