Yazarlar, CHAMACOS çalışmasına katılan ebeveynlere ve ergenlere teşekkür etmek istiyorlar. Ayrıca, bu çalışma için proje yöneticisi olarak yaptığı tüm çalışmalar için, özellikle Katherine Kogut, MS, araştırmaya katılan CHAMACOS çalışanlarına teşekkür etmek isteriz. Yazarlar ayrıca Ulusal Uyuşturucu İstismarı Enstitüsünün 1R01DA035300 sayılı tebliğini onaylamak istiyorlardı.

Bu çalışma, University of California, Berkeley ve California, San Francisco&#39;daki Kurumsal Değerlendirme Kurulu tarafından onaylanmıştır. Katılımcılar, laboratuara saat 4: 30-5: 00 arası gelmeleri planlandı. 1. Durulayın Ağız <ol><li> Katılımcıdan tuvalete gitmesini ve ağzını suyla yıkamasını isteyin. Katılımcıyı soğuk suyla 5-10 saniye dinlendirin ve lavaboda tükürüp çalkalayın. Bunu sadece bir kez yapın. </li><li> Katılımcıya, &quot;Bu, tükürük toplanması için dişlerinizde yiyecek ya da kırıntı olmamasını sağlamak için&quot; deyin . </li></ol> 2. Dinlenme Dönemi <ol><li> Katılımcı bir yalnız odaya yönlendirilir ve en az 10 dakika oturmasına izin verir. Katılımcı, iletişim bilgileri sayfası ve günlük yaşam formları gibi invaziv olmayan veya provakasyonsuz anketler hazırlayın ve deniz hayatının 3 dakikalık barışçı videosunu izleyin. </li></ol> 3. Salya toplama # 1 (PYeniden stres) <ol><li> 2 mL cryovial üzerine 1 mL tükürük belirtmek için bir çizgi yerleştirin ve katılımcıya bu satıra cryovial doldurmasını söyleyin. Katılımcının tükürüğünü pasif drool yoluyla 2 inçlik bir saman ile 2 mL cryovial 36&#39;ya toplayın ve derhal dondurun (-80 ° C). </li><li> Katılımcıya, &quot; Bu tüpü tükürük ile bu satıra kadar doldurmamızı rica edeceğim. Bunu yapmanın yolu, tükürüğün ağzınızda toplanmasına izin vererek saman yoluyla şişeye geçmesine izin vermektir. Tükürmeyin, çünkü örneğinizde kabarcıklar olur - sadece tükürük samanın üzerinden geçmesine izin verin. Bunu yaparken konuşmazsanız yardımcı olacaktır. Lütfen balgam öksürmemeye çalışın, sadece normal tükürük istiyoruz Tükürge ampülünüzü göz önünde bulundurun ve ne kadar dolu olduğunu düşünün Tükürüğünüzün üst kısmında kabarcıklar varsa hattın üzerinden geçmelidirler, bu nedenle hattın hemen altına sıvı tükürüğü var Doldurduğu zaman söyleyin Çizgiye(POINT OUT PICTURES) dükkânındaki bazı resimlerin resmini çizin, zira en sevdiği yemekleri düşünmek halkların ağzını su haline getirir. &quot; </li><li> Katılımcı tükürük örneğini tamamladıktan sonra su teklif edin. Katılımcının suyunu tutmasına izin vermeyin; Bitirince geri al. </li></ol> 4. Hazırlık Dönemi <ol><li> Katılımcıya söyle: &quot;Birkaç dakika içinde, iyi bir arkadaş olduğunuza dair beş dakikalık bir konuşma yapmanızı rica ederiz. Yan odada bulunan, dinleyecek olan iki eğitilmiş gözden geçiren bir komite bulunmaktadır. Konuşmanızın işi gözden geçirenlere iyi bir arkadaş olduğunuza inanmalarını sağlamaktır.Öncelikle başkalarına iyi arkadaş olmanızı söylemenizi isterler.İsterseniz vererek ne kadar iyi olduğunuza göre bir sürü insana karşı yarışıyorsunuz demektir. Konuşmanızı ve insanlara iyi bir arkadaş olduğunuzu ikna etmenizi öneririz. İncelemeler, yüz ifadesini ve vücut hareketini değerlendirmede uzman kişilerdir;Konuşmanızı araştırmadaki diğer insanlara söyleyin. İncelemecilerin not alıyor olduğunu fark edebilirsiniz. Bu, notlarını daha sonra inceleyebilmemiz için. Performansınızı daha sonra değerlendirmemiz için de videoya çekilecektir. Konuşmanız için hazırlanmak için 3 dakikanızı şimdi alacaksınız. Unutmayın, konuşmanız size ait olanı açıklayacak iyi arkadaşınızdır ve diğer insanlara karşı ne kadar inandırıcı olduğunuz için yarışıyorsunuz demektir. Bundan sonra, sizi gözden geçirenlere tanıtacağınız ve 5 dakikalık konuşmanız için yan odada kalacağım. Konuşmanın ardından gelecek başka bir görev olacak, ancak gözden geçirenler konuşmadan sonra görevin ne olduğunu size bildirir. Sormak istediğiniz bir şey var mı? İsterseniz notlar yazabilirsiniz, ancak onları sizinle odaya götüremezsiniz. Tamam, lütfen hazırlanmaya başlayın. Birkaç dakika içinde döneceğim. &quot; </li><li> El katılımcısı kağıt, kalem ve panoya not almak için. </li><li> Katılımcı odaya yalnız bırakın. </li><li> 3 dakikanızı bekleyin ve sonra odaya dönün. </li></ol> 5. TSST Kurulumu <ol><li> Katılımcıya, &quot;Tamam, şimdi yanına gidip başlamak için vakti&quot; deyin . Katılımcı notlar yazdıysa, onları katılımcıdan alın. &quot; Şu anda senden alabilirim, teşekkürler.&quot; Deyin . </li><li> Katılımcıyı TSST odasına götürüp, konfederasyonlara ve video kamera karşısına çıkacaklarını belirtin. </li><li> Katılımcı odaya girmeden önce video kaydını başlatın. Tüm konuşma ve matematik görevlerini kaydedin (yaklaşık 10 dakika toplam). </li><li> Gençlik Röportaj görevlisi komiteyi tanıştırın. &quot;Bu (katılımcının adı) _. (Katılımcı) _, bu insanlardan herhangi birini biliyor musunuz?&quot; <ol><li> Katılımcı hayır cevabı alırsa, Gençlik Röportaj Yöneticisine &quot;Tamam, başlayabilirsiniz&quot; der . </li><li> Katılımcı evet, evetKatılımcı kimlerin bilgisini bildireceklerini belirtin ve Gençlik Röportaj görevlisine &quot;Tamam, _ (konfederasyon) __&quot; deyin , lütfen kendinizi mazur kılın, hakimlerin sizi tanımayan insanlar olması gerekir. &quot; </li></ol></li></ol> 6. TSST Konuşma Görevi <ol><li> Konfederasyon 1&#39;e &quot; Lütfen bize neden iyi bir arkadaş olduğunuzu söyleyin, şimdi konuşmaya başlayın &quot; deyin. </li><li> Zamanlayıcıyı 5 dakika boyunca ayarlayın. Zamanlayıcıyı çalıştır. </li><li> 30 s sessizlikten sonra, katılımcıyı konuşmak için aşağıdaki istemlerden birini kullanın. Her 30 saniyelik duraklama olduğunda, isteklerinizi sırayla kullanın. <ol><li> &quot;Hala zamanın var, lütfen devam et&quot; deyin . </li><li> &quot;Neden iyi arkadaşın?&quot; Deyin. </li><li> &quot;Lütfen iyi bir arkadaş olduğunuza bir örnek verin&quot; deyin . </li><li> &quot;İstediğiniz kadar yaratıcı olun, neden iyi arkadaşın?&quot; Deyin . </li><li> Yukarıdaki tüm istemler kullanıldıktan sonra,&quot;Hâlâ vaktin var, lütfen devam et&quot;. </li></ol></li><li> 5 dakika sonra Konfederasyon 1&#39;e şunları söyleyin: &quot;Lütfen durun, zamanınız doldu.&quot; (Matematik görevine devam edin.) </li></ol> 7. TSST Matematik Görevi <ol><li> Konfederasyona 1, &quot;Şimdi senden yüksek sesle geri saymamızı rica edeceğiz, 423&#39;den başlayıp 7&#39;ler geriye doğru sayın. Sizden durdurmamızı söyleyene kadar 7&#39;liklerden yüksek sesle geri saymaya devam edin. Eğer hata yaparsanız biz Size bildirmenizi sağlayacak ve baştan başlamanızı isteyecektir. Lütfen olabildiğince hızlı ve doğru olunuz. Şimdi geriye doğru saymaya başlamanızı istiyoruz - 423&#39;den başlayıp 7 çıkartın. 7&#39;yi durdurmamızı söyleyene kadar yüksek çıkarmaya devam edin. &quot; </li><li> Zamanlayıcıyı 5 dakika boyunca ayarlayın. Zamanlayıcıyı çalıştır. </li><li> Katılımcı kafası karışık görünüyorsa, Konfederasyon 1&#39;e &quot;Bunu tekrar etmemi ister misiniz?&quot; Deyin. </li><li> Katılımcı bir hata yaparsa, Konfederasyon 1&#39;e &quot;Bu &#39;Yanlış. Lütfen tekrar başlayın. 423 eksi 7 &quot; </li><li> Katılımcı, 30 saniye sonra yüksek sesle sayım yapmaya başlamazsa, aynı istemlerle aynı talimatları kullanarak bir sonraki daha kolay matematik problemine geçin. </li><li> Daha kolay matematik problemleri olarak (şu sırayla) aşağıdakileri kullanın: 423-5 =? 95-5 =? 66 - 3 =? 6 + 3 =? </li><li> Katılımcı her doğru cevabın ardından onay beklemek için durursa Confederate 1&#39;e &quot;Geri sayım 7&#39;ye devam et&quot; deyin. Bir hata yaparsanız sizi düzeltiriz - aksi halde devam etmenizi sağlarız. </li><li> 5 dakika sonra Konfederasyon 1&#39;e &quot;Zaman doldu, lütfen bir sonraki tükürük numunenizi vermek için yanına gidin&quot; dedi. </li><li> Katılımcıya yalnız odaya geri dönün. </li></ol> 8. Protokolü Durdur <ol><li> Her iki taraf da protokolü erkenden durdurmalarını sağlayın. Her iki birliğin de bunu yapmadan önce birbirlerine danışmaları gerekmez. </li><li> EğerKatılımcı çığlık atar ya da gözyaşı dökmüş görünür, açıkça öfkeli veya saldırgan olur veya başka şekilde sıkıntı gösterir veya katılımcı agresif veya garip görünen bir şekilde durmaya başlarsa, protokolü derhal, ancak mümkün olduğunca durdurun. </li><li> De ki: &quot; Zaman geldi, lütfen bir sonraki salya örneğini vermek için yanına git .&quot; </li><li> Doğrudan katılımcı yan odada bulunsun. </li></ol> 9. Tükrük Örneği # 2 (15 dakika Post-stresör Başlangıcı) <ol><li> Gençlik yan odada tekrar girdiğinde, zamanlayıcıyı 15 dakika boyunca ayarlayın. </li><li> Katılımcının &quot;Ziyaretinizin en zor kısmı bu; bunu yaptığınız için teşekkürler ve bir saniye konuşacağız, şimdi başka bir tükürük toplamanın zamanı geldi&quot; dedi. </li><li> Katılımcı TSST&#39;den bahsediyorsa, katılımcının &quot;Bir dakika içinde bunu konuşabiliriz, ancak lütfen tükürük numunesini önce yapın. </li><li> 2 mL cryovial üzerine 1 mL tükürük belirtmek için bir çizgi yerleştirin ve parKatılımcı cryovial&#39;ı bu satıra doldurmalıdır. Katılımcının tükürüğünü pasif drool yoluyla 2 inçlik bir saman ile 2 mL cryovial 36&#39;ya toplayın ve derhal dondurun (-80 ° C). </li><li> Katılımcı, tükürük örneğini tamamladıktan sonra su içmeyi önerin. Katılımcının suyunu tutmasına izin vermeyin; Bitirince geri al. </li></ol> 10. Bilgilendirme <ol><li> Katılımcıya, &quot;Tamam, konuşma ve matematik faaliyetleri hakkında konuşalım, bunu önceden tahmin ettiniz, ancak bu faaliyetlerin tüm amacı stres yaratmaktı.&quot; İncelemecilerin &quot;en sevimli olmadığını tam olarak fark etmişsinizdir. Dünyada değil mi? &quot; &quot;Her şeyden önce, &#39;incelemecilerin sadece araştırma görevlileri olduğunuzu söylemek isterim ... Mesleği, gençlere aktiviteleri yapmak, ancak ne kadar büyük olursa olsun olumlu geribildirim vermemektir.Reklam, bu görevlerdeki performansınızla hiçbir ilgisi yoktur - tanıştıkları her katılımcıyla aynı şekilde davranırlar. &quot; &quot;Muhtemelen bunu neden yaptığınızı merak ediyorsunuz, bunu yapmak için bilimsel bir nedene sahibiz. Günlük yaşantınızda yaşadığınız stres miktarının böyle stresli bir duruma ne kadar çok müdahale ettiğinizi araştırıyor. Çalışma, gençlerin strese farklı tepkiler vermesinin nedenini anlamaktır ... Stres tepkisini görmek için tükrük numunelerinde kortizol denilen bir şeyi ölçüyorduk &quot;dedi. &quot;Konuşmayı ve matematı stresli buldıysanız, yalnız değilsiniz! Konuşmalar yapmayı ve matematik yapmayı seçtik çünkü güvenli oldukları halde bir çok insanı sinirlendiriyorlar. Bu faaliyetleri kendimiz yapmak zorundaydık ve hepimiz çok zor bulduk! Berkeley&#39;den gelen bilim adamları bile matematiğini berbat etti. Hepimiz &#39;onlar uzun süredirHayatımın 10 dakikasını! Sen böyle hissettin mi? &quot; &quot;Söz etmek istediğim birkaç şey daha ...&quot; [IF VIDEOTAPED] &quot;İki nedenden dolayı videoya kaydettik, asıl sebep patronlarımızın etkinliğin doğru şekilde yapılmakta olduğundan emin olabilmeleri. Gelecekte, insanların yüz ifadeleri hakkında daha fazla bilgi edinmek için videolara bakabiliriz. Bu, gençlerin stres farklı şekilde nasıl tepki verdiklerini incelemek için başka bir yoludur. &quot; [NOT VIDEOTAPED DEĞİL] &quot;Gerçek şu ki, sizi gerçekte kameralıyoruz değiliz, kamera gerçekten açılmadı, daha stresli olabilmek için oyuncunun bir başka parçasıydı.&quot; &quot;İçerideki insanlar performansınız hakkında gerçekten notlar yazmıyordu, oyunculuklarının bir parçası olarak saçma notlar yazıyorlardı. &quot;Lütfen bu etkinliği, içinde olabilecek herhangi birine söylememenizi rica ederiz.Bu çalışma, en iyi arkadaşın, kardeşin, kız kardeşinin, kuzenin ya da herneyse bile. Ziyaret için gelmeden önce diğer insanlar bu etkinliği öğrenirlerse konuşmalarını evde yapabilir ya da buraya gelmeden sinirlerini bozabilirler; daha önce yaptığınızdan tamamen farklı bir tecrübeye sahip olacaklardır. Bunun olmasını istemiyoruz. Bu mantıklı mı? Aynı nedenle, ebeveynlerinizle bu konuyla ilgili konuşursanız, lütfen çalışmada arkadaşlarına veya ailesine açıklamamalarını isteyin. &quot; &quot;Sormak istediğiniz bir şey var mı?&quot; </li></ol> 11. Tükrük Örneği # 3 (30 dk Stres Sonrası Başlangıç) <ol><li> 2 mL cryovial üzerine 1 mL tükürük belirtmek için bir çizgi yerleştirin ve katılımcıya bu satıra cryovial doldurmasını söyleyin. Katılımcının tükürüğünü pasif drool yoluyla 2 inçlik bir saman ile 2 mL cryovial 36&#39;ya toplayın ve derhal dondurun (-80 ° C). </li><li> Zamanlayıcıyı 15 dakika boyunca ayarlayın. </li><li> Dren için su teklif etK katılımcının tükürme örneğini tamamlamasından sonra. Katılımcının suyunu tutmasına izin vermeyin; Bitirince geri al. </li></ol> 12. Tükrük Örneği # 4 (45 dakika sonrası stres Başlangıçlı) <ol><li> 2 mL cryovial üzerine 1 mL tükürük belirtmek için bir çizgi yerleştirin ve katılımcıya bu satıra cryovial doldurmasını söyleyin. Katılımcının tükürüğünü pasif drool yoluyla 2 inçlik bir saman ile 2 mL cryovial 36&#39;ya toplayın ve derhal dondurun (-80 ° C). </li><li> Katılımcı, tükürük örneğini tamamladıktan sonra su içmeyi önerin. Katılımcının suyunu tutmasına izin vermeyin; Bitirince geri al. </li></ol>

There are no competing financial interests.

Mevcut çalışma, savunmasız gençlerle TSST&#39;nin değiştirilmiş bir versiyonunun etkinliğini teyit etmeye çalıştı. CHAMACOS projesi hem benzersiz hem de (Meksikalı Amerikan örnekleri genellikle araştırmadan çıkarılmıştır) ve önemli erken hayat sıkıntısı yaşayan bir gençlik örneğini temsil ettiği için değiştirilmiş bağlamsal olarak uygun bir TSST&#39;nin etkinliğini test etmek için en uygun örneği sundu 37 . Sonuçlar, modifiye TSST&#39;nin, ön stresden stres sonrası örneklere kadar, kortizolde belirgin bir artışa neden olduğunu ve ayrıca son tükürük numunesinin toplandığı zamana kadar TSST&#39;den normal bir nispi düzelme sağladığını doğrulamaktadır. Bu çalışma, hem TSST&#39;nin bağlamsal olarak uygun protokolü hem de orijinal TSST&#39;nin değiştirilmesini etkileyen faktörlerin araştırılması yoluyla sahaya değerli bir araç sağlamaktadır. TSST&#39;nin kurulması ve yönetimi için çeşitli kritik adımlar vardırBuna katılmak zorundayız. Birincisi, her iki birlik, beyaz laboratuar önlüğü giymeli, bir masanın arkasında oturmalı ve bir video kamera kaydına sahip olmalı ve katılımcının odaya girmeden önce katılımcının ayakta kalacağına dikkat çekilmelidir. Katılımcı, TSST&#39;nin tamamında dururken, komite oturur. İkincisi, her cinsiyette 1 adet konfederasyon olması ve konfederasyonların katılımcıya benzer bir ırk / etnisite olması ve katılımcı olarak benzer yaşta olması gerekiyor (bu çalışma, katılımcılara benzer şekilde yaşlı görünen biraz daha yaşlı bir genç kullanıyordu) ). Üçüncüsü, konfederasyonlar protokol boyunca hafif sıkıntı ile düz etkiye sahip olmalılar. Konfederasyonlar TSST sırasında ilgi göstermeden katılımcıya mümkün olduğunca bakmak zorundadırlar. Confederate 2 notlar yazarken, Confederate 1 komutları ve talimatları uygulamaktan sorumludur. TSST&#39;yi duygusal olarak &quot;tarafsız ve #34; Devlet beceri ve uygulama gerektirir. Bazı kişiler tarafsız bir yüz sağlayamayan kooperatif rolü için uygun olmayabilir. Bu çalışmadaki konfederasyonlar, TSST&#39;nin tamamı boyunca tarafsız duruşunu sürdürebilmek için elle seçildi. Bununla birlikte, bir katılımcı gözyaşı dökük, hüzünlü veya agresif hale gelirse, bu personel protokolü durdurmak için nasıl ve ne zaman müdahale etmesi gerektiğini bilmelidir. Duygusal tutum ve senaryonun kaybolmamasını sağlamak için TSST&#39;nin bütünlüğü de çalışma boyunca periyodik olarak değerlendirilmelidir. Bu çalışmada, TSST yönetimindeki uzmanlarla olağandışı olayları gidermekte oldukları zaman, konfederasyonlara haftalık check-in imkânı sağlandı ve sorularla kontrol edildi. TSST&#39;de &quot;biraraya gelenler&quot; yeniden yapılandırmak için birkaç ayda bir TSST &quot;tazelemeleri&quot; gerçekleştirildi. Videoları, anneleri onay vermiş katılımcılar için TSST sırasında kaydedildi ve bu videolar, TSST komut dosyasına doğruluğunu sağlamak için gözden geçirildi. Sonunda, bazı araştırmacılar, TSST&#39;ye tepki olarak ihanet veya öfkeyi ifade eden katılımcıların yüksek kortizol tepkilerine sahip olacağını düşünebilirler. Bununla birlikte, bu çalışma, kortizol reaksiyonları yoluyla değerlendirildiğinde, bu gençlerin yanıt vermeyen kişiler olduğu ( yani , kortizolü azalmış veya görev boyunca kalmış olan bireyler) olduğu ortaya çıktığına göre, bu kavramı veride reddetmiştir. Bu nedenle, hassas bir protokole kesinlikle uymak, toplam reaktivite oranlarını zayıflatmaz, aksine, stresörün meydan okumasının bu gençler için uygun seviyeye kadar titre edilmesini sağlamıştır. Standart TSST protokolü hem etik hem de bilimsel olarak yıpranma, tepki verme ve &quot;vazgeçme&quot; terimlerinin baskın bir yanıt olduğu kadar uygun olmayacaktır. Orijinal TSST üzerinden birkaç katılımcıyı çalıştırdıktan sonra, orijinal TSST, bu popülasyonun bağlamsal faktörlerine optimal olmayan sorumluluk nedeniyle daha iyi uyacak şekilde değiştirildi.Es ( yani , ağlamak, görevi bırakmak, agresif duruş). Çalışma personeli, TSST&#39;yi savunmasız nüfuslarla ( örneğin , yetimhaneler, çocuk adaleti ayarları, istismara uğramış nüfus) kullanan çok sayıda araştırmacıya danışmış ancak bu değişikliklerin hiçbiri bu çalışmanın ihtiyaçlarını mükemmel şekilde karşılamamıştır - bazıları protokoldan çok uzaktı ve biz de bu durumdan endişe ediyorduk Değişiklikler bir kortizol yanıtını ortaya çıkarmaz 12 , 27 . Bu nedenle, çalışmamızda TSST&#39;ye üç temel değişiklik yapılmıştır ve bu değişikliklerin modifikasyonları ve motivasyonları aşağıda aydınlatılmıştır. Öncelikle, katılımcılardan uzaklaşmamak önemlidir. Stres görevinin yönetimi bu çalışma için önemlidir, ancak anneler onlarla hamile kaldıklarından beri gençlerin boyuna takip edildiği için katılımcıların yıpranmalarını kaybetmemesi şarttır. Bu çalışmada, katılımcılar dTSST bittikten sonra katılımcılar için stresin sona erdiğinden emin olmak için TSST&#39;den hemen sonra ebriefed. Bu örnek için, raporlamayı yürüten personel, gençlerle duygusal bir bağ olmadan, olabildiğince yabancı ama yine de empati kuran biri olmalıydı. Dikkat çekici gözükse de, tanıdık ve duygusal açıdan gençlerle bir araya gelen personel onları TSST ile ilgili olarak bilgilendirdiğinde, gençler TSST&#39;den daha fazla röntgencilik eğilimi gösterdiler ve daha fazla konuştular; bazen ağlamak ya da kızgınlık hissi ile sona erdi. &quot;Kandırdın&quot; yönünde. Soruşturmayı yürüten tanıdık olmayan personel, kohortun TSST&#39;yi uygulayarak tanıdık çalışanlarla yaptığı uzunlamasına bağlantıları kesmediğimizden emin olmamıza yardımcı oldu. Bu, Latino topluluğu içinde önemli olarak kaydedilir ancak katılımcılar ile güçlü bir uyum geliştiren birçok uzunlamasına çalışmanın dikkate almaları gereken bir şeydir. Bilinmeyen istasyon kullanmaAyrıca, tanıdık olmayan personeli kullanarak gözlemlediğimiz daha optimal davranışsal tepkiler göz önüne alındığında, bu bildirimin gençleri daha da fazla etkileme ihtimalini de azalttı. İki değişik tükürük örneğinin toplanmasından önceki bilgilendirme, bu modifikasyonu kullanan araştırmacılarla ilgili olabilirken, bu çalışmanın TSST&#39;nin sonuçlanmasından sonra prototipik kortizol yanıt paternini gözlemlediği unutulmamalıdır (en yüksek konsantrasyon stresörün sonuçlanmasından 15 dakika sonra gelmektedir Ve stres faktörünün sona ermesinden 30 dakika sonra iyileşme). Bu değişiklik, savunmasız durumlarından dolayı TSST&#39;den sonra stres tepkisine devam etmiş olabilecek gençlere daha kültürel açıdan daha hassas davranıldı. İkinci olarak, TSST protokolünün katılımcının bireysel faktörlerine göre esnek olması gerekir. Bu çalışmada yer alan Meksikalı Amerikalı gençler, Salinas Vadisi&#39;ndeki düşük kaynaklı ve fakir tarım topluluklarında yaşıyorlar. CHAMACOS aileleri zor koşullar altında çalışıyorKoşullar, özellikle düşük ücretli, aralıklı mevsimlik istihdam ve uzun çalışma saatleri, ergenlik döneminde hızlı ve belirgin bir gelişme döneminde olumlu ailevi etkileşim fırsatlarını kaçırır. Kohortta düşük SES / yoksulluk ile ilişkili stresörler, gıda güvensizliği, aşırı kalabalık konutlar, standart altı yaşam koşulları ve yetersiz tıbbi servislerin kognitif engelli ve zihinsel sağlık ihtiyaçlarını gidermesine katkıda bulunmaktadır. Buna ek olarak, Salinas Vadisi&#39;ndeki gençlerin orantısız bir şekilde yerel karmaşıklıklara ve mahalli okullara yayılmış aile kargaşa ve gençlik şiddetine maruz kaldıkları görülüyor. Gençler, hızla değişen sosyal ve ekonomik zorluklara uyum sağlamayı öğrenmek ya da günlük yaşantılarının öngörülemeyen doğasına duyarlı hale gelmek (veya bazen duyarsızlaştırılmış hale getirmek) halinde bu risk faktörleri gittikçe daha da vurgulanmaktadır. TSST&#39;yi bu nüfus için daha esnek hale getirmenin bir örneği, matematik bölümünün zorluğunu değiştirmekti. Bu stu göz önüne alındığındaDy, daha önceki bilişsel testlerden mahrum kaldı ve IQ 38&#39;i etkileyebilecek çevresel patojen maruziyeti hakkında bilgiye sahipti, TSST ile tipik olarak ilişkili olan &quot;tek bir boyutun tümüne uyuyor&quot; matematik görevinin bu nüfusa uyacak olmadığı açıktı. 39 ve 40 arasındaki diğer stres kaynaklarını takiben, matematik zorluğu, gençler için zorlu olduğu halde imkansız olmadığı şeklinde titrildi. Üçüncüsü, TSST protokolünün belirli kültürel ortamlarda yüksek toplumsal ve sosyal bağlantı duygusunu tanıması ve geliştirmesi gerekiyor. Gençlerin katılımcıları ile bağlantı kuran birliklerin kullanılması önemlidir, bu nedenle bu çalışma, benzer yaş ve etnik kökenlerin ortaya çıkması için katılımcılardan biraz daha yaşlı konfederasyonları işe almış ve aynı topluluktan gelmiştir; bu nedenle SET, &quot;onların akranlarından&quot; gelmiştir. Tersine, çok fazla sosyal bağlantı sorunlu idi. Bunu sağlamak önemlidir.Konfederasyonlar uygun şekilde tarafsızdır ve konfederasyonlar katılımcılar tarafından bilinmiyordu. Bu çalışma için kritik önem taşıyor çünkü Salinas Vadisi nispeten geniş bir bölge olmasına rağmen gençlik topluluğu çok küçük ve birbirine bağlı olabilir. Bu nedenle, TSST başlamadan önce, katılımcıların ve birliklerin birbirlerini tanımadıklarından emin olmak yararlı olabilir. Katılımcı veya müttefik, diğerini bu çalışmada tanıdıysa, TSST yalnızca birleşik bir kavimle idare edildi. Bu çalışmanın konfederasyonları aynı topluluktan geldiği gerçeği, bir üniversite ortamından çok uzak olan ve bir seferde bir veya iki saat çalışabilecek personeli bulurken zor olan bu bağlamda (Salinas) not etmek önemlidir. Bu çalışmanın saha çalışanları araştırmacılara çok meraklı ve yüksek eğitim almıştı, bu da protokolün korunması bakımından göz ardı edilmemelidir. Bu sonuçlar, değiştirilmiş bir TSST&#39;nin geçerliliğini doğrulamak için umut vaat ediyor olsa daSavunmasız ergenler ile bu etkilerin farklı örneklerde tekrarlanabilirliğini teyit etmek için daha fazla araştırmaya ihtiyaç vardır. İlk olarak, bu proje benzersiz ve savunmasız Meksikalı ergenlerin örneklerine erişebilmek için şanslı sayılırken, bu sonuçların, bu tadil edilmiş TSST&#39;nin bir kortizol yanıtı ortaya çıkaracak kadar güçlü olduğunu teyit etmek için diğer savunmasız etnik gruplarda çoğaltılması gerekiyor. Diğer popülasyonlar. İkincisi, bu örnek 14 yaşlarla sınırlıydı. Bu örnekteki TSST yanıtına yaşın etkisi için dar örneklem kontrol edilirken, gelecek araştırmalar bu etkileri farklı ergen ve çocuk çağlarında ve belki de pubertal gelişim boyunca tekrarlamaya çalışabilir. Son olarak, verilerin modifiye edilmemiş bir TSST kullanan bir karşılaştırma grubundan toplanmadığına dikkat edilmeli, çünkü başlangıçta daha az modifiye edilmiş bir davranışla karşılaştığımız yüksek davranış oranı düşük ve duygusal tepkiler verilen bu örnekle etik olmayacağız Sürümü oTSST. TSST tekniklerinin genel olarak sınırlamaları da vardır. Daha önce de belirtildiği gibi, konfederasyonun tüm TSST boyunca nötr duruş sergilemesi önemli bir uygulama alanı buluyor. TSST&#39;yi uygun şekilde çalıştırmak için en az 3 kişiye ihtiyaç vardır (2 eştirim ve 1 deneyci) ve TSST, katılımcı tarafından bilinmiyorsa daha iyi çalışır. Bu nedenle, bu protokol, lisans öğrencilerinin bir kerede 1-2 saat laboratuvarda çalışabildikleri, ancak uzak ayarlarda veya birlik olarak bir iş olarak ödedikleri ortamlarda (yalnızca ücretli oldukları için) daha kolay çalışabilecekleri üniversite kampüslerinde çalıştırmak daha kolaydır TSST başına ~ 1 saatlik çalışma için). Bu teknik, zamanla proje üzerinde çalışan personelle uzunlamasına çalışmalar için bir engel olabilir - TSST&#39;yi tanıtan bu iyi bilinen personel olmamalıdır. Ayrıca, zamanla TSST&#39;nin bütünlüğünü korumak açısından önemli yükler vardır - uzmanların video kasetini incelemesi gerekirTSST üyesi olarak, konfederasyonlarla haftalık check-ins&#39;ları sürdürmek ve tekniğin kaybolmamasını sağlamak için periyodik &quot;tazeleme&quot; oturumları sağlamak. Dahası, TSST, küçük aldatmaya dayandığı ve katılımcı tekniğe alışabileceği için belirli bir katılımcı için tekrar tekrar yapmak zordur. Konuşma ve matematik bölümleri, otonom sinir sistemi işleyişi gibi diğer metodolojiler için daha uygun olacak şekilde dengelenmez. TSST&#39;de stresli olmayan başka bir bölüm bulunmadığından, stresli olmayan bir karşılaştırmaya sahip olmak için başka bir oturum ( örn. , Dostu TSST veya plasebo TSST) veya başka bir şey ( örneğin , temel bir gün) gereklidir. Son olarak, laboratuara dayalı olmayan bir stres faktörü daha etkili olabilir ( örneğin , karaoke, merdane bardak altlığı veya perili evler) veya daha fazla ekolojik 41 . Bu çalışma, savunmasız gençlerle değiştirilmiş bir TSST&#39;yi kullanmak için gelecek araştırmaların temelini oluşturmaktadır. Gelecek uzunlamasınaBirden fazla veri toplama dalgası boyunca katılımcıları korumak isteyen araştırmalar da, bu değişikliklerin bir kısmını kullanarak, yıpranmayı sınırlandırmak için yaklaşımlarını değiştirmelidir. Dahası, bu çalışma TSST&#39;nin kortizol yanıt oranındaki bireysel farklılıkları yakalamak için stres reaktivitesini uygun bir seviyeye kadar titre ederek kültürel olarak hassas modifiye edilmiş bir versiyon yaratmanın gerçekten mümkün olduğunu göstermektedir.

Trier Sosyal Stres Testi (TSST) 1 , laboratuvar ortamında stres yaratmak için altın standart haline geldi 2 . Hipotalamik-Hipofiz-Adrenal (HPA) ekseni 1 , 3 tarafından üretilen biyolojik çıktı olan kortizol 2-4 kat artışa neden olduğu gösterilen iyi onaylanmış ve yaygın olarak kullanılan bir sosyal stres kaynağıdır. Bir meta-analiz, iki önemli yönün ömrü boyunca en sağlam HPA tepkimesini uyandırmanın ayrılmaz bir parçası olduğuna karar verdi: her ikisi de TSST 3&#39;ü karakterize eden öngörülemezlik / kontrol edilemezlik ve sosyal değerlendirme tehdidi (SET). Ergenlik, SET&#39;in özellikle stresli olduğu, sosyal etkileşimlerin öğrenmeyi kolaylaştırdığı duyarlı bir gelişim dönemi ile belirgin olduğu kilit bir dönem olabilir 4 . Örneğin erken ergenlik ve ergenlik döneminde akran grubu ile entegrasyon<html> S motivasyonel olarak belirginleşir 5 . Ergenlik başlangıcında hormon seviyelerindeki hızlı artışlar, limbik devrelerin gelişimini etkiler ve duruma bağlı sosyal uyarıların ( yani , hayranlık duygusu) motivasyonel belirginliğin artmasına neden olur 6 . Toplumsal duygusal katılımdaki bu artış, yalnızca şu anki motivasyonları ve davranışları etkilemekle kalmaz aynı zamanda uzun aralıklarla davranış ve motivasyonel öğrenme modellerini de etkiler. Zamanla, toplumsal teşvikleri ön planda tutan bu değişiklik, sağlık araştırması ve risk alma yoluna gidebilir ve bu da toplumsal ve duyuşsal öğrenmeyi ve yetişkinlerin sosyal işlevlerini destekleyen becerileri geliştirebilir. Bu nedenle, TSST konuşma evresinde yer alan toplumsal işlevselliğin yönlerinin ergenler için güçlü bir stres biçimi, yani &quot;iyi arkadaş&quot; başlığı olan 7 , 8 ,Ref &quot;&gt; 9. Bununla birlikte, travma öyküsü ya da stresli yaşam olaylarıyla duyarlı kişilere, zayıf duygusal kontrol ya da strese karşı artmış duyarlılık nedeniyle sosyal olarak değerlendirici ya da öngörülemeyen durumlara zayıf tepkiler vermeye hazırlanabilir ve bu olumsuz yanıt şekli, Uyuşturucu kullanımı veya tehlikeli heyecan arayışı gibi negatif sağlıklı sonuçlar Bu nedenle savunmasız gençlerde AET&#39;ye biyolojik tepkiler alınması en büyük önem taşır. Bir avuç çalışma SET&#39;in varyasyonlarının ve kontrol edilemezliğin stres tepkisini nasıl etkilediğini araştırdı. SET, konfederasyon hakimlerinin sayısına bağlı olarak artırılabilir veya azaltılabilir. TSST, 2 konfederasyonu çağırıyor ancak dört 10 ile daha etkili, 1 - 2 konfedere 11 , 12 , 13 ya da sanal ya da uzak seyirci 14 ile daha etkili , , 16 . Daha olumsuz yorum eklemek SET ve cevaplayıcı oranlarını 11 , 17 artırırken, olumlu yorum SET ve cevaplayıcı oranları düşürüyor 18 . Duyarlılık oranları, (a) katılımcıların konuşmanın hazırlanması gereken süreyi değiştirerek 14 (b) katılımcıların psikososyal kaynaklarını 19 , 20 , 21 arttırarak veya (c) katılımcıların kendilerine güvenlerini arttırarak; TSST 22 . Duygu bastırmasını artıran değişiklikler 23 , dikkatli olunması ya da stres ettiriciye dikkat edilmesi 24 , 25 ya da benlik hakkındaki düşünceler 26 TSST yanıtını arttırır. Sonunda, cinsiyet ve yaş sınırlamasıFederasyon, SET 27 , 28&#39;e karşı stres reaksiyonunu etkileyebilir. Bu çalışmalar responsivite oranlarının deneysel olarak arttırabileceğini veya azaltılacağını göstermektedir. Mevcut çalışmada, TSST, zamana bağlı komut istemleri, alternatif matematik görevleri, ittifaklar olarak aynı etnisite arkadaşlarını kullanma, TSST&#39;nin sonuçlanmasından hemen sonra görüşme ve bildirimi yapmak için bilinmeyen bir gençlik denetçisi kullanarak değiştirildi. Yakın tarihli bir stres paradigması incelemesi, orta dereceli ergenlik döneminde toplumsal değerlendirici tehdidin kortizol yükselmesine (HPA yanıtı) özellikle güçlü etkileri olduğunu gösterdi 29 . Bununla birlikte, savunmasız gençlerle TSST&#39;yi kullanma konusunda geçerli kaygılar vardır. Özellikle, insanların korunması endişeleri, faydaların zaten savunmasız olduğu zaman TSST&#39;ye dayanmak ile bağlantılı potansiyel bir travmanın olması nedeniyle faydaların risklerden daha fazla olmasını sağlamak için yükseltilebilir ( örn. </Em&gt;, yoksulluk ve erken hayat sıkıntısı ortamlarından geliyor). Bu nedenle, gençlerin kaygı ve heyecan duygusu içinde olmamasını sağlamaya ihtiyaç vardır. Bununla birlikte, bu kaygılardan bazılarını hafifletmek / hafifletmek için TSST&#39;deki değişiklikler, stresörün genel etkinliğini veya geçerliliğini azaltmamalıdır. Örneğin, önceki çalışmalar savunmasız gençler için TSST&#39;nin değiştirilmiş versiyonlarının etkilerini belgeledi ancak kortizol 30 , 31&#39;deki artışa neden olarak sınırlı bir başarısı oldu. Ayrıca, TSST&#39;yi kültürel olarak daha hassas ve uygun hale getirmek için değişiklikler yapılması gerekebilir. Örneğin, farklı ırkların bireyleri ile etkileşimde bulunmanın stres ve tehdit reaksiyonlarını indükleyebileceğini gösteren literatür var 32 . Katılımcının ve TSST komitesinin ırk özelliklerinin farklılaşmasının, TSST 33&#39;e kortizol reaktivitesini etkilemediği, daha ziyadeTSST&#39;den kortizol geri kazanımını gerçekleştirir 34 . Bu nedenle, TSST için aynı ırk / etnik birliklerin kullanılması, TSST&#39;den algılanan stereotip tehdidi ve kortizol geri kazanımına ilişkin konfederasyonların yarışlarının gereksiz karışıklığını giderebilir. Bu çalışma Kaliforniya&#39;daki Meksikalı Amerikalı ailelerin, Salinalar&#39;ın Anneleri ve Çocuklarının Sağlıklı Değerlendirilmesi Merkezi (CHAMACOS) olarak adlandırılan uzunlamasına bir doğum kohort çalışması bağlamında gerçekleşti. Bu örnek, yoksulluk oranı yüksek (ailelerin% 76&#39;sı Federal Yoksulluk düzeyinde veya altında idi) ve yüksek sayıda olumsuz erken yaşam olayından ötürü oldukça savunmasız olarak nitelendirilmektedir (örnek için yaşam boyu olayların ortalama sayısı = 4.5 SD = 3.3). Karşılaştırma yapmak gerekirse, ABD Hastalık Kontrol ve Önleme Merkezi ile Kaiser Permanente arasında binlerce kişiden oluşan bir ortaklıkla gerçekleştirilen büyük bir retrospektif çalışma, sadece% 13&#39;lük bir kesimde 4 veya daha fazla olumsuz kızaLdhood olayları 35 . TSST, bu çalışmada, advers erken yaşam olayları, 14 yaşında sosyal değerlendirme tehdidine karşı biyolojik reaktivite (TSST uygulandığında) ve risk alma davranışları arasındaki bağlantıyı araştırmayı amaçlayan büyük bir NIH hibe kapsamında gençlere uygulanmıştır (16 yaşında, veri toplama halen devam etmektedir; grant1R01DA035300). TSST&#39;nin pilotluğunun ilk aşamalarında yaklaşımın, bu nüfusun özgün gereksinimlerine bağlamında duyarlı olması ve kötü yanıtları (ağlama, kızgın olma, TSST&#39;den ayrılması gibi) hafifletmek için kayması gerektiğini gözlemledik. Tam olarak anılacak olursak, değişiklikler yapılmadan önce TSST&#39;ye% 20 oranında bir kötü davranış tepkisi verdik ( yani öfkelenen 20 TSST katılımcısından 4&#39;ü), ancak% 5&#39;i modifikasyonlar uygulandıktan sonra kötü tepkilerle yanıt verdi. Çalışma personeli ayrıca reta&#39;nın öneminin farkındaydılarBu uzunlamasına çalışmada gençlerin ilgisini çekti. Pilot fazda, TSST&#39;ye aşırı stres tepkileri ile davette davranışsal olarak tepki gösteren bireylerin biyolojik seviyede &quot;yanıtsız&quot; oldukları, yani bir kortizol yükselişi göstermediklerini belirtmek gerekir. Bu ilk sonuçlardan çıkan bu duygusal / biyolojik yan yana, TSST&#39;yi uygun bir biyolojik tepki oluşturmak için en uygun koşulları yaratmak için TSST&#39;yi değiştirme ihtiyacı da vurgulanmıştır. Bu nedenle, bu çalışma gençlerin bir alt örneğinden modifiye TSST&#39;nin kortizol reaktivitesini uyarmak için etkinliğini gösteren ön kanıt sağlamaktadır.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="651">
	<colgroup>
		<col />
		<col span="2" />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:199px;">TSST</td>
			<td style="width:128px;"></td>
			<td style="width:128px;"></td>
			<td style="width:196px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2 white lab coats</td>
			<td>Dickies</td>
			<td>83403</td>
			<td>For confederates</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2 clip boards</td>
			<td>Staples</td>
			<td>21423</td>
			<td>For confederates</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2 pens</td>
			<td>BIC</td>
			<td>GSM609-Blk</td>
			<td>For confederates</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Table</td>
			<td>Ikea</td>
			<td>B00EYU3E7I</td>
			<td>For confederates to sit behind</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Video Camera &#38; Tripod</td>
			<td>Sony</td>
			<td>K-86674-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Paper&#160;</td>
			<td>Generic</td>
			<td></td>
			<td>For participant&#39;s preparation period</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Saliva samples</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Latex gloves</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>19041171C</td>
			<td>To collect saliva samples</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2 mL cryovials</td>
			<td>Wheaton</td>
			<td>W985872-100</td>
			<td>4 per participant</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">80 C freezer</td>
			<td>So-Low</td>
			<td>U85-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2&#39;&#39; straws&#160;</td>
			<td>Genuine Joe</td>
			<td>GJO58925</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a modified trier social stress test for vulnerable mexican american adolescents

Trier Sosyal Stres Testi (TSST), insanlarda Hipotalamik-Hipofiz-Adrenal (HPA) ekseni tarafından üretilen biyolojik çıktı olan kortizolün 2-4 kat artmasına neden olduğu gösterilen iyi bilinen ve yaygın şekilde kullanılan bir stresördür. Çalışmalar, TSST&#39;deki değişikliklerin strese duyarlılığı nasıl etkilediğini araştırırken bazı çalışmalarda önemli bir kortizol stres tepkisi ortaya çıkaran savunmasız genç için uygun bir TSST geliştirilmiştir. Bu nedenle, mevcut çalışma, 14 yaşındaki ergenin savunmasız bir örneği için kültürel açıdan hassas bir şekilde TSST&#39;yi değiştirmeye veya ayarlamaya çalışıyordu. Bu çalışma Kaliforniya&#39;daki Meksikalı Amerikalı ailelerin, Salinalar&#39;ın Anneleri ve Çocuklarının Sağlıklı Değerlendirilmesi Merkezi (CHAMACOS) olarak adlandırılan uzunlamasına bir doğum kohort çalışması bağlamında gerçekleşti. CHAMACOS örneği, tadil edilmiş bir kültürel açıdan uygun TSST&#39;nin etkinliğini test etmek için en uygun yöntemdi; çünkü Meksika&#39;daki Amerikan gençlerinden oluşuyor;On araştırma dışında bırakıldı. Bu gençler ayrıca önemli erken hayat sıkıntısı yaşamışlardır. Örnek değişiklikler, zamana bağlı komut istemleri, alternatif matematik görevleri, ittifaklar olarak aynı etnisite arkadaşlarını kullanma, TSST&#39;nin sonuçlanmasından hemen sonra görüşme ve bildirimi yönetmek için bilinmeyen bir gençlik denetçisi dahil edildi. Tükürük numuneleri, başlangıçta (bir dinlenme fazından sonra), ve daha sonra, kortizol konsantrasyonunu değerlendirmek için TSST başlangıçtan 15, 30 ve 45 dakika sonra toplandı. TSST&#39;ye kortizol reaksiyonu için 50 katılımcının (% 50 bayan) bir pilot çalışması analiz edildi. Sonuçlar, TSST&#39;nin bu değiştirilmiş versiyonunun, muhtemelen bireysel farklılıklara bağlı olarak geniş bir değişkenlik aralığında önemli bir kortizol reaksiyonu ortaya çıkarmada başarılı olduğunu teyit etti. Değişiklikler ve etnisite konuları için hedefler tartışılmıştır. Bu çalışma, savunmasız gençlerle değiştirilmiş bir TSST&#39;yi kullanmak için gelecek araştırmaların temelini oluşturmaktadır.

Örneklem, zengin özelliklere sahip, kurulmuş bir kohort çalışmasının parçası olan 14 yaşındaki çocuklardan oluşuyordu. Bunlar, Salinalar&#39;ın Anneleri ve Çocukları Sağlık Değerlendirme Merkezi (CHAMACOS) idi. Bu çalışma Kaliforniya&#39;daki bir çiftçi toplumunda yaşayan 325 Meksikalı Amerikalı aileden oluşan ilk kohorttan oluşuyor ve uteruselden beri prospektif olarak izleniyor. TSST, 9 yaşından itibaren takip edilen 300 çocuğun ikinci CHAMACOS kohortuna uygulanmadı. Adölesanlar, geçmiş ziyaretlerde klinikte gösterilen aşırı atipik davranışlar ( örn. Telaffuz edilen aşırı atipik davranışlar) varsa, adölesan otistik bozukluk tanısı konmuş olsaydı, ergenlerin bir önceki ziyaretten (&lt;12 yaş) tam skala IQ&#39;sının &lt;70 olması koşuluyla, TSST&#39;ye katılanlardan tarandı Depresyon tarama testi skoru yaş ve cinsiyet ortalamasının 3 SDs üstünde olursa, çalışma hakkındaki güvensizlik / paranoya, maternal rapor başına, şeyleri görmüyor veya orada bulunmayan insanlar görüyor) ve eğer tErgen, bir önceki yıldaki bir çete mücadelesine karıştığını bildirdi. Bu dışlama ölçütleri başlangıçta TSST&#39;ye aşırı tepki vermeye dayanılarak eklenmiştir, ancak bu dışlama ölçütlerinin nihai sonuçlarda bir fark oluşturup oluşturmadığı belirsizdir. Bu dışlanma kriterlerinin dışında, katılımcılar psikolojik ve fiziksel sağlığına bakılmaksızın kayıt yaptılar. Sonuçta, 264 adolesan, bildirimde bulunuluncaya kadar hiç bildirilen sorun ya da sorun olmadan TSST&#39;yi tamamladı. Tablo 1 , dışlanan katılımcıların sayısını ve neden hariç tutulduğunu listeler. TSST&#39;yi tamamlamayan ve karşı tamamlayanların arasında demografik bir farklılık yoktu. Salya örnekleri kuru buz üzerinde Iowa Eyalet Üniversitesi&#39;ndeki meslektaşlarına gönderilene kadar -80 ° C&#39;de saklandı ( yani biyogüvenlik seviyesi II laboratuarı). Varışa gelince, dondurulmuş tükürük örnekleri kataloglandı ve tekrar -80 ° C&#39;lik bir dondurucuya yerleştirildi. üzerindeTahlil günü, her salya örneği çözülmüş ve iyi kurulmuş oldukça duyarlı enzim immünoassay kitleri kullanılarak iki kez 24 saat içinde denenmiştir. Ortalama kortezol katsayıları (CV), kortizol için% 2.25&#39;in altında ve ortalama aralıksız CV% 5.13&#39;tü. Tekrarlanan ölçümlerin CV&#39;si% 7&#39;den fazla olursa numune yeniden analiz edildi. Her örnek boyunca standart sapmalar ile birlikte kortizol ölçümleri için tanımlayıcı istatistikler Tablo 2&#39;de verilmiştir ve Şekil 1&#39;de gösterilmiştir. Seksin dört tükürük örneği üzerindeki etkilerini test etmek için iki kez tekrarlanan ölçümler ANOVA yapıldı. TSST&#39;ye kortizol cevabı için ana etki vardı ( F = 9.09, p &lt;0.001), ancak cinsiyet strese kortizol yanıtının önemli bir öngörücüsü değildi ( F = 1.03, p = .39). Ortalama vücut kitle indeksi 23.53 idi ve aynı zamanda tekrarlamanın anlamlı bir öngördürücü değildiTed önlemleri için kortizol ANOVA ( F = 1.03, p = 0.38). Beklendiği gibi, eşleştirilmiş örnek t-testleri ( Tablo 3&#39;te sağlanmıştır), stres öncesi başlangıçtan 15 dk stres sonrası başlangıç, stres sonrası başlangıç ​​30 dakika ve stres sonrası başlangıçtan kortizolde anlamlı değişiklikler olduğunu ortaya koymuştur Stres sonrası post-stres sonrası 30 dakika. Kortizoldeki en büyük değişiklik, stres öncesi kortizol konsantrasyonunu önceki araştırmalarla tutarlı olarak stres sonrası 30 dk konsantrasyon ile karşılaştırırken ortaya çıkmıştır (Cohen&#39;s d = .80) 1 , 3 . TSST ile zor zaman geçiren bireyler, stres etkenlerine karşı artmış stres reaktivitesi bildirme eğilimindeydi, ancak çalışmanın bitiminden önce normal bir duruma geldiğini bildirdiler. Stres sonrası 30 dakikalık konsantrasyon bu örneklerden en yüksek konsantrasyon iken, stres sonrası kortizol konsantrasyonu 45 dakika, bireylerin başlamış olduğunu düşündürmektedirStresörden kurtulmak için, stres sonrası madde konsantrasyonu, 30 dakika konsantrasyonundan anlamlı derecede düşük olduğu için ( Tablo 3&#39;e bakınız). <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/55393/55393fig1.jpg" /> Şekil 1: TSST&#39;ye kortizolün reaktivitesi. Kortizol reaktivitesi, standart sapmalarla çizilmiştir. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55393/55393fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.</a> <img alt="tablo 1" src="/files/ftp_upload/55393/55393table1.jpg" /> Tablo 1: Dışlanma Nedenleri. Katılımcılar, TSST&#39;ye başladıkları, ancak erken üyeliklerini kabul etmedikleri, katılmayı reddettikleri, projeden ayrıldığı veya proje ile ilgili konulardan dolayı atlandıkları takdirde çalışmadan çıkarıldı. Tablo 2: Ortalama Kortizol Konsantrasyonları ve Standart Sapmalar. Kortizol numuneler 1-3&#39;ten artmış ve daha sonra numune 4 tarafından reddedilmiştir. <img alt="Tablo 3" src="/files/ftp_upload/55393/55393table3.jpg" /> Tablo 3: Eşleştirilmiş Örnekler t-testleri. Örnekleri kortizol konsantrasyonunda (μg / dL) ve standart sapmalarda (SD) kortizol değişikliği için birbirleriyle karşılaştırır. Temel örneklemden stres sonrası örneklere kadar kortizolde belirgin artışlar gözlemlendi.

Watch this Scientific Journal Video about A Modified Trier Social Stress Test for Vulnerable Mexican American Adolescents at JoVE.com

A Modified Trier Social Stress Test for Vulnerable Mexican American Adolescents

Burada, savunmasız bir ergen Meksikalı Amerikan örneğinde, Trier Sosyal Stres Testi&#39;nin (TSST) modifiye edilmiş bir sürümünü kullanarak kortizol tepkisini provoke eden bir protokol sunuyoruz. Tükrük numuneleri başlangıçta, TSST&#39;nin başlamasından 15, 30 ve 45 dakika sonra toplandı. Gelecekteki araştırmalar, bu savunmasız gençlerle birlikte değiştirilmiş TSST&#39;yi kullanabilir.

Savunmasız Meksikalı Amerikalı Adolesanlar için Trier Değiştirilmiş Sosyal Gerilme Testi

The Trier Social Stress Test (TSST) is a well validated and widely used social stressor that has been shown to induce a 2-4 fold increase in cortisol, the ...

a-modified-trier-social-stress-test-for-vulnerable-mexican-american

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Introduction to Psychology

Developmental Biology

Unit 1

Stress and Lifestyle

SCIENTISTS IN ACTION

12.7K Görüntüleme.  University of California, Berkeley.  Burada, savunmasız bir ergen Meksikalı Amerikan örneğinde, Trier Sosyal Stres Testi'nin (TSST) modifiye edilmiş bir sürümünü kullanarak kortizol tepkisini provoke eden bir protokol sunuyoruz. Tükrük numuneleri başlangıçta, TSST'nin başlamasından 15, 30 ve 45 dakika sonra toplandı. Gelecekteki araştırmalar, bu savunmasız gençlerle birlikte değiştirilmiş TSST'yi kullanabilir. 

Video: A Modified Trier Social Stress Test for Vulnerable Mexican American Adolescents

Automated Quantification of Hematopoietic Cell &#8211; Stromal Cell Interactions in Histological Images of Undecalcified Bone

Confocal microscopy is the method of choice for the analysis of localization of multiple cell types within complex tissues such as the bone marrow. However, the analysis and quantification of cellular localization is difficult, as in many cases it relies on manual counting, thus bearing the risk of introducing a rater-dependent bias and reducing interrater reliability. Moreover, it is often difficult to judge whether the co-localization between two cells results from random positioning, especially when cell types differ strongly in the frequency of their occurrence. Here, a method for unbiased quantification of cellular co-localization in the bone marrow is introduced. The protocol describes the sample preparation used to obtain histological sections of whole murine long bones including the bone marrow, as well as the staining protocol and the acquisition of high-resolution images. An analysis workflow spanning from the recognition of hematopoietic and non-hematopoietic cell types in 2-dimensional (2D) bone marrow images to the quantification of the direct contacts between those cells is presented. This also includes a neighborhood analysis, to obtain information about the cellular microenvironment surrounding a certain cell type. In order to evaluate whether co-localization of two cell types is the mere result of random cell positioning or reflects preferential associations between the cells, a simulation tool which is suitable for testing this hypothesis in the case of hematopoietic as well as stromal cells, is used. This approach is not limited to the bone marrow, and can be extended to other tissues to permit reproducible, quantitative analysis of histological data.

Automated Quantification of Hematopoietic Cell &amp;#8211; Stromal Cell Interactions in Histological Images of Undecalcified Bone

A strategy to quantitatively analyze histological data in the bone marrow is presented. Confocal microscopy of fluorescently labeled cells in tissue sections results in 2-dimensional images, which are automatically analyzed. Co-localization analyses of different cell types are compared to data from simulated images, giving quantitative information about cellular interactions.

Hematopoetik Hücre Otomatik Ölçümü - undekalsifiye Kemik histolojik Görüntüler stromal hücre etkileşimleri

Confocal microscopy is the method of choice for the analysis of localization of multiple cell types within complex tissues such as the bone marrow. ...

Gelişim Biyolojisi

Capturing Tissue Repair in Zebrafish Larvae with Time-lapse Brightfield Stereomicroscopy

The zebrafish larval tail fin is ideal for studying tissue regeneration due to the simple architecture of the larval fin-fold, which comprises of two layers of skin that enclose undifferentiated mesenchyme, and because the larval tail fin regenerates rapidly within 2-3 days. Using this system, we demonstrate a method for capturing the repair dynamics of the amputated tail fin with time-lapse video brightfield stereomicroscopy. We demonstrate that fin amputation triggers a contraction of the amputation wound and extrusion of cells around the wound margin, leading to their subsequent clearance. Fin regeneration proceeds from proximal to distal direction after a short delay. In addition, developmental growth of the larva can be observed during all stages. The presented method provides an opportunity for observing and analyzing whole tissue-scale behaviors such as fin development and growth in a simple microscope setting, which is easily adaptable to any stereomicroscope with time-lapse capabilities.

We present a protocol for capturing the dynamics of zebrafish larval tail fin regeneration on a whole-tissue scale using brightfield-based stereomicroscopy. This technique enables capturing the regeneration dynamics with single cell resolution. This methodology can be adapted to any stereomicroscope equipped with a CCD camera and time-lapse software.

Time-lapse aydınlık stereomikroskobi ile Zebra balığı Larva Doku Onarım yakalama

The zebrafish larval tail fin is ideal for studying tissue regeneration due to the simple architecture of the larval fin-fold, which comprises of two ...

Forward Genetic Approach to Uncover Stress Resistance Genes in Mice &#8212; A High-throughput Screen in ES Cells

Phenotype-driven genetic screens in mice is a powerful technique to uncover gene functions, but are often hampered by extremely high costs, which severely limits its potential. We describe here the use of mouse embryonic stem (ES) cells as surrogate cells to screen for a phenotype of interest and subsequently introduce these cells into a host embryo to develop into a living mouse carrying the phenotype. This method provides (1) a cost effective, high-throughput platform for genetic screen in mammalian cells; (2) a rapid way to identify the mutated genes and verify causality; and (3) a short-cut to develop mouse mutants directly from these selected ES cells for whole animal studies. We demonstrated the use of paraquat (PQ) to select resistant mutants and identify mutations that confer oxidative stress resistance. Other stressors or cytotoxic compounds may also be used to screen for resistant mutants to uncover novel genetic determinants of a variety of cellular stress resistance.

Forward Genetic Approach to Uncover Stress Resistance Genes in Mice &amp;#8212; A High-throughput Screen in ES Cells

Stress resistance is one of the hallmarks for longevity and is known to be genetically governed. Here, we developed an unbiased high-throughput method to screen for mutations that confer stress resistance in ES cells with which to develop mouse models for longevity studies.

İleri Genetik Yaklaşım Farelerde Stres Direnci Genler ortaya çıkarmak için - ES Hücrelerde bir Yüksek verim Ekranı

Phenotype-driven genetic screens in mice is a powerful technique to uncover gene functions, but are often hampered by extremely high costs, which severely ...

Generation of Genetically Modified Organotypic Skin Cultures Using Devitalized Human Dermis

Organotypic cultures allow the reconstitution of a 3D environment critical for cell-cell contact and cell-matrix interactions which mimics the function and physiology of their in vivo tissue counterparts. This is exemplified by organotypic skin cultures which faithfully recapitulates the epidermal differentiation and stratification program. Primary human epidermal keratinocytes are genetically manipulable through retroviruses where genes can be easily overexpressed or knocked down. These genetically modified keratinocytes can then be used to regenerate human epidermis in organotypic skin cultures providing a powerful model to study genetic pathways impacting epidermal growth, differentiation, and disease progression. The protocols presented here describe methods to prepare devitalized human dermis as well as to genetically manipulate primary human keratinocytes in order to generate organotypic skin cultures. Regenerated human skin can be used in downstream applications such as gene expression profiling, immunostaining, and chromatin immunoprecipitations followed by high throughput sequencing. Thus, generation of these genetically modified organotypic skin cultures will allow the determination of genes that are critical for maintaining skin homeostasis.

The goal of this paper is to provide a comprehensive and detailed protocol on how to generate genetically modified human organotypic skin from epidermal keratinocytes and devitalized human dermis.

Güçsüz İnsan dermis kullanma Genetiği Değiştirilmiş Organotipik Cilt Kültürlerin Üretimi

Organotypic cultures allow the reconstitution of a 3D environment critical for cell-cell contact and cell-matrix interactions which mimics the function ...

Microinjection for Transgenesis and Genome Editing in Threespine Sticklebacks

The threespine stickleback fish has emerged as a powerful system to study the genetic basis of a wide variety of morphological, physiological, and behavioral phenotypes. The remarkably diverse phenotypes that have evolved as marine populations adapt to countless freshwater environments, combined with the ability to cross marine and freshwater forms, provide a rare vertebrate system in which genetics can be used to map genomic regions controlling evolved traits. Excellent genomic resources are now available, facilitating molecular genetic dissection of evolved changes. While mapping experiments generate lists of interesting candidate genes, functional genetic manipulations are required to test the roles of these genes. Gene regulation can be studied with transgenic reporter plasmids and BACs integrated into the genome using the Tol2 transposase system. Functions of specific candidate genes and cis-regulatory elements can be assessed by inducing targeted mutations with TALEN and CRISPR/Cas9 genome editing reagents. All methods require introducing nucleic acids into fertilized one-cell stickleback embryos, a task made challenging by the thick chorion of stickleback embryos and the relatively small and thin blastomere. Here, a detailed protocol for microinjection of nucleic acids into stickleback embryos is described for transgenic and genome editing applications to study gene expression and function, as well as techniques to assess the success of transgenesis and recover stable lines.

Transgenic manipulations and genome editing are critical for functionally testing the roles of genes and cis-regulatory elements. Here a detailed microinjection protocol for the generation of genomic modifications (including Tol2-mediated fluorescent reporter transgene constructs, TALENs, and CRISPRs) is presented for the emergent model fish, the threespine stickleback.

Threespine Sticklebacks içinde Transgenesis ve Genom Kurgu Mikroenjeksiyon

The threespine stickleback fish has emerged as a powerful system to study the genetic basis of a wide variety of morphological, physiological, and ...

Modified MicroSecure Vitrification: A Safe, Simple and Highly Effective Cryopreservation Procedure for Human Blastocysts

Clinical embryo vitrification evolved with the development of unique vitrification devices in the 21st century and with the misconception that ultra-rapid cooling in an &#34;open&#34; system (i.e., direct LN2 contact) was a necessity to optimize vitrification success. The dogma surrounding the importance of cooling rates led to unsafe practices subject to technical variation and to the creation of vitrification devices that disregarded important quality-control factors (e.g., ease of use, repeatability, reliability, labeling security, and storage safety). Understanding the quality-control flaws of other devices allowed for the development of a safe, secure, repeatable, and reliable &#181;S-VTF method aimed to minimize intra- and inter-technician variation. Equally important, it combined the availability of two existing FDA-compliant devices: 1) a 0.3-mL ionomeric resin embryo straw with internalized, dual-colored, tamper-proof labeling with repeatable weld seal potential; and 2) shortened, commonly-used, 300-&#181;m ID sterile flexipettes to directly load the embryo(s) in order to create a highly-effective global vitrification device. Like other aseptic, closed vitrification systems (e.g., High Security Vitrification (HSV), Rapid-i, and VitriSafe) effectively used in reproductive medicine, microSecure Vitrification (&#181;S-VTF) has proven that it can achieve high post-warming survival and pregnancy outcomes with its attention to simplicity, and reduced technical variation. Although the 0.3-mL embryo straw containing an internal hydrophobic plug was commercially replaced with a standard semen straw possessing cotton-polyvinyl pyrrolidone (PVP) plugs, it maintained its ionomeric resin composition to ensure weld sealing. However, the cotton plugs can wick out the fluid-embryo contents of the flexipettes upon contact. A modified &#181;S-VTF method was adapted to include an additional internal weld seal before the plug on the device loading side. The added technical step to the &#181;S-VTF procedure has not affected its successful application, as high survival rates (&#62; 95%) and pregnancy rates continue today.

MicroSecure Vitrification was developed as a non-commercial, aseptic closed vitrification device system that is compliant with FDA good manufacturing and tissue-handling practices. Due to the withdrawal of hydrophobic plugged embryo straws from the industry, the vitrification procedure was modified to include an inner seal before the standard internal cotton plug.

Modifiye MicroSecure Vitrifikasyon: İnsan Blastosistlerinin A, Güvenli Basit ve Etkili Kryoprezervasyon Prosedürü

Clinical embryo vitrification evolved with the development of unique vitrification devices in the 21st century and with the misconception that ultra-rapid ...

Generation of Genetically Modified Mice through the Microinjection of Oocytes

The use of genetically modified mice has significantly contributed to studies on both physiological and pathological in vivo processes. The pronuclear injection of DNA expression constructs into fertilized oocytes remains the most commonly used technique to generate transgenic mice for overexpression. With the introduction of CRISPR technology for gene targeting, pronuclear injection into fertilized oocytes has been extended to the generation of both knockout and knockin mice. This work describes the preparation of DNA for injection and the generation of CRISPR guides for gene targeting, with a particular emphasis on quality control. The genotyping procedures required for the identification of potential founders are critical. Innovative genotyping strategies that take advantage of the "multiplexing" capabilities of CRISPR are presented herein. Surgical procedures are also outlined. Together, the steps of the protocol will allow for the generation of genetically modified mice and for the subsequent establishment of mouse colonies for a plethora of research fields, including immunology, neuroscience, cancer, physiology, development, and others.

The microinjection of mouse oocytes is commonly used for both classic transgenesis (i.e., the random integration of transgenes) and CRISPR-mediated gene targeting. This protocol reviews the latest developments in microinjection, with a particular emphasis on quality control and genotyping strategies.

Oositlerin Mikroenjeksiyonu ile Genetiği Değiştirilmiş Farelerin Üretilmesi

The use of genetically modified mice has significantly contributed to studies on both physiological and pathological in vivo processes. The pronuclear ...

Genetic Engineering of Primary Mouse Intestinal Organoids Using Magnetic Nanoparticle Transduction Viral Vectors for Frozen Sectioning

Intestinal organoid cultures provide a unique opportunity to investigate intestinal stem cell and crypt biology in vitro, although efficient approaches to manipulate gene expression in organoids have made limited progress in this arena. While CRISPR/Cas9 technology allows for precise genome editing of cells for organoid generation, this strategy requires extensive selection and screening by sequence analysis, which is both time-consuming and costly. Here, we provide a detailed protocol for efficient viral transduction of intestinal organoids. This approach is rapid and highly efficient, thus decreasing the time and expense inherent in CRISPR/Cas9 technology. We also present a protocol to generate frozen sections from intact organoid cultures for further analysis with immunohistochemical or immunofluorescent staining, which can be used to confirm gene expression or silencing. After successful transduction of viral vectors for gene expression or silencing is achieved, intestinal stem cell and crypt function can be rapidly assessed. Although most organoid studies employ in vitro assays, organoids can also be delivered to mice for in vivo functional analyses. Moreover, our approaches are advantageous for predicting therapeutic responses to drugs because currently available therapies generally function by modulating gene expression or protein function rather than altering the genome.

We describe step-by-step instructions to: 1) efficiently engineer intestinal organoids using magnetic nanoparticles for lenti- or retroviral transduction, and, 2) generate frozen sections from engineered organoids. This approach provides a powerful tool to efficiently alter gene expression in organoids for investigation of downstream effects.

Primer fare bağırsak Organoidlerin genetik mühendisliği dondurulmuş bölümleme için Manyetik Nano madde dönüştürücü viral vektörler kullanma

Intestinal organoid cultures provide a unique opportunity to investigate intestinal stem cell and crypt biology in vitro, although efficient approaches to ...

Visualizing the Node and Notochordal Plate In Gastrulating Mouse Embryos Using Scanning Electron Microscopy and Whole Mount Immunofluorescence

The post-implantation mouse embryo undergoes major shape changes after the initiation of gastrulation and morphogenesis. A hallmark of morphogenesis is the formation of the transient organizers, the node and notochordal plate, from cells that have passed through the primitive streak. The proper formation of these signaling centers is essential for the development of the body plan and techniques to visualize them are of high interest to mouse developmental biologists. The node and notochordal plate lie on the ventral surface of gastrulating mouse embryos around embryonic day (E) 7.5 of development. The node is a cup-shaped structure whose cells possess a single slender cilium each. The proper subcellular localization and rotation of the cilia in the node pit determines left-right asymmetry. The notochordal plate cells also possess single cilia albeit shorter than those of the node cells. The notochordal plate forms the notochord which acts as an important signaling organizer for somitogenesis and neural patterning. Because the cells of the node and notochordal plate are transiently present on the surface and possess cilia, they can be visualized using scanning electron microscopy (SEM). Among other techniques used to visualize these structures at the cellular level is whole mount immunofluorescence (WMIF) using the antibodies against the proteins that are highly expressed in the node and notochordal plate. In this report, we describe our optimized protocols to perform SEM and WMIF of the node and notochordal plate in developing mouse embryos to help in the assessment of tissue shape and cellular organization in wild-type and gastrulation mutant embryos.

The node and notochordal plate are transient signaling organizers in developing mouse embryos that can be visualized using several techniques. Here, we describe in detail how to perform two of the techniques to study their structure and morphogenesis: 1) scanning electron microscopy (SEM); and 2) whole mount immunofluorescence (WMIF).

Düğüm ve Notochordal plaka Gastrulating fare embriyo Tarama elektron mikroskobu ve bütün Dağı ayirt kullanarak görselleştirme

The post-implantation mouse embryo undergoes major shape changes after the initiation of gastrulation and morphogenesis. A hallmark of morphogenesis is ...

Studying Oxidative Stress Caused by the Mitis Group Streptococci in Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans (C. elegans), a free-living nematode, has emerged as an attractive model to study host-pathogen interactions. The presented protocol uses this model to determine the pathogenicity caused by the mitis group streptococci via the production of H2O2. The mitis group streptococci are an emerging threat that cause many human diseases such as bacteremia, endocarditis, and orbital cellulitis. Described here is a protocol to determine the survival of these worms in response to H2O2 produced by this group of pathogens. Using the gene skn-1 encoding for an oxidative stress response transcription factor, it is shown that this model is important for identifying host genes that are essential against streptococcal infection. Furthermore, it is shown that activation of the oxidative stress response can be monitored in the presence of these pathogens using a transgenic reporter worm strain, in which SKN-1 is fused to green fluorescent protein (GFP). These assays provide the opportunity to study the oxidative stress response to H2O2 derived by a biological source as opposed to exogenously added reactive oxygen species (ROS) sources.

Studying Oxidative Stress Caused by the Mitis Group Streptococci in Caenorhabditis elegans

The nematode Caenorhabditis elegans is an excellent model to dissect host-pathogen interactions. Described here is a protocol to infect the worm with members of the mitis group streptococci and determine activation of the oxidative stress response against H2O2 produced by this group of organisms.