Gelişmiş tek hücreli tümör içgörüleri elde etmek için tümör dokusunun hızlı ayrışması

Tümör sindirimine başlamak için, numuneyi buz üzerine yerleştirilmiş 60 milimetrelik bir doku kültürü kabına dökün. Tabaktan 420 mikrolitre ortamı 1,5 mililitrelik bir mikrosantrifüj tüpüne pipetleyin. Cımbız kullanarak, örnek dokuyu ortam içeren tüpe aktarın.

Numuneyi temiz bir makasla iki ila üç milimetre çapında parçalar halinde kesin. Numuneye uygun hacimlerde sindirim enzimleri ve ortamı ekleyin. Tüpü beş saniye boyunca vorteksleyin ve yan tarafına dikey olarak yerleştirilmiş bir termal karıştırıcıda inkübe edin.

Yeni bir 15 mililitrelik konik tüpün üzerine 50 mikrometrelik bir hücre filtresi yerleştirin. Ve filtreyi bir mililitre taze RPMI ortamıyla doldurun. 1.000 mikrolitrelik düşük gerilimli geniş pipet ucu kullanarak numuneyi filtreye yükleyin ve ortamı ekleyin.

Ardından, bir şırınga pistonunun arkasıyla, numuneyi bir bükülme hareketiyle filtre üzerinde öğütün ve itin. Filtreyi beş mililitre ortamla ve numuneyi içeren tabaktan kalan ortamla yıkayın.