Этот протокол представляет собой большую животную модель для изучения адаптации и недостаточности правого желудочка. Поэтому эта модель жизненно важна для разработки RV-таргетных терапевтических средств для лечения легочной гипертензии. Эта модель постепенно увеличивает правый RV после нагрузки, что может быть использовано в качестве стратегии для титрования адаптации RV.
Ни одна из предыдущих моделей крупных животных не имеет такого контроля над фенотипом RV. Продемонстрировать эту хирургическую процедуру будут доктор Мэтью Баккетта, директор лаборатории и стипендиаты-хирурги, врачи Джон Стоукс, Келли Ву и Ятрик Патель. Я буду демонстрировать процедуру бандажирования легочной артерии.
После обезболивания начните с бритья хирургического поля от шеи овцы до ее верхней части живота. Очистите операционное поле от грязи и других загрязнений с помощью мыла или щетки для скраба. Подготовьте шею в грудной клетке раствором хлоргексидина или бетаина и задрапируйте хирургическое поле стерильным способом.
Для получения экспозиции в стиле медиа выполняют мышечно-щадящую мини-торакотомию в левом четвертом межреберном пространстве с длиной разреза менее восьми сантиметров. Используйте небольшой или средний втягивающий механизм Finochietto, чтобы отделить ребра в более туфельчатом втягивающем устройстве, чтобы сидеть перпендикулярно Finochietto в межреберном пространстве, которое будет втягивать мягкие ткани в межреберное пространство, улучшая экспозицию без повреждения диафрагмального нерва, разрезать перикард внутри него и создавать перикардиальный колодец с 2/0 шелковыми швами для обнажения главной легочной артерии и правого желудочка. Определите придаток левого предсердия в пределах экспозиции как ориентир для уровня бифуркации легочной артерии рассечения вокруг главной легочной артерии и изолируйте ее пупочной лентой.
Выполняют внутриперикардиальное рассечение левой легочной артерии и опоясывают пупочной лентой. Поместите сверхпрочный силиконовый сосудистый окклюдер вокруг главной легочной артерии. Использование шелкового шва 0 на игле Кита.
Закрепите конец сосудистого окклюдера вместе с помощью U-образного шва. После закрепления вокруг главной легочной артерии скользит окклюдер дистально вдоль главной легочной артерии. Чтобы установить линию давления правого желудочка, начните с размещения 5/0 монофиламентного нерассасывающегося полипропиленового кошелькового шва с залогами, окружающими выбранное место, и увидите сосудистую ловушку.
Подготовьте линию давления правого желудочка, отрезав мужской конец стерильной 36-дюймовой напорной трубки под углом 30 градусов, чтобы облегчить введение через миокард. Затем используйте шелковую стяжку 2/0, чтобы отметить линию давления на оптимальной глубине для размещения в правом желудочке. Используя биопсийный перфоратор, сделайте небольшую кардиотомию в тракте оттока правого желудочка или свободной стенке RVOT в пределах ранее размещенного шва струны кошелька.
Контролируйте кровотечение ручным давлением или затягивая ловушку на шве кошелька. Вставьте и закрепите вырезанный конец напорной трубки в RVOT. Привяжите веревку кошелька, затем закрепите струну кошелька на напорной трубке, чтобы закрепить линию давления.
Расширьте трубку RVOT, подключив дополнительную напорную трубку к напорной линии RVOT. Монитор для измерения исходного уровня, давления правого желудочка. Осторожно рассекните вокруг левой легочной артерии Окружите левую легочную артерию пуповинной лентой, завязывающей ее, чтобы завязать ее.
Выведите линию давления RVOT и трубку окклюдера легочной артерии из грудной клетки на одно межреберное пространство ниже разреза торакотомии. Чтобы отметить участки для внутренних отверстий, образуют два субдуральных кармана вдоль слоя фасции на левой спинке овцы как можно дальше к позвоночнику, насколько это возможно в стерильном поле. Используйте полярную трубку грудной клетки для туннелирования линии давления RVOT и трубки окклюдера от разреза грудной клетки до левых участков дорсума.
Закрепите как трубку окклюдера, так и правожелудочковую нажимную магистраль к барбусным соединениям порта. Закрепите окклюдер и напорную трубку вокруг разъемов порта дополнительными стяжками. Для предотвращения миграции портов якорь портов в трех местах вокруг их ободков к подстилающей фасции с помощью полипропиленовых швов 3/0.
Повторное оплодотворение подкожной клетчатки дермы и кожи слоями полиглактином 910 швами. Промывайте порт RVOT пятью миллилитрами гепарина натрия. Закройте торакотомию цифрой восемь номер два полиглактина 910 швами Затем закройте грудной мышечный слой бегущим числом 0 полиглактина 910.
Наконец, закройте подкожную клетчатку слоями ходового номера 2/0 полиглактина 910 швами и скрепите кожу. Подготовьте два датчика давления для контроля, давления правого желудочка и манжеты окклюдера. После того, как животное слегка удерживается, вставьте иглу Хубера из правого желудочкового преобразователя давления в правый желудочковый порт.
Прикрепите пятимиллилитровой шприц к трехстороннему стопорному члену и попытайтесь втянуть кровь обратно в шприц из правого желудочкового порта. Как только линия давления правого желудочка установлена, подключите иглу Хубера к манжету легочной артерии. Зафиксируйте начальные значения давления манжеты разрыва желудочковой и легочной артерий, отмечая любые резкие изменения по сравнению с предыдущими показаниями.
Медленно вводите 3% гипертонического физиологического раствора в порт окклюдера, обращая внимание на давление разрыва желудочков и манжеты. После того, как манжета PA накачана до нужного количества, удалите иглу Huber из порта манжеты. Промыть правый желудочковый порт 10 миллилитрами физиологического раствора, затем промыть порт пятью миллилитрами по 1000 единиц на миллилитр гепарина натрия.
Среди 12 овец. Среднее давление манжеты легочной артерии увеличивалось с увеличением времени с первой по девятую неделю. Более быстрое бандажирование легочной артерии приводит к более быстрому снижению насыщения венозным кислородом.
Напротив, те, кто испытал более постепенную стратегию бандажирования легочной артерии, поддерживают физиологический диапазон насыщения венозным кислородом между 70 и 80%, контролируя давление манжеты легочной артерии. Эта модель обладает способностью контролировать и титровать адаптацию желудочков и фенотип езды.
