Интравитреальные инъекции в ячий глаз

Интравитреальные инъекции могут быть использованы для доставки терапевтических агентов к сетчатке. Здесь представлен протокол интравитреальных инъекций в овечий глаз, как модель человеческого глаза. Интравитреальные инъекции гораздо менее инвазивны, чем другие глазные инъекции.

Интравитреальные инъекции могут быть успешно использованы для доставки продукта генной терапии и лечения дегенерации сетчатки у овец естественными нейрональными цероидными липофусцинозами. После того, как овца будет обезболена, начните асептически дезинфицировать глаз, чтобы ввести его, орошая его от 1 до 5% раствора повидона йода с использованием 20-миллилитрового шприца. Затем поместите стерильную, фенестрированную хирургическую драпировку над глазом.

Приложите зеркало глаза к векам, чтобы держать глаз открытым. Захватите бульбарную конъюнктиву на спинном боковом аспекте глаза щипцами и вращайте глазной шар вентромедиально. Вставьте иглу примерно семимиллиметровую кзади склеры на боковом аспекте глаза и под углом кзади, чтобы избежать хрусталика.

Вводят однократную инъекцию по 100 микролитров в виде болюса, как можно ближе к сетчатке, не нарушая поверхность сетчатки. Промыть глаз примерно 10-15 миллилитрами от 1 до 5% раствора повидона йода, а затем 10 миллилитрами физиологического раствора перед удалением зеркала и драпировки. Электроретинографический анализ продемонстрировал сохранение функции сетчатки в обработанном глазу, в то время как необработанный глаз снижался аналогично животным, пораженным CLN5.

Гистология сетчатки была почти нормализована в обработанном глазу с общей толщиной сетчатки, сопоставимой со здоровыми контрольными животными в центральной сетчатке. Напротив, толщина необработанной сетчатки была сопоставима с животными, пораженными CLN5. Экспрессия глиального фибриллярного кислого белка, или GFAP, маркера стресса сетчатки и астроглии, была ниже в обработанных глазах, чем в необработанных глазах, что указывает на то, что воспаление, связанное с заболеванием, ослаблялось после лечения.

С созданием протокола интравитреальных инъекций в овечий глаз овцы теперь могут использоваться для проверки безопасности и эффективности многих интравитреально доставляемых терапевтических средств.