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Neuroscience

Purificazione di H3 e H4 proteine istoniche e la quantificazione degli istoni acetilati marchi nelle cellule e tessuto cerebrale

Published: November 30th, 2018

DOI:

10.3791/58648

1Department of Psychiatry & Behavioral Sciences, University of Miami Miller School of Medicine, 2Center for Therapeutic Innovation, University of Miami Miller School of Medicine

In tutti gli organismi eucarioti, cromatina, il modello fisiologico delle informazioni genetiche di tutto, è essenziale per eredità. Cromatina è soggetta a una serie di modifiche di posttranslational diversificate (PTM) che per lo più si verificano in termini amminici delle proteine istoniche (cioè, istone coda) e regolano l'accessibilità e lo stato funzionale del DNA sottostante. Istoni estendono dal nucleo del nucleosoma e sono soggette all'aggiunta di gruppi acetile da utilizzando istone acetiltransferasi (Hat) e la rimozione di gruppi acetile di istone deacetilasi (HDACs) durante la crescita cellulare e la differenziazione. Modelli di acetilazione specifici sui residui di lisina (K) su istoni determinano un'omeostasi dinamica tra cromatina trascrizionalmente attiva o trascrizionalmente repressa influenzando il gruppo degli istoni del nucleo (1) e (2) reclutamento sinergica o antagonistiche proteine della cromatina associate al sito di trascrizione. Il meccanismo normativo fondamentale della natura complessa della coda dell'istone PTMs influenza la maggior parte dei processi basati su modelli della cromatina e si traduce in cambiamenti nella maturazione delle cellule e differenziazione nello sviluppo sia normale che patologica. L'obiettivo del report corrente è quello di fornire novizi con un metodo efficiente per purificare proteine istoniche core dalle cellule e tessuto cerebrale e quantificare in modo affidabile segni acetilazione degli istoni H3 e H4.

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