Оптимизированное производство и анализ рекомбинантных везикул, заполненных белком, из E. coli

Мы пытаемся понять динамические взаимодействия между молекулами в живых клетках. Для биохимического анализа может потребоваться использование большого количества рекомбинантного белка. Их может быть чрезвычайно трудно выразить в правильно сложенной и функциональной форме.

Если бы было обнаружено, что белок неправильно свернут или нерастворим при экспрессии в бактериях, исследователям пришлось бы либо прибегнуть к клеткам млекопитающих, что является дорогостоящим и относительно медленным, либо использовать синтетические полипептиды. Наш протокол обеспечивает высокую экспрессию, а также экспорт сложных белков из E.coli. Добавление короткой расщепляемой пептидной последовательности к аминоконцу белка не только увеличивает производство и выход каждого белка, который мы тестировали на сегодняшний день, но также экспортирует белок из клетки в среду.

Наряду с упрощением экспрессии белка, он также упрощает последующую очистку белка.