Sepsis kaynaklı bağışıklık bastırma, çekal ligasyon ve delinme ve Intranasal enfeksiyon çift model tasarımı

Fareyi ameliyata hazırla. Bir jilet kullanarak karın alt kadranda tıraş ve iyot ile bölgeyi dezenfekte. Fareyi, başı operatörden uzağa doğrultarak sırtında temiz bir çalışma yüzeyine yerleştirin.

Sol alt karın yaklaşık yarım santimetre uzunluğunda uzunlamasına deri kesi olun. Periton boşluğuna girmemeye dikkat edin. Yaklaşık bir ila iki santimetre kesi uzatmak için küçük makas kullanın.

Periton boşluğuna erişmek için kas içi bir kesi yapın. Çoğu durumda, çekum karın sol tarafında. Çekonu izole et.

Künt, anatomik forceps kullanarak, yavaşça ve dikkatli bir şekilde kesi yoluyla çekum maruz. Dördüncü adım ligasyondur. Çekumdaki ligasyonun pozisyonu sepsisin şiddetini belirler.

Çekumun yaklaşık %75'inin ligating'i şiddetli sepsise neden olur. Çekumun %50'sinin ligate lezilmesi orta seviye sepsise neden olur. Oysa çekumun %25 veya daha azını bağlamak küçük sepsise neden olur.

Cecum'u belirlenen pozisyonda azat edin. Ileocekal valfi iniltin değil emin olun. Beşinci adım çeki delmek.

Bir iğne kullanarak, tek bir ile cecum delinve ligasyon ve çekum ucu arasında orta yol delinme yoluyla. Kan damarlarını delmediğinden emin olun. Tam bir delik olduğundan emin olmak için, her iki iğne deliğinden küçük bir dışkı damlası çıkar.

Dikkatle karın boşluğuna çekum değiştirin. Basit çalışan dikişler uygulayarak karın kas kapatın ve cildi kapatın. Cildi iyotla temizleyin.

Fareyi canlandırmak için önceden ısıtılmış bir tuzlu çözelti enjekte edin. Fareyi yiyecek ve suya sınırsız erişim ile kafese geri yerleştirin. Cekal ligasyonu ve delinme veya CLP prosedürü yaklaşık üç gün sonra, genellikle sepsis oluşur pnömoni uyarmak için bir intranazal enfeksiyon ile ikinci bir isabet fare tabi.

Farenin boynuna arkadan, düzgün ve hafifçe yaklaşın. Sol elin başparmak ve işaret parmağı U şeklinde bir konum oluşturur. Fare kafası tamamen dizginlenmiş böylece kulakların hemen arkasında boyun tutun.

İntranazal enfeksiyonu tanıyın. 100 mikrolitrelik pipet kullanarak, intranasally staphylococcus aureus suşu aşılamak. Fareyi dik bir pozisyonda tutarak, farenin her iki burun deliğini de yavaşça iki ila üç mikrolitre bakteriyel çözeltiye bırakın.

Bakteriyel çözelti nin nefes borusuna girmesine yardımcı olmak için fareyi başı yukarı ve kuyruğu aşağı doğru yukarı ve aşağı doğru kaldırın. Fareyi yavaşça ve yavaşça indirirken hızlı bir şekilde yukarı kaldırın. Aşıyı 15 kez veya tüm bakteriyel solüsyon aşılanana kadar tekrarlayın.

Son adım prosedürü bitirmektir. Kurtarmak için yaklaşık 35 derecelik bir açıyla açılı yatak üzerinde fare lay. Farenin başı yukarı yatmış şekilde sırt üstü olduğundan emin olun.

Anestezi ve işlemden tamamen kurtulduğundan emin olmak için fareyi izleyin. Yatak düzleştirmekten sonra, fareyi yiyecek ve suya sınırsız erişim le kafese geri yerleştirin. Fareler peritonit indüksiyonundan yaklaşık 12 saat sonra ölmeye başladı.

Pnömoni öncesi CLP'li farelerde mortalite çok daha yüksekti. Ameliyat sonrası üç gün, CLP fareler staphylococcus aureus intranazal uygulama ile daha fazla mortalite vardı. Serum pro-inflamatuar sitokinlerin düzeyleri, sepsis farelerinde bakteriyel instillasyondan 24 saat sonra clp'si tek başına olan farelere veya Sham'ın ikinci bir vuruşla çalışan farelere göre önemli ölçüde artmıştır.

Ancak, çift isabetli fareler BAL sıvı sitokin düzeylerinde hem SA hem de Sham cerrahisi artı SA farelere göre önemli bir azalma göstermiştir. Bu nedenle CLP ev sahibi savunma bozar ve enfeksiyona yatkınlığı artırır. Bu çift isabetli model, süperböcek enfeksiyonları için yeni, etkili ilaçlar ve diğer terapötikler geliştirmek için cadde açabilirsiniz konak-patojen etkileşimi için moleküler mekanizmaları anlamak için değerli bir araçtır.