Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIDCD, P30-DC010754, T32-DC009401) tarafından desteklenir.

1. Pre / Post-öğretim kayıtları <ol><li> Şekil 2&#39;de gösterildiği gibi yapılandırma kullanarak Avisoft Recorder ile ultrasonik izleme başlayın. </li><li> Ultrasonik seslenmelere görsel ya da gerçek zamanlı spektrogram izleyerek izlenir, ya da ultrason kayıt arabirimi kulak kulaklık takılı olabilir. </li><li> Konu erkek sıçan evde kafes içine bir cinsel alıcı (östrus) dişi sıçan yerleştirin. Östrus belirtileri lordoz, kıpır kıpır kulak, ve hızlı darting. Östrüs kadınlarda cinsel olmayan alıcı kadın oranla erkeklerde daha fazla seslenmelere ortaya çıkarmak. </li><li> Erkek kadın (örneğin, koklama, kovalayan, ve / veya montaj) ilgi gösterildiği sonra, kadın kaldırmak ve 1-2 dakika erkek seslenmelere kayıt. </li><li> Erkek hemen sesleri değilse, kısaca seslendirme uyarmak için erkek evine kafesine dişi sıçan dönmek. </li></ol> 2. Ses Eğitimi <ol><li> Şekil 2&#39;de gösterildiği gibi aynı yapılandırma kullanarak Avisoft Recorder ile ultrasonik izleme başlayın. </li><li> Mikrofon altında evine kafes erkek sıçan yerleştirin. </li><li> Dişi sıçan erkek evde kafes içine koyun. Daha önce de belirtildiği gibi, dişi sıçan erkek seslendirme yanıtı en üst düzeye çıkarmak için östrus olmalıdır. </li><li> Bir kere kadın erkek kaldırmak kadın ilgi gösterdi. </li><li> Erkek hedef seslendirme üretir hemen sonra, aynı anda bir kalem su şişesi veya gıda tedavi tıklayın ve kısa bir sunum ile ödüllendirir. Başlangıçta, herhangi bir 50 kHz frekans modülasyonlu (Şekil 5B) çağrısı ödüllendirilir. Peş peşe 5 ila 10 çağrıları dizileri gibi aramaların sadece giderek daha karmaşık dizeleri, eğitim ilerledikçe takviye edilmiştir. </li><li> 30 takviye verilen eğitim toplantısına kadar devam edin. Bu genellikle 5 - 10 dakika arasında sürer. </li></ol> 3. Akustik Analizi için hazırlık <ol><li> Daima orijinal ses dosyaları arşiv ve analiz yapmak her dosyadan ses filtreleme ve silme ihtiyaç olarak, düzenlemeler ve bir çalışma kopyası ölçümleri. </li><li> Avisoft SASLab Pro toplu modu kullanarak, yüksek geçiren, ultrasonik seslenmelere altında istenmeyen gürültü kaldırmak için 25 kHz analiz edilecek tüm ses dosyalarını filtre. </li><li> SASLab Pro otomatik algılama özelliği kullanmak için, gürültü eşik ilk tespit edilmelidir. Bunu yapmak için, bir ses dosyasını açın ve Şekil 3&#39;te gösterildiği gibi ayarları kullanarak bir spektrogram oluşturmak. </li><li> Otomatik Parametre Ölçümleri ekran Şekil 4&#39;te gösterilen ayarlara göre kurulum olmalıdır. </li><li> Herhangi bir çağrı veya sesler vardır spektrogram bir alan bulun; bu arka plan gürültü. </li><li> &quot;Otomatik olarak (tek eşik)&quot; seçeneğini kullanarak, Otomatik Parametre Ölçümleri kurulum iletişim kutusunda, sadece siyah bir çizgi spektrogram üzerinde güç spektrumu penceresinde ayarlayarak arka plan gürültü üzerine Element ayırma bölümünde eşik ayarlayabilirsiniz. Şekil 4&#39;te, eşik değeri -55 dB kurulmuştur. </li><li> Iletişim kutusunun alt kısmında, 1 dB önceki adımda bulunan eşik değerinin altında &quot;tepe genlik değeri küçükse Reddet&quot; olarak ayarlayın. Bu iki değer, artık tüm kayıt ayarları aynıydı varsayarak analiz tüm ses dosyaları için kullanılmalıdır. </li></ol> 4. Seslendirme Kimlik <ol><li> Yukarıda belirtilen otomatik eşik kullanarak seslenmelere etiketlemek için, ilk Yukarıdaki ayarlardan bir spektrogram oluşturun. </li><li> Aşağıdaki kriterlere uygun herhangi bir gürültü elle silmek: 1) yanlış bir seslendirme, 2) olarak tespit edilmiştir başında ve / veya seslendirme sonuna ayrımcılık etkileyen ve / veya 3) yanlış, en yüksek olarak tespit edilmiştir seslendirme en düşük frekans (sırasıyla, alt ve üst kırmızı çizgiler ile gösterilir). Alternatif olarak, aşağıdaki 4.5 adımda kalıcı etiketler oluşturduktan sonra seslendirme etiket start / stop kez manuel olarak ayarlanabilir. Gürültü, yüksek ve düşük frekans ölçümleri etkileyen ancak elle silinebilir gerekir. </li><li> Bazı durumlarda bir seslendirme lokomosyon sırasında yataklar sesi olarak gürültüleri, ayrılması mümkün olmayacaktır. Bu gibi durumlarda, aramanın doğru bir şekilde analiz edilmesi ve silinmelidir. </li><li> Tüm seslenmelere tespit edilmiştir kalıcı ses dosyasını seçerek spektrogram silinmiş bölümleri siler &quot;dalga şekli silinir spektrogram bölümleri çıkarın ...&quot; Araçlar aşağı açılan menüden. Spektrogram kapatılmadan önce bu komut uygulanmaması durumunda, tüm silme işi kaybolur. </li><li> Parametre Ölçümleri Otomatik kurulum penceresinin Eleman Ayırma bölümünde &#39;düzenle&#39; düğmesine tıklayarak ses dosyası kalıcı etiketler oluşturun. </li><li> Modüle basit, frekans (FM), veya harmonik: Görsel ve işitsel olarak etiketlenmiş seslendirme kategori belirlemek için her gözden. GötIGN, önceden tanımlanmış bir metin modülleri kullanarak uygun etiket. Her seslendirme kategorinin örnekleri Şekil 5&#39;te gösterilmiştir. </li><li> Spektrogram kapatın, ses dosyasını kaydetmek ve analiz edilmesi gereken bir sonraki ses dosyası ile devam ediyor. </li></ol> 5. Akustik Ölçümler <ol><li> Tüm dosyaların otomatik olarak akustik parametreleri ölçmek için tüm ses dosyaları seslenmelere tespit edildikten sonra, (Toplu İşleme Araçları) toplu iş işleme aracı kullanabilirsiniz. </li><li> Toplu işleme iletişim kutusunda, açılan menüden &quot;Otomatik Parametre Ölçümleri&quot; seçeneğini seçin. </li><li> &quot;Süreci seçilen klasördeki tüm dosyaları&quot; onay kutusunu seçin, daha sonra &quot;Klasör&quot; düğmesini tıklayın ve ses dosyalarının kaydedileceği klasörü seçin. </li><li> &quot;Başlat&quot; ve her dosyanın en son Otomatik Parametre Ölçüm kurulum diyalog kutusu kullanılan ayarlara göre otomatik olarak analiz edilecektir. </li><li> Ölçümler, DDE Parametreler / Günlük Dosyası Ayarı komutunu kullanarak tanımlanabilir bir metin dosyasına kaydedilir. Bu metin dosyası, daha sonra istatistiksel analiz için bir program içine alınabilir. </li></ol> 6. Temsilcisi Sonuçlar: Sıçan Ultrasonik seslenmelere yaşlanma ve 6-OHDA Parkinson hastalığı modelleri ile ilişkili fizyolojik değişiklikler etkilenen 13 Genellikle, aşağıdaki kantitatif akustik parametreler bir azalma ile karakterize ultrasonik seslenmelere kalitesinde bir azalma görüyoruz: bant genişliği, pik frekans, süre ve yoğunluğu. Başlangıçta, PD indüksiyon, sonra ve seslendirme eğitimden sonra: Şekil 6 PD model bir sıçan üç farklı zaman noktalarında frekans modüle seslenmelere gösterir. PD durum, arama, bant genişliği, süresi ve yoğunluğu azalma göstermektedir. Ayrıca, frekans modülasyonu düzensiz hale gelmiştir. Özel akustik parametrelerinin bozulmasına ek olarak, biz de, yaşlı ve parkinsonizm sıçanlarda üretilen seslenmelere türleri daha genel anlamda gözlemliyoruz. Örneğin, PD indüksiyon sonrası bir sıçan basit aramalar ve daha az frekans modüle çağrıları daha büyük bir sayı üretir. Ardından seslendirme eğitimi, süresi ve yoğunluğu, yaklaşım başlangıç ​​düzeyleri ve karmaşık aramaları artar (Şekil 6) gibi pek çok akustik parametreler. Yaşlı sıçanlarda ultrasonik seslenmelere akustik parametreleri benzer bozulma tezahür eder. Şu anda yaşlı sıçanlarda vokal eğitimi etkilerini araştırıyorlar. <img src="/files/ftp_upload/2835/2835fig1.jpg" alt="Şekil 1"/> Şekil 1. seans başına sesler çıkarma (Hedef her hafta tüm sıçanlar tarafından karşılanması) ve seslendirme oranı (ortalama ve standart hata gösterildiği gibi) hem genç (9 ay) ve eski bir grup, 6 haftalık bir eğitim süre içinde iki artış (32 sayısı ay) Fischer 344/Brown Norveç F1 sıçanlarda. <img src="/files/ftp_upload/2835/2835fig2.jpg" alt="Şekil 2"/> Şekil 2, her üç kategoride 50 kHz seslenmelere Temsilcisi seslenmelere; (A) basit, (B) frekans modülasyonlu ve (C) harmonik . <img src="/files/ftp_upload/2835/2835fig3.jpg" alt="Şekil 3"/> Şekil 3, tek bir (A) başlangıçta sıçan, (B) post-PD indüksiyon, ve (C) sonra seslendirme eğitimi Temsilcisi frekans modülasyonlu seslenmelere .

<ol>
	<li>Fox, C. M., Morrison, C. E., Ramig, L. O., Sapir, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+perspectives+on+the+Lee+Silverman+Voice+Treatment+(LSVT)+for+individuals+with+idiopathic+Parkinson+disease.">Current perspectives on the Lee Silverman Voice Treatment (LSVT) for individuals with idiopathic Parkinson disease.</a> Am J Speech Lang Pathol. 11, 111-123 (2002).</li><li>Roy, N., Stemple, J., Merrill, R. M., Thomas, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+voice+disorders+in+the+elderly:+preliminary+findings.">Epidemiology of voice disorders in the elderly: preliminary findings.</a> Laryngoscope. 117, 628-633 (2007).</li><li>Ramig, L. O., Sapir, S., Fox, C., Countryman, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+vocal+loudness+following+intensive+voice+treatment+(LSVT)+in+individuals+with+Parkinson's+disease:+a+comparison+with+untreated+patients+and+normal+age-matched+controls.">Changes in vocal loudness following intensive voice treatment (LSVT) in individuals with Parkinson's disease: a comparison with untreated patients and normal age-matched controls.</a> Mov. Disord. 16, 79-83 (2001).</li><li>Sapir, S., Ramig, L. O., Fox, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Lee+Silverman+Voice+Treatment®+for+voice,+speech+and+other+orofacial+disorders+in+patients+with+Parkinson's+disease.">The Lee Silverman Voice Treatment® for voice, speech and other orofacial disorders in patients with Parkinson's disease.</a> Future Neurology. 1, 563-570 (2006).</li><li>Panksepp, J., Burgdorf, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=50-kHz+chirping+(laughter?)+in+response+to+conditioned+and+unconditioned+tickle-induced+reward+in+rats:+effects+of+social+housing+and+genetic+variables.">50-kHz chirping (laughter?) in response to conditioned and unconditioned tickle-induced reward in rats: effects of social housing and genetic variables.</a> Behav. Brain Res. 115, 25-38 (2000).</li><li>Scattoni, M. L., Gandhy, S. U., Ricceri, L., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unusual+repertoire+of+vocalizations+in+the+BTBR+T+tf/J+mouse+model+of+autism.">Unusual repertoire of vocalizations in the BTBR T+tf/J mouse model of autism.</a> PLoS One. 3, e3067-e3067 (2008).</li><li>Wohr, M., Houx, B., Schwarting, R. K., Spruijt, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+experience+and+context+on+50-kHz+vocalizations+in+rats.">Effects of experience and context on 50-kHz vocalizations in rats.</a> Physiol. Behav. 93, 766-776 (2008).</li><li>Lahvis, G. P., Alleva, E., Scattoni, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translating+mouse+vocalizations:+prosody+and+frequency+modulation.">Translating mouse vocalizations: prosody and frequency modulation.</a> Genes Brain Behav. 10, 4-16 (2011).</li><li>Brudzynski, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Communication+of+adult+rats+by+ultrasonic+vocalization:+biological,+sociobiological,+and+neuroscience+approaches.">Communication of adult rats by ultrasonic vocalization: biological, sociobiological, and neuroscience approaches.</a> ILAR J. 50, 43-50 (2009).</li><li>Johnson, A. M., Ciucci, M. R., Russell, J. A., Hammer, M. J., Connor, N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasonic+output+from+the+excised+rat+larynx.">Ultrasonic output from the excised rat larynx.</a> J. Acoust. Soc. Am. 128, EL75-EL79 (2010).</li><li>Fulceri, F., Biagioni, F., Lenzi, P., Falleni, A., Gesi, M., Ruggieri, S., Fornai, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nigrostriatal+damage+with+6-OHDA:+validation+of+routinely+applied+procedures.">Nigrostriatal damage with 6-OHDA: validation of routinely applied procedures.</a> Ann N Y Acad Sci. 1074, 344-348 (2006).</li><li>Ciucci, M. R., Vinney, L., Wahoske, E. J., Connor, N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+translational+approach+to+vocalization+deficits+and+neural+recovery+after+behavioral+treatment+in+Parkinson+disease.">A translational approach to vocalization deficits and neural recovery after behavioral treatment in Parkinson disease.</a> J. Commun. Disord. 43, 319-326 (2010).</li><li>Ciucci, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduction+of+dopamine+synaptic+activity:+degradation+of+50-kHz+ultrasonic+vocalization+in+rats.">Reduction of dopamine synaptic activity: degradation of 50-kHz ultrasonic vocalization in rats.</a> Behav. Neurosci. 123, 328-336 (2009).</li><li>Wright, J. M., Gourdon, J. C., Clarke, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+multiple+call+categories+within+the+rich+repertoire+of+adult+rat+50-kHz+ultrasonic+vocalizations:+effects+of+amphetamine+and+social+context.">Identification of multiple call categories within the rich repertoire of adult rat 50-kHz ultrasonic vocalizations: effects of amphetamine and social context.</a> Psychopharmacology (Berl). 211, 1-13 (2010).</li><li>Burgdorf, J., Kroes, R. A., Beinfeld, M. C., Panksepp, J., Moskal, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uncovering+the+molecular+basis+of+positive+affect+using+rough-and-tumble+play+in+rats:+a+role+for+insulin-like+growth+factor+I.">Uncovering the molecular basis of positive affect using rough-and-tumble play in rats: a role for insulin-like growth factor I.</a> Neuroscience. 168, 769-777 (2010).</li><li>W&#246;hr, M., Schwarting, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasonic+communication+in+rats:+effects+of+morphine+and+naloxone+on+vocal+and+behavioral+responses+to+playback+of+50-kHz+vocalizations.">Ultrasonic communication in rats: effects of morphine and naloxone on vocal and behavioral responses to playback of 50-kHz vocalizations.</a> Pharmacol Biochem Behav. 94, 285-295 (2009).</li></ol>

Hayvanlar üzerinde yapılan deneyler, Laboratuvar Hayvanları, laboratuvar hayvanlarının bakımı ve kullanımı kılavuzu, NIH ve hayvan refahı hareket İnsani Bakım ve Kullanım Halk Sağlığı Hizmetleri Politikası tarafından belirlenen kurallara ve yönetmeliklere uygun olarak yapıldı. Hayvan kullanımını protokolü, Wisconsin-Madison Tıp ve Halk Sağlığı Okulu Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu (IACUC) tarafından onaylandı.

Sıçanlarda Ultrasonik seslenmelere, Parkinson hastalığı gibi yaşlanma ve hastalık süreçleri, savunmasız görünür. Bu ultrasonik seslenmelere, hastalığı ve yaşlanmaya bağlı fizyolojik değişiklikler eşlik açıkları da dahil olmak üzere, vokal fonksiyon, bir davranış modeli sağlar. Buna ek olarak, ultrasonik seslenmelere akustik değişiklikleri kolaylıkla ölçülebilir ve rakamsal. Ayrıca, ultrasonik seslenmelere davranışsal müdahaleler yoluyla değiştirilebilir. Bu nedenle, sıçan ultrasonik seslenmelere yaşlanma, hastalık üzerindeki etkilerini incelemek için faydalı model ve terapötik müdahaleler hem davranış ve altta yatan nörobiyolojik mekanizmalar sağlar. Vokal eğitimi yöntemi olumlu bir takviye (bir su veya gıda tedavi ödül) ile ilişkili bir şartlı uyaran (tıklayın) kullanır. Ödül artan karmaşıklığı seslenmelere güçlendirmek için tıklayın kullanılır. Biz bu &quot;düz&quot; ve tek bir frekans (Şekil 5A) korumak karşı bir &quot;ses titremesi&quot; (frekans modülasyonlu) bileşen (Şekil 5B) içeren bu gibi karmaşık seslenmelere tanımlar. Bu frekans modüle bileşeni kolayca sinüzoidal bir görünüm ile tanımlanır. 50 kHz seslenmelere tamamen sinüzoidal (Şekil 5B) olsa da, kısmen bu frekans modüle bileşeni frekans yanı sıra büyük atlar ya da ya da kısa bir düz bileşeni oluşan daha karmaşık bir 50 kHz seslenmelere sıkça rastlanır. Bu daha karmaşık seslenmelere bileşenler arasında 10 ms&#39;den kısa molalar olabilir ama tek bir seslendirme olarak kabul edilir. Bu seslenmelere daha ayrıntılı bir alt sınıflandırma, 14, çevrimdışı mümkün olmasına rağmen, online subjektif sınıflandırma ihtiyacını azaltmak ve takviye değişkenliği azaltmak için karmaşık bir frekans modüle bileşen içeren tüm 50 kHz seslenmelere sınıflandırmak. Kendi laboratuvar veriler çalışmanın amacına uygun bir çalışma tasarımı göre sınıflandırılmış ve analiz nasıl seçmek önemlidir. Bu protokolü kullanarak göz önünde bulundurulması gereken birçok faktör vardır. Her şeyden önce, genetik homojenlik ve usul tutarlılık rağmen, sıçanlarda eğitim değişken bir tepki var. Bazı fareler doğal diğerleri, 5 daha fazla sesleri ya da bir gıda ya da su ödül yerine bir kadın daha fazla maruz kalma ile motive. Bu değişkenliği dikkate yolu bireysel sıçanlarda bazal seslenişlerden sonrası lezyon ve eğitim sonrası seslenmelere akustik parametreler değişiklik inceleyerek. Bu protokol tartışılan olmasa da, biz de monte etmek için gecikme gibi, kadın ilgi ölçmek için davranış testleri var. Ayrıca, bireysel bir sıçan yaş ve aktivite düzeyi bağlı olarak, bir tel üst, kaçmasını önlemek için eğitim sırasında evde kafes gerekli olabilir. Bireysel değişkenliği rağmen, çeşitli suşları ve yaşları göre seslenmelere, her bireyin sıçan temel geliştirmek için bu protokolü başarıyla kullanmıştır. Sıçanlar gibi kokular, sıcaklık ve personel olarak çevre görünüşte küçük değişiklikler için duyarlıdır. Bir çaba, losyonlar, saç ürünleri, ve parfüm gibi kokulu kişisel bakım ürünleri, önlemek için yapılmalıdır. Eğitim girişmeden önce, bir birey ile etkileşim ve sıçanlarda ele rahat olmalıdır. Ayrıca, personel ya da ortamda herhangi bir tutarsızlık farelerin seslendirme yanıt etkileyebilir. Sıçanlarda noktürnal olduğundan, en aktif, kendi döngüsü karanlık kısmı sırasında gerçekleştirilecek eğitim için izin verecek bir ters ışık döngüsü muhafaza edilmelidir. Biz eğitim odası kırmızı ışık ile aydınlatıyor. Ayrıca, eğitim sırasında kullanılan su ödülü ise sıçanlarda su kısıtlı erişime sahip olmalıdır. Sıçanlarda 21 saat önce eğitim oturumu sınırlı su. Üç saat suyla temas Kurumsal Hayvan Bakım tarafından belirlenir ve su, hayvan sağlığı ve iyi olmak için önemli bir uzlaşma sunmadan davranış çalışmalarında takviye olarak yararlı olabilmesi için en az kısıtlayıcı süre Komitesi kullanın. Sıçanlar rasgele zamanlarda eğitimden sonra (30 dakika 10 dakika) suya erişimi ve daha sonra kendi ışık döngüsü karanlık bir bölümü sırasında, üç saat süreyle su ücretsiz erişim var. Sıçanlar her gün dehidratasyon bulguları denetlenir ve anlamlı (% 10 daha fazla) kilo kaybı olmadığından emin olmak için her gün tartılır olmalıdır. Bir ödül olarak bir gıda tedavi kullanılıyorsa bir gıda kısıtlaması gerekli değildir. Sıçanlara davranır özel ticari olarak kullanılabilir, ancak etkili bir ödül şekerli tahıl küçük bir parça bulduk. Yukarıda da belirtildiği gibi, dişi sıçanlarda östrus olmayan cinsel alıcı kadın oranla erkeklerde daha yüksek bir seslendirme cevabı ortaya. Büyük bir koloni kadın sayısını koruyarak, yüksek bir olasılık var ki azen az bir kadın, herhangi bir gün östrus olacak. Ancak, östrüs farmakolojik subkutan 0.1 cc steril susam yağı eğitim 4 saat önce 500 mg progesteron takip eğitim için 0.1 cc steril susam yağı 48 saat önce β-östradiol 10 mikrogram enjekte dişi sıçanlarda indüklenen olabilir. Ayrıca, dişi sıçanlarda naif erkek sıçanlarda cinsel vokal eğitimi öncesinde deneyimli olmalıdır. Bu erkek bağlar ve cinsel ilişki kadar erkek ev kafese cinsel alıcılığı (darting, lordoz, kulak kıpır kıpır) belirtileri gösteren bir dişi fare koyarak yapılır. Erkekler ilk birkaç seans içinde monte olmayabilir ve kadın kadın erkek gösterileri ilgi koklama ve / veya kafes etrafında, kadın peşinde sonra kaldırılmış olabilir. Cinsel yaşıyor, iki hafta boyunca günde bir kez yapılır. Bu süre de, sıçanlar için deneyci (ler) ve kayıt odası alışmakta bir fırsat sağlar. Bu yöntemin bir sınırlama seslendirme türü öznel belirlenmesi. Her çağrı bağımsız olarak incelenmiş ve manuel olarak sınıflandırılır olmalıdır Buna ek olarak, bu faktör, veri toplama hızını sınırlar. Bu, tutarlı bir seslendirme kimlik eğitim almış deneyimli puanlayıcı sahip önemi. Her ikisi de, içi ve hakemlerarası güvenilirlik kendi laboratuvar içinde değerlendirilmesi gerekir. Özetle, kemirgenler ultrasonik seslenmelere duygusal durumlar, ödül ve bağımlılık ve hastalık durumlarında, bu tür otizm gibi beyin-davranış ilişkileri de dahil olmak üzere, çalışma pek çok farklı model kullanılmaktadır. 6,14-16 Bu yeni yöntem, çalışmak için bir yoldur vokal eğitimi, yaşlanma ve Parkinson Hastalığı ses açıklarının tedavi için hedef altında yatan mekanizmalar. Bu yöntem, haberleşme ve ses etkileyen diğer hastalık modellerinde uygulanmak üzere bir potansiyele sahiptir.

<table border="1"><tbody><tr><th> Isim </th><th> Şirket </th><th> Katalog numarası </th></tr><tr><td> Kondenser ultrason mikrofon CM16/CMPA </td><td> Avisoft Bioacoustics </td><td> 40011 </td></tr><tr><td> UltraSoundGate 116Hb </td><td> Avisoft Bioacoustics </td><td> 41161 </td></tr><tr><td> Avisoft-Kaydedici </td><td> Avisoft Bioacoustics </td><td> 10201 </td></tr><tr><td> Avisoft-SASLab Pro </td><td> Avisoft Bioacoustics </td><td> 10101 </td></tr></tbody></table>

targeted training of ultrasonic vocalizations in aged and parkinsonian rats

Ses açıkları Parkinson hastalığı (PH) ve yaşlanma hem de ortak bir komplikasyon; iletişim yeteneklerini etkileyen, yaşam kalitesini önemli ölçüde azaltabilir rağmen 1, 2 Hedeflenen eğitim (konuşma / ses terapisi) özel ses açıkları, 3, 4 artırabilir . davranışsal müdahaleler altında yatan mekanizmalar tam olarak anlaşılmış değildir. Sesli açıkları ve tedavinin sistematik bir araştırma, yaş, ev ortamında, yaş hastalığı sonrası başlangıçlı, hastalığın şiddeti, ve ilaçlar gibi insanlar, kontrolü zor olan birçok faktör göz önünde bulundurmalısınız. Bu yöntem, burada sunulan hedeflenen ses eğitimi ile sensorimotor mekanizmaları değişimin altında yatan nasıl sistematik bir çalışma sağlar seslendirme bir hayvan modeli kullanır. Bu protokolde belirtilen ultrasonik kayıt ve analiz prosedürleri kemirgen ultrasonik seslenmelere herhangi bir soruşturma için geçerli. Kemirgenler ultrasonik seslenmelere davranış nöral substratlar araştırmak için değerli bir model olarak ortaya çıkmaktadır. 5-8 kemirgen ve insan seslenmelere göstergebilimsel değeri taşıyan ve larinks bir daralma ile egressive hava akımını değiştirerek üretilmektedir. 9, 10 Böylece, kemirgen seslenmelere sensorimotor bağlamında ses açıkları incelemek için yararlı bir model olabilir. Ayrıca, sıçan modelleri bize hedefli eğitim açıklarının iyileşme nörobiyolojik temellerinin çalışma izin verir. Modeli PD için Long-Evans ratları (Charles River Laboratuvarları International, Inc) ve 6-hydroxydopamine (6-OHDA) 7 mg tek taraflı bir infüzyon orta presinaptik ciddi dejenerasyona neden olan medial ön beyin demeti içine Parkinsonizm neden striatal nöron (detaylar için Ciucci, 2010) 11, 12 bizim yaşlanma modeli için Fischer 344/Brown Norveç F1 (Ulusal Yaşlanma Enstitüsü) kullanın. Eliciting seslenmelere için birincil yöntem cinsel deneyimli erkek sıçanlarda cinsel alıcı dişi sıçanlarda ortaya çıkarmak için. Erkek, kadın ilgilenen hale geldiğinde, kadın kaldırılır ve erkek sesleri devam ediyor. Yiyecek ya da su, karmaşık seslenmelere sayısı iki ve seslenmelere oranı ile ödüllendirme karmaşık seslenmelere artmış olabilir (Şekil 1). Erkek ev kafes üzerine monte ultrasonik mikrofon seslenmelere kaydeder. Kaldırıldıktan sonra, sıçan kadın erkek aramaları izole etmek için kayıt başlar. Seslenmelere eğitim ya da kaydedildi ve çevrimdışı analiz için gerçek zamanlı olarak görülebilir. Seslenmelere vokal eğitimi öncesi ve sonrasında kayıt ve akustik analiz, hastalık ve eğitim ile normal işlev restorasyon etkileri değerlendirilebilir. Bu model aynı zamanda beyin ve nöromüsküler sistem değişiklikleri bize gözlenen davranış (vokal) geliştirmeleri ilişki sağlar.

Watch this Scientific Journal Video about Targeted Training of Ultrasonic Vocalizations in Aged and Parkinsonian Rats at JoVE.com

Targeted Training of Ultrasonic Vocalizations in Aged and Parkinsonian Rats

Ses bozuklukları, yaşlanma ve Parkinson hastalığı zayıflatıcı. Ayrıca bu koşulları etkilenen sıçan ultrasonik seslenmelere, bu ses bozuklukları, nöral substratlar ve davranışsal müdahale ile fonksiyonel iyileşme doğasını incelemek için kullanılabilir.

Yaşlı ve Parkinson Sıçanlar Ultrasonik seslenmelere Hedefe Yönelik Eğitim

Voice deficits are a common complication of both Parkinson disease (PD) and aging; they can significantly diminish quality of life by impacting ...

targeted-training-ultrasonic-vocalizations-aged-parkinsonian

Research

JoVE Journal

Neuroscience

19.7K Görüntüleme.  University of Wisconsin. Ses bozuklukları, yaşlanma ve Parkinson hastalığı zayıflatıcı. Ayrıca bu koşulları etkilenen sıçan ultrasonik seslenmelere, bu ses bozuklukları, nöral substratlar ve davranışsal müdahale ile fonksiyonel iyileşme doğasını incelemek için kullanılabilir.

Video: Targeted Training of Ultrasonic Vocalizations in Aged and Parkinsonian Rats

Assessment of Ultrasonic Vocalizations During Drug Self-administration in Rats

Drug self-administration procedures are commonly used to study behavioral and neurochemical changes associated with human drug abuse, addiction and relapse. Various types of behavioral activity are commonly utilized as measures of drug motivation in animals. However, a crucial component of drug abuse relapse in abstinent cocaine users is "drug craving", which is difficult to model in animals, as it often occurs in the absence of overt behaviors. Yet, it is possible that a class of ultrasonic vocalizations (USVs) in rats may be a useful marker for affective responses to drug administration, drug anticipation and even drug craving. Rats vocalize in ultrasonic frequencies that serve as a communicatory function and express subjective emotional states. Several studies have shown that different call frequency ranges are associated with negative and positive emotional states. For instance, high frequency calls ("50-kHz") are associated with positive affect, whereas low frequency calls ("22-kHz") represent a negative emotional state. This article describes a procedure to assess rat USVs associated with daily cocaine self-administration. For this procedure, we utilized standard single-lever operant chambers housed within sound-attenuating boxes for cocaine self-administration sessions and utilized ultrasonic microphones, multi-channel recording hardware and specialized software programs to detect and analyze USVs. USVs measurements reflect emotionality of rats before, during and after drug availability and can be correlated with commonly assessed drug self-administration behavioral data such lever responses, inter-response intervals and locomotor activity. Since USVs can be assessed during intervals prior to drug availability (e.g., anticipatory USVs) and during drug extinction trials, changes in affect associated with drug anticipation and drug abstinence can also be determined. In addition, determining USV changes over the course of short- and long-term drug exposure can provide a more detailed interpretation of drug exposure effects on affective functioning.

Drug self-administration and ultrasonic vocalizations (USV) are used as behavioral assessments in animal research, but rarely in combination. The purpose of this article is to describe the advantages of recording USVs during drug self-administration procedures to assess affective responses to drug experience.

Sıçanlar İlaç Öz-yönetim sırasında Ultrasonik seslenmelere Değerlendirilmesi

Drug self-administration procedures are commonly used to study behavioral and neurochemical changes associated with human drug abuse, addiction and ...

Nörobilim

Kinematics and Ground Reaction Force Determination: A Demonstration Quantifying Locomotor Abilities of Young Adult, Middle-aged, and Geriatric Rats

Behavior, in its broadest definition, can be defined as the motor manifestation of physiologic processes. As such, all behaviors manifest through the motor system. In the fields of neuroscience and orthopedics, locomotion is a commonly evaluated behavior for a variety of disease models. For example, locomotor recovery after traumatic injury to the nervous system is one of the most commonly evaluated behaviors 1-3. Though locomotion can be evaluated using a variety of endpoint measurements (e.g. time taken to complete a locomotor task, etc), semiquantitative kinematic measures (e.g. ordinal rating scales (e.g. Basso Beattie and Bresnahan locomotor (BBB) rating scale, etc)) and surrogate measures of behaviour (e.g. muscle force, nerve conduction velocity, etc), only kinetics (force measurements) and kinematics (measurements of body segments in space) provide a detailed description of the strategy by which an animal is able to locomote 1. Though not new, kinematic and kinetic measurements of locomoting rodents is now more readily accessible due to the availability of commercially available equipment designed for this purpose. Importantly, however, experimenters need to be very familiar with theory of biomechanical analyses and understand the benefits and limitations of these forms of analyses prior to embarking on what will become a relatively labor-intensive study. The present paper aims to describe a method for collecting kinematic and ground reaction force data using commercially available equipment. Details of equipment and apparatus set-up, pre-training of animals, inclusion and exclusion criteria of acceptable runs, and methods for collecting the data are described. We illustrate the utility of this behavioral analysis technique by describing the kinematics and kinetics of strain-matched young adult, middle-aged, and geriatric rats.

Locomotion is often examined as a behavioural outcome in various models of disease in fields such as neuroscience and orthopedics. This video paper intends to describe a method for collecting ground reaction forces and kinematics from rats during unrestrained locomotion.

Kinematik ve Zemin Mukabele Gücü&#39;nün Belirlenmesi: Genç Yetişkin, Orta yaşlı ve Geriatrik Sıçanlar, bir gösteri miktarının Lokomotor Yetenekler

Behavior, in its broadest definition, can be defined as the motor manifestation of physiologic processes.  As such, all behaviors manifest through the ...

A General Method for Evaluating Incubation of Sucrose Craving in Rats

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and relapse to food taking 1. Food craving conceptualized in this way is akin to drug craving in response to drug-paired cues. A rich literature has been developed around understanding the behavioral and neurobiological determinants of drug craving; we and others have been focusing recently on translating techniques from basic addiction research to better understand addiction-like behaviors related to food 2-4.
As done in previous studies of drug craving, we examine sucrose craving behavior by utilizing a rat model of relapse. In this model, rats self-administer either drug or food in sessions over several days. In a session, lever responding delivers the reward along with a tone+light stimulus. Craving behavior is then operationally defined as responding in a subsequent session where the reward is not available. Rats will reliably respond for the tone+light stimulus, likely due to its acquired conditioned reinforcing properties 5. This behavior is sometimes referred to as sucrose seeking or cue reactivity. In the present discussion we will use the term "sucrose craving" to subsume both of these constructs.
In the past decade, we have focused on how the length of time following reward self-administration influences reward craving. Interestingly, rats increase responding for the reward-paired cue over the course of several weeks of a period of forced-abstinence. This "incubation of craving" is observed in rats that have self-administered either food or drugs of abuse 4,6. This time-dependent increase in craving we have identified in the animal model may have great potential relevance to human drug and food addiction behaviors.
Here we present a protocol for assessing incubation of sucrose craving in rats. Variants of the procedure will be indicated where craving is assessed as responding for a discrete sucrose-paired cue following extinction of lever pressing within the sucrose self-administration context (Extinction without cues) or as responding for sucrose-paired cues in a general extinction context (Extinction with cues).

Responding for food or drug-paired cues increases over the course of a period of abstinence and this may relate to an increased susceptibility to relapse behaviors. Here we detail a procedure for evaluating this "incubation of craving" in rats that have self-administered sucrose.

Sıçanlarda Sakkaroz Craving Kuluçka değerlendirilmesi için Genel Bir Yöntem

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and ...

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

The overall goal of this method is to record single-unit responses from an identified population of neurons. In vivo electrophysiological recordings from individual neurons are critical for understanding how neural circuits function under natural conditions. Traditionally, these recordings have been performed 'blind', meaning the identity of the recorded cell is unknown at the start of the recording. Cellular identity can be subsequently determined via intracellular1, juxtacellular2 or loose-patch3 iontophoresis of dye, but these recordings cannot be pre-targeted to specific neurons in regions with functionally heterogeneous cell types. Fluorescent proteins can be expressed in a cell-type specific manner permitting visually-guided single-cell electrophysiology4-6. However, there are many model systems for which these genetic tools are not available. Even in genetically accessible model systems, the desired promoter may be unknown or genetically homogenous neurons may have varying projection patterns. Similarly, viral vectors have been used to label specific subgroups of projection neurons7, but use of this method is limited by toxicity and lack of trans-synaptic specificity. Thus, additional techniques that offer specific pre-visualization to record from identified single neurons in vivo are needed. Pre-visualization of the target neuron is particularly useful for challenging recording conditions, for which classical single-cell recordings are often prohibitively difficult8-11. The novel technique described in this paper uses retrograde transport of a fluorescent dye applied using tungsten needles to rapidly and selectively label a specific subset of cells within a particular brain region based on their unique axonal projections, thereby providing a visual cue to obtain targeted electrophysiological recordings from identified neurons in an intact circuit within a vertebrate CNS.
The most significant novel advancement of our method is the use of fluorescent labeling to target specific cell types in a non-genetically accessible model system. Weakly electric fish are an excellent model system for studying neural circuits in awake, behaving animals12. We utilized this technique to study sensory processing by "small cells" in the anterior exterolateral nucleus (ELa) of weakly electric mormyrid fish. "Small cells" are hypothesized to be time comparator neurons important for detecting submillisecond differences in the arrival times of presynaptic spikes13. However, anatomical features such as dense myelin, engulfing synapses, and small cell bodies have made it extremely difficult to record from these cells using traditional methods11, 14. Here we demonstrate that our novel method selectively labels these cells in 28% of preparations, allowing for reliable, robust recordings and characterization of responses to electrosensory stimulation.

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

Retrograde transport of fluorescent dye labels a sub-population of neurons based on anatomical projection. Labeled axons can be visually targeted in vivo, permitting extracellular recording from identified axons. This technique facilitates recording when neurons cannot be labeled through genetic manipulation or are difficult to isolate using 'blind' in vivo approaches.

Retrograd Floresan Etiketleme Belirlenen Nöronlar gelen Hedefli Hücre dışı Tek ünitesi Kayıt izin verir<em&gt; In vivo</em

The overall goal of this method is to record single-unit responses from an identified population of neurons. In vivo electrophysiological recordings from ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains technically challenging. One approach, Activation-Induced Manganese-enhanced MRI (AIM MRI), has been used successfully to map neuronal activity in rodents 1-5. In AIM MRI, Mn2+ acts a calcium analog and accumulates in depolarized neurons 6,7. Because Mn2+ shortens the T1 tissue property, regions of elevated neuronal activity will enhance in MRI. Furthermore, Mn2+ clears slowly from the activated regions; therefore, stimulation can be performed outside the magnet prior to imaging, enabling greater experimental flexibility. However, because Mn2+ does not readily cross the blood-brain barrier (BBB), the need to open the BBB has limited the use of AIM MRI, especially in mice.
One tool for opening the BBB is ultrasound. Though potentially damaging, if ultrasound is administered in combination with gas-filled microbubbles (i.e., ultrasound contrast agents), the acoustic pressure required for BBB opening is considerably lower. This combination of ultrasound and microbubbles can be used to reliably open the BBB without causing tissue damage 8-11.
Here, a method is presented for performing AIM MRI by using microbubbles and ultrasound to open the BBB. After an intravenous injection of perflutren microbubbles, an unfocused pulsed ultrasound beam is applied to the shaved mouse head for 3 minutes. For simplicity, we refer to this technique of BBB Opening with Microbubbles and UltraSound as BOMUS 12. Using BOMUS to open the BBB throughout both cerebral hemispheres, manganese is administered to the whole mouse brain. After experimental stimulation of the lightly sedated mice, AIM MRI is used to map the neuronal response.
To demonstrate this approach, herein BOMUS and AIM MRI are used to map unilateral mechanical stimulation of the vibrissae in lightly sedated mice 13. Because BOMUS can open the BBB throughout both hemispheres, the unstimulated side of the brain is used to control for nonspecific background stimulation. The resultant 3D activation map agrees well with published representations of the vibrissae regions of the barrel field cortex 14. The ultrasonic opening of the BBB is fast, noninvasive, and reversible; and thus this approach is suitable for high-throughput and/or longitudinal studies in awake mice.

A technique is described for broadly opening the blood-brain barrier in the mouse using microbubbles and ultrasound. Using this technique, manganese can be administered to the mouse brain. Because manganese is an MRI contrast agent that accumulates in depolarized neurons, this approach enables imaging of neuronal activity.

Ultrasonik Kan-beyin bariyeri bozulması ve Manganez kontrastlı MRG kullanma İşlevsel beyin görüntüleme

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Fluorescence and Bioluminescence Imaging of Subcellular Ca2+ in Aged Hippocampal Neurons

Susceptibility to neuron cell death associated to neurodegeneration and ischemia are exceedingly increased in the aged brain but mechanisms responsible are badly known. Excitotoxicity, a process believed to contribute to neuron damage induced by both insults, is mediated by activation of glutamate receptors that promotes Ca2+ influx and mitochondrial Ca2+ overload. A substantial change in intracellular Ca2+ homeostasis or remodeling of intracellular Ca2+ homeostasis may favor neuron damage in old neurons. For investigating Ca2+ remodeling in aging we have used live cell imaging in long-term cultures of rat hippocampal neurons that resemble in some aspects aged neurons in vivo. For this end, hippocampal cells are, in first place, freshly dispersed from new born rat hippocampi and plated on poli-D-lysine coated, glass coverslips. Then cultures are kept in controlled media for several days or several weeks for investigating young and old neurons, respectively. Second, cultured neurons are loaded with fura2 and subjected to measurements of cytosolic Ca2+ concentration using digital fluorescence ratio imaging. Third, cultured neurons are transfected with plasmids expressing a tandem of low-affinity aequorin and GFP targeted to mitochondria. After 24 hr, aequorin inside cells is reconstituted with coelenterazine and neurons are subjected to bioluminescence imaging for monitoring of mitochondrial Ca2+ concentration. This three-step procedure allows the monitoring of cytosolic and mitochondrial Ca2+ responses to relevant stimuli as for example the glutamate receptor agonist NMDA and compare whether these and other responses are influenced by aging. This procedure may yield new insights as to how aging influence cytosolic and mitochondrial Ca2+ responses to selected stimuli as well as the testing of selected drugs aimed at preventing neuron cell death in age-related diseases.

Fluorescence and Bioluminescence Imaging of Subcellular Ca2+ in Aged Hippocampal Neurons

Intracellular Ca2+ remodeling in aging may contribute to excitotoxicity and neuron damage, processes mediated by Ca2+ overload. We aimed at investigating Ca2+ remodeling in the aging brain using fluorescence and bioluminescence imaging of cytosolic and mitochondrial Ca2+ in long-term cultures of rat hippocampal neurons, a model of neuronal aging.

Subselüler Ca Floresans ve Biyoparlaklık Görüntüleme<sup&gt; 2+</sup&gt; Yaşlı Hipokampal Nöronlar

Susceptibility to neuron cell death associated to neurodegeneration and ischemia are exceedingly increased in the aged brain but mechanisms responsible ...

Sequential Extraction of Soluble and Insoluble Alpha-Synuclein from Parkinsonian Brains

Alpha-synuclein (&#945;-syn) protein is abundantly expressed mainly within neurons, and exists in a number of different forms - monomers, tetramers, oligomers and fibrils. During disease, &#945;-syn undergoes conformational changes to form oligomers and high molecular weight aggregates that tend to make the protein more insoluble. Abnormally aggregated &#945;-syn is a neuropathological feature of Parkinson&#39;s disease (PD), dementia with Lewy bodies (DLB) and multiple system atrophy (MSA). Biochemical characterization and analysis of insoluble &#945;-syn using buffers with increasing detergent strength and high-speed ultracentrifugation provides a powerful tool to determine the development of &#945;-syn pathology associated with disease progression. This protocol describes the isolation of increasingly insoluble/aggregated &#945;-syn from post-mortem human brain tissue. This methodology can be adapted with modifications to studies of normal and abnormal &#945;-syn biology in transgenic animal models harbouring different &#945;-syn mutations as well as in other neurodegenerative diseases that feature aberrant fibrillar deposits of proteins related to their respective pathologies.

Here, we present a protocol for the isolation of increasingly insoluble/aggregated alpha-synuclein (&#945;-syn) from post-mortem human brain tissue. Through the utilization of buffers with increasing detergent strength and high-speed ultracentrifugation techniques, the variable properties of &#945;-syn aggregation in diseased and non-diseased tissue can be examined.

Parkinson Brains gelen Çözünür ve çözünmez alfa-sinüklein Sıralı Ekstraksiyon

Alpha-synuclein (&#945;-syn) protein is abundantly expressed mainly within neurons, and exists in a number of different forms - monomers, tetramers, ...

An Objective and Reproducible Test of Olfactory Learning and Discrimination in Mice

Olfaction is the predominant sensory modality in mice and influences many important behaviors, including foraging, predator detection, mating, and parenting. Importantly, mice can be trained to associate novel odors with specific behavioral responses to provide insight into olfactory circuit function. This protocol details the procedure for training mice on a Go/No-Go operant learning task. In this approach, mice are trained on hundreds of automated trials daily for 2&#8211;4 weeks and can then be tested on novel Go/No-Go odor pairs to assess olfactory discrimination, or be used for studies on how odor learning alters the structure or function of the olfactory circuit. Additionally, the mouse olfactory bulb (OB) features ongoing integration of adult-born neurons. Interestingly, olfactory learning increases both the survival and synaptic connections of these adult-born neurons. Therefore, this protocol can be combined with other biochemical, electrophysiological, and imaging techniques to study learning and activity-dependent factors that mediate neuronal survival and plasticity.

Here, we train mice on an associative learning task to test odor discrimination. This protocol also allows for studies on learning-induced structural changes in the brain.

Koku öğrenme ve ayrımcılık farelerde bir objektif ve tekrarlanabilir testi

Olfaction is the predominant sensory modality in mice and influences many important behaviors, including foraging, predator detection, mating, and ...

In Vivo Targeted Expression of Optogenetic Proteins Using Silk/AAV Films

The quest to understand how neural circuits process information in order to drive behavioral output has been greatly aided by recently-developed optical methods for manipulating and monitoring the activity of neurons in vivo. These types of experiments rely on two main components: 1) implantable devices that provide optical access to the brain, and 2) light-sensitive proteins that change neuronal excitability or provide a readout of neuronal activity. There are a number of ways to express light-sensitive proteins, but stereotaxic injection of viral vectors is currently the most flexible approach because expression can be controlled with genetic, anatomical, and temporal precision. Despite the great utility of viral vectors, delivering the virus to the site of optical implants poses numerous challenges. Stereotaxic virus injections are demanding surgeries that increase surgical time, increase the cost of studies, and pose a risk to the animal's health. The surrounding tissue can be physically damaged by the injection syringe, and by immunogenic inflammation caused by the abrupt delivery of a bolus of high-titer virus. Aligning injections with optical implants is especially difficult when targeting small regions deep in the brain. To overcome these challenges, we describe a method for coating multiple types of optical implants with films composed of silk fibroin and Adeno-associated viral (AAV) vectors. Fibroin, a polymer derived from the cocoon of Bombyx mori, can encapsulate and protect biomolecules and can be processed into forms ranging from soluble films to ceramics. When implanted into the brain, silk/AAV coatings release virus at the interface between optical elements and the surrounding brain, driving expression precisely where it is needed. This method is easily implemented and promises to greatly facilitate in vivo studies of neural circuit function.

In Vivo Targeted Expression of Optogenetic Proteins Using Silk/AAV Films

Here, we present a method for delivering viral expression vectors into the brain using silk fibroin films. This method allows targeted delivery of expression vectors using silk/AAV coated optical fibers, tapered optical fibers, and cranial windows.

Vivo Optogenetic proteinlerin ipek/AAV filmleri kullanarak hedeflenen ifade

The quest to understand how neural circuits process information in order to drive behavioral output has been greatly aided by recently-developed optical ...

Activity-based Training on a Treadmill with Spinal Cord Injured Wistar Rats

Spinal cord injury (SCI) results in lasting deficits that include both mobility and a multitude of autonomic-related dysfunctions. Locomotor training (LT) on a treadmill is widely used as a rehabilitation tool in the SCI population with many benefits and improvements to daily life. We utilize this method of activity-based task-specific training (ABT) in rodents after SCI to both elucidate the mechanisms behind such improvements and to enhance and improve upon existing clinical rehabilitation protocols. Our current goal is to determine the mechanisms underlying ABT-induced improvements in urinary, bowel, and sexual function in SCI rats after a moderate to severe level of contusion. After securing each individual animal in a custom-made adjustable vest, they are secured to a versatile body weight support mechanism, lowered to a modified three-lane treadmill and assisted in step-training for 58 minutes, once a day for 10 weeks. This setup allows for the training of both quadrupedal and forelimb-only animals, alongside two different non-trained groups. Quadrupedal-trained animals with body weight support are aided by a technician present to assist in stepping with proper hind limb placement as necessary, while forelimb-only trained animals are raised at the caudal end to ensure no hind limb contact with the treadmill and no weight-bearing. One non-trained SCI group of animals is placed in a harness and rests next to the treadmill, while the other control SCI group remains in its home cage in the training room nearby. This paradigm allows for the training of multiple SCI animals at once, thus making it more time-efficient in addition to ensuring that our pre-clinical animal model mimics the clinical representation as close as possible, particularly with respect to the body weight support with manual assistance.

This protocol demonstrates our model of activity-based locomotor treadmill training for rats with spinal cord injury (SCI). Included is both quadrupedal and forelimb-only groups, in addition to two distinct types of non-trained control groups. Investigators are able to assess training effects on SCI rats using this protocol.

Etkinlik tabanlı eğitim omurilik ile bir koşu bandı üzerinde Wistar fareler yaralı

Spinal cord injury (SCI) results in lasting deficits that include both mobility and a multitude of autonomic-related dysfunctions. Locomotor training (LT) ...

Yaşlı ve Parkinson Sıçanlar Ultrasonik seslenmelere Hedefe Yönelik Eğitim

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler