Tedavideki önemli gelişmelere rağmen akut miyokard enfarktüsü sonrası kalp yetmezliği gelişen hastaların sayısı halen artmaktadır. Akut MI'den kalp yetmezliğine geçişi gözlemlemek için tekrarlanabilir hayvan modellerine ihtiyacımız vardır. Biz nispeten kolay, tekrarlanabilir ve hayvanlar için en az rahatsızlık neden MI bir model göstermektedir.
Buna ek olarak, izole kalp aparatı bir zaman ve maliyet-etkin bir şekilde çalışılabilir son derece tekrarlanabilir bir hazırlık sağlar. Dünya çapındaki diğer araştırma gruplarıyla işbirliği içinde, miyokardiyal onarımı ve işlevini iyileştiren yeni ilaçların ve tedavi yaklaşımlarının güvenliğini ve etkinliğini açıklığa kavuşturmak için bu tekniği kullanıyoruz.Entübasyon veya LAD tıkanıklığı düzeyi gibi bu protokolün en kritik adımlarının görsel olarak gösterilmesi ortak tuzakların önlenmesine yardımcı olabilir. Adım adım açıklama, eğitimsiz araştırmacılar tarafından yapılsa bile tekrarlanabilir sonuçlara izin verir.
Laboratuvar teknisyeni Milat İnci, çalışan kalp ölçümlerini, matematikçi ve elektronik mühendisi Michael Koch ise hesaplamalı analize katkıda bulunuyor. Sıçan anestezi sonra, oksijen, hava ve izofluran karışımı ile 14 gauge tüp ve hacim kontrollü havalandırma ile entübe. Bir supine pozisyonda ısıtmalı bir ameliyat masasına sıçan yerleştirin ve bant ile ön bacaklar düzeltmek.
Daha sonra EKG problarını hayvanın ekstremitelerine deri altına yerleştirin. Üçüncü interkostal boşluk düzeyinde sol toraks üzerinde iki milimetre parasternal başlayan bir kesi yapmak ve beşinci interkostal boşluk düzeyinde ön aksiller çizgi devam etmek için bir neşter kullanın. Kaburgaların görülebilmeleri için yüzeysel kasları hafifçe hareket ettirin.
Dördüncü interkostal alan düzeyinde torakotomi gerçekleştirin ve kalp ve akciğer görünürlüğü kazanmak için bir retraktör takın. Daha sonra kanamayı önlemek için perikard'ı dikkatlice açın. Tanımlanmış bir süre içinde iskemi reperfüzyonu indüklemek için, bir turnike ile sol anterior inen arter okkül.
Miyokardiyum yırtılmasından sonra, sol arteri tanımlayın ve sütürü kalbin ventral marjına sınırının 2-3 milimetre altına yerleştirin. 30 dakika sonra turnike kaldırarak arter yeniden açın. Alternatif olarak, arter kalıcı ligasyon kapatmak için 6-0 dikiş ile altı ila yedi düğüm yaparak tıkanmış olabilir.
Üç tek düğme dikişleri ile toraks kapatmak için 4-0 tek monofilament sütür kullanın. Son sütür sıkma dan önce, bir pnömotoraks önlemek için 10 milimetreş ile toraks herhangi bir artık hava kaldırın. Kasları değiştirin ve uçucu anestezi kapatın.
Sonra sürekli 4-0 dikiş ile cilt dikiş. Enfeksiyon ve dikiş ısırma karşı korumak için bir antiseptik sprey uygulayın. Derin anestezi için, ekokardiyografi veya çalışma kalp ölçümleri öncesinde kilogram vücut ağırlığı başına xylazine dört miligram ve kilogram vücut ağırlığı intraperitoneally başına ketamin 100 miligram bir karışımını uygulayın.
Ekokardiyografi için, Isıtma tepsisinde bir supine pozisyonda sıçan yerleştirin ve papiller kas düzeyinde sol ventrikül kavite parasternal kısa eksen görünümleri elde. Daha sonra sol ventrikül ejeksiyon fraksiyonu ve morfolojisini ölçmek için M-modu ekokardiyografi yapın. Organları hasat etmek için, bir intravenöz heparin enjeksiyonu yapmak.
Sonra ksilofoid altında bir deri kesi yapmak için bir neşter kullanın ve makas ile her iki tarafta kaburga paralel genişletilmiş. Ön aksiller çizgide kaburga kesin ve göğüs kaldırmak için xiphoid kapmak. Anatomik veya fibrotik doku yapışıklıklarını iki çift forceps ile dokuyu dikkatlice yırtarak çıkarın.
Vena kavadan beş mililitrelik şırınga ile kan örneği alın. Daha sonra giriş ve çıkış düzeyinde tüm kalbin eksizyonu gerçekleştirin. Buz gibi Krebs-Henseleit tampon kalp batırın ve aort cannulating tarafından eritrosit perfüzyon izole kalp sistemi üzerine monte.
Langendorff modu ile başlayın. Ve 15 dakika sonra, çalışan kalp moduna geçin. Sol atriyumu pulmoner ven ile kanüle.
Daha sonra sol atriyumda perfüzyon ve sol kalpte fizyolojik kan akımı ile sonuçlanan atriyal kanülokyalar klibi açarak akış yönünü değiştirin. Her beş dakikada bir koroner akışı ölçmek için iki mililitrelik şırınga ile koronerlerin kan damlalarını toplayarak, çalışan kalp modunda 20 dakika boyunca hemodinamik ölçümler kaydedin. Bir prob ile sol atriyal akış ve aort akışının sürekli ölçümlerini yapın.
Gerekirse, sol ventrikül içine aort kapağı üzerinden retrograd bir yüksek sadakat kateter yerleştirin ve sol ventrikül sistolik basıncı ölçmek. Metin el yazmasında açıklandığı gibi inme hacmi ve dış kalp çalışmasını hesaplayarak analizi tamamlayın. İşlemin tekrarlanabilirliğini kanıtlamak için histolojik kesikler ve lekeler yapıldı.
MIR ve tedavi edilen hayvanlardaki fibrotik yara, şam ve MIR grupları arasındaki fibrozis farkı önemli iken, sahte hayvanların yara oluşumu ile karşılaştırılabilir. Ayrıca, MIR ve uzaktan iskemik per-klima tedavi hayvanlar mir tedavi hayvanlara göre önemli ölçüde azaltılmış fibrozis gösterdi. İn vivo ekroografi ejeksiyon fraksiyonu, LV end-diyastolik ve son sistolik çapları ölçmek için kullanıldı.
Analiz, MIR tedavisine bağlı olarak kardiyak fonksiyonda önemli ölçüde azalmış, ancak hemodinamik parametrelerin RIPerc tarafından korunduğu görüldü. Eski vivo hemodinamik veriler, MIR grubunun LV sistolik basınç, kardiyak çıkış, inme hacmi ve dış kalp çalışmalarında önemli düşüşler göstermesi nedeniyle prosedürün etkinliğini sergiledi. Bu prosedürü denerken, oklüzyon sütür düzgün konumlandırma ve izole kalp aparatları için kalbin montaj önemli ölçüde tekrarlanabilir sonuçlar elde etme şansını artırmak hatırlamak önemlidir.
Bozulmamış hayvanda kardiyak fonksiyonu akut veya kronik enstrümantasyon ve hatta ekokardiyografi veya MRG ile invaziv olarak değerlendirmenin birçok yolu vardır. Ancak, izole reperfüzyon kalp önemli bir araştırma aracı kalır ve benzersiz avantajlar bir dizi sunuyor.
