치료에 있는 중요한 개선에도 불구하고, 급성 심근 경색에 따라 심부전을 개발하는 환자의 수는 아직도 증가하고 있습니다. 급성 MI에서 심부전으로의 전환을 관찰하려면 재현 가능한 동물 모델이 필요합니다. 우리는 상대적으로 쉽고 재현 가능하며 동물에게 최소한의 불편함을 유발하는 MI 모델을 시연합니다.
또한, 상기 분리된 심장 장치는 시간과 비용 효율적인 방식으로 연구될 수 있는 매우 재현가능한 제제를 제공한다. 전 세계 다른 연구 그룹과 협력하여, 우리는 삽관 또는 LAD 폐색의 수준과 같은이 프로토콜의 가장 중요한 단계의 MI.Visual 데모에 따라 심근 수리 및 기능을 개선하는 새로운 약물 및 치료 접근 법의 안전성과 효능을 명확히하기 위해이 기술을 사용하고 있습니다. 단계별 설명은 훈련받지 않은 연구자가 수행하더라도 재현 가능한 결과를 허용합니다.
실험실 기술자인 Milat Inci는 심장 측정을 수행하고 있으며 수학자이자 전자 엔지니어인 마이클 코흐(Michael Koch)는 전산 분석에 기여하고 있습니다. 쥐를 마취한 후 산소, 공기 및 이소플루란의 혼합물로 14 게이지 튜브와 부피 제어 환기로 삽관하십시오. 가열 된 수술대에 쥐를 놓고 테이프로 앞다리를 고정합니다.
그런 다음 심전도 프로브를 동물의 사지에 피하로 배치합니다. 메스를 사용하여 제3간 늑간 공간의 수준에서 왼쪽 흉부에서 2밀리미터 파라스테랄을 시작하고 다섯 번째 늑간 공간 수준에서 전방 축실선으로 계속 절개를 합니다. 피상근육을 부드럽게 움직이면 갈비뼈를 볼 수 있습니다.
제4간 늑간 공간에서 흉부 절제술을 수행하고 심혼과 폐의 가시성을 얻기 위해 재트랙터를 삽입합니다. 그런 다음 조심스럽게 출혈을 피하기 위해 심낭을 엽니 다. 정의된 시간에 걸쳐 허혈 재관류를 유도하기 위해, 왼쪽 전방 동맥을 지혈대로 내림차순동맥을 가리킬 수 있습니다.
심근을 파열 한 후 왼쪽 동맥을 식별하고 봉합사를 테두리 아래에 2 ~ 3 밀리미터를 심장의 복부 여백에 놓습니다. 30분 후에 지혈대를 제거하여 동맥을 다시 엽니다. 또는, 동맥은 결찰을 닫기 위해 6-0 봉합사로 6-7 노트를 만들어 영구적으로 가려질 수 있습니다.
4-0 싱글 모노필라멘트 봉합사를 사용하여 3개의 단일 버튼 봉합사로 흉부를 닫습니다. 마지막 봉합사를 조이기 전에, 폐렴을 방지하기 위해 10mm 주사기로 흉부에서 잔류 공기를 제거합니다. 근육을 교체하고 휘발성 마취를 끕니다.
그런 다음 연속 4-0 봉합사로 피부를 봉합합니다. 봉합사의 감염과 물기로부터 보호하기 위해 방부제 스프레이를 투여하십시오. 깊은 마취를 위해, xylazine의 혼합물을 관리 킬로그램 체중 당 4 밀리 그램과 케타민 100 천킬로그램 체중 당 100 밀리그램 은 에코 카르디그래피 또는 작업 심장 측정 전에 천막 체중 당.
에코카르디그래피의 경우, 가열 트레이에 쥐를 수핀 위치에 놓고 유두 근육의 수준에서 왼쪽 심실 구멍의 기흉 짧은 축 보기를 얻을 수 있습니다. 그런 다음 왼쪽 심실 배출 분수 및 형태학을 측정하기 위해 M 모드 에코카르디오그래피를 수행합니다. 장기를 수확하려면 정맥 헤파린 주사를 수행하십시오.
그런 다음 메스를 사용하여 자이포이드 아래에서 피부 절개를 하고 가위를 가진 양쪽의 갈비뼈와 평행하게 확장합니다. 앞 축선에 갈비뼈를 잘라 가슴을 들어 올리기 위해 xiphoid를 잡아. 해부학적 또는 섬유성 조직 유착을 조심스럽게 두 쌍의 집게로 조직을 파열시킴으로써 제거하십시오.
5 밀리리터 주사기와 함께 베나 카바에서 혈액 샘플을 채취하십시오. 그런 다음 입구와 콘센트 수준에서 전체 심장의 절개를 수행합니다. 얼음 차가운 크렙스 헨셀레이트 버퍼에 심장을 담그고 대동맥을 캐너리로 적혈구가 퍼진 고립된 심장 시스템에 장착하십시오.
랑엔도르프 모드로 시작합니다. 그리고 15 분 후, 작업 심장 모드로 전환합니다. 폐 정맥을 통해 왼쪽 아트리움을 누를 수 있습니다.
그런 다음 왼쪽 심방 수심에 관류와 왼쪽 심장의 생리적 혈류를 초래하는 심방 캐뉼라를 가리게 하는 클립을 열어 흐름 방향을 변경합니다. 작동 심장 모드에서 20분 동안 혈역학 측정을 기록하여 5분마다 관상 동맥 흐름을 측정하기 위해 2밀리리터 주사기로 관상 동맥의 혈액 방울을 수집합니다. 프로브를 통해 좌심술기 흐름및 대동맥 흐름을 지속적으로 측정합니다.
필요한 경우 대동맥 판막을 통해 역행하여 좌심실 수축기 압력을 측정합니다. 텍스트 원고에 설명된 대로 스트로크 볼륨 및 외부 심장 작업을 계산하여 분석을 마무리합니다. 조직학적 상처와 얼룩은 절차의 재현성을 증명하기 위해 수행되었다.
MIR과 치료된 동물의 섬유성 흉터는 가짜 동물의 흉터 형성과 비교할 수 있었고, 가짜와 MIR 그룹 사이의 섬유증의 차이는 유의했습니다. 또한, MIR및 원격 허혈성 컨디셔닝 당 치료 동물은 MIR 처리된 동물에 비해 현저하게 감소된 섬유증을 보여주었습니다. 생체 내 에코그래피는 배출 분획, LV 말기 확장기 및 종단 수축기 직경을 측정하는 데 사용되었습니다.
분석 결과 MIR 치료로 인해 심장 기능이 현저히 감소했지만 혈역학 적 파라미터는 RIPerc에 의해 보존되었습니다. EX vivo 혈역학 데이터는 MIR 그룹이 LV 수축기 압력, 심장 출력, 뇌졸중 량 및 외부 심장 작업에서 현저한 감소를 보였기 때문에 절차의 효과를 나타냈다. 이 절차를 시도할 때, 폐색 봉합사의 적절한 위치와 고립된 심장 장치에 심장을 장착하는 것이 재현 가능한 결과를 얻을 확률을 크게 증가시키는 것이 중요합니다.
급성 또는 만성 계측을 통해 또는 심지어 비침습적 에코카르디그래피 또는 MRI에 의해 온전한 동물에서 심장 기능을 평가하는 많은 방법이 있습니다. 그러나, 고립 된 레퍼폰 심장은 눈에 띄는 조사 도구로 남아 있으며 독특한 장점의 전체 배열을 제공합니다.
