Injeções intravítreas no olho ovino

Injeções intravítreas podem ser usadas para fornecer agentes terapêuticos à retina. Um protocolo para injeções intravítreas no olho de ovelha, como um modelo do olho humano, é apresentado aqui. As injeções intravítreas são muito menos invasivas do que outras injeções oculares.

As injeções intravítreas podem ser usadas com sucesso para fornecer um produto de terapia genética e tratar a degeneração da retina em ovinos com lipofuscinoses ceroides neuronais que ocorrem naturalmente. Uma vez que a ovelha esteja anestesiada, comece a desinfetar assepticamente o olho a ser injetado, irrigando-o com 1 a 5% de solução de iodopovidona usando uma seringa de 20 mililitros. Em seguida, posicione uma cortina cirúrgica estéril e fenestrada sobre o olho.

Encaixe um espéculo ocular nas pálpebras para manter o olho aberto. Segure a conjuntiva bulbar na face lateral dorsal do olho com fórceps e gire o globo ocular ventromedialmente. Insira a agulha aproximadamente sete milímetros posterior à esclera na face lateral do olho e inclinada posteriormente para evitar a lente.

Administrar a injeção única de 100 microlitros como um bolus, o mais próximo possível da retina, sem perturbar a superfície da retina. Enxaguar o olho com aproximadamente 10 a 15 mililitros de 1 a 5% de solução de iodopovidona seguida de 10 mililitros de solução salina, antes de remover o espéculo e o drape. A análise eletrorretinográfica demonstrou a função retiniana preservada no olho tratado, enquanto o olho não tratado diminuiu de maneira semelhante aos animais afetados pela CLN5.

A histologia da retina foi quase normalizada no olho tratado com uma espessura total da retina comparável a animais controle saudáveis na retina central. Em contraste, a espessura da retina não tratada foi comparável aos animais afetados pelo CLN5. A expressão da proteína glial fibrilar ácida, ou GFAP, um marcador de estresse retiniano e astroglia, foi menor nos olhos tratados do que nos olhos não tratados, indicando que a inflamação associada à doença foi atenuada após o tratamento.

Com o estabelecimento de um protocolo para injeções intravítreas no olho de ovelha, as ovelhas agora podem ser usadas para testar a segurança e a eficácia de muitos agentes terapêuticos intravitríferos.