Akış Sitometrisi Kullanarak Hücre Dışı Veziküllere miRNA Salınımının İzlenmesi

Laboratuvarım mikroRNA'ları incelemek için çalışıyor ve onlarca yıldır mikroRNA'ların kanserde tükendiğini biliyoruz. Bununla birlikte, bu mikroRNA'ların nasıl kaybolduğuna dair mekanizma aktif olarak anlaşılamamıştır. Hücre dışı veziküller üzerine yaptığımız son çalışma, kanserde tükenen mikroRNA'nın bu hücre dışı veziküllere aktif olarak yüklendiğini göstermektedir.

Şimdi amacımız, bu RNA'ların tümör oluşumu sürecinde bu hücre dışı veziküllere aktif olarak nasıl yüklendiğine dair mekanizmaya gerçekten ulaşmaktır. Protokol, hücre dışı vezikül biyolojisi çalışmasındaki zorlu alanlardan biri olan mikroRNA'ların hücre dışı veziküllere salınmasının dinamik sürecini anlamaya ve yakalamaya yardımcı olur. Bulgularımız, kanserde mikroRNA'ların tükenmesini düzenleyen yolların çalışmasını ilerletmek için bir araç sağlar.

Kanserde hücre dışı veziküller yoluyla mikroRNA'nın spesifik alt kümelerinin kaybının fonksiyonel ve fenotipik sonuçlarını belirlemeyi planlıyoruz. Bu mikroRNA'ların hücre dışı veziküllere yüklenmesinde rol oynayan faktörleri belirledikten sonra, amacımız bu faktörleri aşağı regüle etmek ve fenotipik sonucu değerlendirmektir. Dahası, bu küçük RNA'larda bulunan bir motif tanımladığımız için, bu motifin bu RNA'ları hücre dışı veziküllere yüklemek için hem gerekli hem de yeterli olup olmadığını merak ediyoruz.