C. elegans'ı kültür plakalarında hareketsiz hale getirmek için bir soğutma aşamasının montajı ve çalıştırılması

Tüm Caenorhabditis elegans popülasyonunu doğrudan yetiştirme plakalarına hareketsiz hale getirebilecek basit bir yaklaşım geliştiriyoruz. Bu strateji, görüntüleme ile ilgili deneyleri önemli ölçüde hızlandırır. Tipik olarak C.elegans popülasyonunun yüksek çözünürlüklü görüntülenmesi için kullanılan sodyum azid immobilizasyonu son derece emek yoğundur ve bireysel hayvan montajı ve kullanımı gerektirir.

Bu yöntem aynı zamanda hayvan ömrünü ve canlılığını azaltabilir, bu da verileri karıştırabilir. Geleneksel soğutma yöntemi, kapsamlı kullanıcı eğitimi gerektiren iki ila dört santigrat derece mikroakışkan içeren nispeten düşük sıcaklıklar kullandı. Soğutma aşamasında, altı santigrat derece gibi sıcak sıcaklıkların, yüksek devirli görüntüleme için hayvanları daha güçlü bir şekilde hareketsiz hale getirdiğini bulduk.

C.elegans'ın soğutma immobilizasyonu yaygın olarak kullanılmaz, ancak kullanıldığında, genellikle önemli kullanıcı eğitimi gerektiren karmaşık mikroakışkanlarla birleştirilir. Tipik immobilizasyon metodolojisinin eksikliği nedeniyle, soğutma mobilizasyonu ve erişilebilirliği konusundaki iyileştirmemiz, araştırmacılar için yüksek verim ve daha yüksek çözünürlüklü görüntüleme sağlar. Tek tek hayvanların emek yoğun montajı ve anestezi ile karşılaştırıldığında, soğutma yaklaşımımız büyük C.elegans popülasyonlarını geri dönüşümlü olarak hareketsiz hale getirerek işlem süresinin% 98'ini ortadan kaldırabilir.

Kimyasal anesteziklerin eksikliği ayrıca hayvanlara ve araştırmacılara zararlı maruziyeti en aza indirir. Bir soğutma aşaması, doğrudan yetiştirme plakaları üzerinde yüksek verim ve yüksek çözünürlüklü görüntüleme sağlar. Bu tasarımın basitliği, diğer araştırmacıların kendi cihazlarını kolayca inşa etmelerini ve bunları mevcut kurulumlarına entegre etmelerini, biyolojik çalışmalarının kapsamını ve hızını değiştirmelerini sağlar.

Laboratuvarımız soğutma aşamasını çeşitli mikroskop konfigürasyonları için uyarlayacaktır. Farklı tasarımlar, ters çevrilmiş mikroskoplar, bileşik dik mikroskoplar ve farklı görüntüleme platformları ile çalışacaktır.