Intravitreale Injektionen in das Schafauge

Intravitreale Injektionen können verwendet werden, um Therapeutika an die Netzhaut abzugeben. Ein Protokoll für intravitreale Injektionen in das Schafauge, als Modell des menschlichen Auges, wird hier vorgestellt. Intravitreale Injektionen sind viel weniger invasiv als andere Augeninjektionen.

Intravitreale Injektionen können erfolgreich verwendet werden, um ein Gentherapieprodukt zu verabreichen und Netzhautdegeneration bei Schafen mit natürlich vorkommenden neuronalen Ceroid-Lipofuszinosen zu behandeln. Sobald das Schaf betäubt ist, beginnen Sie mit der aseptischen Desinfektion des zu injizierenden Auges, indem Sie es mit einer 20-Milliliter-Spritze mit 1 bis 5% Povidon-Jodlösung spülen. Positionieren Sie dann einen sterilen, fenestrierten chirurgischen Vorhang über dem Auge.

Befestigen Sie ein Augenspekulum an den Augenlidern, um das Auge offen zu halten. Fassen Sie die bulbäre Bindehaut auf dem dorsalen lateralen Aspekt des Auges mit einer Pinzette und drehen Sie die Augenkugel ventromedial. Führen Sie die Nadel etwa sieben Millimeter hinter der Sklera auf der lateralen Seite des Auges ein und sind Sie nach hinten abgewinkelt, um die Linse zu vermeiden.

Verabreichen Sie die einmalige Injektion von 100 Mikrolitern als Bolus, so nah wie möglich an der Netzhaut, ohne die Netzhautoberfläche zu stören. Spülen Sie das Auge mit etwa 10 bis 15 Milliliter 1 bis 5% Povidon-Jodlösung, gefolgt von 10 Milliliter Kochsalzlösung, bevor Sie das Spekulum entfernen und abdecken. Die Elektroretinographie-Analyse zeigte eine erhaltene Netzhautfunktion im behandelten Auge, während das unbehandelte Auge ähnlich wie bei CLN5-betroffenen Tieren abnahm.

Die Netzhauthistologie war im behandelten Auge nahezu normalisiert und hatte eine Gesamtnetzhautdicke, die mit der gesunder Kontrolltiere in der zentralen Netzhaut vergleichbar war. Im Gegensatz dazu war die Dicke der unbehandelten Netzhaut vergleichbar mit CLN5-betroffenen Tieren. Die Expression des sauren Gliafibrillenproteins oder GFAP, ein Marker für Netzhautstress und Astroglia, war bei den behandelten Augen niedriger als bei den unbehandelten Augen, was darauf hindeutet, dass die krankheitsassoziierte Entzündung nach der Behandlung abgeschwächt wurde.

Mit der Etablierung eines Protokolls für intravitreale Injektionen in das Schafauge konnten nun Schafe verwendet werden, um die Sicherheit und Wirksamkeit vieler intravitreell verabreichter Therapeutika zu testen.