Name: a murine model of vertical sleeve gastrectomy
Uploaded: 2017-12-18T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 47 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy at JoVE.com

מחקר זה נתמך על ידי NIH/NCI R21CA195002-01A1, מועצת של הנשיא נשים קורנל, האחווה גיוון SUNY לתואר שני. מעבדה של ד ר קמינגס גם קיבלה מימון במהלך תקופת הפרוייקט תוכנית אימונים של ביולוגיה סרטן של קורנל השוואתי, Eli Lilly and Company.

כל הפרוטוקולים ניסיוני אושרו על ידי קורנל אוניברסיטת אכפת חיה מוסדיים ועל שימוש הוועדה.
1. בפגישת ההכנה
הערה: מחקר עכברים הם בדרך כלל על C57BL הנוצרות על-ידי תזונה שמנים רקע לבצע מחקרים הנוגעים translationally האנושי השמנה ועמידות לאינסולין. זכריים ונקביים עכברים עשויים להילמד כפי שמתואר והשלבים הבאים.
<ol>
	<li>בגיל של חודשיים, במקום עכברים על 45% או 60% דיאטה שומן גבוהה למשך 2 חודשים (ראה טבלה של חומרים). הערה: עכברים אכלו דיאטה שומן גבוהה ליצירת פנוטיפ של שמנים, עמידות לאינסולין. תקופות ארוכה או קצרה יותר של עשיר בשומן האכלה עשוי לשמש בהתאם מטרות המחקר.</li>
	<li>מה לאכול עכברים ad libitum עד הניתוח. אם למדידות בסיסית נדרשים, לאחר 7 שבועות של שומן גבוהה דיאטה האכלה, מהר עכברים במשך 6 שעות או למשך הלילה, לקחת דגימת דם הבסיסית למדידת מטבוליטים של הריבית (למשל, גלוקוז).</li>
	<li>המשך עכברים על שומן גבוהה דיאטה ולאפשר עכברים שבוע להתאושש לאחר איסוף דם לפני ניתוח דמה או VSG. במקום עכברים על נוזל דיאטה (ראה טבלה של חומרים) ארבעה ימים לפני הניתוח. הערה: עכברים מתוחזקים בדיאטת נוזלים לפני ואחרי ניתוח כדי לנקות את מערכת העיכול של חלקיקי החומר עשוי לפגום את התגובה הריפוי.</li>
	<li>לעקר את הפריטים הבאים לפני הניתוח: רדיד אלומיניום, גזה, כותנה משופעת applicators (CTAs) ומכשירים כירורגיים (עוצר דימום, ההפעלה מספריים, מספריים איריס, דומונט forcep, משונן בראון-לאדאמסון forcep, gavage המחט, הנהג microneedle, מעיין מספריים ).</li>
</ol>
2. ניתוח אנכי שרוול קיבה ונהלים המזויפים
<ol>
	<li>ביום של הניתוח שוקלים עכברים להשיג מידה משקל בסיסית.</li>
	<li>לצייד את החדר ניתוח עם הרדמה המערכת, אמבט מים מחומם, כרית החימום. הגדר את המים הרותחים 37 ° C ולהשתמש בו כדי לחמם 0.9% תמיסת להשקיה. לנקות את השדה כירורגית עם 70% אתנול ולהשתמש סטרילי טכניקה כדי לפתוח חבילת ניתוח בלוק וכלים. הערה: כרית החימום משמש כדי לחמם את החיה במהלך הניתוח וההחלמה מן ההרדמה.</li>
	<li>באמצעות חדר אינדוקציה, עזים ומתנגד את העכבר עם 5% איזופלוריין ו- O2 קצב הזרימה של 1 ליטר לדקה אשר העכבר נמצא המטוס המתאים של הרדמה על ידי ביצוע קמצוץ הבוהן. לשמור על העכבר עם איזופלוריין 1-3%, שיעור זרימת2 O של 0.6 L/min, ברגע מטוס עקבית של הרדמה הושגה.</li>
	<li>ברגע העכבר הוא מורדם, מקום עין משחה (ראה טבלה של חומרים) על העיניים שלו כדי לשמור על לחות במהלך הניתוח. בשלב זה גם ניהול של שיכוך כאב, כגון meloxicam (2 מ"ג/ק"ג subcutaneously). קליפ השיערה הטבור כדי השחי החזקת את העור בעדינות כדי לספק מתח.
	<ol>
		<li>כמו עור העכבר דק ועדין, לטפל כדי לא לגרום נגעים בעור בעת מסיכה לשיער. לנקות את העור עם povidone יוד ואלכוהול.</li>
		<li>דון כפפות סטריליות ולהכין את שדה כירורגי סטרילי וכלי נגינה. בצע את שאר ההליך בטכניקה סטרילי. הכינו את השדה כירורגי סטרילי על-ידי הצבת וילונות כירורגי סטרילי משני צדדיו של העכבר. השתמש בנייר בלוק ליצירת תלוי כירורגי על העכבר.</li>
		<li>חותכים חור קטן והאלומיניום כדי לאפשר גישה הבטן של העכבר.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>לעשות חתך של העור מהבטן אמצע (טבורית) לרמה של הסחוס xiphoid באמצעות מספריים של איריס. לזהות את לינאה אלבה ושימוש איריס מספריים לחתוך דרך הקיר הגוף לאורך linea alba. השתמש CTAs כדי לרומם בעדינות את הבטן מתוך הבטן ומנתחים ואז שמותחת את omentum greater ממני עקמומיות רבתי של הקיבה.</li>
	<li>מאתרים ומפסיקים את העורק קיבה קצר שזורם בין את הפונדוס של הקיבה והטחול על ידי הצבת שני ליגטורות באמצעות תפרים שנספג monofilament 7-0. השימוש מעיין מספריים לחתוך בין ליגטורות שני. ברגע העורק הוא transected, מלא exteriorize הבטן של חלל הבטן. במקום גזה תחת הקיבה ורטוב עם תמיסת מלח כדי לשמור את הרקמה לחות.</li>
	<li>שאם שגרת
	<ol>
		<li>עבור ההליך המזויפים, להציב דפוס מתמשך פשוט רופף של התפר באמצעות 6-0 monofilament שנספג לתפור עם מחט להתחדד. מתחילים 2 מ מ בצד ימין (של מנתח ימין) של הוושט. למקם את קו תפרים לאורך הקיר קיבה הגחון ולאחר מכן המשך לאורך הקיר קיבה הגבי. הערה: עבור כל המניפולציות קיבה, יש להשתמש רק בתפר שנספג monofilament כדי להקטין את הסיכון של זיהום. יתר על כן, השתמש רק לתפור עם מחט להתחדד עבור כל המניפולציות קיבה, השימוש מחט חיתוך מגדיל את הסיכון של התפר "משיכה-דרך" שמוביל נזק לרקמות קיבה פצע התבקעות.</li>
		<li>עוברים את המחט לחלוטין דרך קיר קיבה אחד תוך הצבת את התפר. ודא התפר הוא שוכב שטוח, אך לא הגבלת הקיבה. בעדינות לקשור את התפר להשתמש 3-4 זריקות, דלג לשלב 2.9.</li>
		<li>במהלך התהליך VSG לדלג על שלב 2.7 והמשך לשלב 2.8.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>הליך VSG
	<ol>
		<li>עבור ההליך VSG, מאתרים ומפסיקים הענפים הבולטים של קיבה עורק, וריד עם 7-0 monofilament שנספג לתפור עם מחט להתחדד באמצעות 3 זריקות עבור כל קשר. מקם ליגטורות מתחת (כלומר, לכיוון עקמומיות פחותה של הקיבה) הקו המיועד של חיתוך. הערה: קו המיועד של חיתוך מתחיל ב ~ 2 מ מ מעל (כלומר לכיוון שכדור גדול של הקיבה) את החריץ הלב של הקיבה, לפחות 2 מ מ מתחת pilcatus מרגו ומרחיב לסופה proximal של האונה הימנית של הלבלב. בדרך כלל, ישנם כלי 4 לכל קיר הקיבה צריכה להיות מאתרים; עם זאת, זה עשוי להשתנות בין עכברים.</li>
		<li>כדי למנוע זליגת תוכן קיבה במהלך כריתת קיבה, במקום קו רציף פשוטה של תפר עובר דרך שני קירות קיבה רק מתחת לקו המיועד של חיתוך באמצעות 6-0 monofilament שנספג לתפור עם מחט להתחדד. להתחיל את קו תפרים לימין של המנתח של הוושט ומתחת את מרגו pilcatus והסוף ממש מעל הלבלב.</li>
		<li>הצב דק-טיפ טוב מעל לקו התפר והשתמש מעיין מספריים לחתוך בין קו תפרים ועוצרי דימום. להסיר את רקמת קיבה transected מהשדה כירורגי סטרילי.</li></ol></li></ol>השתמש CTAs כדי לנקות דם, digesta את הקיבה.
		<li>מחזקים תמורה של דפנות הקיבה באמצעות 6-0 monofilament שנספג לתפור עם מחט להתחדד באמצעות תבנית פשוטה מקוטע. הערה: דפוס פשוטה תפר רציף מומלץ מאז זה מספק הסגר מאובטח יותר מאשר דפוס פשוטה בתפר רצוף.</li>
		<li>ריקון השריד קיבה עם תמיסת מלח לאורך כל ההליך על מנת לשמור על הרקמה לח ונקי. שימוש במחט gavage 20 גרם המצורפת מזרק 20-mL לבצע שטיפת קיבה עם תמיסת מלח. השתמש בגודל כזה כדי להבטיח לחץ נאותה מסופק מבלי להסתכן נזק לרקמות קיבה מלחץ יתר או נזק לרקמות קיבה בשוגג משימוש מחט המחודד רגיל.</li>
		<li>השתמש מינימום של 20 קשר לסגור היטב את הבטן; שים לב הסגר לאורך הוושט, הצד הזה קשה יותר לגישה, ולכן לעתים קרובות אתר של התבקעות.</li>
		<li>ודא כי ישנם אין דליפות בהקשת בעדינות על הבטן עם CTAs. אם ניתן לזהות דליפות, במקום נוספים פשוט קשר רציף על האזורים של דליפה, ואז להדליף את הבדיקה שוב. בדיקת דליפת עד אין נזילה מזוהה.</li>
		<li>לעשות בדיקת הסימפון המכתשי יסודית הסופי של הקיבה באמצעות לפחות 60 מ"ל של תמיסת מלח כדי להבטיח כי לא זיהומיות חלקיקי כבר נשאר מאחור.</li>
	
	
	<li>מקם את הבטן חזרה לתוך חלל הבטן מתחת לכבד באמצעות של CTA. במקום CTAs לאורך האספקט הגבי של חלל הבטן כדי לספוג את כל הנוזלים העודפים. באמצעות מחט 18 גרם בוטה, להזריק תמיסת הרטמן (מס הכנסה) עם או בלי אנטיביוטיקה (0.5 mL מס הכנסה + /-20 מ"ג/ק"ג Enrofloxacin) ישירות לתוך חלל הבטן, בדיוק לפני סגירת מעגל. הערה: זה מחליף את אובדן הנוזלים מנוסים במהלך הניתוח, מספק שיטה ישירה של אנטיביוטיקה כדי שהיישום באתר כירורגית לסייע עם התאוששות.</li>
	<li>סגור את השכבה שריר הבטן באמצעות 6-0 monofilament שנספג לתפור עם מחט להתחדד בדפוס מקוטע פשוטה. אז סגור את שכבת העור 6-0 monofilament בתפר שנספג בדפוס מתמשך פשוטה.</li>
	<li>במקום דבק רקמות על העור וקפל העור מעבר לקו התפר לקבור את התפר כך העכבר לא יכול לשבש את הסגר פצע וכאב לאחר הניתוח.</li>
	<li>לבטל את איזופלוריין ולתת העכבר לשחזר על כרית חימום במשך 10-15 minbefore להחזירו לכלוב שלה הביתה. אין להשאיר את החיה ללא השגחה עד שהכרתו יכולה להתקדם.</li>
	<li>לשמור על בעלי חיים שוכנו ביחידים עד התאושש מהניתוח. הערה: אם מדידות צריכת מזון מדויק ניתן להשיג לאורך כל המחקר, עליך להמשיך ישוכנו ביחידים במהלך המחקר עכברים. יש סיכון של גוף זר חסימה מאכילת הביתה כלוב מצעים. צריך להיות בו חיות בכלובים ללא מצעים חוץ קינון חומר להעניק העשרה (ראה טבלה של חומרים).</li>

3. לאחר הניתוח בעכבר והטיפול מדידות
<ol>
	<li>לחזור על העכבר בכלוב הביתה ומניחים את הכלוב על כרית החימום. לשמור על עכברים בדיאטת נוזלים לפחות 7 ימים לאחר הניתוח. ניהול של שיכוך כאב, כגון meloxicam (2 מ"ג/ק"ג subcutaneously), 2 ימים לאחר הניתוח. הערה: אנטיביוטיקה, כגון enrofloxacin (20 מ"ג/ק"ג), יכול להינתן עד 7 ימים לאחר הניתוח. אנטיביוטיקה ניתנות כדי למזער את הסיכון של הידבקות הליך כירורגי או לא ייתכן שתידרש בהתאם לרמת עקרות בכל ההליך. עם זאת, אם אנטיביוטיקה משמשים, הם חייבים להיות מנוהל על מנת עכברים כל באותו מחקר כדי לשמור על עקביות.</li>
	<li>במהלך התקופה שלאחר הניתוח להעריך את משקל הגוף, צריכת המזון, על הפרשה, רמת הפעילות, והמחיקה מדי יום לפחות כדי להבטיח ריפוי והתאוששות נכונה. לנהל מעקב לאחר הניתוח למשך 14 ימים לאחר הניתוח. הערה: כשל כירורגי בדרך כלל נתפסת מיד לאחר הניתוח או בתוך שלושה ימים שלאחר שמעשית. חיות לא לאכול או לשתות ביום השני לאחר הניתוח חייבים לפקח מקרוב על סיבוכים כירורגיים.</li>
	<li>לאחר סיום מוצלח של התקופה שלאחר הניתוח, למדוד צריכת במשקל ואוכל הגוף באופן קבוע לאורך כל המחקר כדי להבטיח תחזוקה של פנוטיפ המתאים.</li>
	<li>לבצע מבחן רגישות גלוקוז דרך הפה (OGTT) כדי להעריך גלוקוזה, הפרשת אינסולין הגלוקוז מגורה, ולבזוז הפרשת הורמון.
	<ol>
		<li>לבצע את OGTT בעכברים לאחר צום אותם 6-אייץ ', ולאחר מכן gavage עכברים עם 50% פתרון דקסטרוז במינון 1 g/kg.</li>
		<li>הזנב לאסוף דגימות דם-0, 2.5, 5, 15, 30, 60, 120 דקות לאחר gavage. למדוד את רמת הסוכר בדם עם סוכר בנקודות זמן אלה. איסוף הדוגמאות סרום בכל נקודה בזמן למדידה של הורמונים שונים, כגון אינסולין GLP-1.</li>
		<li>עכברים מהיר במשך 6 שעות לפני המתת חסד. לקחת מידה מדגם של גלוקוז בדם הסופי. להשוות בין המדד הסופי גלוקוז למדידה בסיסית. המתת חסד עכברים עם זריקה בקרום הבטן של פנטוברביטל במינון 200 מ"ג/ק"ג.</li>
		<li>השתמש בסיסית הדוגמאות סרום הסופי analytes נוספים למדוד ולהשוות ערכים כירורגי לפני ואחרי הניתוח.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol>
	<li>Buchwald, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bariatric+surgery:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Bariatric surgery: a systematic review and meta-analysis.</a> JAMA. 292 (14), 1724-1737 (2004).</li><li>Wadden, T. A., Butryn, M. L., Byrne, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+lifestyle+modification+for+long-term+weight+control.">Efficacy of lifestyle modification for long-term weight control.</a> Obes Res. 12, 151s-162s (2004).</li><li>Yanovski, S. Z., Yanovski, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obesity.">Obesity.</a> N Engl J Med. 346 (8), 591-602 (2002).</li><li>Abbatini, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+effects+of+laparoscopic+sleeve+gastrectomy,+gastric+bypass,+and+adjustable+gastric+banding+on+type+2+diabetes.">Long-term effects of laparoscopic sleeve gastrectomy, gastric bypass, and adjustable gastric banding on type 2 diabetes.</a> Surg Endosc. 24 (5), 1005-1010 (2010).</li><li>Sjostrom, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+bariatric+surgery+on+mortality+in+Swedish+obese+subjects.">Effects of bariatric surgery on mortality in Swedish obese subjects.</a> N Engl J Med. 357 (8), 741-752 (2007).</li><li>Adams, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+incidence+and+mortality+after+gastric+bypass+surgery.">Cancer incidence and mortality after gastric bypass surgery.</a> Obesity (Silver Spring). 17 (4), 796-802 (2009).</li><li>Vest, A. R., Heneghan, H. M., Schauer, P. R., Young, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+management+of+obesity+and+the+relationship+to+cardiovascular+disease.">Surgical management of obesity and the relationship to cardiovascular disease.</a> Circulation. 127 (8), 945-959 (2013).</li><li>Ahmed, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laparoscopic+Roux-en-Y+gastric+bypass+and+its+early+effect+on+blood+pressure.">Laparoscopic Roux-en-Y gastric bypass and its early effect on blood pressure.</a> Obes Surg. 19 (7), 845-849 (2009).</li><li>Pories, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Who+would+have+thought+it?+An+operation+proves+to+be+the+most+effective+therapy+for+adult-onset+diabetes+mellitus.">Who would have thought it? An operation proves to be the most effective therapy for adult-onset diabetes mellitus.</a> Ann Surg. 222 (3), 339-350 (1995).</li><li>Garibay, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=beta-Cell+Glucagon-Like+Peptide-1+Receptor+Contributes+to+Improved+Glucose+Tolerance+After+Vertical+Sleeve+Gastrectomy.">beta-Cell Glucagon-Like Peptide-1 Receptor Contributes to Improved Glucose Tolerance After Vertical Sleeve Gastrectomy.</a> Endocrinology. 157 (9), 3405-3409 (2016).</li><li>McGavigan, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGR5+contributes+to+glucoregulatory+improvements+after+vertical+sleeve+gastrectomy+in+mice.">TGR5 contributes to glucoregulatory improvements after vertical sleeve gastrectomy in mice.</a> Gut. 66 (2), 226-234 (2017).</li><li>McGavigan, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical+sleeve+gastrectomy+reduces+blood+pressure+and+hypothalamic+endoplasmic+reticulum+stress+in+mice.">Vertical sleeve gastrectomy reduces blood pressure and hypothalamic endoplasmic reticulum stress in mice.</a> Dis Model Mech. 10 (3), 235-243 (2017).</li><li>Esteban Varela, J., Nguyen, N. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laparoscopic+sleeve+gastrectomy+leads+the+U.S.+utilization+of+bariatric+surgery+at+academic+medical+centers.">Laparoscopic sleeve gastrectomy leads the U.S. utilization of bariatric surgery at academic medical centers.</a> Surg Obes Relat Dis. 11 (5), 987-990 (2015).</li><li>Laferrere, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+weight+loss+by+gastric+bypass+surgery+versus+hypocaloric+diet+on+glucose+and+incretin+levels+in+patients+with+type+2+diabetes.">Effect of weight loss by gastric bypass surgery versus hypocaloric diet on glucose and incretin levels in patients with type 2 diabetes.</a> J Clin Endocrinol Metab. 93 (7), 2479-2485 (2008).</li><li>Adams, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Health+benefits+of+gastric+bypass+surgery+after+6+years.">Health benefits of gastric bypass surgery after 6 years.</a> Jama. 308 (11), 1122-1131 (2012).</li><li>McGavigan, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGR5+contributes+to+glucoregulatory+improvements+after+vertical+sleeve+gastrectomy+in+mice.">TGR5 contributes to glucoregulatory improvements after vertical sleeve gastrectomy in mice.</a> Gut. , (2015).</li><li>Peterli, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+in+glucose+metabolism+after+bariatric+surgery:+comparison+of+laparoscopic+Roux-en-Y+gastric+bypass+and+laparoscopic+sleeve+gastrectomy:+a+prospective+randomized+trial.">Improvement in glucose metabolism after bariatric surgery: comparison of laparoscopic Roux-en-Y gastric bypass and laparoscopic sleeve gastrectomy: a prospective randomized trial.</a> Ann Surg. 250 (2), 234-241 (2009).</li><li>Ryan, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FXR+is+a+molecular+target+for+the+effects+of+vertical+sleeve+gastrectomy.">FXR is a molecular target for the effects of vertical sleeve gastrectomy.</a> Nature. 509 (7499), 183-188 (2014).</li><li>Wilson-Perez, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical+sleeve+gastrectomy+is+effective+in+two+genetic+mouse+models+of+glucagon-like+Peptide+1+receptor+deficiency.">Vertical sleeve gastrectomy is effective in two genetic mouse models of glucagon-like Peptide 1 receptor deficiency.</a> Diabetes. 62 (7), 2380-2385 (2013).</li><li>Pressler, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical+sleeve+gastrectomy+restores+glucose+homeostasis+in+apolipoprotein+A-IV+KO+mice.">Vertical sleeve gastrectomy restores glucose homeostasis in apolipoprotein A-IV KO mice.</a> Diabetes. 64 (2), 498-507 (2015).</li></ol>

המחברים מצהירים שאין ניגודי אינטרסים, מלבד ד ר קאמינגס קיבל מימון Eli Lilly and Company.

ניתוח בריאטרי הוא הטיפול היעיל ביותר לטווח ארוך עבור השמנת יתר ותוצאות יתרונות בריאותיים אחרים כגון שיעור גבוה של סוג 2 סוכרת ויתר לחץ דם הפוגה1,9,15. מודלים מאתר של ניתוח בריאטרי לספק כלי רב עוצמה כדי לזהות את המנגנונים שבאמצעותו ניתוח ברי?...

מגיפת ההשמנה ממשיכה לצמוח ברחבי העולם ניתוח בריאטרי צברה פופולריות כמו הטיפול היעיל ביותר לטווח ארוך עבור השמנת יתר1. למרבה הצער, ירידה במשקל באמצעות דיאטה ופעילות גופנית הוא קשה להשיג יעיל יחסית מעל2,לטווח ארוך3. ניתוח בריאטרי, כגון כריתת קיבה שרוול אנכי (VSG), מוגדרת בתור המניפולציה של מערכת העיכול לצורך משקל הפסד1,4. למרות הירידה במשקל הוא תוצאה בולטת של ניתוח בריאטרי, ניתוח בריאטרי מספק יתרונות בריאותיים אחרים כגון שיפור מחלות רקע השמנה והארכת תוחלת החיים5. לדוגמה, ניתוח בריאטרי תוצאות שיעור גבוה של הפוגה של סוכרת מסוג 2, יתר לחץ דם, הפחתות הסיכון החיים להתפתחות סוגים מסוימים של סרטן1,6,7. ראוי לציין, ההשפעה של ניתוח בריאטרי גורם מחילת סוג 2 סוכרת ויתר לחץ דם נצפית לעיתים קרובות לאחר הניתוח, לפני8,של אובדן משקל9. זה מדגיש את הרעיון כי ישנם מנגנונים עצמאיים של משקל הגוף לתרום היתרונות הבריאותיים נצפתה לאחר הניתוח. מודלים חייתיים של ניתוח בריאטרי פותחו, מנוצלים כדי לחקור את המנגנונים שבאמצעותו יתרונות בריאותיים אלה מתרחשים10,11,12.
הבדיקה והאימות דגם העכבר של VSG, אשר אנחנו שהחלת על מודלים שונים מהונדסים העכבר כדי לחקור את המנגנונים שבאמצעותו ניתוח בריאטרי משפר את השמנת יתר מחלות רקע כגון סוכרת מסוג 2, יתר לחץ דם, סרטן המעי הגס10 , 11 , 12. מכרסם מודלים לאפשר את היכולת לבצע מניפולציה גנטית או התרופות להגדרת תפקידו של גנים ספציפיים או איתות המסלולים עניין ובקרה ניסיוני. אנו מתמקדים בעיקר VSG כי VSG ההליך בריאטרי הנפוץ ביותר שבוצעו במרפאה ארה ב13. בנוסף, VSG הוא מודל ניתוח פשוט עם שינויים אנטומיים פחות בהשוואה הליכים אחרים כגון הסחה מעקפים או biliopancreatic קיבה רו-en-Y.
המודל שלנו העכבר של VSG recapitulates את האפקטים הבאים של ניתוח בריאטרי נצפתה אצל בני אדם: משקל הפסד, צריכת מזון מופחת, תקנה גלוקוז משופרת, שיפור תפקוד איון, גדל הפרשת גלוקגון דמוי מים אחרונים פפטיד-1 (GLP-1), להפחית לחץ דם עורקי והגדלת מחזורי חומצות מרה ריכוזים10,11,12,13,14,15. לכן, זה מודל אידיאלי כדי לחקור את הגוף משקל התלויים והבלתי תלויים המנגנונים שבאמצעותו VSG משפר או פותר מחלות רקע השמנת יתר. בנוסף, זה מודל אמין זה יכול להיות משולב עם ניתוחים אחרים, מאפשר לחקור ההשפעה של VSG בתנאים מחלה שונים עם תובנה מכניסטית יותר12.

<table><tbody><tr><td>45% high fat diet</td><td>Research Diets</td><td>D12451</td><td></td></tr><tr><td>60% high fat diet</td><td>Research Diets</td><td>D12492</td><td></td></tr><tr><td>Boost</td><td>Nestle</td><td>160-67538</td><td>rich chocolate flavor</td></tr><tr><td>6-0 Suture</td><td>Ethicon</td><td>Z432</td><td>monofilament absorbable/taper</td></tr><tr><td>7-0 Suture</td><td>Covidien</td><td>8866127-01</td><td>monofilament absorbable/taper</td></tr><tr><td>Cotton Swabs</td><td>Fisherbrand</td><td>23-400-118</td><td>small</td></tr><tr><td>Cotton Swabs</td><td>Fisherbrand</td><td>233-400-101</td><td>large</td></tr><tr><td>Gauze</td><td>Various</td><td></td><td>4x4 4 ply and 2x2 4 ply</td></tr><tr><td>Foil</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Surgery drape</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>0.9% saline solution</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>LRS</td><td>Hospira</td><td>170RX</td><td></td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alcohol</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Eye Ointment</td><td>Paralube&amp;reg; Vet Ointment</td><td>17033-211-38</td><td></td></tr><tr><td>Tissue Adhesive</td><td>Vetbond</td><td>1469SB</td><td></td></tr><tr><td>Meloxicam (Metacam)</td><td>Boehringer Ingelheim</td><td>141-213</td><td>5 mg/ml</td></tr><tr><td>Enrofloxacin</td><td>Baytril</td><td>08713254-186599</td><td>22.7 mg/ml</td></tr><tr><td>Thin tipped hemostats</td><td>Fine Science Tools</td><td>13021-12</td><td></td></tr><tr><td>Metzenbaum Scissor</td><td>Fine Science Tools</td><td>14018-18</td><td></td></tr><tr><td>Iris Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>14058-09</td><td></td></tr><tr><td>Dumont Forcep</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-20</td><td></td></tr><tr><td>Serrated Forcep</td><td>Fine Science Tools</td><td>11020-12</td><td></td></tr><tr><td>Gavage needle</td><td>Fine Science Tools</td><td>18060-20</td><td></td></tr><tr><td>Microneedle driver</td><td>Fine Science Tools</td><td>12075-14</td><td></td></tr><tr><td>Spring Scissor</td><td>Fine Science Tools</td><td>15396-00</td><td></td></tr><tr><td>Insulin syringe</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1mL syringe</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>20mL syringe</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Glucometer (one touch ultra mini)</td><td>Lifescan</td><td>70021208</td><td></td></tr><tr><td>Multiplex insulin and GLP-1 kit</td><td>Meso Scale Discovery</td><td>K15171C-1</td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism 6.00</td><td>GraphPad Software</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nestlets</td><td>Ancare</td><td>NES3600</td><td></td></tr></tbody></table>

a murine model of vertical sleeve gastrectomy

ניתוח בריאטרי, כגון כריתת קיבה שרוול אנכי (VSG), הוא ניתוח של דרכי העיכול שיש לבצע לצורך ירידה במשקל. ניתוח בריאטרי הוא כיום הטיפול היעיל ביותר לטווח ארוך עבור השמנת יתר. בנוסף ירידה במשקל, ניתוח בריאטרי מייצרת יתרונות בריאותיים נוספים כמו מחילת מחילת יתר לחץ דם, סוכרת מסוג 2, ירד הסיכון להתפתחות סוגי סרטן מסוימים. המנגנונים מעבר לירידה במשקל להטבות האלה נשארים שהיישום מוגדרים. לכן, מודלים חייתיים של ניתוח בריאטרי מתבצעת פיתח ואומת לזיהוי המנגנונים שמוביל את היתרונות הבאים, במטרה לשפר את ההבנה של הפיזיולוגיה של מערכת העיכול וזיהוי מטרות טיפוליות חדשות. VSG הפך ההליך בריאטרי הנפוץ ביותר שבוצעו במרפאה בארצות הברית כי זה יעיל מאוד לייצר ירידה במשקל ושיפור חילוף החומרים, פשוט יותר לביצוע מאשר הליכים בריאטרי אחרים. לכן, יש שפותחה ואנו לאמת מודל מאתר של VSG. מודל VSG מאתר זה recapitulates רבים של ההשפעות של VSG אצל בני אדם, כולל תקנה גלוקוז ולחץ דם משופרת. השיטה מבוססת על בידוד של הקיבה, מצדו של כלי קיבה, הסרה של 70% של הקיבה על ידי transecting לאורך שכדור גדול של הקיבה. אנחנו בהצלחה החלת פרוטוקול כירורגי זה קווים העכבר מהונדסים שונים להגדרת התורמים מכניסטית היתרונות של VSG. יתר על כן, מודל VSG מאתר זה יש כבר בשילוב עם טכניקות ניתוחיות אחרות, כדי להשיג תובנה מכניסטית עמוק יותר. לכן, זה מודל פשוט ופסיביות ללמוד הפיזיולוגיה של מערכת העיכול, היתרונות הבריאותיים של ניתוח בריאטרי.

העמדת פנים ונהלים VSG מתוארים באיור1. איור 1A מציג היכן קו תפר ממוקם לאורך הקירות קיבה במהלך ההליך המזויפים. אזור זה אותו הוא שבו הקיבה נחתך במהלך הניתוח VSG. איור 1B מראה השריד הכרישים של הבטן השמאלית לאחר הביצועים של VSG.
<p class="...

Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy at JoVE.com

A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy

להלן תיאור הביצועים של ניתוח אנכי שרוול קיבה בעכברים. זה הוא סוג של ניתוח הרזיה המערבת הסרה של-70% של הקיבה.

מודל מאתר של ניתוח אנכי שרוול קיבה

Bariatric surgery, such as vertical sleeve gastrectomy (VSG), is a surgery of the gastrointestinal tract that is performed for the purpose of weight loss. ...

a-murine-model-of-vertical-sleeve-gastrectomy

Research

JoVE Journal

Biology

11.1K Views.  Cornell University. להלן תיאור הביצועים של ניתוח אנכי שרוול קיבה בעכברים. זה הוא סוג של ניתוח הרזיה המערבת הסרה של-70% של הקיבה.

Video: A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy

Murine Pancreatic Islet Isolation

Hi, I am Greg Zott. I'm with the UCSF Diabetes Center in the Bluestone Laboratory, and today I'm gonna show you the process for isolating mouse eyelets. The procedure involves the injection of a collagenase solution into the pancreas of a C3 H donor mouse, where we will then remove that pancreas, digest it away, purify the eyelets on a fial gradient, and then handpick them for ultimate transplant into the kidney capsule of a diabetic NOD mouse, Which will be our recipient.Before we start this procedure, we diluted our ATE solution in a modified Hanks buffer and we have adjusted the concentration specific for the strain of mouse that we're using the C3 H.We found digests better at a 0.8 mgs per mil collagenase solution, and we will use that to inject into the common bile duct to distend the pancreas.Performing. The procedure today Will be Pavo codre of the diabetes center. He will inject, open up the mouse, expose the the intestines, and then inject into the common bile duct.We will spray down the mouse with ethanol to keep the hair down, and then we will also verify that the mouse has been sacrificed properly with a toe pinch. Pavo will now open up the mouse and exposing the intestine and the pancreas with a midline incision. The diaphragm will also be cut to verify that the mouse will be sacrificed.Before we get started, I'd like to point out some of the important structures. The stomach is lying right here with the pancreas attached underneath into the duodenum and above. This is the liver where we'll find the gallbladder and the common bile duct, which you can see right here.So what Pavo will do next is he will isolate the small intestine, find where the common bile duct enters the small intestine. Once the intestine is exposed, we clamp on either side of the common bile duct with mosquito clamps. We find that this allows more collagenates to enter the pancreas while other groups try to direct the clamp on top of the common bile duct.We find that this is a better technique in allowing enzyme to enter the pancreas. This is a gentle procedure. You don't want to tear the bowel.You wanna allow the clamps to lie gently on either side of the common bile duct. Now we will find a gallbladder, and once the gallbladder's exposed, we will use that as a guide to injecting the collagenase into the common bile duct. Powell's using a 30 gauge needle with a five cc syringe containing three mills of collagenase solution.As he's entering the common bile duct, he's distending that duct with collagenase solution and then he travels down the common bile duct till he reaches near the intestine. And as he's going down, the enzyme solutions being pumped into the injected into the pancreas. Now that the pancreas is inflated with collagenase solution, Powell's gonna remove the hemostats and then remove the pancreas from the the mouse carefully tearing it away from the intestine.He removes it from the stomach. Okay, and then using the spleen as a handle, he lifts up the pancreas and then slowly snips it away in the common bile duct, and that's it. Pancreas is laid out and then the spleen is removed, and there he's removing the meso enteric tissue, and then the pancreas is placed in a two mill collagenase solution and a sterilized glass vial and it's placed back on Ice.The isolated pancreas that we put into the glass vials will now be placed into a 37 degree water bath for approximately 17 minutes. We placed them into a 50 mil conical rack so that they don't float up. Once during the bath, the timer starts and the digestion begins.Once the digestion time is completed, vials are removed, and then they are shaken and disrupted gently. And once the tissue starts falling apart, the vial is then placed on ice. A sterile screen is placed over a 400 mil beaker that contains washing buffer.The pancreas digest is then carefully poured over the screen into the wash buffer. For demonstration purposes, the hood has been turned off and the glass of the hood has been raised so we could see what we're doing. Once the pancreas digest is poured into the beaker, the vials are rinsed with the same washing buffer and the wash buffer placed over the screen.We have a syringe filled with washing buffer. We will use that to forcefully wash the tissue through the screen. The idea is to release any loose eyelets that are unattached to the matrix, but leaving the membranes and the undigested tissue on the screen.And when you're finished washing a tissue, this is what you usually See at the end of the procedure. The Pancreas tissue that's in the bottom of the tube will now be transferred to two 50 mil conical, and the tissue will be washed, the tissue's mixed evenly, and then distributed evenly so that we have a equal pellet volume in each tube. The beaker is now rinsed with more washing buffer.The sides are rinse so that you get all tissue that is entered the beaker again. Then it's equally distributed between each two, both 50 mil. Conical then are topped off with wash buffer.The tissue is inverted several times and then placed into a centrifuge. This is a quick spin. The centrifuge is allowed to reach a thousand RPM and then is turned off.The tissue at this time is very S eyelets are very sensitive, and you don't want to over compact them. The tubes are removed and we will do this wash step three more times. This is the end of the third wash.The components of the 50 mil conical tube are transferred to the 15 conical tube and centrifuge for a thousand RP M and then stopped. The supernat will be removed and the first part of the FI Call will be started. We are at the step where we Have our pelleted di pancreas digest.We'll resuspend that tissue so it's nice and loose to the pellets. We'll add the first density gradient, which is 1 1 0 8. We'll add five mils to each tube.The pellet is then mixed thoroughly in each of the gradients. It's important that you get good tissue distribution in your heaviest gradient. Now we will layer two mils of 1 0 9 6 density.We will then on top of that, layer two mils of 1 0 6 9 density, and then on top of that 1 0 3 7 density. It's important while you're layering the densities that you don't mix. Then all the layers have been added to the tube.And you can see this is the top of 1 1 0 8, the top of 9 1 0 9 6, the top of 1 0 6 9 and the top of 1 0 3 7. And you could see the tissue is already starting to move to its proper density even without centri fusion. The fial gradients are brought up to speed at 1800 RPM for 15 minutes, and remember to keep the brake off after the tubes are removed from the centrifuge.You can see between the 0 0 9 6 and 0 0 7 layer, there's a nice band of eyelet tissue Pablo's. Now removing the 0 3 7 layer to remove any tissue debris and DNA that might have been released during the processing. Using a sterile plastic pasture pipette, he will now remove the islet layer and transfer them to a 50 mil conical containing 25 mils of wash buffer.You want do this step quickly because fol is toxic to eyelets. We actually removed the entire 0 6 9 and 0 9 6 layer. Pavo cuts the top of the plastic pasture pipette and rinses it with wash buffer.The eyelets are then centrifuge like we centrifuge previously. Centrifuge is brought up to a Thousand RPM and then we stop it and We aspirate off. The supernatant eyelets will be washed three times with wash media.So we just completed the eyelid Isolation process we took from the digest to the fol gradient to the purified eyelets after our third wash with wash buffer, we resuspended the eyelets in our RPMI media and we played it in a tissue culture plate. These eyelets are now ready for in vitro assays or in vivo preps like eyelet Transplant.

הלבלב Murine איילט בידוד

Murine Model of Hindlimb Ischemia 

In the United States, peripheral arterial disease (PAD) affects about 10 million individuals, and is also prevalent worldwide. Medical therapies for symptomatic relief are limited. Surgical or endovascular interventions are useful for some individuals, but long-term results are often disappointing. As a result, there is a need for developing new therapies to treat PAD. The murine hindlimb ischemia preparation is a model of PAD, and is useful for testing new therapies. When compared to other models of tissue ischemia such as coronary or cerebral artery ligation, femoral artery ligation provides for a simpler model of ischemic tissue. Other advantages of this model are the ease of access to the femoral artery and low mortality rate. 
In this video, we demonstrate the methodology for the murine model of unilateral hindimb ischemia. The specific materials and procedures for creating and evaluating the model will be described, including the assessment of limb perfusion by laser Doppler imaging. This protocol can also be utilized for the transplantation and non-invasive tracking of cells, which is demonstrated by Huang et al.1.

Murine Model of Hindlimb Ischemia

The surgical procedure for induction of unilateral hindlimb ischemia is demonstrated, with confirmation of ischemia by laser Doppler perfusion imaging.

דגם Murine של איסכמיה Hindlimb

In the United States, peripheral arterial disease (PAD) affects about 10 million individuals, and is also prevalent worldwide.  Medical therapies for ...

Murine Renal Transplantation Procedure

Renal orthotopic transplantation in mice is a technically challenging procedure. Although the first kidney transplants in mice were performed by Russell et al over 30 years ago (1) and refined by Zhang et al years later (2), few people in the world have mastered this procedure. In our laboratory we have successfully performed 1200 orthotopic kidney transplantations with &gt; 90% survival rate. The key points for success include stringent control of reperfusion injury, bleeding and thrombosis, both during the procedure and post-transplantation, and use of 10-0 instead of 11-0 suture for anastomoses.
Post-operative care and treatment of the recipient is extremely important to transplant success and evaluation. All renal graft recipients receive antibiotics in the form of an injection of penicillin immediately post-transplant and sulfatrim in the drinking water continually. Overall animal health is evaluated daily and whole blood creatinine analyses are performed routinely with a portable I-STAT machine to assess graft function.

Renal transplantation in mice is a technically challenging procedure that requires careful post-operative care and treatment for success.

Murine נוהל השתלת כליה

Renal orthotopic transplantation in mice is a technically challenging procedure. Although the first kidney transplants in mice were performed by Russell ...

Murine Model for Parkinson's Disease: from 6-OH Dopamine Lesion to Behavioral Test

Parkinson's disease (PD) affects at least 6.5 million people worldwide, irrespective of gender, social, ethnic, economic, or geographic boundaries. Key symptoms, such as tremor, rigidity and bradikinesia, develop when about 3/4 of dopaminergic cells are lost in the substantia nigra, and fail to provide for the smooth, coordinated regulation of striatal motor circuits. Depression and hallucinations are common, and dementia eventually occurs in 20% of patients. At this time, there is no treatment to delay or stop the progression of PD. Rather, the medications currently available aim more towards the alleviation of these symptoms. New surgical strategies may reversibly switch on the functionally damaged circuits through the electrical stimulation of deep brain structures, but although deep brain stimulation is a major advance, it is not suitable for all patients. It remains therefore necessary to test new cell therapy approaches in preclinical models.
Selective neurotoxic disruption of dopaminergic pathways can be reproduced by injection of 6-hydroxydopamine (6-OHDA) or MPTP (1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tertahydropyridine) whereas depleting drugs and oxidative-damaging chemicals may also reproduce specific features of PD in rodents. Unlike MPTP, 6-OHDA lesions cause massive irreversible neuronal loss, and can be uni- or bilateral. The 6-OHDA lesion model is reliable, leads to robust motor deficits, and is the most widely used after 40 years of research in rats1. As interactions between grafted cells and host can now be studied more thoroughly in mice rather than in rats, the model has been transposed to mice2,3, where it has been recently characterized4.
In this video, we demonstrate how to lesion the left nigro-striatal pathway of anesthetized mice by slowly delivering 2.0 &mu;L of 6-OHDA through a stereotaxically inserted micro-syringe needle. The loss of dopaminergic input occurs within days, and the functional impairments can be monitored over post-operative weeks and months by rating animal rotations induced by dopaminergic agents5. Here, we show full-body contralateral rotations occurring 10 minutes after a single subcutaneous administration of apomorphine, measured one month after the lesion. Outcomes and drawbacks are discussed below.

Parkinson disease is caused by loss of dopaminergic innervation to the striatum, which can be experimentally induced by 6-OH-dopamine. We describe how to perform a stereotaxic lesion and to monitor apomorphine-induced rotational behavior in mice. This model is useful and reliable for testing new therapies for Parkinson disease.

דגם Murine עבור מחלת פרקינסון: מן הנגע 6-OH דופמין מבחן ההתנהגות

Parkinson's disease (PD) affects at least 6.5 million people worldwide, irrespective of gender, social, ethnic, economic, or geographic boundaries. Key ...

LAD-Ligation: A Murine Model of Myocardial Infarction

Research models of infarction and myocardial ischemia are essential to investigate the acute and chronic pathobiological and pathophysiological processes in myocardial ischemia and to develop and optimize future treatment.
Two different methods of creating myocardial ischemia are performed in laboratory rodents. The first method is to create cryo infarction, a fast but inaccurate technique, where a cryo-pen is applied on the surface of the heart (1-3). Using this method the scientist can not guarantee that the cryo-scar leads to ischemia, also a vast myocardial injury is created that shows pathophysiological side effects that are not related to myocardial infarction. The second method is the permanent ligation of the left anterior descending artery (LAD). Here the LAD is ligated with one single stitch, forming an ischemia that can be seen almost immediately. By closing the LAD, no further blood flow is permitted in that area, while the surrounding myocardial tissue is nearly not affected. This surgical procedure imitates the pathobiological and pathophysiological aspects occurring in infarction-related myocardial ischemia.
The method introduced in this video demonstrates the surgical procedure of a mouse infarction model by ligating the LAD. This model is convenient for pathobiological and pathophysiological as well as immunobiological studies on cardiac infarction. The shown technique provides high accuracy and correlates well with histological sections.

This video demonstrates how to use a fast and reliable model to study pathobiological and pathophysiological processes of myocardial ischemia.

LAD-קשירת: מודל Murine של אוטם שריר הלב

Research models of infarction and myocardial ischemia are essential to investigate the acute and chronic pathobiological and pathophysiological processes ...

Techniques of Sleeve Gastrectomy and Modified Roux-en-Y Gastric Bypass in Mice

Obesity is a major public health issue, with a prevalence of 4 to 28% for men and 6.2 to 36.5% for women in Europe (from 2003 to 2008). Morbid obesity is frequently associated with metabolic complications, such as type 2 diabetes, hypertension, and dyslipidemia, reducing life expectancy and quality. In the absence of any effective noninvasive treatments, bariatric surgery is a valuable therapeutic option for patients with morbid obesity (body mass index (BMI) &#62;40 kg/m2), leading to long-term, sustained weight loss and improvements in metabolic complications. However, the underlying cellular and molecular mechanisms sustaining the beneficial effects of bariatric surgery are not yet fully understood. Due to the numerous genetically-modified strains available, the mouse model is the most convenient animal model to explore the molecular mechanisms behind the pleiotropic beneficial effects of bariatric surgeries. Here, we detailed the optimized healthcare methods and surgical protocols in mice for the two most widely-used bariatric surgeries: the sleeve gastrectomy and the modified Roux-en-Y gastric bypass. Deciphering the molecular mechanisms underlying the therapeutic effects of bariatric surgeries offers the promise of identifying new therapeutics targets.

Bariatric surgery is the most efficient way to reduce body weight and the deadly metabolic complications (diabetes, obesity, and dyslipidemia) frequently associated with morbid obesity. Mouse models of bariatric surgery represent a unique asset for deciphering molecular mechanisms behind the beneficial effects of these surgeries on diabetes, hypertension, and dyslipidemia.

טכניקות של שרוול קיבה ו Modified Roux-en-Y מעקף קיבה בעכברים

Obesity is a major public health issue, with a prevalence of 4 to 28% for men and 6.2 to 36.5% for women in Europe (from 2003 to 2008). Morbid obesity is ...

Medicine

Efficient Production and Purification of Recombinant Murine Kindlin-3 from Insect Cells for Biophysical Studies

Kindlins are essential coactivators, with talin, of the cell surface receptors&#160;integrins and also participate in integrin outside-in signalling, and the control of gene transcription in the cell nucleus. The kindlins are ~75 kDa multidomain proteins and bind to an NPxY motif and upstream T/S cluster of the integrin &#946;-subunit cytoplasmic tail. The hematopoietically-important kindlin isoform, kindlin-3, is critical for platelet aggregation during thrombus formation, leukocyte rolling in response to infection and inflammation and osteoclast podocyte formation in bone resorption. Kindlin-3&#39;s role in these processes has resulted in extensive cellular and physiological studies. However, there is a need for an efficient method of acquiring high quality milligram quantities of the protein for further studies. We have developed a protocol, here described, for the efficient expression and purification of recombinant murine kindlin-3 by use of a baculovirus-driven expression system in Sf9 cells yielding sufficient amounts of high purity full-length protein to allow its biophysical characterization. The same approach could be taken in the study of the other mammalian kindlin isoforms.

Kindlins are fundamental to cell adhesion through integrins but studies of them have been hampered by the difficulty encountered in expressing them recombinantly in bacterial hosts. We describe here methods for their efficient production in baculovirus-infected insect cells.

הפקה וטיהור יעילה של רקומביננטי Murine Kindlin-3 מתאי חרקים לBiophysical לימודים

Kindlins are essential coactivators, with talin, of the cell surface receptors&#160;integrins and also participate in integrin outside-in signalling, and ...

Sleeve Gastrectomy in Mice using Surgical Clips

The number of people who are overweight and obese is continually increasing both in the adult and adolescent populations. This coincides with the increased universal phenomenon of type 2 diabetes (T2D) and other metabolic problems. Bariatric surgery, such as SG, is currently one of the most effective and commonly used long-term treatment for obesity and T2D, but the association between them is not completely explored yet. The mechanisms underlying the outcomes seen after bariatric surgery in humans can be investigated based on preclinical animal studies. The SG reduces body weight, glucose levels and many metabolic parameters, and is easy to perform with a low incidence of complications. The goal of this work is to provide a simple method and an uncomplicated preclinical model of bariatric surgery in animals for researchers.

The prevalence of diabetes and obesity is continuously increasing worldwide. The mechanisms between diabetes, obesity and their associated mortality and co-morbidities need to be further investigated. Here, we present a protocol for sleeve gastrectomy (SG) in animals as an uncomplicated preclinical model of bariatric surgery.

שרוול כריתת קבי במקלקלים באמצעות קליפים כירורגיים

The number of people who are overweight and obese is continually increasing both in the adult and adolescent populations. This coincides with the ...

Single-Anastomosis Duodeno-Ileal Bypass with Sleeve Gastrectomy Model in Mice

Obesity is a major health issue worldwide. As a response, bariatric surgeries have emerged to treat obesity and its related comorbidities (e.g., diabetes mellitus, dyslipidemia, non-alcoholic steatohepatitis, cardiovascular events, and cancers) through restrictive and malabsorptive mechanisms. Understanding the mechanisms by which these procedures allow such improvements often require their transposition into animals, especially in mice, because of the ease of generating genetically modified animals. Recently, the single-anastomosis duodeno-ileal bypass with sleeve gastrectomy (SADI-S) has emerged as a procedure that uses both restrictive and malabsorptive effects, which is being used as an alternative to gastric bypass in case of major obesity. Thus far, this procedure has been associated with strong metabolic improvements, which has led to a marked increase in its use in daily clinical practice. However, the mechanisms underlying these metabolic effects have been poorly studied as a result of a lack of animal models. In this article, we present a reliable and reproducible model of SADI-S in mice, with a special focus on perioperative management. The description and use of this new rodent model will be helpful for the scientific community to better understand the molecular, metabolic, and structural changes induced by the SADI-S and to better define the surgical indications for clinical practice.

Single-anastomosis duodeno-ileal bypass (SADI-S) is an emerging bariatric procedure with important metabolic effects. In this article, we present a reliable and reproducible model of SADI-S in mice.

מעקף Duodeno-Ileal יחיד Anastomosis עם שרוול Gastrectomy דגם בעכברים

Obesity is a major health issue worldwide. As a response, bariatric surgeries have emerged to treat obesity and its related comorbidities (e.g., diabetes ...

Murine Vertical Sleeve Gastrectomy: A Surgical Procedure to Downsize Stomach in Experimental Mouse Models

Source: Garibay, D., Cummings, B. P. <a href="https://www.jove.com/video/56534" target="_blank">A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy.</a> J. Vis. Exp. (2017)
In this video, a vertical sleeve gastrectomy procedure is performed on an experimental mouse model. This procedure helps remove a significant portion of the stomach along its greater curvature.

Murine Vertical Sleeve Gastrectomy: הליך כירורגי להקטנת קיבה במודלים ניסיוניים של עכברים

Source: Garibay, D., Cummings, B. P. A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy. J. Vis. Exp. (2017)
In this video, a vertical sleeve gastrectomy ...