وأيد هذا البحث المعاهد الوطنية للصحة/NCI R21CA195002-01A1، مجلس "أن رئيس" النساء كورنيل و "الزمالة تنوع الدراسات العليا"، جامعة ولاية نيويورك. المختبر الدكتور كامينغز أيضا تلقي التمويل خلال فترة المشروع من كورنيل النسبية سرطان علم الأحياء برنامج التدريب و Eli Lilly والشركة.

كافة البروتوكولات التجريبية أقرتها لجنة الاستخدام ورعاية الحيوان مؤسسي جامعة كورنيل.
1-مرحلة ما قبل الجراحية التحضير
ملاحظة: عادة ما تكون دراسة الفئران على خلفية C57BL يعانون من السمنة المفرطة الناجمة عن النظام الغذائي لإجراء الدراسات ذات الصلة ترانسلاتيونالي البشرية السمنة ومقاومة الأنسولين. وقد درس الفئران الذكور والإناث كما هو موضح في الخطوات اللاحقة.
<ol>
	<li>في سن شهرين، مكان فئران الحمية عالية الدهون 45% أو 60% لمدة شهرين (انظر الجدول للمواد). ملاحظة: يتم تغذية الفئران غذائي الدهون عالية لإنشاء النمط الظاهري السمنة ومقاومة الأنسولين. ويمكن استخدام فترات أقصر أو أطول من تغذية حمية الدهون عالية تبعاً لأهداف الدراسة.</li>
	<li>الاستمرار في تغذية الفئران إعلانية libitum حتى الجراحة. إذا كانت هناك حاجة إلى قياسات أساسية، بعد سبعة أسابيع من ارتفاع الدهون حمية تغذية، سريعة الفئران ح 6 أو بين ليلة وضحاها وأخذ عينة دم خط أساس لقياس نواتج الأيض للفائدة (مثل السكر).</li>
	<li>مواصلة الفئران في ارتفاع الدهون الحمية وتسمح الفئران أسبوع واحد لاسترداد بعد جمع الدم قبل الجراحة صورية أو فسج. ضع الماوس على سائل حمية (انظر الجدول للمواد) لمدة 4 أيام قبل الجراحة. ملاحظة: يتم الاحتفاظ الفئران على اتباع نظام غذائي سائل قبل وبعد الجراحة لمسح في الجهاز الهضمي من الجسيمات التي قد تنال من رد الشفاء.</li>
	<li>تعقيم العناصر التالية قبل الجراحة: إحباط، شاش، يميل قضيب تطبيق (كبار المستشارين التقنيين) والأدوات الجراحية (مسننة هيموستات، تعمل مقص، قص قزحية العين، فورسيب دومون، فورسيب براون--أدزون، سائق microneedle الربيع مقص، إبرة تزقيمية القطن ).</li>
</ol>
2. جاستريكتومي كم الرأسي وإجراءات صورية
<ol>
	<li>اليوم لعملية جراحية وزن الفئران في الحصول على قياس وزن خط أساس.</li>
	<li>تجهيز غرفة العمليات الجراحية نظام التخدير، وحوض ماء ساخن، وتدفئة وسادة. تعيين حمام المياه إلى 37 درجة مئوية، واستخدامه لتسخين المحلول الملحي 0.9% للري. تنظيف الحقل الجراحي مع الإيثانول 70% واستخدام تقنية تعقيم لفتح حزمة جراحة يعقم وأدوات. ملاحظة: يتم استخدام لوحة التدفئة الدفء الحيوان أثناء الجراحة والتعافي من التخدير.</li>
	<li>تستخدم دائرة للاستقراء، تخدير الماوس مع إيسوفلوراني 5% ومعدل تدفق2 س 1 لتر/دقيقة تأكيد أن الفأر في الطائرة المناسبة للتخدير عن طريق إجراء رشة أخمص القدمين. الحفاظ على الماوس مع إيسوفلوراني 1-3% ومعدل تدفق2 س 0.6 لتر في الدقيقة بمجرد تحقق طائرة متسقة للتخدير.</li>
	<li>حالما يتم تخديره من الماوس، ضع مرهم العين (انظر الجدول للمواد) على عينية لإبقائها رطبة أثناء الجراحة. وفي هذا الوقت أيضا إدارة مسكن، مثل ميلوكسيكام (2 مغ/كغ تحت الجلد). مقطع الشعر من السرة للأبط الضغط الجلد بلطف لتوفير التوتر.
	<ol>
		<li>رعاية كما الجلد الماوس رقيقة وحساسة، لا يسبب آفات جلدية عند قص الشعر. تنظيف البشرة بوفيدون والكحول.</li>
		<li>ارتداء قفازات معقمة وإعداد الميدان الجراحية المعقمة والصكوك. تنفيذ باقي الإجراء باستخدام تقنية معقمة. إعداد الميدان الجراحية المعقمة بوضع الستائر الجراحية المعقمة على كلا جانبي من الماوس. استخدام رقائق القصدير يعقم لإنشاء ثني جراحية للماوس.</li>
		<li>قطع ثقب صغير في إحباط القصدير السماح بالوصول إلى البطن الماوس.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>جعل شق الجلد من منتصف البطن (السرة) إلى مستوى الغضروف xiphoid استخدام مقص آيريس. التعرف لينيا آيريس ألبا واستخدام المقص لقطع طريق الجدار الجسم على طول ينيا ألبا. استخدام كبار المستشارين التقنيين للارتقاء بلطف المعدة خارج البطن وثم صراحة تشريح الثرب الكبرى قبالة انحناء أكبر من المعدة.</li>
	<li>سد الشريان المعدة القصير الذي يمتد بين قاع المعدة والطحال عن طريق وضع الأربطة اثنين واستخدام 7-0 شعيرات خياطة قابلة للامتصاص. استخدام مقص الربيع لقطع بين الحروف المركبة اثنين. بمجرد الشريان هو بحف، تماما اكستريورز المعدة من تجويف البطن. ضع شاش تحت المعدة والرطب مع المحلول الملحي للحفاظ الأنسجة الرطبة.</li>
	<li>الإجراء الشام
	<ol>
		<li>لهذا الإجراء الشام، وضع نمط مستمر بسيط فضفاض من خياطة باستخدام 6-0 شعيرات الامتصاص خياطة بإبرة تفتق. تبدأ 2 مم بالحق (حق الجراح) المريء. ضع خط خياطة على طول الجدار المعدة البطني ومن ثم تابع على طول الجدار المعدة الظهرية. ملاحظة: لجميع المعالجات المعدة، استخدام فقط شعيرات خياطة قابلة للامتصاص لتقليل خطر الإصابة. وعلاوة على ذلك، استخدام فقط خياطة بإبرة تفتق لجميع المعالجات المعدة، كاستخدام إبرة قطع يزيد من خطر خياطة "سحب من خلال" مما يؤدي إلى تلف أنسجة المعدة والجرح ديهيسسينسي.</li>
		<li>تمرير الإبرة تماما من خلال جدار المعدة واحد بينما تضع في خياطة الجروح. تأكد من الكذب مسطحة الخياطة، ولكن عدم تقييد المعدة. بلطف التعادل الخياطة إيقاف استخدام رمية 3-4 وقم بالتخطي إلى الخطوة 2.9.</li>
		<li>لهذا الإجراء فسج تخطي الخطوة 2.7 والمضي قدما في خطوة 2.8.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>الإجراء فسج
	<ol>
		<li>لهذا الإجراء فسج، اضطر أبرز فروع الشريان المعدي والاتجاه مع 7-0 خياطة شعيرات قابلة للامتصاص بإبرة تفتق استخدام 3 رميات لكل عقده. ضع الحروف أدناه (أينحو أقل انحناء المعدة) السطر المقصود من ترانسيكشن. ملاحظة: السطر المقصود من ترانسيكشن يبدأ ~ 2 مم أعلاه (معنى نحو انحناء أكبر من المعدة) حز القلب المعدة وعلى الأقل 2 مم أدناه بيلكاتوس مارجو ويمتد إلى نهاية الدانية من الفص الأيمن من البنكرياس. بشكل عام، وهناك 4 سفن كل جدار المعدة التي تحتاج إلى أن تكون متصلة؛ ومع ذلك، وهذا قد تختلف بين الفئران.</li>
		<li>لمنع تسرب محتويات المعدة أثناء جاستريكتومي، وضع خط مستمر بسيطة لخياطة مرورا بكل جدران المعدة أسفل السطر المقصود من ترانسيكشن باستخدام 6-0 شعيرات الامتصاص خياطة بإبرة تفتق. يبدأ خط خياطة بحق الجراح المريء وأقل من بيلكاتوس مارجو ونهاية فقط فوق البنكرياس.</li>
		<li>ضع هيموستاتس رقيقة-مقلوب فوق خط خياطة واستخدام مقص الربيع لقطع بين خط خياطة وهيموستاتس. إزالة أنسجة المعدة بحف من ميدان العمليات الجراحية المعقمة.</li></ol></li></ol>استخدام كبار المستشارين التقنيين لتنظيف الدم و digesta الخروج من المعدة.
		<li>تعزيز ترخيصات لجدران المعدة باستخدام 6-0 شعيرات الامتصاص خياطة بإبرة تفتق استخدام نمط متقطع بسيط. ملاحظة: يوصي نمط خياطة متقطع بسيط بحيث يوفر هذا الإغلاق أكثر أماناً من نمط خياطة مستمرة بسيطة.</li>
		<li>مسح بقايا المعدة مع المالحة طوال فترة الإجراءات من أجل الحفاظ الأنسجة رطبة ونظيفة. استخدام إبرة تزقيمية مدتها 20 غ يعلق على حقنه 20 مل لإجراء الغسل المعدة مع المالحة. استخدم هذه المساحة لضمان توفير الضغط الكافي دون المخاطرة بإلحاق أضرار أنسجة المعدة من الضغط المفرط أو أنسجة المعدة عرضي من استخدام إبرة مدببة العادية.</li>
		<li>استخدام الحد أدنى من 20 عقده بأمان إغلاق المعدة؛ إيلاء الاهتمام للإغلاق على طول الجانب المريء، كما أن هذا الجانب هو أكثر صعوبة للوصول إلى وذلك غالباً ما يكون موقع dehiscence.</li>
		<li>تأكد من أنه لا يوجد أي تسرب بالضغط بلطف على المعدة مع كبار المستشارين التقنيين. إذا تم تحديد تسرب، مكان عقده متقطع بسيطة إضافية في مجالات التسرب وثم تسرب الاختبار مرة أخرى. اختبار تسرب حتى يتم الكشف عن لا تسرب.</li>
		<li>القيام غسل شامل نهائي المعدة باستخدام على الأقل 60 مل من المحلول الملحي لضمان أن لا الجسيمات المعدية قد تركت.</li>
	
	
	<li>مكان المعدة مرة أخرى في تجويف البطن تحت الكبد باستخدام كبار المستشارين التقنيين. وضع كبار المستشارين التقنيين على طول الجانب الظهرية التجويف البطني ﻻستيعاب جميع السوائل الزائدة. استخدام إبرة ز 18 كليلة، حقن الحل لاكتاتيد المسابقة (LRS) مع أو بدون المضادات الحيوية (0.5 مل الباحثون القانونيون +/-انروفلوكساسين 20 مغ/كغ) مباشرة في تجويف البطن، قبل الإغلاق. ملاحظة: هذا يحل محل السوائل المفقودة خلال الجراحة ويوفر طريقة للتطبيق المباشر للمضادات الحيوية إلى موقع العمليات الجراحية للمساعدة في الانتعاش.</li>
	<li>إغلاق طبقة العضلات البطن باستخدام 6-0 شعيرات الامتصاص خياطة بإبرة تفتق في نمط متقطع بسيط. ثم قم بإغلاق طبقة الجلد مع 6-0 شعيرات خياطة قابلة للامتصاص في نمط مستمر بسيطة.</li>
	<li>ضع لاصق الأنسجة في الجلد وإضعاف الجلد عبر خط خياطة لدفن خياطة الجروح حيث أنه لا يمكن تعطيل الماوس إغلاق الجرح قد.</li>
	<li>إيقاف تشغيل في إيسوفلوراني واسمحوا الماوس استرداد على وسادة تدفئة مينبيفوري 10-15 العودة إلى قفصة المنزل. لا تترك الحيوان غير المراقب حتى استعاد وعيه، وهي قادرة على التحرك.</li>
	<li>الحفاظ على الحيوانات مساكن منفردة حتى تعافي تماما من جراحة. ملاحظة: إذا كانت القياسات المدخول الغذائي دقيقة يمكن الحصول عليها في جميع أنحاء الدراسة، ينبغي مواصلة الفئران تكون مساكن منفردة في جميع أنحاء الدراسة. هناك خطر إعاقة جسم غريب من الأكل قفص منزل الأسرة. أن إيواء الحيوانات في أقفاص خالية من الأسرة باستثناء تداخل المواد لتوفير الإثراء (انظر الجدول للمواد).</li>

3-بعد العمليات الجراحية الماوس الرعاية والقياسات
<ol>
	<li>العودة الماوس إلى قفصة المنزل ووضع القفص على منصة تدفئة. الحفاظ على الفئران على حمية سائلة لمدة 7 أيام على الأقل بعد الجراحة. إدارة مسكن، مثل ميلوكسيكام (2 مغ/كغ تحت الجلد)، لمدة يومين بعد الجراحة. ملاحظة: يمكن إعطاء المضادات الحيوية، مثل انروفلوكساسين (20 مغ/كغ)، لمدة تصل إلى 7 أيام بعد الجراحة. المضادات الحيوية تعطي للتقليل من خطر العدوى من العملية الجراحية وقد أو قد لا يكون مطلوباً تبعاً لمستوى العقم يحتفظ طوال فترة الإجراءات. ومع ذلك، إذا كان يتم استخدام المضادات الحيوية، أنها يجب أن تدار على جميع الفئران في نفس الدراسة للحفاظ على التناسق.</li>
	<li>خلال الفترة اللاحقة للعمليات الجراحية تقييم وزن الجسم وتناول الطعام والتغوط، ومستوى النشاط والتصرف فيها على الأقل يوميا لضمان الشفاء السليم والانتعاش. القيام بعمليات رصد بعد العمليات الجراحية لمدة 14 يوما بعد الجراحة. ملاحظة: فشل العمليات الجراحية عادة ما ينظر فورا بعد الجراحة أو في غضون ثلاثة أيام بعد عمليا. الحيوانات التي لم يتم الأكل أو الشرب في اليوم الثاني بعد الجراحة يجب أن تراقب عن كثب للمضاعفات الجراحية.</li>
	<li>وبعد الانتهاء الناجح للفترة اللاحقة للعمليات الجراحية، قياس كمية الوزن والغذاء الجسم بانتظام طوال الدراسة لضمان الحفاظ على النمط الظاهري المناسبة.</li>
	<li>تنفيذ اختبار التسامح جلوكوز عن طريق الفم (OGTT) لتقييم تحمل الجلوكوز، إفراز الأنسولين الجلوكوز-وحفز، والقناة الهضمية إفراز الهرمونات.
	<ol>
		<li>إجراء OGTT في الفئران بعد الصيام لهم عن ح 6، ومن ثم الفئران تزقيمية مع محلول الدكستروز 50% بجرعة 1 غ/كغ.</li>
		<li>جمع عينات الدم الذيل في 0، 2، 5، 5، 15، 30، 60، وبعد تزقيمية مدتها 120 دقيقة. قياس جلوكوز الدم مع السكر في هذه النقاط الزمنية. جمع عينات المصل في كل نقطة الوقت لقياس مختلف الهرمونات، مثل الأنسولين و GLP-1.</li>
		<li>سريعة من الفئران ح 6 قبل القتل الرحيم. تأخذ قياس العينة وجلوكوز دم نهائياً. مقارنة بقياس الجلوكوز النهائي لقياس خط الأساس. Euthanize الفئران بحقن داخل بينتوباربيتال بجرعة 200 مغ/كغ.</li>
		<li>استخدام خط الأساس وعينات مصلية النهائي لقياس التحاليل الإضافية ومقارنة القيم قبل وبعد العملية الجراحية.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol>
	<li>Buchwald, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bariatric+surgery:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Bariatric surgery: a systematic review and meta-analysis.</a> JAMA. 292 (14), 1724-1737 (2004).</li><li>Wadden, T. A., Butryn, M. L., Byrne, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+lifestyle+modification+for+long-term+weight+control.">Efficacy of lifestyle modification for long-term weight control.</a> Obes Res. 12, 151s-162s (2004).</li><li>Yanovski, S. Z., Yanovski, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obesity.">Obesity.</a> N Engl J Med. 346 (8), 591-602 (2002).</li><li>Abbatini, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+effects+of+laparoscopic+sleeve+gastrectomy,+gastric+bypass,+and+adjustable+gastric+banding+on+type+2+diabetes.">Long-term effects of laparoscopic sleeve gastrectomy, gastric bypass, and adjustable gastric banding on type 2 diabetes.</a> Surg Endosc. 24 (5), 1005-1010 (2010).</li><li>Sjostrom, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+bariatric+surgery+on+mortality+in+Swedish+obese+subjects.">Effects of bariatric surgery on mortality in Swedish obese subjects.</a> N Engl J Med. 357 (8), 741-752 (2007).</li><li>Adams, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+incidence+and+mortality+after+gastric+bypass+surgery.">Cancer incidence and mortality after gastric bypass surgery.</a> Obesity (Silver Spring). 17 (4), 796-802 (2009).</li><li>Vest, A. R., Heneghan, H. M., Schauer, P. R., Young, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+management+of+obesity+and+the+relationship+to+cardiovascular+disease.">Surgical management of obesity and the relationship to cardiovascular disease.</a> Circulation. 127 (8), 945-959 (2013).</li><li>Ahmed, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laparoscopic+Roux-en-Y+gastric+bypass+and+its+early+effect+on+blood+pressure.">Laparoscopic Roux-en-Y gastric bypass and its early effect on blood pressure.</a> Obes Surg. 19 (7), 845-849 (2009).</li><li>Pories, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Who+would+have+thought+it?+An+operation+proves+to+be+the+most+effective+therapy+for+adult-onset+diabetes+mellitus.">Who would have thought it? An operation proves to be the most effective therapy for adult-onset diabetes mellitus.</a> Ann Surg. 222 (3), 339-350 (1995).</li><li>Garibay, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=beta-Cell+Glucagon-Like+Peptide-1+Receptor+Contributes+to+Improved+Glucose+Tolerance+After+Vertical+Sleeve+Gastrectomy.">beta-Cell Glucagon-Like Peptide-1 Receptor Contributes to Improved Glucose Tolerance After Vertical Sleeve Gastrectomy.</a> Endocrinology. 157 (9), 3405-3409 (2016).</li><li>McGavigan, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGR5+contributes+to+glucoregulatory+improvements+after+vertical+sleeve+gastrectomy+in+mice.">TGR5 contributes to glucoregulatory improvements after vertical sleeve gastrectomy in mice.</a> Gut. 66 (2), 226-234 (2017).</li><li>McGavigan, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical+sleeve+gastrectomy+reduces+blood+pressure+and+hypothalamic+endoplasmic+reticulum+stress+in+mice.">Vertical sleeve gastrectomy reduces blood pressure and hypothalamic endoplasmic reticulum stress in mice.</a> Dis Model Mech. 10 (3), 235-243 (2017).</li><li>Esteban Varela, J., Nguyen, N. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laparoscopic+sleeve+gastrectomy+leads+the+U.S.+utilization+of+bariatric+surgery+at+academic+medical+centers.">Laparoscopic sleeve gastrectomy leads the U.S. utilization of bariatric surgery at academic medical centers.</a> Surg Obes Relat Dis. 11 (5), 987-990 (2015).</li><li>Laferrere, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+weight+loss+by+gastric+bypass+surgery+versus+hypocaloric+diet+on+glucose+and+incretin+levels+in+patients+with+type+2+diabetes.">Effect of weight loss by gastric bypass surgery versus hypocaloric diet on glucose and incretin levels in patients with type 2 diabetes.</a> J Clin Endocrinol Metab. 93 (7), 2479-2485 (2008).</li><li>Adams, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Health+benefits+of+gastric+bypass+surgery+after+6+years.">Health benefits of gastric bypass surgery after 6 years.</a> Jama. 308 (11), 1122-1131 (2012).</li><li>McGavigan, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGR5+contributes+to+glucoregulatory+improvements+after+vertical+sleeve+gastrectomy+in+mice.">TGR5 contributes to glucoregulatory improvements after vertical sleeve gastrectomy in mice.</a> Gut. , (2015).</li><li>Peterli, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+in+glucose+metabolism+after+bariatric+surgery:+comparison+of+laparoscopic+Roux-en-Y+gastric+bypass+and+laparoscopic+sleeve+gastrectomy:+a+prospective+randomized+trial.">Improvement in glucose metabolism after bariatric surgery: comparison of laparoscopic Roux-en-Y gastric bypass and laparoscopic sleeve gastrectomy: a prospective randomized trial.</a> Ann Surg. 250 (2), 234-241 (2009).</li><li>Ryan, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FXR+is+a+molecular+target+for+the+effects+of+vertical+sleeve+gastrectomy.">FXR is a molecular target for the effects of vertical sleeve gastrectomy.</a> Nature. 509 (7499), 183-188 (2014).</li><li>Wilson-Perez, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical+sleeve+gastrectomy+is+effective+in+two+genetic+mouse+models+of+glucagon-like+Peptide+1+receptor+deficiency.">Vertical sleeve gastrectomy is effective in two genetic mouse models of glucagon-like Peptide 1 receptor deficiency.</a> Diabetes. 62 (7), 2380-2385 (2013).</li><li>Pressler, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical+sleeve+gastrectomy+restores+glucose+homeostasis+in+apolipoprotein+A-IV+KO+mice.">Vertical sleeve gastrectomy restores glucose homeostasis in apolipoprotein A-IV KO mice.</a> Diabetes. 64 (2), 498-507 (2015).</li></ol>

الكتاب يعلن لا تضارب المصالح، فيما عدا الدكتور كامينغز تلقت تمويلاً من Eli Lilly والشركة.

جراحات هو أنجع علاج طويل الأجل للسمنة ونتائج الفوائد الصحية الأخرى مثل معدلات عالية من نوع 2 مرض السكري وارتفاع ضغط الدم مغفرة1،،من915. نماذج مورين لجراحات توفر أداة قوية لتحديد الآليات التي تسبب جراحات التحسينات السريعة ووضوحاً في السمنة...

جراحات السمنة الوباء ما زال ينمو في جميع أنحاء العالم قد اكتسب شعبية كما هو أنجع علاج طويل الأجل للسمنة1. لسوء الحظ، فقدان الوزن بالنظام الغذائي وممارسة صعب المنال وغير فعال نسبيا على مدى ال2،طويلة الأجل3. يتم تعريف جراحات، مثل الأكمام الرأسية جاستريكتومي (فسج)، كالتلاعب بالجهاز الهضمي غرض فقدان الوزن1،4. على الرغم من فقدان الوزن نتيجة بارزة لجراحات، وجراحات يوفر الفوائد الصحية الأخرى مثل تحسين comorbidities السمنة وتمديد عمر5. على سبيل المثال، ينتج جراحات معدلات عالية من مغفرة من مرض السكري من النوع 2 وارتفاع ضغط الدم، وإجراء تخفيضات في أن خطر تطوير أنواع معينة من السرطان1،،من67. من المذكرة، كثيرا ما لوحظ أثر جراحات يسبب مغفرة من مرض السكري من النوع 2 وارتفاع ضغط الدم قريبا بعد عملية جراحية وقبل فقدان الوزن8،9. وهذا يسلط الضوء على مفهوم أن هناك آليات مستقلة للمساهمة في الفوائد الصحية لوحظ بعد الجراحة من وزن الجسم. وقد وضعت نماذج حيوانية لجراحات وتستخدم لدراسة الآليات التي تحدث هذه الفوائد الصحية10،،من1112.
ونحن قد التحقق من صحة نموذج الفأر من فسج، ولقد قدمنا طلبا لمختلف نماذج الماوس المعدلة وراثيا دراسة الآليات التي يحسن جراحات السمنة كانوا مثل داء السكري من النوع 2 وارتفاع ضغط الدم وسرطان القولون والمستقيم10 , 11 , 12-نماذج القوارض السماح التحكم أكثر تجريبية والقدرة على أداء التلاعب الوراثي أو المستحضرات الصيدلانية لتعريف دور جينات محددة أو مسارات إرسال الإشارات لفائدة. نحن نركز أساسا على فسج لأن فسج هو الإجراء الأكثر شيوعاً أداء علاج البدانة في العيادة في الولايات المتحدة13. بالإضافة إلى ذلك، فسج نموذج جراحية بسيطة مع التعديلات التشريحية أقل مقارنة بإجراءات أخرى مثل تحويل تجاوز أو biliopancreatic المعدة رو-أون-Y.
نموذجنا الماوس من فسج يلخص الآثار التالية لجراحات في البشر: وزن خسارة، تناول الطعام انخفاض الجلوكوز تحسين التنظيم، تحسين وظيفة جزيرة ليلى، وزيادة إفراز بعد prandial مثل الجلوكاجون الببتيد-1 (GLP-1)، تخفيض ضغط الدم الشرياني، وزيادة تعميم حامض الصفراء تركيزات10،11،12،13،،من1415. ولذلك، هذا هو نموذج مثالي دراسة الجسم الوزن التابعة والمستقلة الآليات التي يحسن فسج أو يحل comorbidities السمنة. وبالإضافة إلى ذلك، هو نموذج الموثوق بها التي يمكن دمجها مع الإجراءات الجراحية الأخرى، مما يسمح لتحقيق تأثير فسج تحت مختلف ظروف المرض مع زيادة البصيرة آليا إلى12.

<table><tbody><tr><td>45% high fat diet</td><td>Research Diets</td><td>D12451</td><td></td></tr><tr><td>60% high fat diet</td><td>Research Diets</td><td>D12492</td><td></td></tr><tr><td>Boost</td><td>Nestle</td><td>160-67538</td><td>rich chocolate flavor</td></tr><tr><td>6-0 Suture</td><td>Ethicon</td><td>Z432</td><td>monofilament absorbable/taper</td></tr><tr><td>7-0 Suture</td><td>Covidien</td><td>8866127-01</td><td>monofilament absorbable/taper</td></tr><tr><td>Cotton Swabs</td><td>Fisherbrand</td><td>23-400-118</td><td>small</td></tr><tr><td>Cotton Swabs</td><td>Fisherbrand</td><td>233-400-101</td><td>large</td></tr><tr><td>Gauze</td><td>Various</td><td></td><td>4x4 4 ply and 2x2 4 ply</td></tr><tr><td>Foil</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Surgery drape</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>0.9% saline solution</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>LRS</td><td>Hospira</td><td>170RX</td><td></td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alcohol</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Eye Ointment</td><td>Paralube&amp;reg; Vet Ointment</td><td>17033-211-38</td><td></td></tr><tr><td>Tissue Adhesive</td><td>Vetbond</td><td>1469SB</td><td></td></tr><tr><td>Meloxicam (Metacam)</td><td>Boehringer Ingelheim</td><td>141-213</td><td>5 mg/ml</td></tr><tr><td>Enrofloxacin</td><td>Baytril</td><td>08713254-186599</td><td>22.7 mg/ml</td></tr><tr><td>Thin tipped hemostats</td><td>Fine Science Tools</td><td>13021-12</td><td></td></tr><tr><td>Metzenbaum Scissor</td><td>Fine Science Tools</td><td>14018-18</td><td></td></tr><tr><td>Iris Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>14058-09</td><td></td></tr><tr><td>Dumont Forcep</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-20</td><td></td></tr><tr><td>Serrated Forcep</td><td>Fine Science Tools</td><td>11020-12</td><td></td></tr><tr><td>Gavage needle</td><td>Fine Science Tools</td><td>18060-20</td><td></td></tr><tr><td>Microneedle driver</td><td>Fine Science Tools</td><td>12075-14</td><td></td></tr><tr><td>Spring Scissor</td><td>Fine Science Tools</td><td>15396-00</td><td></td></tr><tr><td>Insulin syringe</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1mL syringe</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>20mL syringe</td><td>Various</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Glucometer (one touch ultra mini)</td><td>Lifescan</td><td>70021208</td><td></td></tr><tr><td>Multiplex insulin and GLP-1 kit</td><td>Meso Scale Discovery</td><td>K15171C-1</td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism 6.00</td><td>GraphPad Software</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nestlets</td><td>Ancare</td><td>NES3600</td><td></td></tr></tbody></table>

a murine model of vertical sleeve gastrectomy

جراحات، مثل الأكمام الرأسية جاستريكتومي (فسج)، هو عملية جراحية للجهاز الهضمي الذي يتم تنفيذه بغرض تخفيف الوزن. جراحات حاليا العلاج الطويل الأجل الأكثر فعالية للسمنة. بالإضافة إلى فقدان الوزن، جراحات تنتج فوائد صحية إضافية مثل مغفرة من مرض السكري من النوع 2، مغفرة من ارتفاع ضغط الدم، وانخفاض خطر الإصابة بأنواع معينة من السرطان. الآليات التي تتجاوز الوزن لهذه الفوائد تبقى محددة بشكل غير كامل. ولذلك، يتم حاليا نماذج حيوانية لجراحات المتقدمة والتحقق من صحة لتحديد الآليات المؤدية إلى هذه المزايا، بهدف تحسين فهم فسيولوجيا الجهاز الهضمي وتحديد الأهداف العلاجية الجديدة. فسج أصبح الإجراء الأكثر شيوعاً أداء علاج البدانة في العيادة في الولايات المتحدة لأنها فعالة للغاية في إنتاج وفقدان الوزن وتحسين التمثيل الغذائي، وهو أبسط لإجراء من إجراءات أخرى علاج البدانة. ولذلك، قد وضعت والتحقق من صحة نموذج مورين فسج. ويجمل هذا النموذج فسج موريني العديد من آثار فسج ينظر في البشر، بما في ذلك تحسين تنظيم السكر وضغط الدم. الأسلوب الذي يستند إلى العزلة في المعدة، وربط الأوعية المعدة، وإزالة 70% المعدة قبل ترانسيكتينج على طول انحناء أكبر من المعدة. ونحن قد طبقت بنجاح هذا البروتوكول الجراحية لمختلف خطوط الماوس المعدلة وراثيا لتعريف المساهمين آليا إلى فوائد فسج. وعلاوة على ذلك، قد اقترن هذا النموذج فسج مورين بالتقنيات الجراحية الأخرى، لتحقيق فكرة آليا إلى أعمق. ولذلك، وهذا نموذج بسيط وتنوعاً لدراسة فسيولوجيا الجهاز الهضمي والفوائد الصحية لجراحات.

ويرد في الشكل 1الشام وإجراءات فسج. ويبين الشكل 1A حيث يتم وضع خط خياطة على طول الجدران المعدة أثناء إجراءات صورية. هذه المنطقة نفسها من حيث يتم قص المعدة أثناء الجراحة فسج. ويبين الشكل 1B أنبوبي فلول اليسار المعدة بعد أداء فسج...

Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy at JoVE.com

A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy

فيما يلي وصف لأداء gastrectomy الأكمام الرأسي في الفئران. وهذا هو نوع من جراحة فقدان الوزن الذي ينطوي على إزالة ما يقرب من 70% المعدة.

نموذج موريني Gastrectomy الأكمام العمودي

Bariatric surgery, such as vertical sleeve gastrectomy (VSG), is a surgery of the gastrointestinal tract that is performed for the purpose of weight loss. ...

a-murine-model-of-vertical-sleeve-gastrectomy

Research

JoVE Journal

Biology

11.0K Views.  Cornell University. فيما يلي وصف لأداء gastrectomy الأكمام الرأسي في الفئران. وهذا هو نوع من جراحة فقدان الوزن الذي ينطوي على إزالة ما يقرب من 70% المعدة.

Video: A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy

Murine Pancreatic Islet Isolation

Hi, I am Greg Zott. I'm with the UCSF Diabetes Center in the Bluestone Laboratory, and today I'm gonna show you the process for isolating mouse eyelets. The procedure involves the injection of a collagenase solution into the pancreas of a C3 H donor mouse, where we will then remove that pancreas, digest it away, purify the eyelets on a fial gradient, and then handpick them for ultimate transplant into the kidney capsule of a diabetic NOD mouse, Which will be our recipient.Before we start this procedure, we diluted our ATE solution in a modified Hanks buffer and we have adjusted the concentration specific for the strain of mouse that we're using the C3 H.We found digests better at a 0.8 mgs per mil collagenase solution, and we will use that to inject into the common bile duct to distend the pancreas.Performing. The procedure today Will be Pavo codre of the diabetes center. He will inject, open up the mouse, expose the the intestines, and then inject into the common bile duct.We will spray down the mouse with ethanol to keep the hair down, and then we will also verify that the mouse has been sacrificed properly with a toe pinch. Pavo will now open up the mouse and exposing the intestine and the pancreas with a midline incision. The diaphragm will also be cut to verify that the mouse will be sacrificed.Before we get started, I'd like to point out some of the important structures. The stomach is lying right here with the pancreas attached underneath into the duodenum and above. This is the liver where we'll find the gallbladder and the common bile duct, which you can see right here.So what Pavo will do next is he will isolate the small intestine, find where the common bile duct enters the small intestine. Once the intestine is exposed, we clamp on either side of the common bile duct with mosquito clamps. We find that this allows more collagenates to enter the pancreas while other groups try to direct the clamp on top of the common bile duct.We find that this is a better technique in allowing enzyme to enter the pancreas. This is a gentle procedure. You don't want to tear the bowel.You wanna allow the clamps to lie gently on either side of the common bile duct. Now we will find a gallbladder, and once the gallbladder's exposed, we will use that as a guide to injecting the collagenase into the common bile duct. Powell's using a 30 gauge needle with a five cc syringe containing three mills of collagenase solution.As he's entering the common bile duct, he's distending that duct with collagenase solution and then he travels down the common bile duct till he reaches near the intestine. And as he's going down, the enzyme solutions being pumped into the injected into the pancreas. Now that the pancreas is inflated with collagenase solution, Powell's gonna remove the hemostats and then remove the pancreas from the the mouse carefully tearing it away from the intestine.He removes it from the stomach. Okay, and then using the spleen as a handle, he lifts up the pancreas and then slowly snips it away in the common bile duct, and that's it. Pancreas is laid out and then the spleen is removed, and there he's removing the meso enteric tissue, and then the pancreas is placed in a two mill collagenase solution and a sterilized glass vial and it's placed back on Ice.The isolated pancreas that we put into the glass vials will now be placed into a 37 degree water bath for approximately 17 minutes. We placed them into a 50 mil conical rack so that they don't float up. Once during the bath, the timer starts and the digestion begins.Once the digestion time is completed, vials are removed, and then they are shaken and disrupted gently. And once the tissue starts falling apart, the vial is then placed on ice. A sterile screen is placed over a 400 mil beaker that contains washing buffer.The pancreas digest is then carefully poured over the screen into the wash buffer. For demonstration purposes, the hood has been turned off and the glass of the hood has been raised so we could see what we're doing. Once the pancreas digest is poured into the beaker, the vials are rinsed with the same washing buffer and the wash buffer placed over the screen.We have a syringe filled with washing buffer. We will use that to forcefully wash the tissue through the screen. The idea is to release any loose eyelets that are unattached to the matrix, but leaving the membranes and the undigested tissue on the screen.And when you're finished washing a tissue, this is what you usually See at the end of the procedure. The Pancreas tissue that's in the bottom of the tube will now be transferred to two 50 mil conical, and the tissue will be washed, the tissue's mixed evenly, and then distributed evenly so that we have a equal pellet volume in each tube. The beaker is now rinsed with more washing buffer.The sides are rinse so that you get all tissue that is entered the beaker again. Then it's equally distributed between each two, both 50 mil. Conical then are topped off with wash buffer.The tissue is inverted several times and then placed into a centrifuge. This is a quick spin. The centrifuge is allowed to reach a thousand RPM and then is turned off.The tissue at this time is very S eyelets are very sensitive, and you don't want to over compact them. The tubes are removed and we will do this wash step three more times. This is the end of the third wash.The components of the 50 mil conical tube are transferred to the 15 conical tube and centrifuge for a thousand RP M and then stopped. The supernat will be removed and the first part of the FI Call will be started. We are at the step where we Have our pelleted di pancreas digest.We'll resuspend that tissue so it's nice and loose to the pellets. We'll add the first density gradient, which is 1 1 0 8. We'll add five mils to each tube.The pellet is then mixed thoroughly in each of the gradients. It's important that you get good tissue distribution in your heaviest gradient. Now we will layer two mils of 1 0 9 6 density.We will then on top of that, layer two mils of 1 0 6 9 density, and then on top of that 1 0 3 7 density. It's important while you're layering the densities that you don't mix. Then all the layers have been added to the tube.And you can see this is the top of 1 1 0 8, the top of 9 1 0 9 6, the top of 1 0 6 9 and the top of 1 0 3 7. And you could see the tissue is already starting to move to its proper density even without centri fusion. The fial gradients are brought up to speed at 1800 RPM for 15 minutes, and remember to keep the brake off after the tubes are removed from the centrifuge.You can see between the 0 0 9 6 and 0 0 7 layer, there's a nice band of eyelet tissue Pablo's. Now removing the 0 3 7 layer to remove any tissue debris and DNA that might have been released during the processing. Using a sterile plastic pasture pipette, he will now remove the islet layer and transfer them to a 50 mil conical containing 25 mils of wash buffer.You want do this step quickly because fol is toxic to eyelets. We actually removed the entire 0 6 9 and 0 9 6 layer. Pavo cuts the top of the plastic pasture pipette and rinses it with wash buffer.The eyelets are then centrifuge like we centrifuge previously. Centrifuge is brought up to a Thousand RPM and then we stop it and We aspirate off. The supernatant eyelets will be washed three times with wash media.So we just completed the eyelid Isolation process we took from the digest to the fol gradient to the purified eyelets after our third wash with wash buffer, we resuspended the eyelets in our RPMI media and we played it in a tissue culture plate. These eyelets are now ready for in vitro assays or in vivo preps like eyelet Transplant.

فأري عزل جزيرة البنكرياس

Murine Model of Hindlimb Ischemia 

In the United States, peripheral arterial disease (PAD) affects about 10 million individuals, and is also prevalent worldwide. Medical therapies for symptomatic relief are limited. Surgical or endovascular interventions are useful for some individuals, but long-term results are often disappointing. As a result, there is a need for developing new therapies to treat PAD. The murine hindlimb ischemia preparation is a model of PAD, and is useful for testing new therapies. When compared to other models of tissue ischemia such as coronary or cerebral artery ligation, femoral artery ligation provides for a simpler model of ischemic tissue. Other advantages of this model are the ease of access to the femoral artery and low mortality rate. 
In this video, we demonstrate the methodology for the murine model of unilateral hindimb ischemia. The specific materials and procedures for creating and evaluating the model will be described, including the assessment of limb perfusion by laser Doppler imaging. This protocol can also be utilized for the transplantation and non-invasive tracking of cells, which is demonstrated by Huang et al.1.

Murine Model of Hindlimb Ischemia

The surgical procedure for induction of unilateral hindlimb ischemia is demonstrated, with confirmation of ischemia by laser Doppler perfusion imaging.

فأري موديل الإسكيمية Hindlimb

In the United States, peripheral arterial disease (PAD) affects about 10 million individuals, and is also prevalent worldwide.  Medical therapies for ...

Murine Renal Transplantation Procedure

Renal orthotopic transplantation in mice is a technically challenging procedure. Although the first kidney transplants in mice were performed by Russell et al over 30 years ago (1) and refined by Zhang et al years later (2), few people in the world have mastered this procedure. In our laboratory we have successfully performed 1200 orthotopic kidney transplantations with &gt; 90% survival rate. The key points for success include stringent control of reperfusion injury, bleeding and thrombosis, both during the procedure and post-transplantation, and use of 10-0 instead of 11-0 suture for anastomoses.
Post-operative care and treatment of the recipient is extremely important to transplant success and evaluation. All renal graft recipients receive antibiotics in the form of an injection of penicillin immediately post-transplant and sulfatrim in the drinking water continually. Overall animal health is evaluated daily and whole blood creatinine analyses are performed routinely with a portable I-STAT machine to assess graft function.

Renal transplantation in mice is a technically challenging procedure that requires careful post-operative care and treatment for success.

فأري إجراء زراعة الكلى

Renal orthotopic transplantation in mice is a technically challenging procedure. Although the first kidney transplants in mice were performed by Russell ...

LAD-Ligation: A Murine Model of Myocardial Infarction

Research models of infarction and myocardial ischemia are essential to investigate the acute and chronic pathobiological and pathophysiological processes in myocardial ischemia and to develop and optimize future treatment.
Two different methods of creating myocardial ischemia are performed in laboratory rodents. The first method is to create cryo infarction, a fast but inaccurate technique, where a cryo-pen is applied on the surface of the heart (1-3). Using this method the scientist can not guarantee that the cryo-scar leads to ischemia, also a vast myocardial injury is created that shows pathophysiological side effects that are not related to myocardial infarction. The second method is the permanent ligation of the left anterior descending artery (LAD). Here the LAD is ligated with one single stitch, forming an ischemia that can be seen almost immediately. By closing the LAD, no further blood flow is permitted in that area, while the surrounding myocardial tissue is nearly not affected. This surgical procedure imitates the pathobiological and pathophysiological aspects occurring in infarction-related myocardial ischemia.
The method introduced in this video demonstrates the surgical procedure of a mouse infarction model by ligating the LAD. This model is convenient for pathobiological and pathophysiological as well as immunobiological studies on cardiac infarction. The shown technique provides high accuracy and correlates well with histological sections.

This video demonstrates how to use a fast and reliable model to study pathobiological and pathophysiological processes of myocardial ischemia.

LAD - الربط : نموذج الفئران من احتشاء عضلة القلب

Research models of infarction and myocardial ischemia are essential to investigate the acute and chronic pathobiological and pathophysiological processes ...

Techniques of Sleeve Gastrectomy and Modified Roux-en-Y Gastric Bypass in Mice

Obesity is a major public health issue, with a prevalence of 4 to 28% for men and 6.2 to 36.5% for women in Europe (from 2003 to 2008). Morbid obesity is frequently associated with metabolic complications, such as type 2 diabetes, hypertension, and dyslipidemia, reducing life expectancy and quality. In the absence of any effective noninvasive treatments, bariatric surgery is a valuable therapeutic option for patients with morbid obesity (body mass index (BMI) &#62;40 kg/m2), leading to long-term, sustained weight loss and improvements in metabolic complications. However, the underlying cellular and molecular mechanisms sustaining the beneficial effects of bariatric surgery are not yet fully understood. Due to the numerous genetically-modified strains available, the mouse model is the most convenient animal model to explore the molecular mechanisms behind the pleiotropic beneficial effects of bariatric surgeries. Here, we detailed the optimized healthcare methods and surgical protocols in mice for the two most widely-used bariatric surgeries: the sleeve gastrectomy and the modified Roux-en-Y gastric bypass. Deciphering the molecular mechanisms underlying the therapeutic effects of bariatric surgeries offers the promise of identifying new therapeutics targets.

Bariatric surgery is the most efficient way to reduce body weight and the deadly metabolic complications (diabetes, obesity, and dyslipidemia) frequently associated with morbid obesity. Mouse models of bariatric surgery represent a unique asset for deciphering molecular mechanisms behind the beneficial effects of these surgeries on diabetes, hypertension, and dyslipidemia.

تقنيات تكميم المعدة والتعديل رو اون Y تجاوز المعدة في الفئران

Obesity is a major public health issue, with a prevalence of 4 to 28% for men and 6.2 to 36.5% for women in Europe (from 2003 to 2008). Morbid obesity is ...

Medicine

Efficient Production and Purification of Recombinant Murine Kindlin-3 from Insect Cells for Biophysical Studies

Kindlins are essential coactivators, with talin, of the cell surface receptors&#160;integrins and also participate in integrin outside-in signalling, and the control of gene transcription in the cell nucleus. The kindlins are ~75 kDa multidomain proteins and bind to an NPxY motif and upstream T/S cluster of the integrin &#946;-subunit cytoplasmic tail. The hematopoietically-important kindlin isoform, kindlin-3, is critical for platelet aggregation during thrombus formation, leukocyte rolling in response to infection and inflammation and osteoclast podocyte formation in bone resorption. Kindlin-3&#39;s role in these processes has resulted in extensive cellular and physiological studies. However, there is a need for an efficient method of acquiring high quality milligram quantities of the protein for further studies. We have developed a protocol, here described, for the efficient expression and purification of recombinant murine kindlin-3 by use of a baculovirus-driven expression system in Sf9 cells yielding sufficient amounts of high purity full-length protein to allow its biophysical characterization. The same approach could be taken in the study of the other mammalian kindlin isoforms.

Kindlins are fundamental to cell adhesion through integrins but studies of them have been hampered by the difficulty encountered in expressing them recombinantly in bacterial hosts. We describe here methods for their efficient production in baculovirus-infected insect cells.

كفاءة الإنتاج وتنقية المؤتلف الفئران Kindlin-3 من خلايا الحشرات للدراسات البيوفيزيائية

Kindlins are essential coactivators, with talin, of the cell surface receptors&#160;integrins and also participate in integrin outside-in signalling, and ...

Sleeve Gastrectomy in Mice using Surgical Clips

The number of people who are overweight and obese is continually increasing both in the adult and adolescent populations. This coincides with the increased universal phenomenon of type 2 diabetes (T2D) and other metabolic problems. Bariatric surgery, such as SG, is currently one of the most effective and commonly used long-term treatment for obesity and T2D, but the association between them is not completely explored yet. The mechanisms underlying the outcomes seen after bariatric surgery in humans can be investigated based on preclinical animal studies. The SG reduces body weight, glucose levels and many metabolic parameters, and is easy to perform with a low incidence of complications. The goal of this work is to provide a simple method and an uncomplicated preclinical model of bariatric surgery in animals for researchers.

The prevalence of diabetes and obesity is continuously increasing worldwide. The mechanisms between diabetes, obesity and their associated mortality and co-morbidities need to be further investigated. Here, we present a protocol for sleeve gastrectomy (SG) in animals as an uncomplicated preclinical model of bariatric surgery.

استئصال المعدة في الفئران باستخدام مقاطع جراحية

The number of people who are overweight and obese is continually increasing both in the adult and adolescent populations. This coincides with the ...

Isolation of Murine Coronary Vascular Smooth Muscle Cells

While the isolation and culture of vascular smooth muscle cells (VSMCs) from large vessels is well established, we sought to isolate and culture VSMCs from the coronary circulation. Hearts with intact aortic arches were removed and perfused via retrograde Langendorff with digestion solution containing 300 Units/ml of collagenase type II, 0.1 mg/ml soybean trypsin inhibitor and 1 M CaCl2. The perfusates were collected at 15 min intervals for 90 min, pelleted by centrifugation, resuspended in plating media, and plated on tissue culture dishes. VSMCs were characterized by presence of SM22&#945;, &#945;-SMA, and vimentin. One of the main advantages of using this technique is the ability to isolate VSMCs from the coronary circulation of mice. Although the small number of cells obtained can limit some of the applications for which the cells can be utilized, isolated coronary VSMCs can be used in a variety of well-established cell culture techniques and assays. Studies investigating VSMCs from genetically modified mice can provide further information about structure-function and signaling processes associated with vascular pathologies.

The purpose of this protocol is to demonstrate the isolation and culture techniques of murine primary vascular smooth muscle cells (VSMCs) from the coronary circulation. Once VSMCs have been isolated, they can be used for many standard culture techniques.

عزل الفئران التاجي الأوعية الدموية خلايا العضلات الملساء

While the isolation and culture of vascular smooth muscle cells (VSMCs) from large vessels is well established, we sought to isolate and culture VSMCs ...

Single-Anastomosis Duodeno-Ileal Bypass with Sleeve Gastrectomy Model in Mice

Obesity is a major health issue worldwide. As a response, bariatric surgeries have emerged to treat obesity and its related comorbidities (e.g., diabetes mellitus, dyslipidemia, non-alcoholic steatohepatitis, cardiovascular events, and cancers) through restrictive and malabsorptive mechanisms. Understanding the mechanisms by which these procedures allow such improvements often require their transposition into animals, especially in mice, because of the ease of generating genetically modified animals. Recently, the single-anastomosis duodeno-ileal bypass with sleeve gastrectomy (SADI-S) has emerged as a procedure that uses both restrictive and malabsorptive effects, which is being used as an alternative to gastric bypass in case of major obesity. Thus far, this procedure has been associated with strong metabolic improvements, which has led to a marked increase in its use in daily clinical practice. However, the mechanisms underlying these metabolic effects have been poorly studied as a result of a lack of animal models. In this article, we present a reliable and reproducible model of SADI-S in mice, with a special focus on perioperative management. The description and use of this new rodent model will be helpful for the scientific community to better understand the molecular, metabolic, and structural changes induced by the SADI-S and to better define the surgical indications for clinical practice.

Single-anastomosis duodeno-ileal bypass (SADI-S) is an emerging bariatric procedure with important metabolic effects. In this article, we present a reliable and reproducible model of SADI-S in mice.

المجازة الاثني عشر اللفائفي أحادية المفاغرة مع نموذج تكميم المعدة في الفئران

Obesity is a major health issue worldwide. As a response, bariatric surgeries have emerged to treat obesity and its related comorbidities (e.g., diabetes ...

Murine Vertical Sleeve Gastrectomy: A Surgical Procedure to Downsize Stomach in Experimental Mouse Models

Source: Garibay, D., Cummings, B. P. <a href="https://www.jove.com/video/56534" target="_blank">A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy.</a> J. Vis. Exp. (2017)
In this video, a vertical sleeve gastrectomy procedure is performed on an experimental mouse model. This procedure helps remove a significant portion of the stomach along its greater curvature.

تكميم المعدة العمودي للفئران: إجراء جراحي لتقليص حجم المعدة في نماذج الفئران التجريبية

Source: Garibay, D., Cummings, B. P. A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy. J. Vis. Exp. (2017)
In this video, a vertical sleeve gastrectomy ...