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Nous présentons une méthode de montage d’une valve aortique porcine sur un duplicateur d’impulsions afin de tester ses propriétés hydrodynamiques. Cette méthode peut être utilisée pour déterminer le changement de l’hydrodynamique après l’application d’une procédure expérimentale ou d’un nouveau dispositif médical avant son utilisation dans un modèle animal de grande taille.
Les options pour tester de nouvelles procédures cardiaques et de nouveaux dispositifs médicaux d’investigation avant leur utilisation dans un modèle animal sont limitées. Dans cette étude, nous présentons une méthode de montage d’une valve aortique porcine dans un duplicateur d’impulsions afin d’évaluer ses propriétés hydrodynamiques. Ces propriétés peuvent ensuite être évaluées avant et après l’exécution de la procédure à l’étude et/ou l’application du dispositif médical d’investigation. La fixation du segment d’entrée présente une certaine difficulté en raison de l’absence de myocarde circonférentiel dans la voie d’écoulement ventriculaire gauche. Cette méthode résout ce problème en fixant le segment d’entrée à l’aide du feuillet antérieur de la valve mitrale, puis en suturant la paroi libre ventriculaire gauche autour de l’appareil d’entrée. Le segment d’écoulement est sécurisé simplement en insérant le dispositif dans une incision dans la face supérieure de l’arc aortique. Nous avons constaté que les spécimens avaient des propriétés hydrodynamiques significativement différentes avant et après la fixation tissulaire. Cette découverte nous a incités à utiliser des échantillons frais dans nos tests et devrait être prise en compte lors de l’utilisation de cette méthode. Dans notre travail, nous avons utilisé cette méthode pour tester de nouveaux matériaux de patchs intracardiaques à utiliser en position valvulaire en effectuant une procédure de néocuspidisation de la valve aortique (procédure d’Ozaki) sur les valves aortiques porcines montées. Ces vannes ont été testées avant et après la procédure afin d’évaluer le changement des propriétés hydrodynamiques par rapport à la vanne native. Nous présentons ici une plate-forme d’essais hydrodynamiques de procédures expérimentales de valve aortique qui permet la comparaison avec la valve native et entre différents dispositifs et techniques utilisés pour la procédure à l’étude.
La valvulopathie aortique représente un fardeau important pour la santé publique, en particulier la sténose aortique, qui touche 9 millions de personnes dans le monde1. Les stratégies pour traiter cette maladie sont en cours d’évolution et comprennent la réparation de la valve aortique et le remplacement de la valve aortique. Dans la population pédiatrique en particulier, il existe une incitation importante à réparer plutôt qu’à remplacer la valve, car les prothèses actuellement disponibles sont sujettes à la dégénérescence valvulaire structurelle (SVD) et ne sont pas tolérantes à la croissance, nécessitant une réintervention pour un remplacement au fur et à mesure que le patient grandit. Même la procédure de Ross, qui consiste à remplacer la valve aortique (AV) malade par la valve pulmonaire native (PV), nécessite une prothèse ou un greffon en position pulmonaire qui est également sujet à la SVD et à une tolérance de croissance souvent limitée2. De nouvelles approches de la valvulopathie aortique sont en cours de développement, et il est nécessaire de les tester dans un contexte biologiquement pertinent avant de les appliquer dans un grand modèle animal.
Nous avons mis au point une méthode de test d’un VA porcin qui peut fournir des informations sur la fonction de la valve avant et après une procédure expérimentale ou l’application d’un nouveau dispositif médical. En montant l’AV porcin sur une machine à duplication d’impulsions disponible dans le commerce, nous sommes en mesure de comparer les caractéristiques hydrodynamiques couramment utilisées dans l’étude et, finalement, l’approbation des prothèses valvulaires, y compris la fraction de régurgitation (RF), la surface effective de l’orifice (EOA) et la différence de pression positive moyenne (PPD)3,4. L’intervention peut ensuite être affinée dans un contexte biologiquement pertinent avant d’être utilisée dans un grand modèle animal, limitant ainsi le nombre d’animaux nécessaires à la production d’une procédure ou d’une prothèse pouvant être utilisée chez l’homme. Les cœurs utilisés pour cette expérience peuvent être obtenus à partir de l’abattoir local ou de déchets de tissus provenant d’autres expériences, il n’est donc pas nécessaire de sacrifier un animal uniquement pour les besoins de cette expérience.
Dans le cadre de notre travail, nous avons utilisé cette méthode pour développer un nouveau matériau de patch pour la réparation et le remplacement des valves. Nous avons testé la fonction hydrodynamique d’une variété de matériaux de patch en effectuant une procédure de néocuspidisation de la valve aortique (procédure d’Ozaki 5,6,7) sur des AV porcins et en les testant dans le duplicateur d’impulsions avant et après la procédure. Cela nous a permis d’affiner le matériau en fonction de ses performances hydrodynamiques. Ainsi, cette méthode fournit une plate-forme pour les essais hydrodynamiques de procédures expérimentales et de nouveaux dispositifs médicaux destinés à être utilisés sur l’AV avant d’être appliqués dans un modèle animal de grande taille.
Toutes les recherches ont été effectuées conformément aux directives institutionnelles pour les soins aux animaux.
1. Considérations et préparatifs de l’expérience
Figure 1 : Fixations personnalisées imprimées en 3D pour le montage des valves aortiques porcines sur le duplicateur d’impulsions. Comme indiqué dans le protocole, la longueur de l’accessoire doit être d’au moins 2 cm et la largeur utile de l’accessoire doit être d’au moins 4 cm. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
2. Résection des structures du côté droit
Figure 2 : Échantillon de cardectomie et résection des structures du côté droit. (A) Échantillon de cardectomie. (B) Artère pulmonaire principale disséquée de l’aorte jusqu’à ce que le tissu ventriculaire soit visible. (C) Inciser le ventricule droit (RV) à la base de la valve pulmonaire. (D) Continuer l’incision le long du septum interventriculaire vers l’avant. (E) Enlever la paroi libre de RV en continuant l’incision sur le pourtour le long du septum interventriculaire. (F) Spécimen dont les structures du côté droit ont été enlevées. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
3. Préparation de la voie d’écoulement ventriculaire gauche (LVOT) pour la canulation avec le dispositif
Figure 3 : Préparation de la voie d’écoulement ventriculaire gauche pour la canulation à l’aide du duplicateur d’impulsions. (A) Inciser l’oreillette gauche (LA) à travers l’ostium de la veine pulmonaire droite. (B) Excès de tissu LA coupé, en maintenant une coiffe d’au moins 3 mm de tissu auriculaire sur l’aorte et en maintenant l’anneau de la valve mitrale sur la circonférence. (C) Extension de l’incision sur le ventricule gauche (VG) à travers la commissure antérolatérale de la valve mitrale. (D) Enlever l’excès de tissu VG sous les muscles papillaires. Les ciseaux sont visibles dans le coin supérieur droit de l’image. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
4. Préparation de l’aorte pour la canulation avec le dispositif
Figure 4 : Préparation de l’aorte pour la canulation à l’aide du duplicateur d’impulsions. (A) Arc aortique avec l’excès de tissu enlevé. Remarquez les deux vaisseaux de l’arc dans l’arc aortique porcin, le tronc brachiocéphale et l’artère sous-clavière gauche. (B) Début de l’incision le long de la face supérieure de l’arc aortique de l’aorte descendante à l’artère sous-clavière gauche. (C) Continuer l’incision le long de la face supérieure de l’arc aortique de l’artère sous-clavière gauche jusqu’au tronc brachiocéphale. (D) Incision de l’arc aortique terminée. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
5. Canulation du LVOT avec le luminaire
Figure 5 : Canulation de la voie d’écoulement ventriculaire gauche à l’aide du duplicateur d’impulsions. (A) Réduction de la moitié de l’épaisseur de la paroi libre du VG avec 1 cm d’épicarde maintenu au bord libre. La ligne pointillée indique la zone de 1 cm à enlever de l’angle supérieur de l’enveloppe murale sans BT. (B) Trou de fixation de la tige de support positionné à 1 cm derrière l’incision de paroi libre BT. (C) Attache zippée fixant le feuillet antérieur du MV à la fixation proximale. (D) Mur sans BT suturé autour de l’appareil. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
6. Canulation de l’aorte avec fixation et préparation finale pour le test
Figure 6 : Canulation de l’aorte et test dans le duplicateur d’impulsions. (A) Soulever l’échantillon de la table par l’aorte pour identifier la position neutre de l’aorte. (B) Fixation distale fixée dans l’aorte à l’aide de colliers de serrage. (C) Éprouvette montée dans le duplicateur d’impulsions pour les essais hydrodynamiques. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
7. Effectuer une procédure expérimentale
REMARQUE : Effectuez des procédures expérimentales telles que la procédure d’Ozaki décrite précédemment 5,6,7 et répétez les tests de DP.
8. Entreposage à long terme de l’échantillon (si désiré)
Les données représentatives recueillies à partir du duplicateur d’impulsions comprennent la fraction de régurgitation (RF), la surface effective de l’orifice (EOA) et la différence de pression positive moyenne (PPD). Les RF et EOA, en particulier, sont utilisés dans les normes ISO pour les valves prothétiques (ISO 5840) et seront importants à collecter si des produits valvulaires prothétiques sont à l’étude. Le PPD offre des informations sur la pression nécessaire pour ouvrir la valve et est couramment ...
La méthode présentée ici fournit une plate-forme pour les essais hydrodynamiques de l’AV afin d’examiner l’effet d’une procédure expérimentale ou d’un nouveau dispositif médical. En montant la valve aortique native sur une machine à duplication d’impulsions, nous sommes en mesure de déterminer l’effet de la procédure expérimentale sur tous les paramètres hydrodynamiques utilisés dans la recherche et l’approbation de nouvelles prothèses valvulaires (ISO 5840). Cela permet d’affiner les proc?...
Les auteurs n’ont aucun conflit d’intérêts financier pertinent à divulguer.
Nous tenons à remercier le laboratoire de la Dre Gordana Vunjak-Novakovic, y compris Julie Van Hassel, Mohamed Diane et Panpan Chen, de nous avoir permis d’utiliser les déchets de tissus cardiaques issus de leurs expériences. Ce travail a été soutenu par la Congenital Heart Defect Coalition à Butler, NJ, et les National Institutes of Health à Bethesda, MD (5T32HL007854-27).
Name | Company | Catalog Number | Comments |
3D Printer | Ultimaker | Ultimaker S5 | Used for printing custom fixtures for hydrodynamic testing |
Crile-Wood Needle Driver | Emerald Instruments | 2.0638.15 | Used for suturing ventricle |
Debakey Forceps | Jarit | 320-110 | Used for dissection and sample preparation (can use multiple if working with an assistant) |
Ethanol 200 proof | Decon Labs Inc. | DSP-MD.43 | Used for fixed tissue storage |
Formalin 10% | Epredia | 5701 | Used for tissue fixation |
Gerald Forceps | Jarit | 285-126 | Used for dissection and sample preparation |
Glass jars | QAPPDA | B07QCP54Z3 | Used for tissue storage |
Glutaraldehyde 25% | Electron Microscopy Sciences | 16400 | Used for tissue fixation |
HEPES 1 M buffer solution | Fisher | BP299-100 | Used to make glutaraldehyde 0.6% |
Mayo Scissors | Jarit | 099-200 | Used for cutting suture |
Metzenbaum Scissors | Jarit | 099-262 | Used for dissection and sample preparation |
O-ring | Sterling Seal & Supply Inc. | AS568-117 | Used as a gasket on the end of the 3D printed fixtures |
Polylactic acid resin | Ultimaker | 1609 | Used for 3D printing fixtures |
Polyproplene suture | Covidien | VP-762-X | Used for suturing ventricle, tapered needle |
Pulse Duplicator | BDC Laboratories | HDTi-6000 | Used for hydrodynamic testing |
Silk ties | Covidien | S-193 | Used for ligating coronary arteries |
Tonsil Clamp | Aesculap | BH957R | Used for coronary artery dissection |
Zip ties (6 inch) | Advanced Cable Ties, Inc. | AL-06-18-9-C | Used for securing sample to fixtures, 157.14 mm long (6 inches), 2.5 mm wide |
Zip ties (8 inch) | GTSE | GTSE-20025B.1000 | Used for securing sample to fixtures, 203 mm long (8 inches), 2.5 mm wide |
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