Iniezioni intravitreali nell'occhio ovino

Le iniezioni intravitreali possono essere utilizzate per fornire agenti terapeutici alla retina. Un protocollo per le iniezioni intravitreali nell'occhio di pecora, come modello dell'occhio umano, è presentato qui. Le iniezioni intravitreali sono molto meno invasive di altre iniezioni oculari.

Le iniezioni intravitreali possono essere utilizzate con successo per fornire un prodotto di terapia genica e trattare la degenerazione retinica negli ovini con lipofuscinosi ceroidali neuronali presenti in natura. Una volta che la pecora è anestetizzata, iniziare a disinfettare asetticamente l'occhio da iniettare irrigandolo con una soluzione di iodio povidone dall'1 al 5% utilizzando una siringa da 20 millilitri. Quindi, posizionare un drappo chirurgico sterile e fenestrato sull'occhio.

Montare uno speculum oculare sulle palpebre per tenere l'occhio aperto. Afferrare la congiuntiva bulbare sull'aspetto laterale dorsale dell'occhio con una pinza e ruotare il globo oculare ventromedialmente. Inserire l'ago a circa sette millimetri posteriormente alla sclera sull'aspetto laterale dell'occhio e inclinato posteriormente per evitare la lente.

Somministrare la singola iniezione di 100 microlitri come bolo, il più vicino possibile alla retina, senza disturbare la superficie retinica. Risciacquare l'occhio con circa 10-15 millilitri di soluzione di iodio da 1 a 5% povidone seguita da 10 millilitri di soluzione salina, prima di rimuovere lo speculum e il drappo. L'analisi elettroretinografica ha dimostrato la preservazione della funzione retinica nell'occhio trattato, mentre l'occhio non trattato è diminuito in modo simile agli animali affetti da CLN5.

L'istologia retinica era quasi normalizzata nell'occhio trattato con uno spessore retinico totale paragonabile agli animali sani di controllo nella retina centrale. Al contrario, lo spessore della retina non trattata era paragonabile agli animali affetti da CLN5. L'espressione della proteina acida fibrillare gliale, o GFAP, un marker di stress retinico e astroglia, era inferiore negli occhi trattati rispetto agli occhi non trattati, indicando che l'infiammazione associata alla malattia era attenuata dopo il trattamento.

Con l'istituzione di un protocollo per le iniezioni intravitreali nell'occhio di pecora, le pecore potrebbero ora essere utilizzate per testare la sicurezza e l'efficacia di molti agenti terapeutici somministrati per via intravitreale.