JoVE Logo
Yazarlar
Bize Ulaşın

Oturum Aç

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Özet
  • Giriş
  • Protokol
  • Sonuçlar
  • Tartışmalar
  • Açıklamalar
  • Teşekkürler
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

Berberin (BBR), Coptis chinensis'ten izole edilen bir izokinolin alkaloididir ve anti-enflamatuar, anti-tümör ve tip 2 diabetes mellitusun (T2DM) çeşitli komplikasyonlarını hafifletme dahil olmak üzere değerli farmakolojik aktivitelere sahiptir. Bununla birlikte, BBR'nin diyabetik tendon hasarını düzenlemedeki rolü tam olarak anlaşılamamıştır. Bu çalışmada, T2DM'nin bir sıçan modeli oluşturuldu ve BBR tedavisi sonrası tendon dokularında hücre apoptozu ve otofaji, TdT Aracılı dUTP nick-end etiketleme (TUNEL) testi ve immünohistokimyasal analiz ile değerlendirildi. Tendon fibroblastları sıçan Aşil tendonundan elde edildi ve BBR'nin hücre apoptozunu düzenlemedeki rolü, inflamatuar sitokinlerin üretimi ve otofaji aktivasyonu akış sitometrisi, kantitatif gerçek zamanlı PCR (qRT-PCR) ve western blot analizi kullanılarak değerlendirildi. BBR tedavisinin T2DM sıçanlarının tendon dokularında otofaji aktivasyonunu önemli ölçüde arttırdığını ve hücre apoptozunu azalttığını gösterdik. Tendon fibroblastlarında BBR, yüksek glukoz (HG) ile indüklenen hücre apoptozunu ve proinflamatuar sitokinlerin üretimini baskıladı. HG tedavisi tendon fibroblastlarında otofaji aktivasyonunda azalmaya neden olurken, BBR otofaji aktivasyonunu geri yükledi. Daha da önemlisi, otofajinin 3-MA ile farmakolojik olarak inhibisyonu, BBR'nin HG ile indüklenen tendon fibroblast hasarına karşı koruyucu etkilerini zayıflatmıştır. Birlikte ele alındığında, mevcut sonuçlar BBR'nin tendon fibroblastlarının otofajisini aktive ederek diyabetik tendon hasarını hafifletmeye yardımcı olduğunu göstermektedir.

Giriş

Diyabet (diabetes mellitus, DM), hiperglisemi ile karakterize sistemik bir metabolik bozukluktur1. Günümüzde diyabet, insan sağlığını ve yaşam beklentisini tehdit eden başlıca hastalıklardan biri haline gelmiştir2. Vakaların %90'ından fazlası tip 2 diyabet, kronik inflamasyon3, insülin direnci4 ve adacıkβ hücrelerinde hasar 5 ile karakterize metabolik bir hastalıktır ve prevalansı dünya çapında her yıl artmaktadır.

Tip 2 diyabet, kardiyovasküler sistem6, göz7, böbrek7 ve sinirler8 üzerinde ciddi etkileri olan, diyabet hastalarını birden fazla sakatlık ve hatta yaşamı tehdit eden sağlık riskleri riskine sokan bir dizi ciddi komplikasyon getirir. Kas-iskelet sistemi ile ilgili, özellikle diyabetik tendonlardaki patolojik değişiklikler üzerine az sayıda çalışma yapılmıştır. Son yıllarda, kronik tendinopati insidansı önemli ölçüde artmıştır. Tendonlar, enerji depolama ve iletme kapasitelerini dinamik olarak düzenleyebilir 9,10. Tendon dokularında, tendon fibroblastları, tendon adaptasyonunu modüle etmede ve yaralanma sonrası tendon onarımında önemli bir rol oynar 9,11. Şu anda, tendon fibroblastlarının tendon yaralanması üzerindeki işlevi belirsizliğini korumaktadır.

Bir izokinolin alkaloidi olarak BBR, kan şekerini düşürmek, lipitleri düşürmek, kolesterolü düşürmek, antienflamatuar etkiler, antibakteriyel etkiler, reaktif oksijen türlerini uzaklaştırmak ve sinir sistemi disfonksiyonunu antagonize etmek dahil olmak üzere çeşitli fizyolojik süreçlerde farmakolojik etkiler gösterir 12,13. BBR, yağ dokusu ve iskelet kası hücrelerinde glikoz alımını ve kullanımını artırabilir, karaciğer ve iskelet kası hücrelerinde insülin reseptörünün ekspresyonunu artırabilir, karaciğerde LDL reseptörünün ekspresyonunu artırabilir ve plazmadaki kolesterol ve şeker seviyelerini azaltabilir14. BBR, DM 15,16,17'nin çeşitli komplikasyonlarını hafifletmede değerli farmakolojik aktivitelere sahip olmasına rağmen, BBR'nin diyabetik tendon hasarını düzenlemedeki rolü tam olarak anlaşılamamıştır.

Otofaji, hasarlı organelleri geri çekmek ve metabolik homeostazı sürdürmek için metabolitler sağlamak için çoğu dokuda başlangıç seviyesinde meydana gelmelidir18,19. Otofaji, β hücre sağlığında çok önemli bir rol oynar ve bozulmuş otofaji, β hücre disfonksiyonu ve diyabet ilerlemesi ile ilişkilidir20,21. Ortaya çıkan çalışmalar, BBR'nin neden olduğu otofaji aktivasyonunun diyabetik nefropatinin iyileştirilmesine katkıda bulunduğunu göstermiştir22. Yukarıdaki bulgulara dayanarak, BBR'nin otofajiyi düzenleyerek diyabetik tendon hasarını hafifletmede yardımcı olup olmadığını araştırdık. Mevcut sonuçlar, BBR'nin HG ile indüklenen tendon fibroblast hasarını ve inflamatuar yanıtı azalttığını göstermiştir. HG, tendon fibroblastlarının otofaji aktivasyonunu azaltırken, BBR tedavisi otofaji aktivasyonunu geri kazandırdı ve daha sonra tendon fibroblastlarının canlılığının artmasına ve proinflamatuar sitokinlerin azalmasına neden oldu.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protokol

Bu çalışma, Şanghay Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi, Yueyang Entegre Geleneksel Çin ve Batı Tıbbı Hastanesi Araştırma Etik Kurulu tarafından onaylanmıştır. Tüm hayvan deneyleri, Şanghay Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi, Yueyang Entegre Geleneksel Çin ve Batı Tıbbı Hastanesi Etik Komitesi tarafından onaylanmıştır (IACUC numarası: YYLAC-2019-1). Erkek Wistar sıçanları (200-240 g, 8 haftalık) Şanghay SLAC Laboratuvar Hayvanları Merkezi'nden satın alındı.

1. T2DM'nin sıçan modeli

  1. Erkek Wistar sıçanlarını (200-240 g, 8 haftalık) 12 saatlik aydınlık/karanlık döngüsü (20 ± 2 °C ve %50-%60 bağıl nem) ile iklim kontrollü bir ortamda koruyun. Deney süresi boyunca yiyecek ve su ad libitum sağlayın.
  2. Nazik kullanım, günlük kafes temizliği ve izleme dahil olmak üzere hayvanların çektiği acıyı en aza indirmek için çaba gösterin.
  3. Sıçanları rastgele 3 gruba atayın: kontrol grubu (n = 5), DM model grubu (n = 5) ve BBR grubu ile tedavi edilen diyabetik model (n = 5).
  4. Sıçan DM modelini önceki bir açıklamayagöre oluşturun 23.
    1. Sıçanları, 30 mg / kg'lık bir dozda taze hazırlanmış sodyum sitrat tamponunda (a / h:% 2) çözülmüş tek bir intravenöz streptozotosin (STZ) enjeksiyonu ile uygulayın. Kontrol grubuna STZ olmadan eşit hacimde sitrat sodyum sitrat tamponu ile intraperitoneal olarak enjekte edin.
    2. Bir kan gazı analizörü kullanarak kan şekerini değerlendirin. T2DM modeli için belirtilen kan şekeri seviyesine (≥16.7 mmol / L, 10 gün boyunca sürekli) sahip sıçanları kullanın.
    3. 1 hafta sonra, T2DM sıçanlarını rastgele iki gruba ayırın (her grubun n = 5'i): tedavi edilmemiş sıçanlar veya sıçanlar, 4 hafta boyunca gavaj yoluyla 200 mg / kg / gün BBR uygulandı.

2. Primer tendon fibroblastları

  1. Sıçanları anestezi altında intraperitoneal barbitürat enjeksiyonu (40 mg / kg) ile sakit edin ve daha önce bildirildiği gibi Aşil tendonunu elde edin24.
  2. Tendon fibroblastlarını tendon dokularından izole edin25.
    1. Tendon dokularını manuel olarak parçalayın ve% 0.2 tip II kollajenaz içeren DMEM'e yerleştirin. 37 °C'de 3 saat kuvvetlice çalkalayın.
    2. Ortamı santrifüjleme ile çıkarın ve sindirilen dokuya %10 FBS ve %1 penisilin / streptomisin içeren DMEM ekleyin.
    3. Tendon dokularını 100 μm'lik bir süzgeçle süzün, filtrelenmiş çözeltiyi 6 oyuklu plakalara dökün ve tendon fibroblastlarını% 5 CO2 ile 37 ° C'de nemlendirilmiş bir inkübatörde tutun.

3. Hücre canlılığı testi

NOT: Hücre sayma kiti-8 (CCK-8) testi, üreticinin talimatlarına göre hücre canlılığını ölçmek için kullanılmıştır.

  1. Tripsinizasyondan sonra, tendon fibroblastlarını 96 oyuklu plakalarda (4 x 103 hücre / kuyucuk) kaplayın ve daha sonra bunları farklı dozlarda glikoz ile tedavi edin (0, 5, 10, 20, 30 ve 50 mM) BBR varlığında veya yokluğunda (0, 5, 10, 20, 40 ve 80 μM) 48 saat boyunca.
    NOT: Glukoz ve BBR DMEM'de çözüldü.
  2. Her oyuğa CCK-8 çözeltisi (10 μL) ekleyin ve hücreleri 37 ° C'de 2 saat daha inkübe edin.
  3. Daha sonra, her bir oyuğun emilimini 450 nm dalga boyunda bir mikroplaka okuyucu ile ölçün.

4. Hücre apoptozu analizi

NOT: Tendon fibroblastlarının apoptoz oranını analiz etmek için bir propidyum iyodür (PI) ve annexin V-FITC akış sitometrisi testi kullanıldı.

  1. Tendon fibroblastlarını (5 x 105 hücreli) 24 saat boyunca DMEM'de 6 oyuklu plakalara tohumlayın.
  2. Her kuyucuktan DMEM'i aspire edin ve atın. Hücreleri, 24 saat boyunca BBR (20 μM) varlığında veya yokluğunda HG (30 mM) içeren taze DMEM ile tedavi edin.
  3. Hücreleri 1x PBS'de% 0.25 tripsin ile ayırın, hücreleri PBS ile hasat edin ve 5 dakika boyunca 2000 x g'da santrifüjleyin.
  4. Hücreleri bağlayıcı tamponda (Malzeme Tablosu) yeniden süspanse edin ve oda sıcaklığında (RT) 15 dakika boyunca karanlıkta 10 μL FITC konjuge annexin V ve 5 μL PI ile boyayın.
  5. Ardından, hücreleri bir akış sitometresi ile analiz edin.

5. Kantitatif gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (qRT-PCR)

  1. Tendon fibroblastlarını hasat edin ve üreticinin tavsiyelerine göre bir RNA ekstraksiyon kiti (Malzeme Tablosu) kullanarak homojenize edin.
  2. Moloney'nin murin lösemi virüsü, ters transkriptaz ve Oligo (dT) primerleri ile ters transkripsiyonel PCR gerçekleştirin (Malzeme Tablosu).
  3. Gerçek zamanlı PCR Sisteminde SYBR yeşil qPCR Karışımı kullanarak qRT-PCR gerçekleştirin. Döngü koşulları, 10 dakika boyunca 95 ° C'de denatürasyon ve 20 saniye boyunca 95 ° C'de 45 döngü, 20 saniye boyunca 55 ° C ve 30 saniye boyunca 72 ° C'dir.
    NOT: IL-1β, IL-6 ve IL-10 için astarların ayrıntıları için Malzeme Tablosuna bakın. Referans gen olarak β-aktin kullanıldı.
  4. Daha önce açıklandığı gibi 2-ΔΔCT formülünü kullanarak bağıl ifade seviyesini hesaplayın26 .

6. Batı lekesi analizi

  1. 24 saat boyunca BBR (20 μM) varlığında veya yokluğunda HG (30 mM) ile muameleden sonra, tendon fibroblastlarını RIPA tamponu (Malzeme Tablosu) ile parçalayın ve bikinkoninik asit tahlili kullanarak toplam protein konsantrasyonunu ölçün.
  2. Her numuneden eşdeğer miktarlarda proteini (50 μg) RT'de %10 SDS-PAGE ile ayırın ve ardından 2 saat boyunca 4 ° C'de poliviniliden florür (PVDF) membranlarına aktarın.
  3. TBST'de% 5 yağsız kurutulmuş sütte membranları bloke edin ve daha sonra aşağıdaki birincil antikorlarla gece boyunca 4 ° C'de inkübe edin: anti-LC3B (1:1500), anti-p62 (1:2000) ve anti-β-aktin (1:3500) antikoru.
  4. TBST ile yıkandıktan sonra, zarları keçi anti-tavşan H&L HRP konjuge ikincil antikorları (1:5000) ile RT'de 1 saat inkübe edin.
  5. Spesifik lekeleri görselleştirmek ve otoradyogramları dansitometri ile ölçmek için bir ECL kemilüminesans kiti kullanın.

7. İmmünohistokimyasal analiz (IHC)

  1. Parafine gömülü ayak tendon dokularını 6 μm kalınlığında bölümler halinde kesin.
  2. Bölümleri %4 formalin içinde sabitledikten sonra, bölümleri anti-LC3 antikoru (1:200) ile gece boyunca 4 °C'de inkübe edin.
  3. 10 mM PBS (Tween 20 ile pH7.4) kullanarak üç kez yıkadıktan sonra, tüm bölümleri 37 ° C'de 1 saat boyunca keçi anti-tavşan HRP konjuge ikincil antikoru (1:1000) ile inkübe edin ve RT'de 60 dakika boyunca DAB ve hematoksilen ile boyayın.
  4. Ters çevrilmiş bir mikroskop kullanarak lekeli slaytları 20x büyütmede görüntüleyin.

8. TÜNEL testi

NOT: Tendon dokusundaki hücre apoptozu, üreticinin talimatlarına göre bir TUNEL test kiti kullanılarak analiz edildi.

  1. Parafine gömülü ayak tendon dokularını 6 μm kalınlığında bölümler halinde kesin.
  2. Ksilen içindeki bölümleri parafinden arındırın ve bunları kademeli bir etanol serisinde yeniden sulandırın.
  3. RT'de% 3 hidrojen peroksit ile daldırıldıktan sonra, bölümleri 37 ° C'de 1 saat boyunca TUNEL reaksiyon karışımı ile inkübe edin.
  4. DAPI kullanarak çekirdekleri boyayın. Lekeli hücreleri bir floresan mikroskobu (20x) altında gözlemleyin ve TUNEL pozitif hücrelerin yüzdesini belirleyin.

9. İstatistiksel analiz

  1. İstatistiksel analiz yapmak için uygun yazılım uygulamalarını kullanın
    NOT: Burada veriler, üç bağımsız deneyin ortalama ± standart sapması (SD) olarak sunulmuştur. İstatistiksel analizler SPSS 23.0 programı ile yapıldı. Gruplar arası farklılıkları karşılaştırmak için Student t-testi, çoklu grup analizleri için tek yönlü varyans analizi (ANOVA) yapıldı. Aradaki fark p < 0.05 olduğunda istatistiksel olarak anlamlıydı.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Sonuçlar

BBR'nin diyabetik tendon hasarını hafifletmedeki farmakolojik rolünü değerlendirmek için, DM sıçanlarının ayak tendon dokularında hücre apoptozu ve otofaji aktivasyonu, BBR varlığında veya yokluğunda değerlendirildi. Şekil 1A , DM sıçanlarının tendon dokularında LC3 protein seviyesinin (bir otofaji belirteci) kontrol sıçanlarına kıyasla azaldığını, BBR tedavisinin ise otofaji aktivasyonunu önemli ölçüde geri kazandığını...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Tartışmalar

Tendon yaralanması DM27'li hastalarda sık görülen bir komplikasyondur. Tendon fibroblastları yara iyileşme sürecinde önemli bir rol oynar28,29. Mevcut çalışma, i) BBR'nin DM sıçanlarının tendon dokularında otofaji aktivasyonunu arttırdığını ve hücre apoptozunu azalttığını, ii) BBR'nin tendon fibroblastlarının HG ile indüklenen apoptozunu azalttığını, iii) BBR'nin tendon fib...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Açıklamalar

Yazarların bu makalenin içeriğiyle ilgili beyan etmek için herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Teşekkürler

Bu çalışma, Geleneksel Çin Tıbbının Gelişimini Daha Da Hızlandırmak için Şanghay Üç Yıllık Eylem Planı Projesi [ZY (2018-2020)-CCCX-4005] tarafından finanse edilmiştir.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Malzemeler

NameCompanyCatalog NumberComments
1% penicillin/streptomycinSigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA516104-M
anti-LC3BAbcam, CA, USAab48394
anti-p62Abcamab91526
anti-β-actin antibodyAbcamab8227
Binding bufferBD Biosciences556454
DMEMThermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA11965092
EVOS XL Core microscopeThermo Fisher ScientificAMEX1000
Goat anti-rabbit H&L HRP-conjugated secondary antibodiesAbcamab205718
Leukemiavirus reverse transcriptaseClontech639574
Male Wistar ratsShanghai SLAC Laboratory Animal Co., Ltd200–240 g, 8 weeks
Oligo (dT)18 PrimerTaKaRa3806
PrimersShanghai Sangon BiotechSynthesized primers for IL-1β, IL-6 and IL-10
RIPA Lysis BufferThermo Fisher Scientific20-188
RNA extraction kit (Trizol)TaKaRa9108Q
StepOne Realtime PCR SystemThermo Fisher Scientific4376357
TUNEL assay kitThermo Fisher ScientificC10245

Referanslar

  1. Cho, S. B., Kim, S. C., Chung, M. G. Identification of novel population clusters with different susceptibilities to type 2 diabetes and their impact on the prediction of diabetes. Scientific Reports. 9 (1), 3329(2019).
  2. Diamant, A. L., Babey, S. H., Hastert, T. A., Brown, E. R. Diabetes: the growing epidemic. Policy Brief (UCLA Center for Health Policy Research. , 1-12 (2007).
  3. Zhang, H., Qi, R., Zeng, Y., Tsao, R., Mine, Y. Chinese sweet leaf tea (Rubus suavissimus) mitigates LPS-induced low-grade chronic inflammation and reduces the risk of metabolic disorders in a C57BL/6J mouse model. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 68 (1), 138-146 (2019).
  4. Tian, S., Wang, M., Liu, C., Zhao, H., Zhao, B. Mulberry leaf reduces inflammation and insulin resistance in type 2 diabetic mice by TLRs and insulin Signalling pathway. BMC Complementary and Alternative Medicine. 19 (1), 326(2019).
  5. Butler, A. E., Janson, J., Soeller, W. C., Butler, P. C. Increased beta-cell apoptosis prevents adaptive increase in beta-cell mass in mouse model of type 2 diabetes: evidence for role of islet amyloid formation rather than direct action of amyloid. Diabetes. 52 (9), 2304-2314 (2003).
  6. Ramirez-Farias, C., et al. Effect of inulin on the human gut microbiota: stimulation of Bifidobacterium adolescentis and Faecalibacterium prausnitzii. British Journal of Nutrition. 101 (4), 541-550 (2009).
  7. Zhang, Y., et al. Treatment of type 2 diabetes and dyslipidemia with the natural plant alkaloid berberine. The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. 93 (7), 2559-2565 (2008).
  8. Turnbaugh, P. J., Backhed, F., Fulton, L., Gordon, J. I. Diet-induced obesity is linked to marked but reversible alterations in the mouse distal gut microbiome. Cell Host & Microbe. 3 (4), 213-223 (2008).
  9. Jamil, S., et al. Angiopoietin-like 4 enhances the proliferation and migration of tendon fibroblasts. Medicine & Science in Sports & Exercise. 49 (9), 1769-1777 (2017).
  10. Bohm, S., Mersmann, F., Tettke, M., Kraft, M., Arampatzis, A. Human achilles tendon plasticity in response to cyclic strain: effect of rate and duration. Journal of Experimental Biology. 217, 4010-4017 (2014).
  11. Mousavizadeh, R., et al. Cyclic strain alters the expression and release of angiogenic factors by human tendon cells. PLoS One. 9 (5), 97356(2014).
  12. Dong, H., Zhao, Y., Zhao, L., Lu, F. The effects of berberine on blood lipids: a systemic review and meta-analysis of randomized controlled trials. Planta Medica. 79 (6), 437-446 (2013).
  13. Dong, H., Wang, N., Zhao, L., Lu, F. Berberine in the treatment of type 2 diabetes mellitus: a systemic review and meta-analysis. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2012, 591654(2012).
  14. Pirillo, A., Catapano, A. L. Berberine, a plant alkaloid with lipid- and glucose-lowering properties: From in vitro evidence to clinical studies. Atherosclerosis. 243 (2), 449-461 (2015).
  15. Sun, S. F., et al. Renoprotective effect of berberine on type 2 diabetic nephropathy in rats. Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology. 42 (6), 662-670 (2015).
  16. Zhai, J., et al. Berberine protects against diabetic retinopathy by inhibiting cell apoptosis via deactivation of the NFkappaB signaling pathway. Molecular Medicine Reports. 22 (5), 4227-4235 (2020).
  17. Zhang, J. H., et al. Effects of Berberine on diabetes and cognitive impairment in an animal model: The mechanisms of action. The American Journal of Chinese Medicine. 49 (6), 1399-1415 (2021).
  18. Jandrey, E. H. F., et al. A key pathway to cancer resilience: The role of autophagy in glioblastomas. Frontiers in Oncology. 11, 652133(2021).
  19. Kroemer, G., Levine, B. Autophagic cell death: the story of a misnomer. Nature Reviews Molecular Cell Biology. 9 (12), 1004-1010 (2008).
  20. Hoshino, A., et al. Inhibition of p53 preserves Parkin-mediated mitophagy and pancreatic beta-cell function in diabetes. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (8), 3116-3121 (2014).
  21. Jung, H. S., et al. Loss of autophagy diminishes pancreatic beta cell mass and function with resultant hyperglycemia. Cell Metabolism. 8 (4), 318-324 (2008).
  22. Zhang, M., et al. Highly bioavailable berberine formulation ameliorates diabetic nephropathy through the inhibition of glomerular mesangial matrix expansion and the activation of autophagy. European Journal of Pharmacology. 873, 172955(2020).
  23. Jia, Y., Xu, B., Xu, J. Effects of type 2 diabetes mellitus on the pharmacokinetics of berberine in rats. Pharmaceutical Biology. 55 (1), 510-515 (2017).
  24. Sakamoto, K., et al. Involvement of Na+/Ca2+ exchanger in migration and contraction of rat cultured tendon fibroblasts. Journal of Physiology. 587, 5345-5359 (2009).
  25. Mendias, C. L., Gumucio, J. P., Lynch, E. B. Mechanical loading and TGF-beta change the expression of multiple miRNAs in tendon fibroblasts. Journal of Applied Physiology. 113 (1), 56-62 (2012).
  26. Livak, K. J., Schmittgen, T. D. Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2(-Delta Delta C(T)) Method. Methods. 25 (4), 402-408 (2001).
  27. Oliver, T. I., Mutluoglu, M. Diabetic Foot Ulcer. Treasure Island (FL): StatPearls Publishing. , (2020).
  28. Zeng, T., et al. Endothelial cell-derived small extracellular vesicles suppress cutaneous wound healing through regulating fibroblasts autophagy. Clinical science. 133 (9), London, England. (2019).
  29. Sardone, F., et al. Collagen VI-NG2 axis in human tendon fibroblasts under conditions mimicking injury response. Matrix Biology. 55, 90-105 (2016).
  30. de Oliveira, A. R., et al. Effect of photobiomodulation and exercise on early remodeling of the Achilles tendon in streptozotocin-induced diabetic rats. PLoS One. 14 (2), 0211643(2019).
  31. Wu, Y. F., et al. High glucose alters tendon homeostasis through downregulation of the AMPK/Egr1 pathway. Scientific Reports. 7, 44199(2017).
  32. Garcia-Bailo, B., et al. E in the prevention of type 2 diabetes mellitus: modulation of inflammation and oxidative stress. Biologics. 5, 7-19 (2011).
  33. Hudgens, J. L., et al. Platelet-rich plasma activates proinflammatory signaling pathways and induces oxidative stress in tendon fibroblasts. American Journal of Sports Medicine. 44 (8), 1931-1940 (2016).
  34. Chen, H., et al. Berberine attenuates apoptosis in rat retinal Muller cells stimulated with high glucose via enhancing autophagy and the AMPK/mTOR signaling. Biomedicine & Pharmacotherapy. 108, 1201-1207 (2018).
  35. Li, G., et al. Antifibrotic cardioprotection of berberine via downregulating myocardial IGF-1 receptor-regulated MMP-2/MMP-9 expression in diabetic rats. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 315 (4), 802-813 (2018).
  36. Yerra, V. G., Kalvala, A. K., Sherkhane, B., Areti, A., Kumar, A. Adenosine monophosphate-activated protein kinase modulation by berberine attenuates mitochondrial deficits and redox imbalance in experimental diabetic neuropathy. Neuropharmacology. 131, 256-270 (2018).
  37. Zhou, G., Yan, M., Guo, G., Tong, N. Ameliorative effect of berberine on neonatally induced type 2 diabetic neuropathy via modulation of BDNF, IGF-1, PPAR-gamma, and AMPK expressions. Dose Response. 17 (3), 1559325819862449(2019).
  38. Zhu, L., Han, J., Yuan, R., Xue, L., Pang, W. Berberine ameliorates diabetic nephropathy by inhibiting TLR4/NF-kappaB pathway. Biological Research. 51 (1), 9(2018).
  39. Han, Y., et al. Pharmacokinetics and pharmacological activities of berberine in diabetes mellitus treatment. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2021, 9987097(2021).
  40. Habtemariam, S. Berberine pharmacology and the gut microbiota: A hidden therapeutic link. Pharmacological Research. 155, 104722(2020).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

BerberinDiyabetik Tendon HasarTendon FibroblastlarOtofaji AktivasyonuTip 2 Diabetes MellitusTUNEL Testinflamatuar SitokinlerApoptoz Reg lasyonuAk SitometrisiQRT PCRWestern Blot AnaliziY ksek Glukoz TedavisiFarmakolojik nhibisyon

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Bize Ulaşın

KÜTÜPHANEYE TAVSİYE ET

JoVE HABER BÜLTENLERİ

Araştırma

Eğitim

Yazarlar

Kütüphaneciler

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır