Farelerde inme sonrası depresyon Inducing için orta serebral arter tıkanıklığı tekniği

Protokolümüz, inme sonrası depresyon gelişiminin mekanizmasını incelemeye ve daha etkili bir tedavi bulmaya yardımcı olmak için sıçanlarda yeni bir medial serebral arter oklüzyon tekniği önermektedir. Tekniğimizin en büyük avantajı, kilo değişiklikleri, beyin ödemi ve enfarktüs hacmindeki değişkenliği azaltma ve prosedüre bağlı ölümleri en aza indirebilme yeteneğidir. Bir erkek 300 ila 350 gramsa Sprague Dawley sıçan kuyruk tutam yanıt eksikliği doğruladıktan sonra, 37 santigrat derece ısıtma plakası üzerine hayvan yerleştirin ve çekirdek vücut Sıcaklığı izlemek için bir rektal prob kullanın.

Hayvanın gözlerine merhem uygulayın ve boynundaki tüyleri tıraş edin. Daha sonra, yüzde 70 alkol klorheksidin ile maruz kalan cilt dezenfekte ve standart tekniklere göre oklüzyon yapmadan önce steril cerrahi perde ile sıçan kapağı. Nörolojik şiddet puanı elde etmek için, düz bir yüzeye tıkanmış bir sıçan yerleştirin ve hayvan serbestçe hareket sağlar.

Bir dakika sonra fareyi kuyruğundan yavaşça geriye çekin ve hayvanın yürüyüş tepkisini derecelendirin. Enfarktüs hacmini ölçmek için, hazırlanan lekeli beyin dilimlerini 1,600'e 1, 600 nokta inç çözünürlükte tarayarak ve tüm görüntüler için ölçeği standartlaştırın. Daha sonra, standart görüntüleri uygun bir görüntü analizi yazılımı programına yükleyin ve tüm beyin diliminin yüzdesi olarak enfarktüs boyutunu belirlemek için altı ardışık iki milimetrelik dilimlerde işaretli pallor alanını ölçmek için bir izleme aracı kullanın.

Ameliyattan 30 ila 33 gün sonra hayvanları kafeslerde kapalı, sessiz, ışık kontrollü bir odaya aktarın ve her kafese %1 sakaroz çözeltisi içeren 100 mililitrelik bir şişe yerleştirin. Ertesi gün, 12 saat boyunca şişeyanı, yiyecek ve içme suyu çıkarın. Mahrumiyet süresinin sonunda, 100 mililitre %1 sakaroz çözeltisi içeren bir şişe ve her kafese 100 mililitre musluk suyu içeren bir şişedört saat boyunca yerleştirin.

Daha sonra, her hayvan için sakaroz tercihine yakınlık hesaplama sağlamak için sakaroz çözeltisi ve tüketilen su hacmini kaydedin. Porsolt'ün zorunlu yüzme testi için, ameliyattan 30 ila 33 gün sonra, her sıçanı 15 dakika boyunca 80 santimetre 25 santigrat derece su içeren dikey pleksiglas silindire yerleştirin. Alışma süresinin sonunda, farenin hayvanı ev kafesine geri döndürmeden önce 32 santigrat derecede ısıtılmış kasada 15 dakika kurumasını bekleyin.

Ertesi gün, bu süre boyunca hareketsizlik toplam süresinin hesaplanmasına izin vermek için beş dakikalık test kayıt, son beş dakika için silindir e fare dönün. Histolojik analiz, sahte kontrol grubundaki hayvanlarla karşılaştırıldığında MCAO sonrası toplam beyin hacminin bir yüzdesi olarak istatistiksel olarak anlamlı infarkt hacmini ortaya koymaktadır. Deney hayvanlarında sahte kontrol grubuna göre istatistiksel olarak anlamlı bir beyin ödemi de gözlenmektedir.

MCAO hayvanlar 50 dakika, 24 saat ve yedi gün ameliyat sonrası sham-işletilen hayvanlara göre daha düşük nörolojik performans göstermektedir. MCAO sıçanlar da sakaroz önemli ölçüde daha düşük miktarda tüketmek ve sham işletilen hayvanlara göre Porsalt'S zorunlu yüzme testleri sırasında daha uzun bir hareketsizlik sergiler. Bu davranışsal inme çalışmaları için önemli bir modeldir ve gelecekteki tedavileri değerlendirmek veya terapötik maddelerin etkinliği hakkında kritik preklinik veri sağlamak için bir araç olarak hizmet verebilir.