Name: a murine model of vertical sleeve gastrectomy
Uploaded: 2017-12-18T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 47 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy at JoVE.com

Bu araştırma tarafından NIH/ncı R21CA195002-01A1, Başkan'ın Konsey Cornell kadınlar ve SUNY lisansüstü çeşitlilik bursu desteklenmiştir. Cornell karşılaştırmalı kanser Biyoloji eğitim programı ve Eli Lilly ve şirket üzerinden proje döneminde finansman doktor Cummings laboratuvar da aldı.

Tüm deneysel protokoller Cornell Üniversitesi Kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi tarafından onaylanmış olması.
1. cerrahi öncesi hazırlık
Not: Çalışma fareler genellikle hızle insan obezite ve insülin direnci ile ilgili çalışmalar yapmak C57BL diyet kaynaklı obez arka plan üzerinde değildir. Erkek ve dişi fareler Sonraki adımlarda açıklandığı gibi okudu.
<ol>
	<li>2 ay bir yaşta, fareler üzerinde %45 veya % 60'ı yüksek yağlı diyet 2 ay ( Tablo malzemelerigörmek) yerleştirin. Not: Bir obez ve insüline dirençli fenotip oluşturmak için yüksek yağlı diyet fareler beslenir. Yüksek yağlı diyet beslenme daha kısa veya daha uzun süre çalışma hedeflerine bağlı olarak kullanılabilir.</li>
	<li>Fareler beslemeye devam ad libitum ameliyat kadar. Yüksek yağ 7 hafta beslenme diyet sonra temel ölçü birimlerinin, gerekiyorsa, fareler 6 h için hızlı veya bir gecede ve metabolitleri ilginç (e.g., glikoz) ölçüm için bir temel kan örneği alalım.</li>
	<li>Fareler üzerinde yüksek yağlı diyet ve fareler bir hafta sonra kan toplama sham cerrahi veya VSG önce kurtarmak için izin devam ediyor. Bir sıvı üzerinde fare yerleştirin (bkz. Tablo reçetesi) ameliyattan önce 4 gün için diyet. Not: Fareler daha önce ve Partiküler madde şifa yanıt bozabilen sindirim sistemi temizlemek için ameliyat sonrası sıvı diyet sürdürülür.</li>
	<li>Ameliyat öncesi aşağıdaki öğeleri sterilize: folyo, gazlı bez, pamuk uygulayıcıları (CTAs) ve cerrahi aletler (tırtıklı hemostat, makas, Iris makas, dumont forcep, faaliyet Brown-Adson forcep, sonda ile besleme iğne, microneedle sürücü, Bahar makas uçlu ).</li>
</ol>
2. dikey kol gastrektomi ve Sham yordamları
<ol>
	<li>Ameliyat günü temel ağırlık ölçü elde etmek için fareler tartın.</li>
	<li>Cerrahi Oda bir anestezi sistemi, ısıtmalı su banyosu ve Isıtma yastığı ile donatmak. Su banyosu 37 ° C için ayarla ve sulama için % 0,9 serum fizyolojik çözüm ısıtmak için kullanabilirsiniz. Cerrahi alan % 70 etanol ile temiz ve steril tekniği autoclaved cerrahi paketi ve araçları açmak için kullanın. Not: Isıtma yastığını hayvan cerrahi ve anestezi kurtarma sırasında sıcak tutmak için kullanılır.</li>
	<li>Bir indüksiyon odası kullanarak, fare ile %5 isoflurane ve O2 debisi 1 L/dak anestezi uygun düzlemde bir ayak çimdik gerçekleştirerek faredir Onayla anestezi. Bir kez elde tutarlı bir uçak anestezi fare % 1-3 isoflurane ve 0.6 L/dak bir O2 debisi ile koruyun.</li>
	<li>Fare anestezi kez göz merhem yerleştirin (bkz. tablo reçetesi) ameliyat sırasında nemli tutmak için gözleri onun üzerinde. Şu anda da Meloksikam gibi bir analjezik yönetmek (2 mg/kg subkutan). Göbeğini saç cilt nazikçe gerginlik sağlamak için basılı aksilla için küçük.
	<ol>
		<li>Fare cilt ince ve hassas olarak, deri lezyonları ne zaman saç kırpma değil neden için özen gösterin. Povidone-iyot ve alkol ile cildinizi temizleyin.</li>
		<li>Steril eldiven don ve steril cerrahi alan ve aletleri hazırlayın. Steril tekniği kullanarak yordamın geri kalanını gerçekleştirmek. Steril cerrahi alan fare her iki tarafında steril cerrahi perdeler koyarak hazırlamak. Autoclaved kalay folyo fare için bir cerrahi örtüsü oluşturmak için kullanın.</li>
		<li>Folyo fare karın erişmesine izin vermek için küçük bir delik.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Bir kesik deri orta karından (göbek) bir Iris makas kullanarak xiphoid kıkırdak seviyeye olun. Linea Alba ve kullanım Iris beden duvarı boyunca linea kesmek için makas tanımlamak alba. CTAs yavaşça mide karın dışarı yükseltmek ve açık açık kapalı mide daha fazla eğrilik büyük Omentumun incelemek için kullanın.</li>
	<li>Mide fundus ve dalak arasında 7-0 monofilament absorbe dikiş kullanarak iki bitişik harfler yerleştirerek çalışır kısa Gastrik arter ligate. İki bitişik harfler arasında kesmek için Bahar makas kullanın. Tam olarak bir kez atardamarı kesmiş, mide karın boşluğu üzerinden exteriorize. Mide ve ıslak doku nemli tutmak için serum fizyolojik ile altında gazlı bez koyun.</li>
	<li>Sham yordamı
	<ol>
		<li>Sham yordamı için 6-0 monofilament absorbe dikiş konik bir iğneyle kullanarak dikiş gevşek bir basit sürekli desen yerleştirin. Yemek borusu (cerrah'ın sağ) sağında 2 mm başlar. Ventral Gastrik duvar boyunca dikiş hattı yerleştirin ve dorsal mide duvarı boyunca devam edin. Not: tüm mide manipülasyonlar için enfeksiyon riskini azaltmak için yalnızca monofilament absorbe dikiş kullanın. Ayrıca, tüm mide manipülasyonlar için konik bir iğne ile sadece dikiş kullanın kullanım kesim iğne dikiş "çekme-Gastrik doku hasarı için önde gelen ve yırtılması yara yoluyla" riskini artırır.</li>
		<li>Tamamen bir mide duvarına doğru iğne dikiş yerleştirerek süre ver. Dikişi düz yalan ama mide kısıtlama değil emin olun. Yavaşça 3-4 atış kullanarak dikiş kravat ve 2,9 adıma atlayın.</li>
		<li>VSG yordam için atlamak adım 2.7 ve 2.8 adımla devam edin.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>VSG yordamı
	<ol>
		<li>VSG yordamı için önemli dalları Gastrik arter ve ven ile 7-0 3 kullanarak konik iğneyle monofilament absorbe dikiş için her düğüm atar ligate. Hemen altında (Yani, doğru mide daha az eğriliği) bitişik harfler transeksiyon amaçlanan satırı koyun. Not: Transeksiyon amaçlanan satırı kardiyak çentiği kadınlarda mide ve margo pilcatus altında en az 2 mm ~ 2 mm yukarıda (mide daha fazla eğrilik doğru anlamına gelir) başlar ve proksimal pankreas sağ LOB sonuna kadar uzanır. Genellikle, tane gerek mide duvar başına 4 damarları vardır; Ancak, bu fareler arasında değişebilir.</li>
		<li>Gastrektomi sırasında mide içeriğinin dökülmeyi önlemek için hemen altında transeksiyon konik bir iğne ile 6-0 monofilament absorbe dikiş kullanarak hedeflenen hattının her iki mide duvarların üzerinden geçen dikiş sürekli satırlık basit bir yer. Cerrahın sağ yemek borusu ve margo pilcatus ve bitiş hemen üstünde pankreas aşağıda dikiş hattına başlar.</li>
		<li>İnce uçlu hemostats dikiş çizgisinin üstündeki ve dikiş hattı ve hemostats arasında kesmek için Bahar makas kullanın. Transected mide doku steril cerrahi alandan kaldırın.</li></ol></li></ol>CTAs kan ve mide kapalı fermentasyonda temizlemek için kullanın.
		<li>6-0 monofilament absorbe dikiş kullanarak basit bir kesintili desen kullanarak konik bir iğneyle mide duvarlarının appozisyon güçlendirmek. Not: Bu daha basit sürekli dikiş desen daha güvenli kapatma sağladığı basit kesintili dikiş desen önerilir.</li>
		<li>Doku nemli ve temiz tutmak için prosedür boyunca serum fizyolojik ile Gastrik kalıntısı floş. Serum fizyolojik ile Gastrik lavaj gerçekleştirmek için 20 mL şırınga bağlı 20 G sonda ile besleme iğne kullanın. Bu boyutu yeterli basınç aşırı basınç Gastrik doku hasarı veya kaza sonucu mide doku hasarı düzenli sivri iğne kullanımı üzerinden riske atmadan sağlanan emin olmak için kullanın.</li>
		<li>20 deniz mili en az güvenli bir şekilde mide kapatmak için kullanın; Bu yan erişmek daha zor olduğunu ve bu nedenle sık sık bir yırtılması sitedir kapatma özofagus kenarındaki dikkat.</li>
		<li>Yavaşça mide CTAs ile basarak hiçbir sızıntı olduğundan emin olun. Sızıntı tespit varsa ek basit kesintili knot sızıntı alanlar üzerinde yerleştirebilir ve test tekrar kaçak. Hiçbir sızıntı tespit kadar kaçak testi.</li>
		<li>Son kapsamlı lavaj enfeksiyöz partikül olursa olsun geride bırakıldı olduğunu emin olmak için en az 60 mL serum kullanarak mide yapmak.</li>
	
	
	<li>Mide karın boşluğu bir CTA kullanarak karaciğer altında geri yerleştirin. CTAs tüm aşırı sıvı emmek için karın boşluğu dorsal yönünü yerleştirin. Künt 18 G iğne kullanarak, lactated zil'ın çözüm (IRS) veya antibiyotik (0.5 mL IRS +/-20 mg/kg Enrofloksasin) olmadan hemen önce kapatılması karın boşluğu içine doğrudan enjekte et. Not: Bu sıvı kaybı ameliyat sırasında deneyimli yerini alır ve kurtarma ile yardımcı olmak doğrudan uygulamaya antibiyotik cerrahi sitesi için bir yöntem sağlar.</li>
	<li>Basit bir iş öğelerinin sürekli olmayan desen konik bir iğne ile 6-0 monofilament absorbe dikiş kullanarak karın kas katman kapatın. 6-0 monofilament absorbe dikiş basit sürekli desen cilt katmanıyla kapatın.</li>
	<li>Doku yapıştırıcı deri üzerine yerleştirin ve cilt böylece fare yara kapatma post-operatively bozmak değil dikişi gömmek için dikiş hattı üzerinden katlayın.</li>
	<li>İsoflurane devre dışı bırakmak ve eve onun kafes dönen 10-15 minbefore için Isıtma yastığını kurtarmak fare izin. Kendine geldi ve taşımak mümkün kadar hayvan başıboş bırakmayın.</li>
	<li>Tek başına ameliyat tamamen iyileşti kadar yer alan hayvan tutmak. Not: Eğer doğru gıda alımı ölçüleri çalışma elde edilecek, fareler tek başına çalışma muhafaza devam etmelidir. Yabancı cisim tıkanıklığı eve kafes yatak yeme riski vardır. Hayvanlar özgür malzeme zenginleştirme sağlamak için iç içe geçmiş dışında yatak takımları kafeslerde muhafaza (bkz. Tablo malzeme).</li>

3. ameliyat sonrası fare bakım ve ölçümler
<ol>
	<li>Fare için ev onun kafes dönmek ve kafes Isıtma yastığını yerleştirin. En az 7 gün ameliyat sonrası sıvı diyet fareler korumak. Meloksikam gibi bir analjezik yönetmek (2 mg/kg subkutan), ameliyat sonrası 2 gün. Not: Ameliyat sonrası 7 güne kadar Enrofloksasin (20 mg/kg), gibi bir antibiyotik verilebilir. Antibiyotikler cerrahi işlem enfeksiyon riskini en aza indirmek için verilir ve olabilir veya yordam tutulan kısırlık düzeyine bağlı olarak gerekli olmayabilir. Antibiyotik kullanılması halinde, ancak, onlar tutarlılığı korumak için aynı çalışmada bütün farelere yönetilmesi gerekir.</li>
	<li>Ameliyat sonrası dönemde vücut ağırlığı, gıda alımı, dışkılama, aktivite düzeyi ve uygun şifa ve kurtarma sağlamak için en az günlük eğilim değerlendirmek. Ameliyattan sonra 14 gün boyunca ameliyat sonrası izleme kuralları. Not: Cerrahi başarısızlık genellikle ameliyattan hemen sonra ya da üç gün sonrası içinde çimentosu görülür. Yemek veya ameliyat sonrası ikinci gününde içme hayvanlar için cerrahi komplikasyonlar yakından izlenmesi gerekir.</li>
	<li>Ameliyat sonrası dönemi başarıyla tamamlayan, vücut ağırlığı ve gıda alımı uygun fenotip bakım sağlamak için düzenli olarak çalışma boyunca ölçmek.</li>
	<li>Glikoz toleransı, glikoz uyarılmış insülin salgılanması değerlendirmek için bir oral glukoz tolerans testi (OGTT) gerçekleştirmek ve hormon salgısı delik deşik.
	<ol>
		<li>OGTT farelerde oruç sonra gerçekleştirmek 6 h ve sonra % 50 dekstroz çözüm 1 g/kg doz, ile sonda ile besleme fareler için bunları.</li>
		<li>Kuyruk kan örnekleri 0, 2.5, 5, 15, 30, 60 ve 120 dakika sonra sonda ile besleme toplamak. Bu zaman noktalarda bir şeker ölçüm ile kan glukoz ölçümü. Serum numuneleri, insülin ve GLP-1 gibi çeşitli hormonların ölçümü için her zaman bir noktada toplamak.</li>
		<li>Hızlı fare ötenazi önce 6 h için. Son kan örneği ve glikoz ölçüm al. Temel ölçüm için son glikoz ölçüm karşılaştırın. Mayi Fentobarbital 200 mg/kg doz, enjeksiyonu ile fareler ötenazi.</li>
		<li>Temel ve son serum numuneleri ek analitler ölçmek ve öncesi ve ameliyat sonrası cerrahi değerleri karşılaştırmak için kullanın.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol>
	<li>Buchwald, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bariatric+surgery:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Bariatric surgery: a systematic review and meta-analysis.</a> JAMA. 292 (14), 1724-1737 (2004).</li><li>Wadden, T. A., Butryn, M. L., Byrne, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+lifestyle+modification+for+long-term+weight+control.">Efficacy of lifestyle modification for long-term weight control.</a> Obes Res. 12, 151s-162s (2004).</li><li>Yanovski, S. Z., Yanovski, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obesity.">Obesity.</a> N Engl J Med. 346 (8), 591-602 (2002).</li><li>Abbatini, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+effects+of+laparoscopic+sleeve+gastrectomy,+gastric+bypass,+and+adjustable+gastric+banding+on+type+2+diabetes.">Long-term effects of laparoscopic sleeve gastrectomy, gastric bypass, and adjustable gastric banding on type 2 diabetes.</a> Surg Endosc. 24 (5), 1005-1010 (2010).</li><li>Sjostrom, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+bariatric+surgery+on+mortality+in+Swedish+obese+subjects.">Effects of bariatric surgery on mortality in Swedish obese subjects.</a> N Engl J Med. 357 (8), 741-752 (2007).</li><li>Adams, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+incidence+and+mortality+after+gastric+bypass+surgery.">Cancer incidence and mortality after gastric bypass surgery.</a> Obesity (Silver Spring). 17 (4), 796-802 (2009).</li><li>Vest, A. R., Heneghan, H. M., Schauer, P. R., Young, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+management+of+obesity+and+the+relationship+to+cardiovascular+disease.">Surgical management of obesity and the relationship to cardiovascular disease.</a> Circulation. 127 (8), 945-959 (2013).</li><li>Ahmed, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laparoscopic+Roux-en-Y+gastric+bypass+and+its+early+effect+on+blood+pressure.">Laparoscopic Roux-en-Y gastric bypass and its early effect on blood pressure.</a> Obes Surg. 19 (7), 845-849 (2009).</li><li>Pories, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Who+would+have+thought+it?+An+operation+proves+to+be+the+most+effective+therapy+for+adult-onset+diabetes+mellitus.">Who would have thought it? An operation proves to be the most effective therapy for adult-onset diabetes mellitus.</a> Ann Surg. 222 (3), 339-350 (1995).</li><li>Garibay, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=beta-Cell+Glucagon-Like+Peptide-1+Receptor+Contributes+to+Improved+Glucose+Tolerance+After+Vertical+Sleeve+Gastrectomy.">beta-Cell Glucagon-Like Peptide-1 Receptor Contributes to Improved Glucose Tolerance After Vertical Sleeve Gastrectomy.</a> Endocrinology. 157 (9), 3405-3409 (2016).</li><li>McGavigan, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGR5+contributes+to+glucoregulatory+improvements+after+vertical+sleeve+gastrectomy+in+mice.">TGR5 contributes to glucoregulatory improvements after vertical sleeve gastrectomy in mice.</a> Gut. 66 (2), 226-234 (2017).</li><li>McGavigan, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical+sleeve+gastrectomy+reduces+blood+pressure+and+hypothalamic+endoplasmic+reticulum+stress+in+mice.">Vertical sleeve gastrectomy reduces blood pressure and hypothalamic endoplasmic reticulum stress in mice.</a> Dis Model Mech. 10 (3), 235-243 (2017).</li><li>Esteban Varela, J., Nguyen, N. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laparoscopic+sleeve+gastrectomy+leads+the+U.S.+utilization+of+bariatric+surgery+at+academic+medical+centers.">Laparoscopic sleeve gastrectomy leads the U.S. utilization of bariatric surgery at academic medical centers.</a> Surg Obes Relat Dis. 11 (5), 987-990 (2015).</li><li>Laferrere, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+weight+loss+by+gastric+bypass+surgery+versus+hypocaloric+diet+on+glucose+and+incretin+levels+in+patients+with+type+2+diabetes.">Effect of weight loss by gastric bypass surgery versus hypocaloric diet on glucose and incretin levels in patients with type 2 diabetes.</a> J Clin Endocrinol Metab. 93 (7), 2479-2485 (2008).</li><li>Adams, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Health+benefits+of+gastric+bypass+surgery+after+6+years.">Health benefits of gastric bypass surgery after 6 years.</a> Jama. 308 (11), 1122-1131 (2012).</li><li>McGavigan, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGR5+contributes+to+glucoregulatory+improvements+after+vertical+sleeve+gastrectomy+in+mice.">TGR5 contributes to glucoregulatory improvements after vertical sleeve gastrectomy in mice.</a> Gut. , (2015).</li><li>Peterli, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+in+glucose+metabolism+after+bariatric+surgery:+comparison+of+laparoscopic+Roux-en-Y+gastric+bypass+and+laparoscopic+sleeve+gastrectomy:+a+prospective+randomized+trial.">Improvement in glucose metabolism after bariatric surgery: comparison of laparoscopic Roux-en-Y gastric bypass and laparoscopic sleeve gastrectomy: a prospective randomized trial.</a> Ann Surg. 250 (2), 234-241 (2009).</li><li>Ryan, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FXR+is+a+molecular+target+for+the+effects+of+vertical+sleeve+gastrectomy.">FXR is a molecular target for the effects of vertical sleeve gastrectomy.</a> Nature. 509 (7499), 183-188 (2014).</li><li>Wilson-Perez, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical+sleeve+gastrectomy+is+effective+in+two+genetic+mouse+models+of+glucagon-like+Peptide+1+receptor+deficiency.">Vertical sleeve gastrectomy is effective in two genetic mouse models of glucagon-like Peptide 1 receptor deficiency.</a> Diabetes. 62 (7), 2380-2385 (2013).</li><li>Pressler, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical+sleeve+gastrectomy+restores+glucose+homeostasis+in+apolipoprotein+A-IV+KO+mice.">Vertical sleeve gastrectomy restores glucose homeostasis in apolipoprotein A-IV KO mice.</a> Diabetes. 64 (2), 498-507 (2015).</li></ol>

Doktor Cummings Eli Lilly ve şirket fon aldı dışında hiçbir çıkar çatışmaları, yazarlar bildirin.

Bariatrik cerrahi en etkili uzun vadeli tedavi için obezite ve tip 2 diyabet ve hipertansiyon remisyon1,9,15yüksek oranda gibi diğer sağlık yararları sonuçları. Bariatrik cerrahinin fare modelleri ile hangi neden olan tarafından bariatrik cerrahi hızlı ve belirgin iyileştirmeler obezite comorbidities mekanizmaları tanımlamak güçlü bir araç sağlar. Ayrıca, bariatrik cerrahinin fare modelleri tarafından çeşi...

Obezite salgın dünya çapında büyümeye devam ediyor bariatrik cerrahi olarak obezite1için en etkili uzun vadeli tedavi popülerlik kazanmıştır. Ne yazık ki, kilo kaybı diyet ve egzersiz tarafından elde etmek zor ve görece etkisiz üzerinde uzun vadeli2,3' tür. Dikey kol gastrektomi (VSG), gibi bariatrik cerrahi kilo kaybı1,4amacıyla gastrointestinal sistem manipülasyon olarak tanımlanır. Bariatrik cerrahi kilo kaybı bariatrik cerrahinin önemli bir sonucu olsa da, obezite comorbidities geliştirmek ve ömrü5genişletme gibi diğer sağlık yararları sağlar. Örneğin, tip 2 diyabet ve hipertansiyon ve kanser1,6,7' nin belirli türlerdeki gelişiminin ömür boyu risk düşüşler remisyon yüksek oranda bariatrik cerrahi sonuçlanır. Belirtmek gerekirse etkisi bariatrik cerrahinin remisyon, tip 2 diyabet ve hipertansiyon neden sık sık kısa bir süre sonra ameliyat ve ağırlık kaybı8,9önce görülmektedir. Bu mekanizmaları ameliyattan sonra gözlenen sağlık yararları katkıda vücut ağırlığının bağımsız kavramı vurgular. Bariatrik cerrahinin hayvan modelleri geliştirilmiştir ve bu sağlık yararları10,11,12gerçekleştiği tarafından mekanizmaları incelemek için kullanılmaktadır.
Biz hangi tarafından obezite comorbidities tip 2 diyabet, hipertansiyon ve kolorektal kanser10 gibi bariatrik cerrahi geliştirir mekanizmaları incelemek için birçok genetik olarak değiştirilmiş fare modeli uygulanan VSG bir fare modeli doğrulanmış , 11 , 12. kemirgen modelleri daha deneysel kontrol ve yeteneği belirli genlere rolünün veya ilgi sinyal yolları tanımlamak için genetik veya ilaç işleme gerçekleştirmek için izin verir. Amerika Birleşik Devletleri13klinikte en sık gerçekleştirilen bariatrik yordamda VSG olduğu için öncelikle VSG üzerinde duruluyor. Ayrıca, VSG Roux-en-Y Gastrik bypass ya da biliopancreatic saptırma gibi diğer yordamlara göre daha az anatomik değişiklikler ile basit bir cerrahi modeli var.
VSG bizim fare modeli aşağıdaki efektleri insanlarda gözlenen bariatrik cerrahinin recapitulates: kilo kaybı, düşük gıda alımı, geliştirilmiş glikoz yönetmelik, sonrası prandial glukagon benzeri peptid-1 (GLP-1) salgılanması artar, geliştirilmiş adacık işlevi arteryel kan basıncı ve artan dolaşımdaki safra asidi konsantrasyonlarının10,11,12,13,14,15azalttı. Bu nedenle, bu VSG artırır veya obezite comorbidities giderir vücut ağırlığı bağımlı ve bağımsız mekanizmaları incelemek için ideal bir modeldir. Buna ek olarak, VSG etkisi daha fazla mekanik kavrama12ile çeşitli hastalık koşullarda incelenmesi için izin diğer cerrahi işlemler ile birlikte güvenilir bir model olduğunu.

<table><tbody><tr><td>45% high fat diet</td><td>Research Diets</td><td>D12451</td><td></td></tr><tr><td>60% high fat diet</td><td>Research Diets</td><td>D12492</td><td></td></tr><tr><td>Boost</td><td>Nestle</td><td>160-67538</td><td>rich chocolate flavor</td></tr><tr><td>6-0 Suture</td><td>Ethicon</td><td>Z432</td><td>monofilament absorbable/taper</td></tr><tr><td>7-0 Suture</td><td>Covidien</td><td>8866127-01</td><td>monofilament absorbable/taper</td></tr><tr><td>Cotton Swabs</td><td>Fisherbrand</td><td>23-400-118</td><td>small</td></tr><tr><td>Cotton Swabs</td><td>Fisherbrand</td><td>233-400-101</td><td>large</td></tr><tr><td>Gauze</td><td>Various</td><td></td><td>4x4 4 ply and 2x2 4 ply</td></tr><tr><td>Foil</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Surgery drape</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>0.9% saline solution</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>LRS</td><td>Hospira</td><td>170RX</td><td></td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alcohol</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Eye Ointment</td><td>Paralube&amp;reg; Vet Ointment</td><td>17033-211-38</td><td></td></tr><tr><td>Tissue Adhesive</td><td>Vetbond</td><td>1469SB</td><td></td></tr><tr><td>Meloxicam (Metacam)</td><td>Boehringer Ingelheim</td><td>141-213</td><td>5 mg/ml</td></tr><tr><td>Enrofloxacin</td><td>Baytril</td><td>08713254-186599</td><td>22.7 mg/ml</td></tr><tr><td>Thin tipped hemostats</td><td>Fine Science Tools</td><td>13021-12</td><td></td></tr><tr><td>Metzenbaum Scissor</td><td>Fine Science Tools</td><td>14018-18</td><td></td></tr><tr><td>Iris Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>14058-09</td><td></td></tr><tr><td>Dumont Forcep</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-20</td><td></td></tr><tr><td>Serrated Forcep</td><td>Fine Science Tools</td><td>11020-12</td><td></td></tr><tr><td>Gavage needle</td><td>Fine Science Tools</td><td>18060-20</td><td></td></tr><tr><td>Microneedle driver</td><td>Fine Science Tools</td><td>12075-14</td><td></td></tr><tr><td>Spring Scissor</td><td>Fine Science Tools</td><td>15396-00</td><td></td></tr><tr><td>Insulin syringe</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1mL syringe</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>20mL syringe</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Glucometer (one touch ultra mini)</td><td>Lifescan</td><td>70021208</td><td></td></tr><tr><td>Multiplex insulin and GLP-1 kit</td><td>Meso Scale Discovery</td><td>K15171C-1</td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism 6.00</td><td>GraphPad Software</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nestlets</td><td>Ancare</td><td>NES3600</td><td></td></tr></tbody></table>

a murine model of vertical sleeve gastrectomy

Dikey kol gastrektomi (VSG), gibi bariatrik cerrahi kilo kaybı amacıyla gerçekleştirilen gastrointestinal sistem cerrahidir. Bariatrik cerrahi şu anda obezite için en etkili uzun vadeli tedavi yöntemidir. Ek olarak kilo kaybı, bariatrik cerrahi tip 2 diyabet, hipertansiyon, remisyon remisyon gibi ek sağlık yararları üretir ve bazı kanser türlerine yakalanma riski azalmıştır. Kilo kaybı ötesinde mekanizmaları bu yardımları için eksik olarak tanımlanmış kalır. Bu nedenle, bariatrik cerrahinin hayvan modelleri varlık gelişmiş ve bu avantajları, yeni tedavi hedefleri tespit ve gastrointestinal fizyolojisi anlama geliştirilmesi amacı ile önde gelen mekanizmaları tanımlamak için doğrulanmış. VSG kilo kaybı ve metabolik geliştirme üreten son derece etkili olduğu için Amerika Birleşik Devletleri klinikte en sık gerçekleştirilen bariatrik yordamda haline gelmiştir ve bariatrik diğer yordamları gerçekleştirmek basittir. Bu nedenle, biz geliştirdik ve VSG fare modeli doğrulanmış. Bu fare VSG modeli geliştirilmiş glikoz ve kan basıncı yönetmelik de dahil olmak üzere insanlarda görülen VSG etkileri birçoğu beyannamedir. Bu yöntem yalıtım mide, mide damarlarının tüp ligasyonu ve mide % 70'i kaldırma mide daha fazla eğim transecting tarafından dayanır. Mekanik katkıda bulunan VSG faydaları tanımlamak için çeşitli genetik olarak değiştirilmiş fare satırları başarıyla bu cerrahi Protokolü uyguladınız. Ayrıca, bu fare VSG model daha derin mekanik kavrama elde etmek için diğer cerrahi teknikleri ile birleştirmiştir. Bu nedenle, gastrointestinal fizyolojisi ve sağlık yararları bariatrik cerrahinin çalışmak için basit ve çok yönlü bir model bu.

Sham ve VSG yordamlar şekil 1' de tasvir edilmektedir. Şekil 1A dikiş hattı sahte işlem sırasında mide duvarlar boyunca yerleştirildiği gösterir. Nerede mide VSG ameliyat sırasında kesilir bu aynı alandır. Şekil 1B mide sol borulu kalıntısı VSG performansından sonra gösterir.
İstatistik ve veri analizi<...

Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy at JoVE.com

A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy

Dikey kol gastrektomi farelerde performansını açıklar. Bu bir mide yaklaşık % 70'i kaldırılmasını içerir kilo kaybı cerrahi türüdür.

Dikey kol gastrektomi fare modeli

Bariatric surgery, such as vertical sleeve gastrectomy (VSG), is a surgery of the gastrointestinal tract that is performed for the purpose of weight loss. ...

a-murine-model-of-vertical-sleeve-gastrectomy

Research

JoVE Journal

Biology

11.1K Görüntüleme.  Cornell University. Dikey kol gastrektomi farelerde performansını açıklar. Bu bir mide yaklaşık % 70'i kaldırılmasını içerir kilo kaybı cerrahi türüdür.

Video: A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy

Murine Pancreatic Islet Isolation

Hi, I am Greg Zott. I'm with the UCSF Diabetes Center in the Bluestone Laboratory, and today I'm gonna show you the process for isolating mouse eyelets. The procedure involves the injection of a collagenase solution into the pancreas of a C3 H donor mouse, where we will then remove that pancreas, digest it away, purify the eyelets on a fial gradient, and then handpick them for ultimate transplant into the kidney capsule of a diabetic NOD mouse, Which will be our recipient.Before we start this procedure, we diluted our ATE solution in a modified Hanks buffer and we have adjusted the concentration specific for the strain of mouse that we're using the C3 H.We found digests better at a 0.8 mgs per mil collagenase solution, and we will use that to inject into the common bile duct to distend the pancreas.Performing. The procedure today Will be Pavo codre of the diabetes center. He will inject, open up the mouse, expose the the intestines, and then inject into the common bile duct.We will spray down the mouse with ethanol to keep the hair down, and then we will also verify that the mouse has been sacrificed properly with a toe pinch. Pavo will now open up the mouse and exposing the intestine and the pancreas with a midline incision. The diaphragm will also be cut to verify that the mouse will be sacrificed.Before we get started, I'd like to point out some of the important structures. The stomach is lying right here with the pancreas attached underneath into the duodenum and above. This is the liver where we'll find the gallbladder and the common bile duct, which you can see right here.So what Pavo will do next is he will isolate the small intestine, find where the common bile duct enters the small intestine. Once the intestine is exposed, we clamp on either side of the common bile duct with mosquito clamps. We find that this allows more collagenates to enter the pancreas while other groups try to direct the clamp on top of the common bile duct.We find that this is a better technique in allowing enzyme to enter the pancreas. This is a gentle procedure. You don't want to tear the bowel.You wanna allow the clamps to lie gently on either side of the common bile duct. Now we will find a gallbladder, and once the gallbladder's exposed, we will use that as a guide to injecting the collagenase into the common bile duct. Powell's using a 30 gauge needle with a five cc syringe containing three mills of collagenase solution.As he's entering the common bile duct, he's distending that duct with collagenase solution and then he travels down the common bile duct till he reaches near the intestine. And as he's going down, the enzyme solutions being pumped into the injected into the pancreas. Now that the pancreas is inflated with collagenase solution, Powell's gonna remove the hemostats and then remove the pancreas from the the mouse carefully tearing it away from the intestine.He removes it from the stomach. Okay, and then using the spleen as a handle, he lifts up the pancreas and then slowly snips it away in the common bile duct, and that's it. Pancreas is laid out and then the spleen is removed, and there he's removing the meso enteric tissue, and then the pancreas is placed in a two mill collagenase solution and a sterilized glass vial and it's placed back on Ice.The isolated pancreas that we put into the glass vials will now be placed into a 37 degree water bath for approximately 17 minutes. We placed them into a 50 mil conical rack so that they don't float up. Once during the bath, the timer starts and the digestion begins.Once the digestion time is completed, vials are removed, and then they are shaken and disrupted gently. And once the tissue starts falling apart, the vial is then placed on ice. A sterile screen is placed over a 400 mil beaker that contains washing buffer.The pancreas digest is then carefully poured over the screen into the wash buffer. For demonstration purposes, the hood has been turned off and the glass of the hood has been raised so we could see what we're doing. Once the pancreas digest is poured into the beaker, the vials are rinsed with the same washing buffer and the wash buffer placed over the screen.We have a syringe filled with washing buffer. We will use that to forcefully wash the tissue through the screen. The idea is to release any loose eyelets that are unattached to the matrix, but leaving the membranes and the undigested tissue on the screen.And when you're finished washing a tissue, this is what you usually See at the end of the procedure. The Pancreas tissue that's in the bottom of the tube will now be transferred to two 50 mil conical, and the tissue will be washed, the tissue's mixed evenly, and then distributed evenly so that we have a equal pellet volume in each tube. The beaker is now rinsed with more washing buffer.The sides are rinse so that you get all tissue that is entered the beaker again. Then it's equally distributed between each two, both 50 mil. Conical then are topped off with wash buffer.The tissue is inverted several times and then placed into a centrifuge. This is a quick spin. The centrifuge is allowed to reach a thousand RPM and then is turned off.The tissue at this time is very S eyelets are very sensitive, and you don't want to over compact them. The tubes are removed and we will do this wash step three more times. This is the end of the third wash.The components of the 50 mil conical tube are transferred to the 15 conical tube and centrifuge for a thousand RP M and then stopped. The supernat will be removed and the first part of the FI Call will be started. We are at the step where we Have our pelleted di pancreas digest.We'll resuspend that tissue so it's nice and loose to the pellets. We'll add the first density gradient, which is 1 1 0 8. We'll add five mils to each tube.The pellet is then mixed thoroughly in each of the gradients. It's important that you get good tissue distribution in your heaviest gradient. Now we will layer two mils of 1 0 9 6 density.We will then on top of that, layer two mils of 1 0 6 9 density, and then on top of that 1 0 3 7 density. It's important while you're layering the densities that you don't mix. Then all the layers have been added to the tube.And you can see this is the top of 1 1 0 8, the top of 9 1 0 9 6, the top of 1 0 6 9 and the top of 1 0 3 7. And you could see the tissue is already starting to move to its proper density even without centri fusion. The fial gradients are brought up to speed at 1800 RPM for 15 minutes, and remember to keep the brake off after the tubes are removed from the centrifuge.You can see between the 0 0 9 6 and 0 0 7 layer, there's a nice band of eyelet tissue Pablo's. Now removing the 0 3 7 layer to remove any tissue debris and DNA that might have been released during the processing. Using a sterile plastic pasture pipette, he will now remove the islet layer and transfer them to a 50 mil conical containing 25 mils of wash buffer.You want do this step quickly because fol is toxic to eyelets. We actually removed the entire 0 6 9 and 0 9 6 layer. Pavo cuts the top of the plastic pasture pipette and rinses it with wash buffer.The eyelets are then centrifuge like we centrifuge previously. Centrifuge is brought up to a Thousand RPM and then we stop it and We aspirate off. The supernatant eyelets will be washed three times with wash media.So we just completed the eyelid Isolation process we took from the digest to the fol gradient to the purified eyelets after our third wash with wash buffer, we resuspended the eyelets in our RPMI media and we played it in a tissue culture plate. These eyelets are now ready for in vitro assays or in vivo preps like eyelet Transplant.

Murin Pankreas Adacık İzolasyonu

Biyoloji

Murine Model of Hindlimb Ischemia 

In the United States, peripheral arterial disease (PAD) affects about 10 million individuals, and is also prevalent worldwide. Medical therapies for symptomatic relief are limited. Surgical or endovascular interventions are useful for some individuals, but long-term results are often disappointing. As a result, there is a need for developing new therapies to treat PAD. The murine hindlimb ischemia preparation is a model of PAD, and is useful for testing new therapies. When compared to other models of tissue ischemia such as coronary or cerebral artery ligation, femoral artery ligation provides for a simpler model of ischemic tissue. Other advantages of this model are the ease of access to the femoral artery and low mortality rate. 
In this video, we demonstrate the methodology for the murine model of unilateral hindimb ischemia. The specific materials and procedures for creating and evaluating the model will be described, including the assessment of limb perfusion by laser Doppler imaging. This protocol can also be utilized for the transplantation and non-invasive tracking of cells, which is demonstrated by Huang et al.1.

Murine Model of Hindlimb Ischemia

The surgical procedure for induction of unilateral hindlimb ischemia is demonstrated, with confirmation of ischemia by laser Doppler perfusion imaging.

Murin Model Hindlimb İskemi

In the United States, peripheral arterial disease (PAD) affects about 10 million individuals, and is also prevalent worldwide.  Medical therapies for ...

Murine Renal Transplantation Procedure

Renal orthotopic transplantation in mice is a technically challenging procedure. Although the first kidney transplants in mice were performed by Russell et al over 30 years ago (1) and refined by Zhang et al years later (2), few people in the world have mastered this procedure. In our laboratory we have successfully performed 1200 orthotopic kidney transplantations with &gt; 90% survival rate. The key points for success include stringent control of reperfusion injury, bleeding and thrombosis, both during the procedure and post-transplantation, and use of 10-0 instead of 11-0 suture for anastomoses.
Post-operative care and treatment of the recipient is extremely important to transplant success and evaluation. All renal graft recipients receive antibiotics in the form of an injection of penicillin immediately post-transplant and sulfatrim in the drinking water continually. Overall animal health is evaluated daily and whole blood creatinine analyses are performed routinely with a portable I-STAT machine to assess graft function.

Renal transplantation in mice is a technically challenging procedure that requires careful post-operative care and treatment for success.

Murin Böbrek Nakli Prosedürü

Renal orthotopic transplantation in mice is a technically challenging procedure. Although the first kidney transplants in mice were performed by Russell ...

Murine Model for Parkinson's Disease: from 6-OH Dopamine Lesion to Behavioral Test

Parkinson's disease (PD) affects at least 6.5 million people worldwide, irrespective of gender, social, ethnic, economic, or geographic boundaries. Key symptoms, such as tremor, rigidity and bradikinesia, develop when about 3/4 of dopaminergic cells are lost in the substantia nigra, and fail to provide for the smooth, coordinated regulation of striatal motor circuits. Depression and hallucinations are common, and dementia eventually occurs in 20% of patients. At this time, there is no treatment to delay or stop the progression of PD. Rather, the medications currently available aim more towards the alleviation of these symptoms. New surgical strategies may reversibly switch on the functionally damaged circuits through the electrical stimulation of deep brain structures, but although deep brain stimulation is a major advance, it is not suitable for all patients. It remains therefore necessary to test new cell therapy approaches in preclinical models.
Selective neurotoxic disruption of dopaminergic pathways can be reproduced by injection of 6-hydroxydopamine (6-OHDA) or MPTP (1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tertahydropyridine) whereas depleting drugs and oxidative-damaging chemicals may also reproduce specific features of PD in rodents. Unlike MPTP, 6-OHDA lesions cause massive irreversible neuronal loss, and can be uni- or bilateral. The 6-OHDA lesion model is reliable, leads to robust motor deficits, and is the most widely used after 40 years of research in rats1. As interactions between grafted cells and host can now be studied more thoroughly in mice rather than in rats, the model has been transposed to mice2,3, where it has been recently characterized4.
In this video, we demonstrate how to lesion the left nigro-striatal pathway of anesthetized mice by slowly delivering 2.0 &mu;L of 6-OHDA through a stereotaxically inserted micro-syringe needle. The loss of dopaminergic input occurs within days, and the functional impairments can be monitored over post-operative weeks and months by rating animal rotations induced by dopaminergic agents5. Here, we show full-body contralateral rotations occurring 10 minutes after a single subcutaneous administration of apomorphine, measured one month after the lesion. Outcomes and drawbacks are discussed below.

Parkinson disease is caused by loss of dopaminergic innervation to the striatum, which can be experimentally induced by 6-OH-dopamine. We describe how to perform a stereotaxic lesion and to monitor apomorphine-induced rotational behavior in mice. This model is useful and reliable for testing new therapies for Parkinson disease.

Parkinson Hastalığı için murin Model: 6-OH Dopamin Lezyon Davranış Testi

Parkinson's disease (PD) affects at least 6.5 million people worldwide, irrespective of gender, social, ethnic, economic, or geographic boundaries. Key ...

LAD-Ligation: A Murine Model of Myocardial Infarction

Research models of infarction and myocardial ischemia are essential to investigate the acute and chronic pathobiological and pathophysiological processes in myocardial ischemia and to develop and optimize future treatment.
Two different methods of creating myocardial ischemia are performed in laboratory rodents. The first method is to create cryo infarction, a fast but inaccurate technique, where a cryo-pen is applied on the surface of the heart (1-3). Using this method the scientist can not guarantee that the cryo-scar leads to ischemia, also a vast myocardial injury is created that shows pathophysiological side effects that are not related to myocardial infarction. The second method is the permanent ligation of the left anterior descending artery (LAD). Here the LAD is ligated with one single stitch, forming an ischemia that can be seen almost immediately. By closing the LAD, no further blood flow is permitted in that area, while the surrounding myocardial tissue is nearly not affected. This surgical procedure imitates the pathobiological and pathophysiological aspects occurring in infarction-related myocardial ischemia.
The method introduced in this video demonstrates the surgical procedure of a mouse infarction model by ligating the LAD. This model is convenient for pathobiological and pathophysiological as well as immunobiological studies on cardiac infarction. The shown technique provides high accuracy and correlates well with histological sections.

This video demonstrates how to use a fast and reliable model to study pathobiological and pathophysiological processes of myocardial ischemia.

LAD-ligasyon murin Model: Miyokard Enfarktüsü

Research models of infarction and myocardial ischemia are essential to investigate the acute and chronic pathobiological and pathophysiological processes ...

Techniques of Sleeve Gastrectomy and Modified Roux-en-Y Gastric Bypass in Mice

Obesity is a major public health issue, with a prevalence of 4 to 28% for men and 6.2 to 36.5% for women in Europe (from 2003 to 2008). Morbid obesity is frequently associated with metabolic complications, such as type 2 diabetes, hypertension, and dyslipidemia, reducing life expectancy and quality. In the absence of any effective noninvasive treatments, bariatric surgery is a valuable therapeutic option for patients with morbid obesity (body mass index (BMI) &#62;40 kg/m2), leading to long-term, sustained weight loss and improvements in metabolic complications. However, the underlying cellular and molecular mechanisms sustaining the beneficial effects of bariatric surgery are not yet fully understood. Due to the numerous genetically-modified strains available, the mouse model is the most convenient animal model to explore the molecular mechanisms behind the pleiotropic beneficial effects of bariatric surgeries. Here, we detailed the optimized healthcare methods and surgical protocols in mice for the two most widely-used bariatric surgeries: the sleeve gastrectomy and the modified Roux-en-Y gastric bypass. Deciphering the molecular mechanisms underlying the therapeutic effects of bariatric surgeries offers the promise of identifying new therapeutics targets.

Bariatric surgery is the most efficient way to reduce body weight and the deadly metabolic complications (diabetes, obesity, and dyslipidemia) frequently associated with morbid obesity. Mouse models of bariatric surgery represent a unique asset for deciphering molecular mechanisms behind the beneficial effects of these surgeries on diabetes, hypertension, and dyslipidemia.

Sleeve gastrektomi Teknikleri ve Farelerde Roux-en-Y Gastrik Bypass Modifiye

Obesity is a major public health issue, with a prevalence of 4 to 28% for men and 6.2 to 36.5% for women in Europe (from 2003 to 2008). Morbid obesity is ...

Tıp

Efficient Production and Purification of Recombinant Murine Kindlin-3 from Insect Cells for Biophysical Studies

Kindlins are essential coactivators, with talin, of the cell surface receptors&#160;integrins and also participate in integrin outside-in signalling, and the control of gene transcription in the cell nucleus. The kindlins are ~75 kDa multidomain proteins and bind to an NPxY motif and upstream T/S cluster of the integrin &#946;-subunit cytoplasmic tail. The hematopoietically-important kindlin isoform, kindlin-3, is critical for platelet aggregation during thrombus formation, leukocyte rolling in response to infection and inflammation and osteoclast podocyte formation in bone resorption. Kindlin-3&#39;s role in these processes has resulted in extensive cellular and physiological studies. However, there is a need for an efficient method of acquiring high quality milligram quantities of the protein for further studies. We have developed a protocol, here described, for the efficient expression and purification of recombinant murine kindlin-3 by use of a baculovirus-driven expression system in Sf9 cells yielding sufficient amounts of high purity full-length protein to allow its biophysical characterization. The same approach could be taken in the study of the other mammalian kindlin isoforms.

Kindlins are fundamental to cell adhesion through integrins but studies of them have been hampered by the difficulty encountered in expressing them recombinantly in bacterial hosts. We describe here methods for their efficient production in baculovirus-infected insect cells.

Verimli Üretimi ve Saflaştırılması Rekombinant murin kindlin-3 Biophysical Çalışmaları Böcek hücrelerinden

Kindlins are essential coactivators, with talin, of the cell surface receptors&#160;integrins and also participate in integrin outside-in signalling, and ...

Sleeve Gastrectomy in Mice using Surgical Clips

The number of people who are overweight and obese is continually increasing both in the adult and adolescent populations. This coincides with the increased universal phenomenon of type 2 diabetes (T2D) and other metabolic problems. Bariatric surgery, such as SG, is currently one of the most effective and commonly used long-term treatment for obesity and T2D, but the association between them is not completely explored yet. The mechanisms underlying the outcomes seen after bariatric surgery in humans can be investigated based on preclinical animal studies. The SG reduces body weight, glucose levels and many metabolic parameters, and is easy to perform with a low incidence of complications. The goal of this work is to provide a simple method and an uncomplicated preclinical model of bariatric surgery in animals for researchers.

The prevalence of diabetes and obesity is continuously increasing worldwide. The mechanisms between diabetes, obesity and their associated mortality and co-morbidities need to be further investigated. Here, we present a protocol for sleeve gastrectomy (SG) in animals as an uncomplicated preclinical model of bariatric surgery.

Cerrahi Klipsler Kullanılarak Farelerde Sleeve Gastrektomi

The number of people who are overweight and obese is continually increasing both in the adult and adolescent populations. This coincides with the ...

Single-Anastomosis Duodeno-Ileal Bypass with Sleeve Gastrectomy Model in Mice

Obesity is a major health issue worldwide. As a response, bariatric surgeries have emerged to treat obesity and its related comorbidities (e.g., diabetes mellitus, dyslipidemia, non-alcoholic steatohepatitis, cardiovascular events, and cancers) through restrictive and malabsorptive mechanisms. Understanding the mechanisms by which these procedures allow such improvements often require their transposition into animals, especially in mice, because of the ease of generating genetically modified animals. Recently, the single-anastomosis duodeno-ileal bypass with sleeve gastrectomy (SADI-S) has emerged as a procedure that uses both restrictive and malabsorptive effects, which is being used as an alternative to gastric bypass in case of major obesity. Thus far, this procedure has been associated with strong metabolic improvements, which has led to a marked increase in its use in daily clinical practice. However, the mechanisms underlying these metabolic effects have been poorly studied as a result of a lack of animal models. In this article, we present a reliable and reproducible model of SADI-S in mice, with a special focus on perioperative management. The description and use of this new rodent model will be helpful for the scientific community to better understand the molecular, metabolic, and structural changes induced by the SADI-S and to better define the surgical indications for clinical practice.

Single-anastomosis duodeno-ileal bypass (SADI-S) is an emerging bariatric procedure with important metabolic effects. In this article, we present a reliable and reproducible model of SADI-S in mice.

Farelerde Sleeve Gastrektomi Modeli ile Tek Anastomoz Duodeno-İleal Bypass

Obesity is a major health issue worldwide. As a response, bariatric surgeries have emerged to treat obesity and its related comorbidities (e.g., diabetes ...

Murine Vertical Sleeve Gastrectomy: A Surgical Procedure to Downsize Stomach in Experimental Mouse Models

Source: Garibay, D., Cummings, B. P. <a href="https://www.jove.com/video/56534" target="_blank">A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy.</a> J. Vis. Exp. (2017)
In this video, a vertical sleeve gastrectomy procedure is performed on an experimental mouse model. This procedure helps remove a significant portion of the stomach along its greater curvature.

Murin Dikey Sleeve Gastrektomi: Deneysel Fare Modellerinde Mideyi Küçültmek İçin Cerrahi Bir İşlem

Source: Garibay, D., Cummings, B. P. A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy. J. Vis. Exp. (2017)
In this video, a vertical sleeve gastrectomy ...