이 프로토콜은 그들의 복지에 근본적인 서식지 선호도에 관한 선택을 보면서 물고기가 원하는 것을 더 잘 이해할 수 있게 해 줍니다. 이 프로토콜은 자갈 대 모래 기판, 플라스틱 식물 대, 또는 다른 수생 종에 걸쳐 등 다양한 환경 요인을 보기 위해 쉽게 적응할 수 있습니다. 특혜 장치를 설정하려면 불투명한 흰색 플라스틱으로 만든 실험 용 탱크를 사용하여 아크릴로 만든 벽으로 4 개의 영역으로 분할되어 실리콘 실란트로 고정됩니다.
테스트할 특정 서식지 매개 변수에 따라 적절한 농축 재료를 각 영역에 배치합니다. 예를 들어, 모래 대 바위 기판, 인공 식물 대 대피소, 또는 인공 식물 대 물의 흐름을 포함한다. 물의 흐름이 관심의 매개 변수로 사용되는 경우, 작은 펌프를 배치하여 탱크에 물을 공급하고 펌프를 특정 속도로 설정하여 관심있는 생태와 생명 의 종에 따라 일정한 방향의 물 흐름을 제공합니다.
실험 탱크 의 중간에 음식이 배달될 중앙 아레나가 있습니다. 각 구역에서 센트럴 아레나에 대한 접근은 관심의 종에 대한 충분히 큰 분리 벽의 작은 개구부를 통해해야, 방해받지 않는 영역 사이를 이동하지만, 물고기가 다른 지역에서 경험할 수있는 시각적 인 단서를 줄일 만큼 작다. 바이오 필터와 히터를 실험 영역 외부의 탱크 구석구석에 배치하여 물의 흐름을 방해하지 않고 모든 영역에 걸쳐 일정한 수온을 보장합니다.
공간 지시에 따라 추가 실험 탱크를 설정하여 모든 복제 탱크에 균일한 조건이 있는지 확인합니다. 모든 영역이 보이도록 카메라를 각 실험 탱크 바로 위에 배치합니다. 메모리 카드가 녹음을위한 충분한 공간이 있음을 확인한 후, 점진적인 12 시간, 빛 / 어두운, 일출과 일몰을 시뮬레이션하는 사이클에 방 조명을 설정합니다.
그리고 수온을 섭씨 25도, 플러스 또는 영하 1도로 설정합니다. 그들은 테스트되지 않을 때 홈 탱크에 물고기를 유지합니다. 실험 당일, 두 개의 그물을 사용하여 홈 탱크에서 모든 테스트 물고기를 신속하게 포착하고 캡처 후 30 초 이내에 실험 탱크의 중앙 아레나에 배치하십시오.
1일부터 4일까지 물고기는 다른 구역을 적응하고 탐험하는 데 시간을 할애합니다. 요즘에는 데이터를 수집하지 마십시오. 적응 하는 동안, 정기적인 수질 테스트를 실시 하 고 문제가 감지될 경우 물을 대체.
물고기를 먹이려면 수면의 센트럴 아레나 벽에 부착된 떠다니는 푸드 링을 사용하여 생선에 플레이크 생선 음식을 전달합니다. 광고 리비툼 에 액세스 한 후 30 분 동안 딥 그물을 사용하여 탱크에서 남은 음식을 제거하십시오. 5일부터 7일까지 는 카메라를 켜고 예정된 아침과 오후 의 먹이 주기 후 2시간 동안 물고기 행동을 기록합니다.
8일째되는 날, 딥 넷을 사용하여 모든 물고기를 홈 탱크로 다시 옮깁니다. 얼마나 많은 섬프 물을 사용할 수 에 따라, 물의 적어도 1/3을 대체, 실험 탱크에서, 신선한 섬프 물 물고기에 스트레스 호르몬의 영향을 줄이기 위해 그리고 후속 복제. 그런 다음, 그 주에 대한 영역 회전 일정에 따라 실험 탱크를 설정하고, 물고기의 새로운 배치와 테스트 프로세스를 시작합니다.
각 녹화 일이 끝나면 비디오를 컴퓨터에 다운로드합니다. 또한 비디오 소프트웨어를 사용하여 각 영역의 물고기 수를 각 2시간 녹화 기간에 5분 간격으로 수동으로 계산합니다. 서식지 환경 설정을 분석하려면 각 복제 탱크에 대해 영역당 평균 물고기 수를 계산합니다.
구조 사용에 대한 기본 설정 점수를 얻으려면 표시된 대로 수식을 사용하여 Jacobs의 기본 설정 인덱스를 계산합니다. 물고기의 전신이 영역 사이의 개구부를 통해 교차 할 때, 영역에 입력 한 물고기를 고려한다. 관측 기간 동안 물고기가 영역 을 전환하는 속도에 변화가 있는지 확인하려면 관찰 기간 동안 중앙 아레나에서 각 구역에 물고기가 들어오는 횟수를 계산하여 모든 관찰 기간의 첫 번째 및 마지막 5 분 동안의 총 물고기 수로 나뉩니다.
그리고 각 복제 탱크에 대한 시작 및 마무리 평균 스위치 속도를 계산합니다. 통계 소프트웨어를 사용하여 기본 설정 지수를 종속 변수로, 영역을 예측 변수로 사용하는 단방향 ANOVA와 같은 관련 통계 분석을 수행하고 각 탱크의 시작 및 마무리 평균 전환률에 대한 쌍t 테스트를 수행합니다. 각 영역을 서로 영역과 비교하려면 Tukey의 여러 비교 후 hoc 테스트를 적용합니다.
이 대표적인 실험에서 제브라피쉬는 농축 및 흐름 지대에 대한 선호도가 가장 높은 것으로 보였으며, 센트럴 아레나에서 더 많은 시간을 보내며 플로우만 과 평원 지역을 피했습니다. 또한, 제브라피쉬는 관찰 기간이 시작될 때 다른 서식지 구역 사이를 더 자주 이동하여 마지막보다 더 자주 움직였다. 외부 노이즈, 운동, 수자원 화학 또는 광 수준과 같은 균일한 조건이 복제 탱크 에서 유지되는 것이 중요합니다.
환경 강화의 다양한 측면이 개인의 결정에 어떤 영향을 미치는지 이해하기 위해 기본 설정 테스트가 확장됩니다. 그러나 비교 환경 농축 연구에도 유용합니다.
