Этот протокол дает нам лучшее понимание того, чего хотят рыбы, глядя на выбор, который они делают в отношении предпочтений среды обитания, что имеет основополагающее значение для их благосостояния. Этот протокол можно легко адаптировать, чтобы посмотреть на различные факторы окружающей среды, в том числе гравий по сравнению с песчаным субстратом, живые против пластиковых растений, или даже через различные водные виды. Для настройки прибора предпочтения используйте экспериментальный резервуар из непрозрачного белого пластика, разделенный на четыре зоны со стенами из акрила, закрепленные на месте силиконовым герметиком.
Поместите соответствующие материалы обогащения в каждую зону в соответствии с конкретными параметрами среды обитания, которые должны быть проверены. Например, включают песчаные и каменистые субстраты, искусственные растения по сравнению с укрытиями, или поток воды по сравнению с искусственными растениями. Если поток воды должен быть использован в качестве параметра интереса, поместите небольшие насосы для снабжения струй воды в бак и установить насосы на определенной скорости, так что они обеспечивают постоянный и направленный поток воды на основе экологии и истории жизни видов, представляющих интерес.
В середине экспериментального танка, есть Центральная арена, где пища будет доставлена. Доступ к Центральной Арене из каждой зоны должен быть через небольшое отверстие в разделительных стенах, которое достаточно большое, для видов, представляющих интерес, чтобы двигаться между зонами беспрепятственно, но достаточно мал, чтобы уменьшить любые визуальные сигналы, которые рыба может испытать из других зон. Поместите биофильтр и обогреватель в каждом углу резервуара за пределами экспериментальной зоны, чтобы не нарушить поток воды и обеспечить постоянную температуру воды во всех зонах.
Настройка любых дополнительных экспериментальных танков, как пространство диктует, гарантируя, что все реплики танки имеют единые условия. Поместите камеры на штативы, непосредственно над каждым экспериментальным танком, так что все зоны видны. Подтвердив, что карты памяти имеют достаточно места для записи, установите освещение комнаты на постепенный 12-часовой, светлый/темный, цикл для имитации восхода и захода солнца.
И установите температуру воды до 25, плюс-минус один градус по Цельсию. Храните рыбу в домашних резервуарах, когда они не проходят испытания. В день эксперимента используйте две сети, чтобы быстро захватить все испытательные рыбы из своих домашних резервуаров, и поместить их в Центральную арену экспериментального танка в течение 30 секунд после захвата.
В дни от одного до четырех, рыба будет тратить время акклиматизации и изучения различных зон. Не собирать данные в эти дни. Во время акклиматизации проводите регулярные испытания качества воды, заменяя воду при обнаружении каких-либо проблем.
Чтобы покормить рыбу, используйте плавающее пищевое кольцо, прикрепленное к стене Центральной Арены на поверхности воды, чтобы доставить рыбьего корма из хлопья. После 30 минут доступа ad libitum используйте сеть для удаления оставшейся пищи из бака. В дни с пяти до семи, включите камеры, и записывать поведение рыбы в течение двух часов после каждого запланированного утреннего и дневного кормления.
На восьмой день, использовать падение сети для передачи всех рыб обратно в свои дома танки. В зависимости от того, сколько водоотливной воды имеется, заменить по крайней мере одну треть воды, в экспериментальном баке, со свежей водоотливной водой, чтобы уменьшить любое воздействие гормонов стресса на рыбу и последующие репликации. Затем установите экспериментальные резервуары в соответствии с графиком вращения зоны на этой неделе и начните процесс испытаний с новой партии рыбы.
В конце каждого дня записи загрузите видео на компьютер. И используйте видео программное обеспечение, чтобы вручную подсчитать количество рыб в каждой зоне, с интервалом в пять минут, в каждые два часа записи периода. Для анализа предпочтений среды обитания вычислите среднее количество рыбы в зоне для каждого резервуара репликации.
Чтобы получить оценку предпочтений для использования структуры, вычислите индекс предпочтений Jacobs, используя указанную формулу. Считайте, что рыба вошла в зону, когда все тело рыбы пересекает отверстие между зонами. Чтобы определить, есть ли какие-либо изменения в скорости, с которой рыба переключается между зонами, в течение периода наблюдения, рассчитать количество раз, когда рыба входит в каждую зону от Центральной Арены, разделенной на общее количество рыбы в первую и последнюю пять минут каждого периода наблюдения.
И вычислить стартовую и отделочные средние скорости переключения для каждого реплики танка. Используя статистическое программное обеспечение, проведите соответствующий статистический анализ, такой как односторочные ANOVA, с индексом предпочтений в качестве зависимой переменной и зоны в качестве переменной предсказателя, и парным t-тестом на стартовой и заканчивая средней скорости переключения для каждого бака. Чтобы сравнить каждую зону друг с другом, примените многократный тест Tukey после специального тестирования.
В этом репрезентативном эксперименте зебрафиша продемонстрировала наивысшее предпочтение зоне Обогащенного и Потока, и избежала только зон Потока и Равнины, проводя больше времени на Центральной Арене. Кроме того, зебрафиш перемещались между различными зонами обитания чаще в начале периода наблюдений, чем в конце. Крайне важно, чтобы в резервуарах для репликации сохранялись единые условия, такие как внешний шум или движение, химия воды или уровень освещенности.
Тестирование предпочтений распространяется на попытки понять, как различные аспекты обогащения окружающей среды влияют на решения человека. Но также полезно для сравнительных исследований по обогащению окружающей среды.
