쥐의 사후 뇌졸중 우울증을 유도 하기 위한 중간 대뇌 동맥 폐색 기술

우리의 프로토콜은 뇌졸중 후 우울증 개발의 메커니즘을 연구하고 보다 효율적인 치료를 찾을 수 있도록 쥐에 있는 새로운 내측 대뇌 동맥 폐색 기술을 제안합니다. 우리의 기술의 주요 장점은 체중 변화, 뇌 부종 및 경색 볼륨의 가변성을 줄이고 절차 관련 사망을 최소화하는 능력입니다. 남성 300 ~350그램 스프라그 Dawley 쥐의 꼬리 핀치에 대한 반응부족을 확인한 후, 동물을 섭씨 37도 에 놓고 핵심 체온을 모니터링하기 위해 직장 프로브를 사용합니다.

동물의 눈에 연고를 바르고 목에서 머리카락을 면도합니다. 이어서, 노출된 피부를 70% 알코올 클로르헤시딘으로 소독하고, 표준 기술에 따라 폐색을 수행하기 전에 멸균 수술 드레이프로 쥐를 덮는다. 신경학적 심각도 점수를 얻으려면 폐색 된 쥐를 평평한 표면에 놓고 동물이 자유롭게 움직일 수 있도록하십시오.

1분 후, 쥐를 꼬리뒤로 부드럽게 당기고 동물의 걸음걸이 반응을 채점합니다. 경피량을 측정하려면 준비된 스테인드 브레인 슬라이스를 인치 해상도당 1, 600 x 1, 600 점으로 스캔하고 모든 이미지의 크기를 자르고 크기를 조정합니다. 그런 다음 표준화된 이미지를 적절한 이미지 분석 소프트웨어 프로그램에 로드하고 추적 도구를 사용하여 6개의 연속 2mm 슬라이스로 표시된 페일어 영역을 측정하여 전체 뇌 슬라이스의 백분율로 극한크기를 결정합니다.

수술 후 30~33일 동안 동물을 개별 케이지의 폐쇄적이고 조용하고 가벼운 통제실로 옮기고, 24시간 동안 각 케이지에 1%의 수당 용액 100밀리리터가 들어 있는 병을 넣습니다. 다음 날, 12 시간 동안 병뿐만 아니라 음식과 식수를 제거합니다. 박탈 기간이 끝나면 100 밀리리터100 밀리리터가 들어 있는 1병과 4시간 동안 각 케이지에 100밀리리터의 수돗물을 넣습니다.

그런 다음 각 동물에 대한 선호도를 계산할 수 있도록 소비된 자당 용액과 물의 양을 기록한다. 포르솔트의 강제 수영 시험의 경우 수술 후 30~33일 동안 각 쥐를 15분 동안 섭씨 25도의 80cm를 포함하는 수직 플렉시글라스 실린더에 1위를 차지합니다. 습관 기간이 끝나면 동물을 홈 케이지로 되돌리기 전에 32도의 가열된 인클로저에서 15분 동안 쥐가 건조할 수 있습니다.

다음 날, 마지막 5 분 동안 실린더에 쥐를 반환, 그 기간 동안 부동성의 총 기간을 계산 할 수 있도록 5 분 테스트를 기록. 조직학적 분석은 가짜 대조군의 동물과 비교할 때 MCAO 이후 총 뇌 부피의 백분율로서 통계적으로 유의한 경포량을 나타낸다. 통계적으로 유의한 뇌 부종은 또한 샴 대조군에 비해 실험동물에서 관찰된다.

MCAO 동물은 수술 후 50분, 24시간, 7일 동안 가짜 수술동물에 비해 신경작용이 낮은 것으로 입증됩니다. MCAO 쥐는 또한 자당의 상당히 낮은 양을 소비하고 가짜 작동 동물에 비해 포르염의 강제 수영 테스트 동안 더 이상 부동성을 나타낸다. 이것은 행동 치기 연구 결과를 위한 중요한 모형이고 미래 치료를 평가하거나 치료 물질의 효험에 중요한 전임상 데이터를 제공하기 위한 공구역할을 할 수 있었습니다.