Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • Representative Results
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

В этой статье мы рассказываем о недорогом и воспроизводимом методе, демонстрирующем мембранный транспорт гистидина в кишечнике козы. Этот процесс происходит за счет совместного транспортирования ионов гистидина и натрия под действием градиента натрия через мембрану энтероцитов. Этот метод использует педагогику эмпирического обучения для лучшего понимания движения растворенных веществ через биологические мембраны.

Abstract

Гистидин является незаменимой аминокислотой, которая также является предшественником метаболитов, участвующих в иммунной системе, легочной вентиляции и сосудистом кровообращении. Абсорбция гистидина с пищей в значительной степени зависит от транспорта нейтральных аминокислот, связанного с натрием, транспортером нейтральных аминокислот Броуда (B0AT), присутствующим на апикальной мембране энтероцита. Здесь мы демонстрируем абсорбцию гистидина кишечными ворсинчатыми энтероцитами из просвета с использованием перевернутых мешочков тощей кишки козы. Тощищие мешочки, подвергшиеся воздействию различных концентраций натрия и гистидина, были проанализированы для определения концентрации гистидина внутри мешков в зависимости от времени. Результаты показывают активное всасывание гистидина. Увеличение концентрации соли приводило к более высокой абсорбции гистидина, что свидетельствует о симпорте абсорбции натрия и гистидина в инвертированных кишечных мешочках коз. Этот протокол может быть применен для визуализации подвижности аминокислот или других метаболитов в кишечнике с соответствующими модификациями. Мы предлагаем этот эксперимент в качестве экспериментального педагогического инструмента, который может помочь студентам бакалавриата понять концепцию мембранного транспорта.

Introduction

Биологические клетки окружены мембранным липидным бислоем, который отделяет внутриклеточный цитозоль от внеклеточного содержимого. Мембрана служит полупроницаемым барьером, регулирующим движение растворенных веществ1. На транспорт через биологические мембраны влияет коэффициент проницаемости растворенного вещества, который зависит от нескольких факторов, в том числе от концентрации и заряда растворенного вещества. В целом, растворенные вещества перемещаются через мембрану с помощью трех механизмов (рис. 1): пассивная диффузия, облегченная диффузия и активный транспорт

Protocol

Весь протокол со всеми этапами представлен в виде схематической диаграммы на рисунке 4. Метод адаптирован из предыдущего исследования с использованием кишечника крысы8. Эксперимент проводился в соответствии с институциональными рекомен.......

Representative Results

Экспериментальный процесс демонстрации кишечной подвижности гистидина путем абсорбции гистидина кишечными ворсинками в просвет вывернутых мешочков проиллюстрирован на рисунках 4, в таблице 1 и таблице 2. Были выполнены три независ?.......

Discussion

Мембранный транспорт является одним из самых фундаментальных понятий, которые преподаются студентам бакалавриата по всем основным дисциплинам биологических наук, как фундаментальным, так и прикладным. Традиционно движение по мембранам визуализировалось с помощью .......

Acknowledgements

Это исследование было поддержано кафедрой биохимии Колледжа Шри Венкатешвара Делийского университета. Авторы благодарят сотрудников лаборатории за поддержку.

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
1.5 mL Microcentrifuge TubesTARSONS500020
10 mL Test TubesBOROSIL9800U04
50 mL Sterile Falcon TubesTARSONS546041
500 mL BeakerBOROSIL10044977
500 mL Conical FlaskBOROSIL691467
D-GlucoseSRL42738
Digital SpectrophotometerSYSTRONICS2710
EthanolEMSURE1009831000
FinpipettesTHERMOFISHER4642090
Glass Stirrer RodBOROSIL9850107
L-Histidine SRL17849
NaClSRL41721
Nitrile GlovesKIMTECH112-4847
Petri Dish TARSONS460090
Phosphate Buffered Saline (ph 7.4)SRL95131
Pipette TipsABDOSP10102
Sodium CarbonateSRL89382
Sodium Nitrate SRL44618
Sodium Phosphate Dibasic (anhydrous)SRL53046
Sodium Phosphate Monobasic (anhydrous)SRL22249
Sulphanilic Acid SRL15354

References

  1. Nelson, D. L., Cox, M. M. . Lehninger Principles of Biochemistry. , (2017).
  2. Stillwell, W. Membrane Transport. An Introduction to Biological Membranes. , (2013).
  3. Fick, A. V.

Explore More Articles

212

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved