Name: a murine model of vertical sleeve gastrectomy
Uploaded: 2017-12-18T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 47 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy at JoVE.com

Diese Forschung wurde von NIH/NCI R21CA195002-01A1, der Präsident des Rates der Cornell Frauen und SUNY Graduate Vielfalt Fellowship unterstützt. Dr. Cummings Labor erhielt auch Finanzierung während der Projektlaufzeit vom Cornell vergleichende Krebs-Biologie-Trainingsprogramm und Eli Lilly and Company.

Alle experimentelle Protokolle wurden von der Cornell University institutionelle Animal Care und Use Committee genehmigt.
1. präoperative Vorbereitung
Hinweis: Studie Mäuse sind in der Regel auf einem C57BL Diät-induzierten fettleibig Hintergrund Studien translationally für menschliche Übergewicht und Insulinresistenz relevant zu machen. Männlichen und weibliche Mäusen können untersucht werden, wie in den nachfolgenden Schritten beschrieben.
<ol>
	<li>Legen Sie in einem Alter von 2 Monaten Mäuse auf eine 45 % bzw. 60 % fettreiche Ernährung für 2 Monate (siehe Tabelle der Materialien). Hinweis: Mäuse werden gefüttert, eine fettreiche Diät um eine übergewichtige und Insulin resistent Phänotyp zu erstellen. Kürzere oder längere Zeit der fettreiche Ernährung Fütterung können abhängig von den Zielen der Studie verwendet werden.</li>
	<li>Mäusen füttern weiterhin Ad Libitum bis Chirurgie. Wenn Basisberechnungen benötigt werden, nach 7 Wochen von fettreichen Ernährung Fütterung, schnelle Mäuse für 6 h oder über Nacht und nehmen eine Basislinie Blutprobe für die Messung von Metaboliten von Interesse (z. B. Glukose).</li>
	<li>Weiter Mäuse auf fettreiche Ernährung und erlauben Mäuse eine Woche um nach der Blutentnahme vor Schein Chirurgie oder VSG zu erholen. Legen Sie Mäuse auf eine Flüssigkeit Ernährung (siehe Tabelle der Materialien) für 4 Tage vor der Operation. Hinweis: Mäuse bestehen auf eine flüssige Ernährung vor und nach der Operation, den Verdauungstrakt von Feinstaub zu löschen, die den Heilungsprozess beeinträchtigen können.</li>
	<li>Die folgenden Elemente vor der Operation sterilisieren: Folie, Gaze, Baumwolle kippte Applikatoren (CTAs) und chirurgische Instrumente (Gefäßklemme, Betrieb, Schere, Iris-Schere, Dumont Forcep gezahnt Brown-Adson Forcep, Magensonde Nadel, Microneedle Fahrer, Feder-Schere ).</li>
</ol>
2. vertikale Sleeve-Gastrektomie und Sham-Verfahren
<ol>
	<li>Am Tag der Operation wiegen Mäuse um eine Basismessung Gewicht zu erhalten.</li>
	<li>OP mit ein Anästhesiesystem, beheizten Wasserbad und Heizkissen auszustatten. Das Wasserbad auf 37 ° C eingestellt, und verwenden Sie es um 0,9 % Kochsalzlösung für die Bewässerung zu wärmen. Reinigen Sie das OP-Feld mit 70 % Ethanol und sterilen Technik autoklaviert Chirurgie Pack und Tools öffnen. Hinweis: Das Heizkissen wird verwendet, um das Tier warm zu halten während der Operation und Genesung von Anästhesie.</li>
	<li>Verwenden eine Induktion-Kammer, betäuben Sie die Maus mit 5 % Isofluran und O2 Durchfluss von 1 L/min bestätigen, das die Maus in die entsprechende Ebene der Narkose durch Ausführen einer Zehe-Klemme. Pflegen Sie die Maus mit 1-3 % Isofluran und eine O-2 -Durchflussmenge von 0,6 L/min, sobald eine einheitliche Ebene der Anästhesie erreicht worden ist.</li>
	<li>Sobald die Maus betäubt ist, legen Sie Augensalbe (siehe Tabelle der Materialien) auf ihre Augen um sie feucht zu halten während der Operation. Zu diesem Zeitpunkt auch verabreichen ein Schmerzmittel, wie z.B. Meloxicam (2 mg/kg subkutan). Schneiden Sie das Haar von den Nabel der Axilla gedrückt halten die Haut sanft an um Spannung zu bieten.
	<ol>
		<li>Wie die Maus Haut dünn und zart ist, achten Sie darauf, keine Hautveränderungen verursachen, wenn die Haare abschneiden. Reinigen Sie die Haut mit Povidon-Jod und Alkohol.</li>
		<li>Sterile Handschuhe Don und bereiten die sterile OP-Feld und Instrumente. Führen Sie den Rest des Verfahrens mit steriler Technik. Bereiten Sie die sterile OP-Feld, indem sterilen OP-Tüchern auf beiden Seiten der Maus. Verwenden Sie autoklaviert Alufolie zum Erstellen einer chirurgischen drapieren für die Maus.</li>
		<li>Schneiden Sie ein kleines Loch in die Alufolie Zugriff auf die Maus Bauch.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Machen Sie einen Schnitt der Haut aus der Mitte des Bauches (Nabel) auf das Niveau von xiphoid Knorpel mit einer Iris-Schere. Identifizieren der Linea Alba und Nutzung Iris Schere durchschneiden die Körperwand entlang der Linea Alba. CTAs können Sie den Magen aus dem Bauch sanft zu erheben und dann unverblümt sezieren die großen Omentum aus größerer Krümmung des Magens.</li>
	<li>Verbinden Sie die kurze gastrische Arterie, die zwischen der Fundus des Magens und der Milz verläuft, indem man zwei Ligaturen mit 7: 0 Monofile resorbierbaren Naht. Verwenden Sie Frühling-Schere zum Schneiden zwischen zwei Ligaturen. Sobald die Arterie durchtrennten ist, voll exteriorize den Magen aus der Bauchhöhle. Legen Sie die Gaze unter dem Bauch und nass mit Kochsalzlösung, das Gewebe feucht zu halten.</li>
	<li>Sham-Verfahren
	<ol>
		<li>Für die Farce-Prozedur Platzieren einer Lose einfache kontinuierliche Anordnung von Naht mit 6-0 Monofile resorbierbaren Naht mit einer konischen Nadel. Beginnen Sie 2 mm nach rechts (des Chirurgen rechts) der Speiseröhre. Legen Sie die Naht Linie entlang der ventralen Magen Wand und dann weiter entlang der dorsalen Magen Wand. Hinweis: Für alle Magen-Manipulationen, verwenden Sie nur Monofile resorbierbarem Nahtmaterial, um das Risiko einer Infektion zu verringern. Darüber hinaus nutzen Sie nur Naht mit einer konischen Nadel für alle Magen-Manipulationen, wie Verwendung einer Nadel schneiden das Risiko von Naht "durchziehen erhöht" führt zu Magen Gewebeschäden und Dehiszenz gewickelt.</li>
		<li>Führen Sie die Nadel vollständig durch einen Magen Wand während des Einsetzens der Naht. Stellen Sie sicher die Naht flach ist, aber den Magen nicht zu beschränken. Sanft binden Sie die Naht mit 3-4 Würfe zu und überspringen Sie Schritt 2,9.</li>
		<li>Überspringen Sie für die VSG-Prozedur Schritt 2.7 und fahren Sie mit Schritt 2,8.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>VSG-Verfahren
	<ol>
		<li>Verbinden Sie für die VSG-Verfahren die prominenten Zweige der gastrische Arterie und Vene mit 7: 0 Monofile resorbierbaren Naht mit einer konischen Nadel mit 3 für jeden Knoten wirft. Legen Sie den Ligaturen nur unten (d. h.in Richtung der geringeren Krümmung des Magens) der vorgesehenen Linie der Durchtrennung. Hinweis: Die vorgesehene Linie der Durchtrennung beginnt bei ~ 2 mm oben (d. h. in Richtung größerer Krümmung des Magens) die kardiale Kerbe des Magens und mindestens 2 mm unterhalb der Margo Pilcatus und erstreckt sich auf das proximale Ende der Rechte Lappen der Bauchspeicheldrüse. In der Regel gibt es 4 Schiffe pro Magen Wand, die ligiert werden müssen; Dies kann jedoch variieren zwischen Mäusen.</li>
		<li>Um Verschütten des Mageninhalts während der Gastrektomie zu vermeiden, legen Sie eine einfache durchgehende Linie der Naht durch beide Magen Wände unterhalb der vorgesehenen Linie der Durchtrennung mit 6-0 Monofile resorbierbaren Naht mit einer konischen Nadel. Beginnen Sie die Naht-Linie, der Chirurg rechts der Speiseröhre und unterhalb der Margo Pilcatus und Ende oberhalb der Bauchspeicheldrüse.</li>
		<li>Legen Sie dünne Spitze Futterzange oberhalb der Naht Linie und verwenden Sie Feder Schere, um zwischen der Naht Linie und Futterzange geschnitten. Entfernen Sie die durchtrennten Magen Gewebe aus der sterilen OP-Feld.</li></ol></li></ol>Verwenden Sie CTAs, um Blut und Futterbrei aus dem Magen zu reinigen.
		<li>Apposition der Magen Wände mit 6-0 Monofile resorbierbaren Naht mit einer konischen Nadel mit einem einfachen diskontinuierliche Muster zu verstärken. Hinweis: Eine einfache diskontinuierliche Naht Muster wird empfohlen, da dadurch sicherer Verschluss als das einfache kontinuierliche Naht Muster.</li>
		<li>Spülen Sie den Magen Überrest mit Kochsalzlösung während des Verfahrens um das Gewebe feucht und sauber zu halten. Verwenden Sie eine 20G Magensonde Nadel eine 20-mL-Spritze um Magenspülung mit Kochsalzlösung durchzuführen. Verwenden Sie diese Größe, um sicherzustellen, dass ausreichend Druck zur Verfügung gestellt wird, ohne zu riskieren, gastrische Gewebeschädigung vor Überdruck oder versehentliche Magen Gewebeschäden durch Verwendung einer regelmäßigen spitzen Nadel.</li>
		<li>Verwenden Sie ein Minimum von 20 Knoten, um sicher den Magen schließen; Achten Sie auf Schließung entlang der Speiseröhre, als diese Seite mehr schwer zugänglich und daher oft ein Ort der Dehiszenz ist.</li>
		<li>Sicherstellen Sie, dass keine Lecks durch leichtes Drücken auf den Magen mit CTAs vorhanden sind. Wenn Undichtigkeiten festgestellt werden, legen Sie zusätzliche einfache diskontinuierliche Knoten auf den Gebieten der Leckage und dann Leck Test wieder. Dichtheitsprüfung bis keine Leckage erkannt wird.</li>
		<li>Machen Sie eine letzte gründliche Lavage des Magens mit mindestens 60 mL Kochsalzlösung um sicherzustellen, dass keine infektiöse Partikel zurückgelassen worden.</li>
	
	
	<li>Platzieren Sie den Magen wieder in die Bauchhöhle unter der Leber mit einem CTA. Platzieren Sie CTAs entlang der dorsalen Aspekt der Bauchhöhle, alle überschüssigen Flüssigkeit zu absorbieren. Mit einer stumpfen Nadel 18G, injizieren Sie gesäugt Ringer-Lösung (LRS) mit oder ohne Antibiotika (0,5 mL LRS + /-20 mg/kg Enrofloxacin) direkt in die Bauchhöhle, kurz vor der Schließung. Hinweis: Ersetzt Flüssigkeitsverlust während der Operation erfahren und stellt eine Methode für die direkte Anwendung von Antibiotika an der Operationsstelle, mit Erholung zu unterstützen.</li>
	<li>Schließen Sie die Bauchmuskel-Schicht mit 6-0 Monofile resorbierbaren Naht mit einer konischen Nadel in ein einfaches diskontinuierliche Muster. Schließen Sie dann die Hautschicht mit 6-0 Monofile resorbierbaren Naht in einem einfachen kontinuierlichen Muster.</li>
	<li>Gewebe-Klebeband auf die Haut legen und Falten der Haut über der Naht Linie, um die Naht zu begraben, so dass die Maus den Wundverschluss postoperativ stören kann nicht.</li>
	<li>Schalten Sie die Isofluran aus und lassen Sie die Maus auf das Heizkissen für 10-15 Minbefore wieder in seine Heimat Käfig zu erholen. Nicht unbeaufsichtigt lassen das Tier bis es hat wieder zu Bewusstsein und kann sich bewegen.</li>
	<li>Halten Sie Tiere einzeln untergebracht, bis vollständig von der Operation erholt. Hinweis: Wenn genaue Essen Aufnahme Messungen in der gesamten Studie einzuholen sind, sollten Mäuse weiterhin in der gesamten Studie einzeln untergebracht werden. Besteht die Gefahr des Fremdkörpers verhindert Essen nach Hause Käfig Einstreu. Tiere in Käfigen Bettwäsche mit Ausnahme der Verschachtelung Material um Bereicherung bieten kostenlos untergebracht werden sollte (siehe Tabelle der Materialien).</li>

3. postoperative Maus Pflege und Messungen
<ol>
	<li>Die Maus zu seinem Hause Käfig zurück und legen Sie den Käfig auf ein Heizkissen. Pflegen Sie Mäuse auf eine flüssige Diät für mindestens 7 Tage nach der Operation. Analgetikum, z. B. Meloxicam zu verwalten (2 mg/kg subkutan), für 2 Tage nach der Operation. Hinweis: Ein Antibiotikum wie Enrofloxacin (20 mg/kg), kann für bis zu 7 Tage nach der Operation gegeben werden. Antibiotika werden gegeben, um das Risiko einer Infektion durch den chirurgischen Eingriff zu minimieren und möglicherweise oder möglicherweise nicht abhängig von der Höhe der Sterilität während des gesamten Verfahrens erforderlich. Jedoch wenn Antibiotika verwendet werden, müssen sie alle Mäuse in der gleichen Studie auf ihre Kohärenz verabreicht werden.</li>
	<li>Während der postoperativen Phase beurteilen Sie, Körpergewicht, Nahrungsaufnahme, Stuhlgang, Aktivitätsgrad und Neigung mindestens einmal täglich zu richtigen Heilung und Erholung zu gewährleisten. Durchführen Sie postoperative Kontrollen für 14 Tage nach der Operation. Hinweis: Chirurgische Fehler wird in der Regel unmittelbar nach der Operation oder innerhalb von drei Tagen Post-operativ gesehen. Tiere, die nicht essen oder trinken am zweiten Tag nach der Operation, müssen für chirurgische Komplikationen engmaschig überwacht werden.</li>
	<li>Messen Sie nach erfolgreichem Abschluss der postoperativen Phase Körper Gewicht und Nahrungsaufnahme regelmäßig in der gesamten Studie zur Erhaltung der entsprechenden Phänotyp zu gewährleisten.</li>
	<li>Durchführen Sie einer oralen Glukosetoleranztest (OGTT) Glukosetoleranz, Glukose-stimulierten Insulinsekretion, bewerten und ausnehmen Sie Hormonausschüttung.
	<ol>
		<li>Durchführen der OGTT bei Mäusen nach dem Fasten Sie für 6 h und dann Magensonde Mäuse mit 50 % Traubenzucker-Lösung in einer Dosis von 1 g/kg.</li>
		<li>Tail Blutproben bei 0, 2,5, 5, 15, 30, 60 und 120 Minuten nach der Magensonde zu sammeln. Messen des Blutzuckers mit einem Blutzuckermessgerät zu diesen Zeitpunkten. Sammeln Sie Serumproben zu jedem Zeitpunkt zur Messung verschiedener Hormone, wie Insulin und GLP-1.</li>
		<li>Schnelle Mäuse für 6 h vor der Euthanasie. Nehmen Sie eine endgültige Blut Probe und Glukose-Messung. Vergleichen Sie die endgültige Glukose Messung der Baseline-Messung. Einschläfern Sie Mäuse mit einer intraperitoneale Injektion von Pentobarbital bei einer Dosis von 200 mg/kg.</li>
		<li>Verwenden Sie die Grundlinie und endgültige Serumproben zusätzliche Analyten messen und vergleichen Prä- und postoperative chirurgische Werte.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol>
	<li>Buchwald, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bariatric+surgery:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Bariatric surgery: a systematic review and meta-analysis.</a> JAMA. 292 (14), 1724-1737 (2004).</li><li>Wadden, T. A., Butryn, M. L., Byrne, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+lifestyle+modification+for+long-term+weight+control.">Efficacy of lifestyle modification for long-term weight control.</a> Obes Res. 12, 151s-162s (2004).</li><li>Yanovski, S. Z., Yanovski, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obesity.">Obesity.</a> N Engl J Med. 346 (8), 591-602 (2002).</li><li>Abbatini, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+effects+of+laparoscopic+sleeve+gastrectomy,+gastric+bypass,+and+adjustable+gastric+banding+on+type+2+diabetes.">Long-term effects of laparoscopic sleeve gastrectomy, gastric bypass, and adjustable gastric banding on type 2 diabetes.</a> Surg Endosc. 24 (5), 1005-1010 (2010).</li><li>Sjostrom, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+bariatric+surgery+on+mortality+in+Swedish+obese+subjects.">Effects of bariatric surgery on mortality in Swedish obese subjects.</a> N Engl J Med. 357 (8), 741-752 (2007).</li><li>Adams, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+incidence+and+mortality+after+gastric+bypass+surgery.">Cancer incidence and mortality after gastric bypass surgery.</a> Obesity (Silver Spring). 17 (4), 796-802 (2009).</li><li>Vest, A. R., Heneghan, H. M., Schauer, P. R., Young, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+management+of+obesity+and+the+relationship+to+cardiovascular+disease.">Surgical management of obesity and the relationship to cardiovascular disease.</a> Circulation. 127 (8), 945-959 (2013).</li><li>Ahmed, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laparoscopic+Roux-en-Y+gastric+bypass+and+its+early+effect+on+blood+pressure.">Laparoscopic Roux-en-Y gastric bypass and its early effect on blood pressure.</a> Obes Surg. 19 (7), 845-849 (2009).</li><li>Pories, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Who+would+have+thought+it?+An+operation+proves+to+be+the+most+effective+therapy+for+adult-onset+diabetes+mellitus.">Who would have thought it? An operation proves to be the most effective therapy for adult-onset diabetes mellitus.</a> Ann Surg. 222 (3), 339-350 (1995).</li><li>Garibay, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=beta-Cell+Glucagon-Like+Peptide-1+Receptor+Contributes+to+Improved+Glucose+Tolerance+After+Vertical+Sleeve+Gastrectomy.">beta-Cell Glucagon-Like Peptide-1 Receptor Contributes to Improved Glucose Tolerance After Vertical Sleeve Gastrectomy.</a> Endocrinology. 157 (9), 3405-3409 (2016).</li><li>McGavigan, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGR5+contributes+to+glucoregulatory+improvements+after+vertical+sleeve+gastrectomy+in+mice.">TGR5 contributes to glucoregulatory improvements after vertical sleeve gastrectomy in mice.</a> Gut. 66 (2), 226-234 (2017).</li><li>McGavigan, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical+sleeve+gastrectomy+reduces+blood+pressure+and+hypothalamic+endoplasmic+reticulum+stress+in+mice.">Vertical sleeve gastrectomy reduces blood pressure and hypothalamic endoplasmic reticulum stress in mice.</a> Dis Model Mech. 10 (3), 235-243 (2017).</li><li>Esteban Varela, J., Nguyen, N. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laparoscopic+sleeve+gastrectomy+leads+the+U.S.+utilization+of+bariatric+surgery+at+academic+medical+centers.">Laparoscopic sleeve gastrectomy leads the U.S. utilization of bariatric surgery at academic medical centers.</a> Surg Obes Relat Dis. 11 (5), 987-990 (2015).</li><li>Laferrere, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+weight+loss+by+gastric+bypass+surgery+versus+hypocaloric+diet+on+glucose+and+incretin+levels+in+patients+with+type+2+diabetes.">Effect of weight loss by gastric bypass surgery versus hypocaloric diet on glucose and incretin levels in patients with type 2 diabetes.</a> J Clin Endocrinol Metab. 93 (7), 2479-2485 (2008).</li><li>Adams, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Health+benefits+of+gastric+bypass+surgery+after+6+years.">Health benefits of gastric bypass surgery after 6 years.</a> Jama. 308 (11), 1122-1131 (2012).</li><li>McGavigan, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGR5+contributes+to+glucoregulatory+improvements+after+vertical+sleeve+gastrectomy+in+mice.">TGR5 contributes to glucoregulatory improvements after vertical sleeve gastrectomy in mice.</a> Gut. , (2015).</li><li>Peterli, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+in+glucose+metabolism+after+bariatric+surgery:+comparison+of+laparoscopic+Roux-en-Y+gastric+bypass+and+laparoscopic+sleeve+gastrectomy:+a+prospective+randomized+trial.">Improvement in glucose metabolism after bariatric surgery: comparison of laparoscopic Roux-en-Y gastric bypass and laparoscopic sleeve gastrectomy: a prospective randomized trial.</a> Ann Surg. 250 (2), 234-241 (2009).</li><li>Ryan, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FXR+is+a+molecular+target+for+the+effects+of+vertical+sleeve+gastrectomy.">FXR is a molecular target for the effects of vertical sleeve gastrectomy.</a> Nature. 509 (7499), 183-188 (2014).</li><li>Wilson-Perez, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical+sleeve+gastrectomy+is+effective+in+two+genetic+mouse+models+of+glucagon-like+Peptide+1+receptor+deficiency.">Vertical sleeve gastrectomy is effective in two genetic mouse models of glucagon-like Peptide 1 receptor deficiency.</a> Diabetes. 62 (7), 2380-2385 (2013).</li><li>Pressler, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical+sleeve+gastrectomy+restores+glucose+homeostasis+in+apolipoprotein+A-IV+KO+mice.">Vertical sleeve gastrectomy restores glucose homeostasis in apolipoprotein A-IV KO mice.</a> Diabetes. 64 (2), 498-507 (2015).</li></ol>

Die Autoren erklären keine Interessenkonflikte, außer Dr. Cummings finanziell unterstützt von Eli Lilly and Company.

Adipositaschirurgie ist die effektivste langfristige Behandlung von Adipositas und andere gesundheitliche Vorteile wie hohe Raten von Typ 2 Diabetes und Bluthochdruck Remission1,9,15führt. Murine Modelle der bariatrischen Chirurgie bieten ein leistungsfähiges Werkzeug, um die Mechanismen zu identifizieren, durch die Adipositaschirurgie schnelle und deutliche Verbesserungen in Folgeerkrankungen der Adipositas verursacht. Darüb...

Da die Adipositas-Epidemie weltweit wächst hat Adipositaschirurgie Popularität gewonnen, da es die effektivste langfristige Behandlung für Adipositas1ist. Leider ist Gewichtsabnahme durch Diät und Bewegung schwer zu erreichen und relativ erfolglos über die langfristige2,3. Bariatrische Chirurgie, wie vertikale Sleeve-Gastrektomie (VSG) ist definiert als die Manipulation des Gastrointestinaltraktes zum Zwecke der Gewicht-Verlust-1,-4. Obwohl Gewichtsverlust ein prominenter Ergebnis der Adipositaschirurgie ist, bietet bariatrischer Chirurgie andere gesundheitliche Vorteile wie Fettleibigkeit Komorbiditäten zu verbessern und die Lebensdauer5Erweiterung. Zum Beispiel führt Adipositaschirurgie hohe Raten der Remission von Typ-2-Diabetes und Bluthochdruck und Reduzierung der Lebensdauer Risiko für die Entwicklung bestimmter Arten von Krebs1,6,7. Der Hinweis ist die Wirkung der Adipositaschirurgie Remission der Typ-2-Diabetes und Bluthochdruck verursachen oft bald nach der Operation und vor der Gewicht-Verlust-8,9beobachtet. Dies unterstreicht das Konzept, dass Mechanismen unabhängig vom Körpergewicht einen Beitrag zu den Nutzen für die Gesundheit nach der Operation beobachtet. Tiermodelle der bariatrischen Chirurgie entwickelt worden und werden genutzt, um die Mechanismen zu studieren, mit denen diese gesundheitlichen Vorteile10,11,12auftreten.
Wir haben ein Maus-Modell der VSG, validiert die wir, zu verschiedenen gentechnisch veränderten Mausmodellen beantragt haben, die Mechanismen zu studieren, durch die Adipositaschirurgie Adipositas Begleiterkrankungen wie Diabetes Typ 2, Bluthochdruck und Darmkrebs10 verbessert , 11 , 12. Nagetier-Modelle ermöglichen experimenteller Kontrolle und die Fähigkeit zur genetischen oder pharmazeutischen Manipulation um die Rolle bestimmter Gene oder Signalwege von Interesse zu definieren. Wir konzentrieren uns in erster Linie auf VSG weil VSG der am häufigsten durchgeführten bariatrischen Verfahren in der Klinik in den Vereinigten Staaten13 ist. VSG ist darüber hinaus eine einfache chirurgische Modell mit weniger anatomische Änderungen im Vergleich zu anderen Verfahren wie Roux-En-Y Magen-Bypass oder biliopankreatischen Diversion.
Unsere Maus-Modell der VSG rekapituliert die folgenden Auswirkungen der bariatrischen Chirurgie beim Menschen beobachtet: Gewichtsverlust, reduzierte Nahrungsaufnahme, verbesserte Glukose Verordnung Inselchen Funktion verbessert, erhöht postprandialen Glucagon-Like Peptid 1 (GLP-1)-Sekretion, Arterieller Blutdruck und erhöhte zirkulierende Gallensäure Konzentrationen10,11,12,13,14,15reduziert. Daher ist dies ein ideales Modell, um den Körper Gewicht abhängigen und unabhängigen Mechanismen zu studieren, durch die VSG verbessert oder löst Folgeerkrankungen der Adipositas. Darüber hinaus ist es ein zuverlässiges Modell, das mit anderen chirurgischen Eingriffen, so dass für die Untersuchung der Auswirkungen der VSG unter verschiedenen Erkrankungen mit größeren mechanistische Einblicke12kombiniert werden kann.

<table><tbody><tr><td>45% high fat diet</td><td>Research Diets</td><td>D12451</td><td></td></tr><tr><td>60% high fat diet</td><td>Research Diets</td><td>D12492</td><td></td></tr><tr><td>Boost</td><td>Nestle</td><td>160-67538</td><td>rich chocolate flavor</td></tr><tr><td>6-0 Suture</td><td>Ethicon</td><td>Z432</td><td>monofilament absorbable/taper</td></tr><tr><td>7-0 Suture</td><td>Covidien</td><td>8866127-01</td><td>monofilament absorbable/taper</td></tr><tr><td>Cotton Swabs</td><td>Fisherbrand</td><td>23-400-118</td><td>small</td></tr><tr><td>Cotton Swabs</td><td>Fisherbrand</td><td>233-400-101</td><td>large</td></tr><tr><td>Gauze</td><td>Various</td><td></td><td>4x4 4 ply and 2x2 4 ply</td></tr><tr><td>Foil</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Surgery drape</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>0.9% saline solution</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>LRS</td><td>Hospira</td><td>170RX</td><td></td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alcohol</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Eye Ointment</td><td>Paralube&amp;reg; Vet Ointment</td><td>17033-211-38</td><td></td></tr><tr><td>Tissue Adhesive</td><td>Vetbond</td><td>1469SB</td><td></td></tr><tr><td>Meloxicam (Metacam)</td><td>Boehringer Ingelheim</td><td>141-213</td><td>5 mg/ml</td></tr><tr><td>Enrofloxacin</td><td>Baytril</td><td>08713254-186599</td><td>22.7 mg/ml</td></tr><tr><td>Thin tipped hemostats</td><td>Fine Science Tools</td><td>13021-12</td><td></td></tr><tr><td>Metzenbaum Scissor</td><td>Fine Science Tools</td><td>14018-18</td><td></td></tr><tr><td>Iris Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>14058-09</td><td></td></tr><tr><td>Dumont Forcep</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-20</td><td></td></tr><tr><td>Serrated Forcep</td><td>Fine Science Tools</td><td>11020-12</td><td></td></tr><tr><td>Gavage needle</td><td>Fine Science Tools</td><td>18060-20</td><td></td></tr><tr><td>Microneedle driver</td><td>Fine Science Tools</td><td>12075-14</td><td></td></tr><tr><td>Spring Scissor</td><td>Fine Science Tools</td><td>15396-00</td><td></td></tr><tr><td>Insulin syringe</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1mL syringe</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>20mL syringe</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Glucometer (one touch ultra mini)</td><td>Lifescan</td><td>70021208</td><td></td></tr><tr><td>Multiplex insulin and GLP-1 kit</td><td>Meso Scale Discovery</td><td>K15171C-1</td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism 6.00</td><td>GraphPad Software</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nestlets</td><td>Ancare</td><td>NES3600</td><td></td></tr></tbody></table>

a murine model of vertical sleeve gastrectomy

Bariatrische Chirurgie, wie vertikale Sleeve-Gastrektomie (VSG), ist eine Operation des Gastrointestinaltraktes, die zum Zwecke der Gewichtsreduktion durchgeführt wird. Adipositaschirurgie ist derzeit die wirksamste langfristige Behandlung von Fettleibigkeit. Neben Gewichtsverlust Adipositaschirurgie gesundheitlichem Zusatznutzen wie Vergebung der Remission von Bluthochdruck, Diabetes Typ 2 produziert und verringert Risiko für bestimmte Arten von Krebs. Die Mechanismen über Gewichtsverlust für diese Vorteile bleiben unvollständig definierten. Daher werden Tiermodelle der bariatrischen Chirurgie entwickelt und validiert, um die Mechanismen, die diese Leistungen mit dem Ziel der Verbesserung der Magen-Darm-Physiologie verstehen und neue therapeutische Zielstrukturen zu identifizieren identifizieren. VSG ist die am häufigsten durchgeführten bariatrischen Verfahren in der Klinik in den Vereinigten Staaten geworden, weil es sehr effektiv ist bei der Herstellung von Gewichtsverlust und metabolische Verbesserung und ist einfacher durchzuführen als andere bariatrischen Eingriffe. Daher haben wir entwickelt und validiert ein Mausmodell der VSG. Diese VSG-Mausmodell rekapituliert viele der Wirkungen von VSG gesehen beim Menschen, darunter auch verbesserte Blutzucker- und Blutdruck-Verordnung. Die Methode basiert von transecting entlang der größere Krümmung des Magens auf Isolation des Magens, Unterbindung der Magen Schiffe und Entfernung von 70 % des Magens. Dieses chirurgische Protokoll haben wir erfolgreich an verschiedenen gentechnisch veränderten Mauslinien definieren die mechanistischen Mitwirkenden zu den Vorteilen der VSG eingesetzt. Darüber hinaus wurde diese VSG-Mausmodell mit anderen chirurgischen Techniken, mechanistische Einblicke zu erreichen kombiniert. Daher ist dies eine einfache und vielseitige Modell für die Untersuchung von Magen-Darm-Physiologie und die gesundheitlichen Vorteile der Adipositaschirurgie.

Die Farce und VSG-Verfahren sind in Abbildung 1dargestellt. Abbildung 1A zeigt, wo die Naht Linie entlang der Magen Wände während des Verfahrens Schein platziert wird. Derselben Gegend ist, wo der Magen während der VSG Operation geschnitten wird. Abbildung 1 b zeigt die röhrenförmige Überbleibsel der Magen links nach Leistung der VSG.
<p class="jove_content" fo:keep-together.within-page="1"...

Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy at JoVE.com

A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy

Das folgende beschreibt die Leistung der vertikalen Sleeve-Gastrektomie bei Mäusen. Dies ist eine Art von Gewichtsverlust Chirurgie, die etwa 70 % des Magens entfernt wird.

Ein Mausmodell der vertikalen Sleeve-Gastrektomie

Bariatric surgery, such as vertical sleeve gastrectomy (VSG), is a surgery of the gastrointestinal tract that is performed for the purpose of weight loss. ...

a-murine-model-of-vertical-sleeve-gastrectomy

Research

JoVE Journal

Biology

11.1K Aufrufe.  Cornell University. Das folgende beschreibt die Leistung der vertikalen Sleeve-Gastrektomie bei Mäusen. Dies ist eine Art von Gewichtsverlust Chirurgie, die etwa 70 % des Magens entfernt wird.

Serie: A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy

Murine Pancreatic Islet Isolation

Hi, I am Greg Zott. I'm with the UCSF Diabetes Center in the Bluestone Laboratory, and today I'm gonna show you the process for isolating mouse eyelets. The procedure involves the injection of a collagenase solution into the pancreas of a C3 H donor mouse, where we will then remove that pancreas, digest it away, purify the eyelets on a fial gradient, and then handpick them for ultimate transplant into the kidney capsule of a diabetic NOD mouse, Which will be our recipient.Before we start this procedure, we diluted our ATE solution in a modified Hanks buffer and we have adjusted the concentration specific for the strain of mouse that we're using the C3 H.We found digests better at a 0.8 mgs per mil collagenase solution, and we will use that to inject into the common bile duct to distend the pancreas.Performing. The procedure today Will be Pavo codre of the diabetes center. He will inject, open up the mouse, expose the the intestines, and then inject into the common bile duct.We will spray down the mouse with ethanol to keep the hair down, and then we will also verify that the mouse has been sacrificed properly with a toe pinch. Pavo will now open up the mouse and exposing the intestine and the pancreas with a midline incision. The diaphragm will also be cut to verify that the mouse will be sacrificed.Before we get started, I'd like to point out some of the important structures. The stomach is lying right here with the pancreas attached underneath into the duodenum and above. This is the liver where we'll find the gallbladder and the common bile duct, which you can see right here.So what Pavo will do next is he will isolate the small intestine, find where the common bile duct enters the small intestine. Once the intestine is exposed, we clamp on either side of the common bile duct with mosquito clamps. We find that this allows more collagenates to enter the pancreas while other groups try to direct the clamp on top of the common bile duct.We find that this is a better technique in allowing enzyme to enter the pancreas. This is a gentle procedure. You don't want to tear the bowel.You wanna allow the clamps to lie gently on either side of the common bile duct. Now we will find a gallbladder, and once the gallbladder's exposed, we will use that as a guide to injecting the collagenase into the common bile duct. Powell's using a 30 gauge needle with a five cc syringe containing three mills of collagenase solution.As he's entering the common bile duct, he's distending that duct with collagenase solution and then he travels down the common bile duct till he reaches near the intestine. And as he's going down, the enzyme solutions being pumped into the injected into the pancreas. Now that the pancreas is inflated with collagenase solution, Powell's gonna remove the hemostats and then remove the pancreas from the the mouse carefully tearing it away from the intestine.He removes it from the stomach. Okay, and then using the spleen as a handle, he lifts up the pancreas and then slowly snips it away in the common bile duct, and that's it. Pancreas is laid out and then the spleen is removed, and there he's removing the meso enteric tissue, and then the pancreas is placed in a two mill collagenase solution and a sterilized glass vial and it's placed back on Ice.The isolated pancreas that we put into the glass vials will now be placed into a 37 degree water bath for approximately 17 minutes. We placed them into a 50 mil conical rack so that they don't float up. Once during the bath, the timer starts and the digestion begins.Once the digestion time is completed, vials are removed, and then they are shaken and disrupted gently. And once the tissue starts falling apart, the vial is then placed on ice. A sterile screen is placed over a 400 mil beaker that contains washing buffer.The pancreas digest is then carefully poured over the screen into the wash buffer. For demonstration purposes, the hood has been turned off and the glass of the hood has been raised so we could see what we're doing. Once the pancreas digest is poured into the beaker, the vials are rinsed with the same washing buffer and the wash buffer placed over the screen.We have a syringe filled with washing buffer. We will use that to forcefully wash the tissue through the screen. The idea is to release any loose eyelets that are unattached to the matrix, but leaving the membranes and the undigested tissue on the screen.And when you're finished washing a tissue, this is what you usually See at the end of the procedure. The Pancreas tissue that's in the bottom of the tube will now be transferred to two 50 mil conical, and the tissue will be washed, the tissue's mixed evenly, and then distributed evenly so that we have a equal pellet volume in each tube. The beaker is now rinsed with more washing buffer.The sides are rinse so that you get all tissue that is entered the beaker again. Then it's equally distributed between each two, both 50 mil. Conical then are topped off with wash buffer.The tissue is inverted several times and then placed into a centrifuge. This is a quick spin. The centrifuge is allowed to reach a thousand RPM and then is turned off.The tissue at this time is very S eyelets are very sensitive, and you don't want to over compact them. The tubes are removed and we will do this wash step three more times. This is the end of the third wash.The components of the 50 mil conical tube are transferred to the 15 conical tube and centrifuge for a thousand RP M and then stopped. The supernat will be removed and the first part of the FI Call will be started. We are at the step where we Have our pelleted di pancreas digest.We'll resuspend that tissue so it's nice and loose to the pellets. We'll add the first density gradient, which is 1 1 0 8. We'll add five mils to each tube.The pellet is then mixed thoroughly in each of the gradients. It's important that you get good tissue distribution in your heaviest gradient. Now we will layer two mils of 1 0 9 6 density.We will then on top of that, layer two mils of 1 0 6 9 density, and then on top of that 1 0 3 7 density. It's important while you're layering the densities that you don't mix. Then all the layers have been added to the tube.And you can see this is the top of 1 1 0 8, the top of 9 1 0 9 6, the top of 1 0 6 9 and the top of 1 0 3 7. And you could see the tissue is already starting to move to its proper density even without centri fusion. The fial gradients are brought up to speed at 1800 RPM for 15 minutes, and remember to keep the brake off after the tubes are removed from the centrifuge.You can see between the 0 0 9 6 and 0 0 7 layer, there's a nice band of eyelet tissue Pablo's. Now removing the 0 3 7 layer to remove any tissue debris and DNA that might have been released during the processing. Using a sterile plastic pasture pipette, he will now remove the islet layer and transfer them to a 50 mil conical containing 25 mils of wash buffer.You want do this step quickly because fol is toxic to eyelets. We actually removed the entire 0 6 9 and 0 9 6 layer. Pavo cuts the top of the plastic pasture pipette and rinses it with wash buffer.The eyelets are then centrifuge like we centrifuge previously. Centrifuge is brought up to a Thousand RPM and then we stop it and We aspirate off. The supernatant eyelets will be washed three times with wash media.So we just completed the eyelid Isolation process we took from the digest to the fol gradient to the purified eyelets after our third wash with wash buffer, we resuspended the eyelets in our RPMI media and we played it in a tissue culture plate. These eyelets are now ready for in vitro assays or in vivo preps like eyelet Transplant.

Murine Inselzellen der Bauchspeicheldrüse Isolation

Forschung

Biologie

Murine Model of Hindlimb Ischemia 

In the United States, peripheral arterial disease (PAD) affects about 10 million individuals, and is also prevalent worldwide. Medical therapies for symptomatic relief are limited. Surgical or endovascular interventions are useful for some individuals, but long-term results are often disappointing. As a result, there is a need for developing new therapies to treat PAD. The murine hindlimb ischemia preparation is a model of PAD, and is useful for testing new therapies. When compared to other models of tissue ischemia such as coronary or cerebral artery ligation, femoral artery ligation provides for a simpler model of ischemic tissue. Other advantages of this model are the ease of access to the femoral artery and low mortality rate. 
In this video, we demonstrate the methodology for the murine model of unilateral hindimb ischemia. The specific materials and procedures for creating and evaluating the model will be described, including the assessment of limb perfusion by laser Doppler imaging. This protocol can also be utilized for the transplantation and non-invasive tracking of cells, which is demonstrated by Huang et al.1.

Murine Model of Hindlimb Ischemia

The surgical procedure for induction of unilateral hindlimb ischemia is demonstrated, with confirmation of ischemia by laser Doppler perfusion imaging.

Mausmodell der hinteren Gliedmaßen Ischämie

In the United States, peripheral arterial disease (PAD) affects about 10 million individuals, and is also prevalent worldwide.  Medical therapies for ...

Murine Renal Transplantation Procedure

Renal orthotopic transplantation in mice is a technically challenging procedure. Although the first kidney transplants in mice were performed by Russell et al over 30 years ago (1) and refined by Zhang et al years later (2), few people in the world have mastered this procedure. In our laboratory we have successfully performed 1200 orthotopic kidney transplantations with &gt; 90% survival rate. The key points for success include stringent control of reperfusion injury, bleeding and thrombosis, both during the procedure and post-transplantation, and use of 10-0 instead of 11-0 suture for anastomoses.
Post-operative care and treatment of the recipient is extremely important to transplant success and evaluation. All renal graft recipients receive antibiotics in the form of an injection of penicillin immediately post-transplant and sulfatrim in the drinking water continually. Overall animal health is evaluated daily and whole blood creatinine analyses are performed routinely with a portable I-STAT machine to assess graft function.

Renal transplantation in mice is a technically challenging procedure that requires careful post-operative care and treatment for success.

Murine Renal Transplantation

Renal orthotopic transplantation in mice is a technically challenging procedure. Although the first kidney transplants in mice were performed by Russell ...

Murine Model for Parkinson's Disease: from 6-OH Dopamine Lesion to Behavioral Test

Parkinson's disease (PD) affects at least 6.5 million people worldwide, irrespective of gender, social, ethnic, economic, or geographic boundaries. Key symptoms, such as tremor, rigidity and bradikinesia, develop when about 3/4 of dopaminergic cells are lost in the substantia nigra, and fail to provide for the smooth, coordinated regulation of striatal motor circuits. Depression and hallucinations are common, and dementia eventually occurs in 20% of patients. At this time, there is no treatment to delay or stop the progression of PD. Rather, the medications currently available aim more towards the alleviation of these symptoms. New surgical strategies may reversibly switch on the functionally damaged circuits through the electrical stimulation of deep brain structures, but although deep brain stimulation is a major advance, it is not suitable for all patients. It remains therefore necessary to test new cell therapy approaches in preclinical models.
Selective neurotoxic disruption of dopaminergic pathways can be reproduced by injection of 6-hydroxydopamine (6-OHDA) or MPTP (1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tertahydropyridine) whereas depleting drugs and oxidative-damaging chemicals may also reproduce specific features of PD in rodents. Unlike MPTP, 6-OHDA lesions cause massive irreversible neuronal loss, and can be uni- or bilateral. The 6-OHDA lesion model is reliable, leads to robust motor deficits, and is the most widely used after 40 years of research in rats1. As interactions between grafted cells and host can now be studied more thoroughly in mice rather than in rats, the model has been transposed to mice2,3, where it has been recently characterized4.
In this video, we demonstrate how to lesion the left nigro-striatal pathway of anesthetized mice by slowly delivering 2.0 &mu;L of 6-OHDA through a stereotaxically inserted micro-syringe needle. The loss of dopaminergic input occurs within days, and the functional impairments can be monitored over post-operative weeks and months by rating animal rotations induced by dopaminergic agents5. Here, we show full-body contralateral rotations occurring 10 minutes after a single subcutaneous administration of apomorphine, measured one month after the lesion. Outcomes and drawbacks are discussed below.

Parkinson disease is caused by loss of dopaminergic innervation to the striatum, which can be experimentally induced by 6-OH-dopamine. We describe how to perform a stereotaxic lesion and to monitor apomorphine-induced rotational behavior in mice. This model is useful and reliable for testing new therapies for Parkinson disease.

Mausmodell für Morbus Parkinson: von 6-OH Dopamin Läsion Behavioral-Test

Parkinson's disease (PD) affects at least 6.5 million people worldwide, irrespective of gender, social, ethnic, economic, or geographic boundaries. Key ...

LAD-Ligation: A Murine Model of Myocardial Infarction

Research models of infarction and myocardial ischemia are essential to investigate the acute and chronic pathobiological and pathophysiological processes in myocardial ischemia and to develop and optimize future treatment.
Two different methods of creating myocardial ischemia are performed in laboratory rodents. The first method is to create cryo infarction, a fast but inaccurate technique, where a cryo-pen is applied on the surface of the heart (1-3). Using this method the scientist can not guarantee that the cryo-scar leads to ischemia, also a vast myocardial injury is created that shows pathophysiological side effects that are not related to myocardial infarction. The second method is the permanent ligation of the left anterior descending artery (LAD). Here the LAD is ligated with one single stitch, forming an ischemia that can be seen almost immediately. By closing the LAD, no further blood flow is permitted in that area, while the surrounding myocardial tissue is nearly not affected. This surgical procedure imitates the pathobiological and pathophysiological aspects occurring in infarction-related myocardial ischemia.
The method introduced in this video demonstrates the surgical procedure of a mouse infarction model by ligating the LAD. This model is convenient for pathobiological and pathophysiological as well as immunobiological studies on cardiac infarction. The shown technique provides high accuracy and correlates well with histological sections.

This video demonstrates how to use a fast and reliable model to study pathobiological and pathophysiological processes of myocardial ischemia.

LAD-Ligation: einem Mausmodell der Myokardinfarkt

Research models of infarction and myocardial ischemia are essential to investigate the acute and chronic pathobiological and pathophysiological processes ...

Techniques of Sleeve Gastrectomy and Modified Roux-en-Y Gastric Bypass in Mice

Obesity is a major public health issue, with a prevalence of 4 to 28% for men and 6.2 to 36.5% for women in Europe (from 2003 to 2008). Morbid obesity is frequently associated with metabolic complications, such as type 2 diabetes, hypertension, and dyslipidemia, reducing life expectancy and quality. In the absence of any effective noninvasive treatments, bariatric surgery is a valuable therapeutic option for patients with morbid obesity (body mass index (BMI) &#62;40 kg/m2), leading to long-term, sustained weight loss and improvements in metabolic complications. However, the underlying cellular and molecular mechanisms sustaining the beneficial effects of bariatric surgery are not yet fully understood. Due to the numerous genetically-modified strains available, the mouse model is the most convenient animal model to explore the molecular mechanisms behind the pleiotropic beneficial effects of bariatric surgeries. Here, we detailed the optimized healthcare methods and surgical protocols in mice for the two most widely-used bariatric surgeries: the sleeve gastrectomy and the modified Roux-en-Y gastric bypass. Deciphering the molecular mechanisms underlying the therapeutic effects of bariatric surgeries offers the promise of identifying new therapeutics targets.

Bariatric surgery is the most efficient way to reduce body weight and the deadly metabolic complications (diabetes, obesity, and dyslipidemia) frequently associated with morbid obesity. Mouse models of bariatric surgery represent a unique asset for deciphering molecular mechanisms behind the beneficial effects of these surgeries on diabetes, hypertension, and dyslipidemia.

Techniken der Schlauchmagen-Operation und Modified Roux-en-Y-Magenbypass bei Mäusen

Obesity is a major public health issue, with a prevalence of 4 to 28% for men and 6.2 to 36.5% for women in Europe (from 2003 to 2008). Morbid obesity is ...

Medizin

Efficient Production and Purification of Recombinant Murine Kindlin-3 from Insect Cells for Biophysical Studies

Kindlins are essential coactivators, with talin, of the cell surface receptors&#160;integrins and also participate in integrin outside-in signalling, and the control of gene transcription in the cell nucleus. The kindlins are ~75 kDa multidomain proteins and bind to an NPxY motif and upstream T/S cluster of the integrin &#946;-subunit cytoplasmic tail. The hematopoietically-important kindlin isoform, kindlin-3, is critical for platelet aggregation during thrombus formation, leukocyte rolling in response to infection and inflammation and osteoclast podocyte formation in bone resorption. Kindlin-3&#39;s role in these processes has resulted in extensive cellular and physiological studies. However, there is a need for an efficient method of acquiring high quality milligram quantities of the protein for further studies. We have developed a protocol, here described, for the efficient expression and purification of recombinant murine kindlin-3 by use of a baculovirus-driven expression system in Sf9 cells yielding sufficient amounts of high purity full-length protein to allow its biophysical characterization. The same approach could be taken in the study of the other mammalian kindlin isoforms.

Kindlins are fundamental to cell adhesion through integrins but studies of them have been hampered by the difficulty encountered in expressing them recombinantly in bacterial hosts. We describe here methods for their efficient production in baculovirus-infected insect cells.

Effizienten Herstellung und Reinigung von rekombinantem murinem Kindlin-3 von Insektenzellen für biophysikalische Studien

Kindlins are essential coactivators, with talin, of the cell surface receptors&#160;integrins and also participate in integrin outside-in signalling, and ...

Sleeve Gastrectomy in Mice using Surgical Clips

The number of people who are overweight and obese is continually increasing both in the adult and adolescent populations. This coincides with the increased universal phenomenon of type 2 diabetes (T2D) and other metabolic problems. Bariatric surgery, such as SG, is currently one of the most effective and commonly used long-term treatment for obesity and T2D, but the association between them is not completely explored yet. The mechanisms underlying the outcomes seen after bariatric surgery in humans can be investigated based on preclinical animal studies. The SG reduces body weight, glucose levels and many metabolic parameters, and is easy to perform with a low incidence of complications. The goal of this work is to provide a simple method and an uncomplicated preclinical model of bariatric surgery in animals for researchers.

The prevalence of diabetes and obesity is continuously increasing worldwide. The mechanisms between diabetes, obesity and their associated mortality and co-morbidities need to be further investigated. Here, we present a protocol for sleeve gastrectomy (SG) in animals as an uncomplicated preclinical model of bariatric surgery.

Ärmel-Gastrektomie bei Mäusen mit chirurgischen Clips

The number of people who are overweight and obese is continually increasing both in the adult and adolescent populations. This coincides with the ...

Single-Anastomosis Duodeno-Ileal Bypass with Sleeve Gastrectomy Model in Mice

Obesity is a major health issue worldwide. As a response, bariatric surgeries have emerged to treat obesity and its related comorbidities (e.g., diabetes mellitus, dyslipidemia, non-alcoholic steatohepatitis, cardiovascular events, and cancers) through restrictive and malabsorptive mechanisms. Understanding the mechanisms by which these procedures allow such improvements often require their transposition into animals, especially in mice, because of the ease of generating genetically modified animals. Recently, the single-anastomosis duodeno-ileal bypass with sleeve gastrectomy (SADI-S) has emerged as a procedure that uses both restrictive and malabsorptive effects, which is being used as an alternative to gastric bypass in case of major obesity. Thus far, this procedure has been associated with strong metabolic improvements, which has led to a marked increase in its use in daily clinical practice. However, the mechanisms underlying these metabolic effects have been poorly studied as a result of a lack of animal models. In this article, we present a reliable and reproducible model of SADI-S in mice, with a special focus on perioperative management. The description and use of this new rodent model will be helpful for the scientific community to better understand the molecular, metabolic, and structural changes induced by the SADI-S and to better define the surgical indications for clinical practice.

Single-anastomosis duodeno-ileal bypass (SADI-S) is an emerging bariatric procedure with important metabolic effects. In this article, we present a reliable and reproducible model of SADI-S in mice.

Duodeno-ilealer Bypass mit Sleeve-Gastrektomie-Modell bei Mäusen

Obesity is a major health issue worldwide. As a response, bariatric surgeries have emerged to treat obesity and its related comorbidities (e.g., diabetes ...

Murine Vertical Sleeve Gastrectomy: A Surgical Procedure to Downsize Stomach in Experimental Mouse Models

Source: Garibay, D., Cummings, B. P. <a href="https://www.jove.com/video/56534" target="_blank">A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy.</a> J. Vis. Exp. (2017)
In this video, a vertical sleeve gastrectomy procedure is performed on an experimental mouse model. This procedure helps remove a significant portion of the stomach along its greater curvature.

Maus Vertical Sleeve Gastrektomie: Ein chirurgischer Eingriff zur Verkleinerung des Magens in experimentellen Mausmodellen

Source: Garibay, D., Cummings, B. P. A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy. J. Vis. Exp. (2017)
In this video, a vertical sleeve gastrectomy ...