A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
В этой статье мы рассказываем о недорогом и воспроизводимом методе, демонстрирующем мембранный транспорт гистидина в кишечнике козы. Этот процесс происходит за счет совместного транспортирования ионов гистидина и натрия под действием градиента натрия через мембрану энтероцитов. Этот метод использует педагогику эмпирического обучения для лучшего понимания движения растворенных веществ через биологические мембраны.
Гистидин является незаменимой аминокислотой, которая также является предшественником метаболитов, участвующих в иммунной системе, легочной вентиляции и сосудистом кровообращении. Абсорбция гистидина с пищей в значительной степени зависит от транспорта нейтральных аминокислот, связанного с натрием, транспортером нейтральных аминокислот Броуда (B0AT), присутствующим на апикальной мембране энтероцита. Здесь мы демонстрируем абсорбцию гистидина кишечными ворсинчатыми энтероцитами из просвета с использованием перевернутых мешочков тощей кишки козы. Тощищие мешочки, подвергшиеся воздействию различных концентраций натрия и гистидина, были проанализированы для определения концентрации гистидина внутри мешков в зависимости от времени. Результаты показывают активное всасывание гистидина. Увеличение концентрации соли приводило к более высокой абсорбции гистидина, что свидетельствует о симпорте абсорбции натрия и гистидина в инвертированных кишечных мешочках коз. Этот протокол может быть применен для визуализации подвижности аминокислот или других метаболитов в кишечнике с соответствующими модификациями. Мы предлагаем этот эксперимент в качестве экспериментального педагогического инструмента, который может помочь студентам бакалавриата понять концепцию мембранного транспорта.
Биологические клетки окружены мембранным липидным бислоем, который отделяет внутриклеточный цитозоль от внеклеточного содержимого. Мембрана служит полупроницаемым барьером, регулирующим движение растворенных веществ1. На транспорт через биологические мембраны влияет коэффициент проницаемости растворенного вещества, который зависит от нескольких факторов, в том числе от концентрации и заряда растворенного вещества. В целом, растворенные вещества перемещаются через мембрану с помощью трех механизмов (рис. 1): пассивная диффузия, облегченная диффузия и активный транспорт
Весь протокол со всеми этапами представлен в виде схематической диаграммы на рисунке 4. Метод адаптирован из предыдущего исследования с использованием кишечника крысы8. Эксперимент проводился в соответствии с институциональными рекомен.......
Экспериментальный процесс демонстрации кишечной подвижности гистидина путем абсорбции гистидина кишечными ворсинками в просвет вывернутых мешочков проиллюстрирован на рисунках 4, в таблице 1 и таблице 2. Были выполнены три независ?.......
Мембранный транспорт является одним из самых фундаментальных понятий, которые преподаются студентам бакалавриата по всем основным дисциплинам биологических наук, как фундаментальным, так и прикладным. Традиционно движение по мембранам визуализировалось с помощью .......
Это исследование было поддержано кафедрой биохимии Колледжа Шри Венкатешвара Делийского университета. Авторы благодарят сотрудников лаборатории за поддержку.
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
1.5 mL Microcentrifuge Tubes | TARSONS | 500020 | |
10 mL Test Tubes | BOROSIL | 9800U04 | |
50 mL Sterile Falcon Tubes | TARSONS | 546041 | |
500 mL Beaker | BOROSIL | 10044977 | |
500 mL Conical Flask | BOROSIL | 691467 | |
D-Glucose | SRL | 42738 | |
Digital Spectrophotometer | SYSTRONICS | 2710 | |
Ethanol | EMSURE | 1009831000 | |
Finpipettes | THERMOFISHER | 4642090 | |
Glass Stirrer Rod | BOROSIL | 9850107 | |
L-Histidine | SRL | 17849 | |
NaCl | SRL | 41721 | |
Nitrile Gloves | KIMTECH | 112-4847 | |
Petri Dish | TARSONS | 460090 | |
Phosphate Buffered Saline (ph 7.4) | SRL | 95131 | |
Pipette Tips | ABDOS | P10102 | |
Sodium Carbonate | SRL | 89382 | |
Sodium Nitrate | SRL | 44618 | |
Sodium Phosphate Dibasic (anhydrous) | SRL | 53046 | |
Sodium Phosphate Monobasic (anhydrous) | SRL | 22249 | |
Sulphanilic Acid | SRL | 15354 |
Explore More Articles
This article has been published
Video Coming Soon
ABOUT JoVE
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved