מחקר זה נתמך על ידי NIH/NCI R21CA195002-01A1, מועצת של הנשיא נשים קורנל, האחווה גיוון SUNY לתואר שני. מעבדה של ד ר קמינגס גם קיבלה מימון במהלך תקופת הפרוייקט תוכנית אימונים של ביולוגיה סרטן של קורנל השוואתי, Eli Lilly and Company.

כל הפרוטוקולים ניסיוני אושרו על ידי קורנל אוניברסיטת אכפת חיה מוסדיים ועל שימוש הוועדה.
1. בפגישת ההכנה
הערה: מחקר עכברים הם בדרך כלל על C57BL הנוצרות על-ידי תזונה שמנים רקע לבצע מחקרים הנוגעים translationally האנושי השמנה ועמידות לאינסולין. זכריים ונקביים עכברים עשויים להילמד כפי שמתואר והשלבים הבאים.
<ol>
	<li>בגיל של חודשיים, במקום עכברים על 45% או 60% דיאטה שומן גבוהה למשך 2 חודשים (ראה טבלה של חומרים). הערה: עכברים אכלו דיאטה שומן גבוהה ליצירת פנוטיפ של שמנים, עמידות לאינסולין. תקופות ארוכה או קצרה יותר של עשיר בשומן האכלה עשוי לשמש בהתאם מטרות המחקר.</li>
	<li>מה לאכול עכברים ad libitum עד הניתוח. אם למדידות בסיסית נדרשים, לאחר 7 שבועות של שומן גבוהה דיאטה האכלה, מהר עכברים במשך 6 שעות או למשך הלילה, לקחת דגימת דם הבסיסית למדידת מטבוליטים של הריבית (למשל, גלוקוז).</li>
	<li>המשך עכברים על שומן גבוהה דיאטה ולאפשר עכברים שבוע להתאושש לאחר איסוף דם לפני ניתוח דמה או VSG. במקום עכברים על נוזל דיאטה (ראה טבלה של חומרים) ארבעה ימים לפני הניתוח. הערה: עכברים מתוחזקים בדיאטת נוזלים לפני ואחרי ניתוח כדי לנקות את מערכת העיכול של חלקיקי החומר עשוי לפגום את התגובה הריפוי.</li>
	<li>לעקר את הפריטים הבאים לפני הניתוח: רדיד אלומיניום, גזה, כותנה משופעת applicators (CTAs) ומכשירים כירורגיים (עוצר דימום, ההפעלה מספריים, מספריים איריס, דומונט forcep, משונן בראון-לאדאמסון forcep, gavage המחט, הנהג microneedle, מעיין מספריים ).</li>
</ol>
2. ניתוח אנכי שרוול קיבה ונהלים המזויפים
<ol>
	<li>ביום של הניתוח שוקלים עכברים להשיג מידה משקל בסיסית.</li>
	<li>לצייד את החדר ניתוח עם הרדמה המערכת, אמבט מים מחומם, כרית החימום. הגדר את המים הרותחים 37 ° C ולהשתמש בו כדי לחמם 0.9% תמיסת להשקיה. לנקות את השדה כירורגית עם 70% אתנול ולהשתמש סטרילי טכניקה כדי לפתוח חבילת ניתוח בלוק וכלים. הערה: כרית החימום משמש כדי לחמם את החיה במהלך הניתוח וההחלמה מן ההרדמה.</li>
	<li>באמצעות חדר אינדוקציה, עזים ומתנגד את העכבר עם 5% איזופלוריין ו- O2 קצב הזרימה של 1 ליטר לדקה אשר העכבר נמצא המטוס המתאים של הרדמה על ידי ביצוע קמצוץ הבוהן. לשמור על העכבר עם איזופלוריין 1-3%, שיעור זרימת2 O של 0.6 L/min, ברגע מטוס עקבית של הרדמה הושגה.</li>
	<li>ברגע העכבר הוא מורדם, מקום עין משחה (ראה טבלה של חומרים) על העיניים שלו כדי לשמור על לחות במהלך הניתוח. בשלב זה גם ניהול של שיכוך כאב, כגון meloxicam (2 מ"ג/ק"ג subcutaneously). קליפ השיערה הטבור כדי השחי החזקת את העור בעדינות כדי לספק מתח.
	<ol>
		<li>כמו עור העכבר דק ועדין, לטפל כדי לא לגרום נגעים בעור בעת מסיכה לשיער. לנקות את העור עם povidone יוד ואלכוהול.</li>
		<li>דון כפפות סטריליות ולהכין את שדה כירורגי סטרילי וכלי נגינה. בצע את שאר ההליך בטכניקה סטרילי. הכינו את השדה כירורגי סטרילי על-ידי הצבת וילונות כירורגי סטרילי משני צדדיו של העכבר. השתמש בנייר בלוק ליצירת תלוי כירורגי על העכבר.</li>
		<li>חותכים חור קטן והאלומיניום כדי לאפשר גישה הבטן של העכבר.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>לעשות חתך של העור מהבטן אמצע (טבורית) לרמה של הסחוס xiphoid באמצעות מספריים של איריס. לזהות את לינאה אלבה ושימוש איריס מספריים לחתוך דרך הקיר הגוף לאורך linea alba. השתמש CTAs כדי לרומם בעדינות את הבטן מתוך הבטן ומנתחים ואז שמותחת את omentum greater ממני עקמומיות רבתי של הקיבה.</li>
	<li>מאתרים ומפסיקים את העורק קיבה קצר שזורם בין את הפונדוס של הקיבה והטחול על ידי הצבת שני ליגטורות באמצעות תפרים שנספג monofilament 7-0. השימוש מעיין מספריים לחתוך בין ליגטורות שני. ברגע העורק הוא transected, מלא exteriorize הבטן של חלל הבטן. במקום גזה תחת הקיבה ורטוב עם תמיסת מלח כדי לשמור את הרקמה לחות.</li>
	<li>שאם שגרת
	<ol>
		<li>עבור ההליך המזויפים, להציב דפוס מתמשך פשוט רופף של התפר באמצעות 6-0 monofilament שנספג לתפור עם מחט להתחדד. מתחילים 2 מ מ בצד ימין (של מנתח ימין) של הוושט. למקם את קו תפרים לאורך הקיר קיבה הגחון ולאחר מכן המשך לאורך הקיר קיבה הגבי. הערה: עבור כל המניפולציות קיבה, יש להשתמש רק בתפר שנספג monofilament כדי להקטין את הסיכון של זיהום. יתר על כן, השתמש רק לתפור עם מחט להתחדד עבור כל המניפולציות קיבה, השימוש מחט חיתוך מגדיל את הסיכון של התפר "משיכה-דרך" שמוביל נזק לרקמות קיבה פצע התבקעות.</li>
		<li>עוברים את המחט לחלוטין דרך קיר קיבה אחד תוך הצבת את התפר. ודא התפר הוא שוכב שטוח, אך לא הגבלת הקיבה. בעדינות לקשור את התפר להשתמש 3-4 זריקות, דלג לשלב 2.9.</li>
		<li>במהלך התהליך VSG לדלג על שלב 2.7 והמשך לשלב 2.8.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>הליך VSG
	<ol>
		<li>עבור ההליך VSG, מאתרים ומפסיקים הענפים הבולטים של קיבה עורק, וריד עם 7-0 monofilament שנספג לתפור עם מחט להתחדד באמצעות 3 זריקות עבור כל קשר. מקם ליגטורות מתחת (כלומר, לכיוון עקמומיות פחותה של הקיבה) הקו המיועד של חיתוך. הערה: קו המיועד של חיתוך מתחיל ב ~ 2 מ מ מעל (כלומר לכיוון שכדור גדול של הקיבה) את החריץ הלב של הקיבה, לפחות 2 מ מ מתחת pilcatus מרגו ומרחיב לסופה proximal של האונה הימנית של הלבלב. בדרך כלל, ישנם כלי 4 לכל קיר הקיבה צריכה להיות מאתרים; עם זאת, זה עשוי להשתנות בין עכברים.</li>
		<li>כדי למנוע זליגת תוכן קיבה במהלך כריתת קיבה, במקום קו רציף פשוטה של תפר עובר דרך שני קירות קיבה רק מתחת לקו המיועד של חיתוך באמצעות 6-0 monofilament שנספג לתפור עם מחט להתחדד. להתחיל את קו תפרים לימין של המנתח של הוושט ומתחת את מרגו pilcatus והסוף ממש מעל הלבלב.</li>
		<li>הצב דק-טיפ טוב מעל לקו התפר והשתמש מעיין מספריים לחתוך בין קו תפרים ועוצרי דימום. להסיר את רקמת קיבה transected מהשדה כירורגי סטרילי.</li></ol></li></ol>השתמש CTAs כדי לנקות דם, digesta את הקיבה.
		<li>מחזקים תמורה של דפנות הקיבה באמצעות 6-0 monofilament שנספג לתפור עם מחט להתחדד באמצעות תבנית פשוטה מקוטע. הערה: דפוס פשוטה תפר רציף מומלץ מאז זה מספק הסגר מאובטח יותר מאשר דפוס פשוטה בתפר רצוף.</li>
		<li>ריקון השריד קיבה עם תמיסת מלח לאורך כל ההליך על מנת לשמור על הרקמה לח ונקי. שימוש במחט gavage 20 גרם המצורפת מזרק 20-mL לבצע שטיפת קיבה עם תמיסת מלח. השתמש בגודל כזה כדי להבטיח לחץ נאותה מסופק מבלי להסתכן נזק לרקמות קיבה מלחץ יתר או נזק לרקמות קיבה בשוגג משימוש מחט המחודד רגיל.</li>
		<li>השתמש מינימום של 20 קשר לסגור היטב את הבטן; שים לב הסגר לאורך הוושט, הצד הזה קשה יותר לגישה, ולכן לעתים קרובות אתר של התבקעות.</li>
		<li>ודא כי ישנם אין דליפות בהקשת בעדינות על הבטן עם CTAs. אם ניתן לזהות דליפות, במקום נוספים פשוט קשר רציף על האזורים של דליפה, ואז להדליף את הבדיקה שוב. בדיקת דליפת עד אין נזילה מזוהה.</li>
		<li>לעשות בדיקת הסימפון המכתשי יסודית הסופי של הקיבה באמצעות לפחות 60 מ"ל של תמיסת מלח כדי להבטיח כי לא זיהומיות חלקיקי כבר נשאר מאחור.</li>
	
	
	<li>מקם את הבטן חזרה לתוך חלל הבטן מתחת לכבד באמצעות של CTA. במקום CTAs לאורך האספקט הגבי של חלל הבטן כדי לספוג את כל הנוזלים העודפים. באמצעות מחט 18 גרם בוטה, להזריק תמיסת הרטמן (מס הכנסה) עם או בלי אנטיביוטיקה (0.5 mL מס הכנסה + /-20 מ"ג/ק"ג Enrofloxacin) ישירות לתוך חלל הבטן, בדיוק לפני סגירת מעגל. הערה: זה מחליף את אובדן הנוזלים מנוסים במהלך הניתוח, מספק שיטה ישירה של אנטיביוטיקה כדי שהיישום באתר כירורגית לסייע עם התאוששות.</li>
	<li>סגור את השכבה שריר הבטן באמצעות 6-0 monofilament שנספג לתפור עם מחט להתחדד בדפוס מקוטע פשוטה. אז סגור את שכבת העור 6-0 monofilament בתפר שנספג בדפוס מתמשך פשוטה.</li>
	<li>במקום דבק רקמות על העור וקפל העור מעבר לקו התפר לקבור את התפר כך העכבר לא יכול לשבש את הסגר פצע וכאב לאחר הניתוח.</li>
	<li>לבטל את איזופלוריין ולתת העכבר לשחזר על כרית חימום במשך 10-15 minbefore להחזירו לכלוב שלה הביתה. אין להשאיר את החיה ללא השגחה עד שהכרתו יכולה להתקדם.</li>
	<li>לשמור על בעלי חיים שוכנו ביחידים עד התאושש מהניתוח. הערה: אם מדידות צריכת מזון מדויק ניתן להשיג לאורך כל המחקר, עליך להמשיך ישוכנו ביחידים במהלך המחקר עכברים. יש סיכון של גוף זר חסימה מאכילת הביתה כלוב מצעים. צריך להיות בו חיות בכלובים ללא מצעים חוץ קינון חומר להעניק העשרה (ראה טבלה של חומרים).</li>

3. לאחר הניתוח בעכבר והטיפול מדידות
<ol>
	<li>לחזור על העכבר בכלוב הביתה ומניחים את הכלוב על כרית החימום. לשמור על עכברים בדיאטת נוזלים לפחות 7 ימים לאחר הניתוח. ניהול של שיכוך כאב, כגון meloxicam (2 מ"ג/ק"ג subcutaneously), 2 ימים לאחר הניתוח. הערה: אנטיביוטיקה, כגון enrofloxacin (20 מ"ג/ק"ג), יכול להינתן עד 7 ימים לאחר הניתוח. אנטיביוטיקה ניתנות כדי למזער את הסיכון של הידבקות הליך כירורגי או לא ייתכן שתידרש בהתאם לרמת עקרות בכל ההליך. עם זאת, אם אנטיביוטיקה משמשים, הם חייבים להיות מנוהל על מנת עכברים כל באותו מחקר כדי לשמור על עקביות.</li>
	<li>במהלך התקופה שלאחר הניתוח להעריך את משקל הגוף, צריכת המזון, על הפרשה, רמת הפעילות, והמחיקה מדי יום לפחות כדי להבטיח ריפוי והתאוששות נכונה. לנהל מעקב לאחר הניתוח למשך 14 ימים לאחר הניתוח. הערה: כשל כירורגי בדרך כלל נתפסת מיד לאחר הניתוח או בתוך שלושה ימים שלאחר שמעשית. חיות לא לאכול או לשתות ביום השני לאחר הניתוח חייבים לפקח מקרוב על סיבוכים כירורגיים.</li>
	<li>לאחר סיום מוצלח של התקופה שלאחר הניתוח, למדוד צריכת במשקל ואוכל הגוף באופן קבוע לאורך כל המחקר כדי להבטיח תחזוקה של פנוטיפ המתאים.</li>
	<li>לבצע מבחן רגישות גלוקוז דרך הפה (OGTT) כדי להעריך גלוקוזה, הפרשת אינסולין הגלוקוז מגורה, ולבזוז הפרשת הורמון.
	<ol>
		<li>לבצע את OGTT בעכברים לאחר צום אותם 6-אייץ ', ולאחר מכן gavage עכברים עם 50% פתרון דקסטרוז במינון 1 g/kg.</li>
		<li>הזנב לאסוף דגימות דם-0, 2.5, 5, 15, 30, 60, 120 דקות לאחר gavage. למדוד את רמת הסוכר בדם עם סוכר בנקודות זמן אלה. איסוף הדוגמאות סרום בכל נקודה בזמן למדידה של הורמונים שונים, כגון אינסולין GLP-1.</li>
		<li>עכברים מהיר במשך 6 שעות לפני המתת חסד. לקחת מידה מדגם של גלוקוז בדם הסופי. להשוות בין המדד הסופי גלוקוז למדידה בסיסית. המתת חסד עכברים עם זריקה בקרום הבטן של פנטוברביטל במינון 200 מ"ג/ק"ג.</li>
		<li>השתמש בסיסית הדוגמאות סרום הסופי analytes נוספים למדוד ולהשוות ערכים כירורגי לפני ואחרי הניתוח.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol>
	<li>Buchwald, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bariatric+surgery:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Bariatric surgery: a systematic review and meta-analysis.</a> JAMA. 292 (14), 1724-1737 (2004).</li><li>Wadden, T. A., Butryn, M. L., Byrne, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+lifestyle+modification+for+long-term+weight+control.">Efficacy of lifestyle modification for long-term weight control.</a> Obes Res. 12, 151s-162s (2004).</li><li>Yanovski, S. Z., Yanovski, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obesity.">Obesity.</a> N Engl J Med. 346 (8), 591-602 (2002).</li><li>Abbatini, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+effects+of+laparoscopic+sleeve+gastrectomy,+gastric+bypass,+and+adjustable+gastric+banding+on+type+2+diabetes.">Long-term effects of laparoscopic sleeve gastrectomy, gastric bypass, and adjustable gastric banding on type 2 diabetes.</a> Surg Endosc. 24 (5), 1005-1010 (2010).</li><li>Sjostrom, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+bariatric+surgery+on+mortality+in+Swedish+obese+subjects.">Effects of bariatric surgery on mortality in Swedish obese subjects.</a> N Engl J Med. 357 (8), 741-752 (2007).</li><li>Adams, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+incidence+and+mortality+after+gastric+bypass+surgery.">Cancer incidence and mortality after gastric bypass surgery.</a> Obesity (Silver Spring). 17 (4), 796-802 (2009).</li><li>Vest, A. R., Heneghan, H. M., Schauer, P. R., Young, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+management+of+obesity+and+the+relationship+to+cardiovascular+disease.">Surgical management of obesity and the relationship to cardiovascular disease.</a> Circulation. 127 (8), 945-959 (2013).</li><li>Ahmed, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laparoscopic+Roux-en-Y+gastric+bypass+and+its+early+effect+on+blood+pressure.">Laparoscopic Roux-en-Y gastric bypass and its early effect on blood pressure.</a> Obes Surg. 19 (7), 845-849 (2009).</li><li>Pories, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Who+would+have+thought+it?+An+operation+proves+to+be+the+most+effective+therapy+for+adult-onset+diabetes+mellitus.">Who would have thought it? An operation proves to be the most effective therapy for adult-onset diabetes mellitus.</a> Ann Surg. 222 (3), 339-350 (1995).</li><li>Garibay, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=beta-Cell+Glucagon-Like+Peptide-1+Receptor+Contributes+to+Improved+Glucose+Tolerance+After+Vertical+Sleeve+Gastrectomy.">beta-Cell Glucagon-Like Peptide-1 Receptor Contributes to Improved Glucose Tolerance After Vertical Sleeve Gastrectomy.</a> Endocrinology. 157 (9), 3405-3409 (2016).</li><li>McGavigan, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGR5+contributes+to+glucoregulatory+improvements+after+vertical+sleeve+gastrectomy+in+mice.">TGR5 contributes to glucoregulatory improvements after vertical sleeve gastrectomy in mice.</a> Gut. 66 (2), 226-234 (2017).</li><li>McGavigan, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical+sleeve+gastrectomy+reduces+blood+pressure+and+hypothalamic+endoplasmic+reticulum+stress+in+mice.">Vertical sleeve gastrectomy reduces blood pressure and hypothalamic endoplasmic reticulum stress in mice.</a> Dis Model Mech. 10 (3), 235-243 (2017).</li><li>Esteban Varela, J., Nguyen, N. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laparoscopic+sleeve+gastrectomy+leads+the+U.S.+utilization+of+bariatric+surgery+at+academic+medical+centers.">Laparoscopic sleeve gastrectomy leads the U.S. utilization of bariatric surgery at academic medical centers.</a> Surg Obes Relat Dis. 11 (5), 987-990 (2015).</li><li>Laferrere, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+weight+loss+by+gastric+bypass+surgery+versus+hypocaloric+diet+on+glucose+and+incretin+levels+in+patients+with+type+2+diabetes.">Effect of weight loss by gastric bypass surgery versus hypocaloric diet on glucose and incretin levels in patients with type 2 diabetes.</a> J Clin Endocrinol Metab. 93 (7), 2479-2485 (2008).</li><li>Adams, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Health+benefits+of+gastric+bypass+surgery+after+6+years.">Health benefits of gastric bypass surgery after 6 years.</a> Jama. 308 (11), 1122-1131 (2012).</li><li>McGavigan, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGR5+contributes+to+glucoregulatory+improvements+after+vertical+sleeve+gastrectomy+in+mice.">TGR5 contributes to glucoregulatory improvements after vertical sleeve gastrectomy in mice.</a> Gut. , (2015).</li><li>Peterli, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+in+glucose+metabolism+after+bariatric+surgery:+comparison+of+laparoscopic+Roux-en-Y+gastric+bypass+and+laparoscopic+sleeve+gastrectomy:+a+prospective+randomized+trial.">Improvement in glucose metabolism after bariatric surgery: comparison of laparoscopic Roux-en-Y gastric bypass and laparoscopic sleeve gastrectomy: a prospective randomized trial.</a> Ann Surg. 250 (2), 234-241 (2009).</li><li>Ryan, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FXR+is+a+molecular+target+for+the+effects+of+vertical+sleeve+gastrectomy.">FXR is a molecular target for the effects of vertical sleeve gastrectomy.</a> Nature. 509 (7499), 183-188 (2014).</li><li>Wilson-Perez, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical+sleeve+gastrectomy+is+effective+in+two+genetic+mouse+models+of+glucagon-like+Peptide+1+receptor+deficiency.">Vertical sleeve gastrectomy is effective in two genetic mouse models of glucagon-like Peptide 1 receptor deficiency.</a> Diabetes. 62 (7), 2380-2385 (2013).</li><li>Pressler, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical+sleeve+gastrectomy+restores+glucose+homeostasis+in+apolipoprotein+A-IV+KO+mice.">Vertical sleeve gastrectomy restores glucose homeostasis in apolipoprotein A-IV KO mice.</a> Diabetes. 64 (2), 498-507 (2015).</li></ol>

המחברים מצהירים שאין ניגודי אינטרסים, מלבד ד ר קאמינגס קיבל מימון Eli Lilly and Company.

ניתוח בריאטרי הוא הטיפול היעיל ביותר לטווח ארוך עבור השמנת יתר ותוצאות יתרונות בריאותיים אחרים כגון שיעור גבוה של סוג 2 סוכרת ויתר לחץ דם הפוגה1,9,15. מודלים מאתר של ניתוח בריאטרי לספק כלי רב עוצמה כדי לזהות את המנגנונים שבאמצעותו ניתוח ברי?...

מגיפת ההשמנה ממשיכה לצמוח ברחבי העולם ניתוח בריאטרי צברה פופולריות כמו הטיפול היעיל ביותר לטווח ארוך עבור השמנת יתר1. למרבה הצער, ירידה במשקל באמצעות דיאטה ופעילות גופנית הוא קשה להשיג יעיל יחסית מעל2,לטווח ארוך3. ניתוח בריאטרי, כגון כריתת קיבה שרוול אנכי (VSG), מוגדרת בתור המניפולציה של מערכת העיכול לצורך משקל הפסד1,4. למרות הירידה במשקל הוא תוצאה בולטת של ניתוח בריאטרי, ניתוח בריאטרי מספק יתרונות בריאותיים אחרים כגון שיפור מחלות רקע השמנה והארכת תוחלת החיים5. לדוגמה, ניתוח בריאטרי תוצאות שיעור גבוה של הפוגה של סוכרת מסוג 2, יתר לחץ דם, הפחתות הסיכון החיים להתפתחות סוגים מסוימים של סרטן1,6,7. ראוי לציין, ההשפעה של ניתוח בריאטרי גורם מחילת סוג 2 סוכרת ויתר לחץ דם נצפית לעיתים קרובות לאחר הניתוח, לפני8,של אובדן משקל9. זה מדגיש את הרעיון כי ישנם מנגנונים עצמאיים של משקל הגוף לתרום היתרונות הבריאותיים נצפתה לאחר הניתוח. מודלים חייתיים של ניתוח בריאטרי פותחו, מנוצלים כדי לחקור את המנגנונים שבאמצעותו יתרונות בריאותיים אלה מתרחשים10,11,12.
הבדיקה והאימות דגם העכבר של VSG, אשר אנחנו שהחלת על מודלים שונים מהונדסים העכבר כדי לחקור את המנגנונים שבאמצעותו ניתוח בריאטרי משפר את השמנת יתר מחלות רקע כגון סוכרת מסוג 2, יתר לחץ דם, סרטן המעי הגס10 , 11 , 12. מכרסם מודלים לאפשר את היכולת לבצע מניפולציה גנטית או התרופות להגדרת תפקידו של גנים ספציפיים או איתות המסלולים עניין ובקרה ניסיוני. אנו מתמקדים בעיקר VSG כי VSG ההליך בריאטרי הנפוץ ביותר שבוצעו במרפאה ארה ב13. בנוסף, VSG הוא מודל ניתוח פשוט עם שינויים אנטומיים פחות בהשוואה הליכים אחרים כגון הסחה מעקפים או biliopancreatic קיבה רו-en-Y.
המודל שלנו העכבר של VSG recapitulates את האפקטים הבאים של ניתוח בריאטרי נצפתה אצל בני אדם: משקל הפסד, צריכת מזון מופחת, תקנה גלוקוז משופרת, שיפור תפקוד איון, גדל הפרשת גלוקגון דמוי מים אחרונים פפטיד-1 (GLP-1), להפחית לחץ דם עורקי והגדלת מחזורי חומצות מרה ריכוזים10,11,12,13,14,15. לכן, זה מודל אידיאלי כדי לחקור את הגוף משקל התלויים והבלתי תלויים המנגנונים שבאמצעותו VSG משפר או פותר מחלות רקע השמנת יתר. בנוסף, זה מודל אמין זה יכול להיות משולב עם ניתוחים אחרים, מאפשר לחקור ההשפעה של VSG בתנאים מחלה שונים עם תובנה מכניסטית יותר12.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>45% high fat diet</td>
			<td>Research Diets</td>
			<td>D12451</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60% high fat diet</td>
			<td>Research Diets</td>
			<td>D12492</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Boost</td>
			<td>Nestle</td>
			<td>160-67538</td>
			<td>rich chocolate flavor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 Suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>Z432</td>
			<td>monofilament absorbable/taper</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>7-0 Suture</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>8866127-01</td>
			<td>monofilament absorbable/taper</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton Swabs</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>23-400-118</td>
			<td>small</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton Swabs</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>233-400-101</td>
			<td>large</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td>4x4 4 ply and 2x2 4 ply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foil</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgery drape</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.9% saline solution</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LRS</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>170RX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye Ointment</td>
			<td>Paralube&#174; Vet Ointment</td>
			<td>17033-211-38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Adhesive</td>
			<td>Vetbond</td>
			<td>1469SB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam (Metacam)</td>
			<td>Boehringer Ingelheim</td>
			<td>141-213</td>
			<td>5 mg/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Enrofloxacin</td>
			<td>Baytril</td>
			<td>08713254-186599</td>
			<td>22.7 mg/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thin tipped hemostats</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>13021-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum Scissor</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14018-18</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14058-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont Forcep</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serrated Forcep</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11020-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gavage needle</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18060-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microneedle driver</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12075-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spring Scissor</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15396-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringe</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1mL syringe</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20mL syringe</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucometer (one touch ultra mini)</td>
			<td>Lifescan</td>
			<td>70021208</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiplex insulin and GLP-1 kit</td>
			<td>Meso Scale Discovery</td>
			<td>K15171C-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism 6.00</td>
			<td>GraphPad Software</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nestlets</td>
			<td>Ancare</td>
			<td>NES3600</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a murine model of vertical sleeve gastrectomy

ניתוח בריאטרי, כגון כריתת קיבה שרוול אנכי (VSG), הוא ניתוח של דרכי העיכול שיש לבצע לצורך ירידה במשקל. ניתוח בריאטרי הוא כיום הטיפול היעיל ביותר לטווח ארוך עבור השמנת יתר. בנוסף ירידה במשקל, ניתוח בריאטרי מייצרת יתרונות בריאותיים נוספים כמו מחילת מחילת יתר לחץ דם, סוכרת מסוג 2, ירד הסיכון להתפתחות סוגי סרטן מסוימים. המנגנונים מעבר לירידה במשקל להטבות האלה נשארים שהיישום מוגדרים. לכן, מודלים חייתיים של ניתוח בריאטרי מתבצעת פיתח ואומת לזיהוי המנגנונים שמוביל את היתרונות הבאים, במטרה לשפר את ההבנה של הפיזיולוגיה של מערכת העיכול וזיהוי מטרות טיפוליות חדשות. VSG הפך ההליך בריאטרי הנפוץ ביותר שבוצעו במרפאה בארצות הברית כי זה יעיל מאוד לייצר ירידה במשקל ושיפור חילוף החומרים, פשוט יותר לביצוע מאשר הליכים בריאטרי אחרים. לכן, יש שפותחה ואנו לאמת מודל מאתר של VSG. מודל VSG מאתר זה recapitulates רבים של ההשפעות של VSG אצל בני אדם, כולל תקנה גלוקוז ולחץ דם משופרת. השיטה מבוססת על בידוד של הקיבה, מצדו של כלי קיבה, הסרה של 70% של הקיבה על ידי transecting לאורך שכדור גדול של הקיבה. אנחנו בהצלחה החלת פרוטוקול כירורגי זה קווים העכבר מהונדסים שונים להגדרת התורמים מכניסטית היתרונות של VSG. יתר על כן, מודל VSG מאתר זה יש כבר בשילוב עם טכניקות ניתוחיות אחרות, כדי להשיג תובנה מכניסטית עמוק יותר. לכן, זה מודל פשוט ופסיביות ללמוד הפיזיולוגיה של מערכת העיכול, היתרונות הבריאותיים של ניתוח בריאטרי.

העמדת פנים ונהלים VSG מתוארים באיור1. איור 1A מציג היכן קו תפר ממוקם לאורך הקירות קיבה במהלך ההליך המזויפים. אזור זה אותו הוא שבו הקיבה נחתך במהלך הניתוח VSG. איור 1B מראה השריד הכרישים של הבטן השמאלית לאחר הביצועים של VSG.
<p class="...

Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy at JoVE.com

A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy

להלן תיאור הביצועים של ניתוח אנכי שרוול קיבה בעכברים. זה הוא סוג של ניתוח הרזיה המערבת הסרה של-70% של הקיבה.

מודל מאתר של ניתוח אנכי שרוול קיבה

Bariatric surgery, such as vertical sleeve gastrectomy (VSG), is a surgery of the gastrointestinal tract that is performed for the purpose of weight loss. ...

a-murine-model-of-vertical-sleeve-gastrectomy

Research

JoVE Journal

Biology

11.0K Views.  Cornell University. להלן תיאור הביצועים של ניתוח אנכי שרוול קיבה בעכברים. זה הוא סוג של ניתוח הרזיה המערבת הסרה של-70% של הקיבה.

Video: A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy

Murine Pancreatic Islet Isolation

הלבלב Murine איילט בידוד

Murine Model of Hindlimb Ischemia 

In the United States, peripheral arterial disease (PAD) affects about 10 million individuals, and is also prevalent worldwide. Medical therapies for symptomatic relief are limited. Surgical or endovascular interventions are useful for some individuals, but long-term results are often disappointing. As a result, there is a need for developing new therapies to treat PAD. The murine hindlimb ischemia preparation is a model of PAD, and is useful for testing new therapies. When compared to other models of tissue ischemia such as coronary or cerebral artery ligation, femoral artery ligation provides for a simpler model of ischemic tissue. Other advantages of this model are the ease of access to the femoral artery and low mortality rate. 
In this video, we demonstrate the methodology for the murine model of unilateral hindimb ischemia. The specific materials and procedures for creating and evaluating the model will be described, including the assessment of limb perfusion by laser Doppler imaging. This protocol can also be utilized for the transplantation and non-invasive tracking of cells, which is demonstrated by Huang et al.1.

Murine Model of Hindlimb Ischemia

The surgical procedure for induction of unilateral hindlimb ischemia is demonstrated, with confirmation of ischemia by laser Doppler perfusion imaging.

דגם Murine של איסכמיה Hindlimb

In the United States, peripheral arterial disease (PAD) affects about 10 million individuals, and is also prevalent worldwide.  Medical therapies for ...

Murine Renal Transplantation Procedure

Renal orthotopic transplantation in mice is a technically challenging procedure. Although the first kidney transplants in mice were performed by Russell et al over 30 years ago (1) and refined by Zhang et al years later (2), few people in the world have mastered this procedure. In our laboratory we have successfully performed 1200 orthotopic kidney transplantations with &gt; 90% survival rate. The key points for success include stringent control of reperfusion injury, bleeding and thrombosis, both during the procedure and post-transplantation, and use of 10-0 instead of 11-0 suture for anastomoses.
Post-operative care and treatment of the recipient is extremely important to transplant success and evaluation. All renal graft recipients receive antibiotics in the form of an injection of penicillin immediately post-transplant and sulfatrim in the drinking water continually. Overall animal health is evaluated daily and whole blood creatinine analyses are performed routinely with a portable I-STAT machine to assess graft function.

Renal transplantation in mice is a technically challenging procedure that requires careful post-operative care and treatment for success.

Murine נוהל השתלת כליה

Renal orthotopic transplantation in mice is a technically challenging procedure. Although the first kidney transplants in mice were performed by Russell ...

LAD-Ligation: A Murine Model of Myocardial Infarction

Research models of infarction and myocardial ischemia are essential to investigate the acute and chronic pathobiological and pathophysiological processes in myocardial ischemia and to develop and optimize future treatment.
Two different methods of creating myocardial ischemia are performed in laboratory rodents. The first method is to create cryo infarction, a fast but inaccurate technique, where a cryo-pen is applied on the surface of the heart (1-3). Using this method the scientist can not guarantee that the cryo-scar leads to ischemia, also a vast myocardial injury is created that shows pathophysiological side effects that are not related to myocardial infarction. The second method is the permanent ligation of the left anterior descending artery (LAD). Here the LAD is ligated with one single stitch, forming an ischemia that can be seen almost immediately. By closing the LAD, no further blood flow is permitted in that area, while the surrounding myocardial tissue is nearly not affected. This surgical procedure imitates the pathobiological and pathophysiological aspects occurring in infarction-related myocardial ischemia.
The method introduced in this video demonstrates the surgical procedure of a mouse infarction model by ligating the LAD. This model is convenient for pathobiological and pathophysiological as well as immunobiological studies on cardiac infarction. The shown technique provides high accuracy and correlates well with histological sections.

This video demonstrates how to use a fast and reliable model to study pathobiological and pathophysiological processes of myocardial ischemia.

LAD-קשירת: מודל Murine של אוטם שריר הלב

Research models of infarction and myocardial ischemia are essential to investigate the acute and chronic pathobiological and pathophysiological processes ...

Efficient Production and Purification of Recombinant Murine Kindlin-3 from Insect Cells for Biophysical Studies

Kindlins are essential coactivators, with talin, of the cell surface receptors&#160;integrins and also participate in integrin outside-in signalling, and the control of gene transcription in the cell nucleus. The kindlins are ~75 kDa multidomain proteins and bind to an NPxY motif and upstream T/S cluster of the integrin &#946;-subunit cytoplasmic tail. The hematopoietically-important kindlin isoform, kindlin-3, is critical for platelet aggregation during thrombus formation, leukocyte rolling in response to infection and inflammation and osteoclast podocyte formation in bone resorption. Kindlin-3&#39;s role in these processes has resulted in extensive cellular and physiological studies. However, there is a need for an efficient method of acquiring high quality milligram quantities of the protein for further studies. We have developed a protocol, here described, for the efficient expression and purification of recombinant murine kindlin-3 by use of a baculovirus-driven expression system in Sf9 cells yielding sufficient amounts of high purity full-length protein to allow its biophysical characterization. The same approach could be taken in the study of the other mammalian kindlin isoforms.

Kindlins are fundamental to cell adhesion through integrins but studies of them have been hampered by the difficulty encountered in expressing them recombinantly in bacterial hosts. We describe here methods for their efficient production in baculovirus-infected insect cells.

הפקה וטיהור יעילה של רקומביננטי Murine Kindlin-3 מתאי חרקים לBiophysical לימודים

Kindlins are essential coactivators, with talin, of the cell surface receptors&#160;integrins and also participate in integrin outside-in signalling, and ...

Isolation of Murine Coronary Vascular Smooth Muscle Cells

While the isolation and culture of vascular smooth muscle cells (VSMCs) from large vessels is well established, we sought to isolate and culture VSMCs from the coronary circulation. Hearts with intact aortic arches were removed and perfused via retrograde Langendorff with digestion solution containing 300 Units/ml of collagenase type II, 0.1 mg/ml soybean trypsin inhibitor and 1 M CaCl2. The perfusates were collected at 15 min intervals for 90 min, pelleted by centrifugation, resuspended in plating media, and plated on tissue culture dishes. VSMCs were characterized by presence of SM22&#945;, &#945;-SMA, and vimentin. One of the main advantages of using this technique is the ability to isolate VSMCs from the coronary circulation of mice. Although the small number of cells obtained can limit some of the applications for which the cells can be utilized, isolated coronary VSMCs can be used in a variety of well-established cell culture techniques and assays. Studies investigating VSMCs from genetically modified mice can provide further information about structure-function and signaling processes associated with vascular pathologies.

The purpose of this protocol is to demonstrate the isolation and culture techniques of murine primary vascular smooth muscle cells (VSMCs) from the coronary circulation. Once VSMCs have been isolated, they can be used for many standard culture techniques.

בידוד של תאי שריר חלק Murine כלילית דם

While the isolation and culture of vascular smooth muscle cells (VSMCs) from large vessels is well established, we sought to isolate and culture VSMCs ...

The Murine Choline-Deficient, Ethionine-Supplemented (CDE) Diet Model of Chronic Liver Injury

Chronic liver diseases, such as viral hepatitis, alcoholic liver disease, or non-alcoholic fatty liver disease, are characterized by continual inflammation, progressive destruction and regeneration of the hepatic parenchyma, liver progenitor cell proliferation, and fibrosis. The end-stage of every chronic liver disease is cirrhosis, a major risk factor for the development of hepatocellular carcinoma. To study processes regulating disease initiation, establishment, and progression, several animal models are used in laboratories. Here we describe a six-week time course of the choline-deficient and ethionine-supplemented (CDE) mouse model, which involves feeding six-week old male C57BL/6J mice with choline-deficient chow and 0.15% DL-ethionine-supplemented drinking water. Monitoring of animal health and a typical body weight loss curve are explained. The protocol demonstrates the gross examination of a CDE-treated liver and blood collection by cardiac puncture for subsequent serum analyses. Next, the liver perfusion technique and collection of different hepatic lobes for standard evaluations are shown, including liver histology assessments by hematoxylin and eosin or Sirius Red stainings, immunofluorescent detection of hepatic cell populations as well as transcriptome profiling of the liver microenvironment. This mouse model is suitable for studying inflammatory, fibrogenic, and liver progenitor cell dynamics induced through chronic liver disease and can be used to test potential therapeutic agents that may modulate these processes.

The Murine Choline-Deficient, Ethionine-Supplemented CDE Diet Model of Chronic Liver Injury

Here we describe a common method to induce chronic liver injury in mice by feeding of a choline-deficient and ethionine-supplemented (CDE) diet. We demonstrate health monitoring, liver perfusion, isolation, and preservation. A time course of six weeks can inform about liver injury, pathohistology, fibrosis, inflammatory, and liver progenitor cell responses.

מאתר כולין לקויה, בתוספת Ethionine (CDE) דיאטה מודל של פגיעה כרונית בכבד

Chronic liver diseases, such as viral hepatitis, alcoholic liver disease, or non-alcoholic fatty liver disease, are characterized by continual ...

Mass Spectrometry Analysis to Identify Ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A (EYFP-CENP-A)

Studying the structure and the dynamics of kinetochores and centromeres is important in understanding chromosomal instability (CIN) and cancer progression. How the chromosomal location and function of a centromere (i.e., centromere identity) are determined and participate in accurate chromosome segregation is a fundamental question. CENP-A is proposed to be the non-DNA indicator (epigenetic mark) of centromere identity, and CENP-A ubiquitylation is required for CENP-A deposition at the centromere, inherited through dimerization between cell division, and indispensable to cell viability.
Here we describe mass spectrometry analysis to identify ubiquitylation of EYFP-CENP-A K124R mutant suggesting that ubiquitylation at a different lysine is induced because of the EYFP tagging in the CENP-A K124R mutant protein. Lysine 306 (K306) ubiquitylation in EYFP-CENP-A K124R was successfully identified, which corresponds to lysine 56 (K56) in CENP-A through mass spectrometry analysis. A caveat is discussed in the use of GFP/EYFP or the tagging of high molecular weight protein as a tool to analyze the function of a protein. Current technical limit is also discussed for the detection of ubiquitylated bands, identification of site-specific ubiquitylation(s), and visualization of ubiquitylation in living cells or a specific single cell during the whole cell cycle.
The method of mass spectrometry analysis presented here can be applied to human CENP-A protein with different tags and other centromere-kinetochore proteins. These combinatory methods consisting of several assays/analyses could be recommended for researchers who are interested in identifying functional roles of ubiquitylation.

Mass Spectrometry Analysis to Identify Ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A EYFP-CENP-A

CENP-A ubiquitylation is an important requirement for CENP-A deposition at the centromere, inherited through dimerization between cell division, and indispensable to cell viability. Here we describe mass spectrometry analysis to identify ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A (EYFP-CENP-A) protein.

ניתוח ספקטרומטר המסה כדי לזהות את אוביקווילציה של EYFP-מתויג CENP-A (EYFP-CENP-A)

Studying the structure and the dynamics of kinetochores and centromeres is important in understanding chromosomal instability (CIN) and cancer ...

A Murine Model of a Burn Wound Reconstructed with an Allogeneic Skin Graft

Trivial superficial wounds heal without complications by primary intention. Deep wounds, such as full thickness burns, heal by secondary intention and require surgical debridement and skin grafting. Successful integration of the donor graft into a recipient wound bed depends on timely recruitment of immune cells, robust angiogenic response and new extracellular matrix formation. The development of novel therapeutic agents, which target some key processes involved in wound healing, are hindered by the lack of reliable preclinical models with optimized objective assessment of wound closure. Here, we describe an inexpensive and reproducible model of experimental full thickness burn wound reconstructed with an allogeneic skin graft. The wound is induced on the dorsum surface of anaesthetized inbred wild type mice from the BALB/C and SKH1-Hrhr backgrounds. The burn is produced using a brass template measuring 10 mm in diameter, which is preheated to 80 &#176;C and delivered at a constant pressure for 20 s. Burn eschar is excised 24 hours after the injury and replaced with a full thickness graft harvested from the tail of a genetically similar donor mouse. No specialized equipment is required for the procedure and surgical techniques are straightforward to follow. The method may be effortlessly implemented and reproduced in most research settings. Certain limitations are associated with the model. Due to technical difficulties, the harvest of thinner split thickness skin grafts is not possible. The surgical method we describe here allows for the reconstruction of burn wounds using full thickness skin grafts. It may be used to carry out preclinical therapeutic testing.

The aim of this study was to develop a murine model of burn wound healing. A thermal burn was induced on the dorsal skin of mice using a preheated brass template. Burned tissue was debrided and overlaid with a skin graft harvested from the tail of a genetically similar donor mouse.

מודל מורנה של פצע צריבה שוחזר עם שתל העור Allogeneic

Trivial superficial wounds heal without complications by primary intention. Deep wounds, such as full thickness burns, heal by secondary intention and ...

Comprehensive Echocardiographic Assessment of Right Ventricle Function in a Rat Model of Pulmonary Arterial Hypertension

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a progressive disease caused by vasoconstriction and remodeling of the small arteries in the lungs. This remodeling leads to increased pulmonary vascular resistance, worsened right ventricular function, and premature death. Currently approved therapies for PAH largely target pulmonary vasodilator pathways; however, recent emerging therapeutic modalities are focused on other novel pathways involved in the pathogenesis of the disease, including right ventricle (RV) remodeling. Imaging techniques that allow longitudinal assessment of novel therapeutics are very useful for determining the efficacy of new drugs in preclinical studies. Noninvasive trans-thoracic echocardiography remains the standard approach to evaluating heart function and is widely used in rodent models. However, echocardiographic evaluation of the RV can be challenging due to its anatomical position and structure. In addition, standardized guidelines are lacking for echocardiography&#160;in preclinical rodent models, making it difficult to carry out a uniform assessment of RV&#160;function across studies in different laboratories. In preclinical studies, the monocrotaline (MCT) injury model in rats is widely used to evaluate drug efficacy for treating PAH. This protocol describes the echocardiographic evaluation of the RV in na&#239;ve and MCT-induced PAH rats.

The present protocol describes the echocardiographic characterization of right ventricular morphology and function in a rat model of pulmonary arterial hypertension.