على الرغم من التحسينات الكبيرة في العلاج، لا تزال أعداد المرضى الذين يصابون بفشل القلب بعد احتشاء عضلة القلب الحاد في تزايد. لمراقبة الانتقال من MI الحاد إلى فشل القلب، نحن بحاجة إلى نماذج حيوانية قابلة للتكاثر. نحن نبرهن على نموذج من MI الذي هو سهل نسبيا، استنساخ ويسبب الحد الأدنى من الانزعاج للحيوانات.
بالإضافة إلى ذلك ، يوفر جهاز القلب المعزول إعدادًا قابلًا للاستنساخ للغاية يمكن دراسته بطريقة ذات وقت وفعالية من حيث التكلفة. بالتعاون مع مجموعات بحثية أخرى في جميع أنحاء العالم، ونحن نستخدم هذه التقنية لتوضيح سلامة وفعالية الأدوية الجديدة والنهج العلاجية التي تحسن إصلاح عضلة القلب وظيفة بعد MI.Visual مظاهرة من الخطوات الأكثر أهمية من هذا البروتوكول مثل الإرهاق أو مستوى انسداد LAD يمكن أن تساعد على منع المزالق المشتركة. الوصف خطوة بخطوة يسمح بنتائج قابلة للتكرار حتى لو تم إجراؤها من قبل باحثين غير مدربين.
تقوم ملات إنسي، فني المختبر، بإجراء قياسات القلب العامل، ويساهم مايكل كوخ، عالم الرياضيات والمهندس الإلكتروني، في التحليل الحسابي. بعد تخدير الفئران، intubate ذلك مع أنبوب قياس 14 والتهوية التي تسيطر عليها وحدة التخزين مع خليط من الأكسجين والهواء، وisoflurane. ضع الجرذ على طاولة تشغيل ساخنة في موضع supine وإصلاح forelimbs مع الشريط.
ثم ضع مسبار ECG تحت الجلد في أطراف الحيوان. استخدام مشرط لجعل شق يبدأ مليمترين parasternal على الصدر الأيسر على مستوى الفضاء ال intercostal الثالث والاستمرار في خط الإبط الأمامي على مستوى الفضاء البيني الخامس. نقل العضلات السطحية بلطف بحيث يمكن رؤية الأضلاع.
قم بإجراء استئصال الصدر على مستوى الفضاء الوربي الرابع وأدخل مُتَرّسًا للحصول على رؤية القلب والرئة. ثم فتح بعناية في بيريكارديوم لتجنب النزيف. للحث على إعادة ضخ الإقفاري على مدى وقت محدد ، قم بتكديس الشريان الأمامي الأيسر مع tourniquet.
بعد تمزق عضلة القلب، حدد الشريان الأيسر ووضع الغرزة من ملليمترين إلى ثلاثة ملليمترات تحت حدودها عند الهامش البطني للقلب. أعد فتح الشريان عن طريق إزالة التورنيكيت بعد 30 دقيقة. بدلا من ذلك، يمكن انسداد الشريان بشكل دائم عن طريق جعل ستة إلى سبعة عقدة مع خياطة 6-0 لإغلاق الربط.
استخدام 4-0 خياطة أحادية واحدة لإغلاق الصدر مع ثلاث خياطة زر واحد. قبل تشديد خياطة الماضي، وإزالة أي الهواء المتبقي من الصدر مع حقنة 10 ملليمتر لمنع وجود هضاب الصدر. استبدل العضلات وأطفئ التخدير المتطاير.
ثم خياطة الجلد مع خياطة مستمرة 4-0. إدارة رذاذ مطهر للحماية من العدوى والعض من الغرز. للتخدير العميق، وإدارة خليط من xylazine أربعة ملليغرام لكل كيلوغرام من وزن الجسم والكيتامين 100 ملليغرام لكل كيلوغرام وزن الجسم intraperitoneally قبل تخطيط صدى القلب أو قياسات القلب العامل.
بالنسبة للتصوير الصدى، ضع الجرذ في موضعه الوبين على صينية التدفئة والحصول على مناظر قصيرة المحاور لتجويف البطين الأيسر على مستوى العضلة الحليمية. ثم قم بإجراء تخطيط صدى القلب M-mode من أجل قياس جزء طرد البطين الأيسر والمورفولوجيا. لحصاد الأعضاء، قم بإجراء حقنة هيبارين في الوريد.
ثم استخدام مشرط لجعل شق الجلد تحت xyphoid وتمديدها موازية للأضلاع على كلا الجانبين مع مقص. قطع الأضلاع في خط الإبط الأمامي والاستيلاء على xiphoid لرفع الصدر. إزالة الالتصاقات الأنسجة التشريحية أو الليفية عن طريق تمزق بعناية الأنسجة مع اثنين من أزواج من ملقط.
خذ عينات دم من الوريدي مع حقنة خمسة ملليلتر. ثم قم بإجراء ختان القلب كله على مستوى المدخل والمنفذ. تزج القلب في الجليد الباردة Krebs-Henseleit العازلة وجبله على نظام القلب المعزولة دريثروسييت عن طريق ابلى الشريان الأورطي.
ابدأ بوضع لانغيندورف. وبعد 15 دقيقة، انتقل إلى وضع القلب العامل. Cannulate الأذين الأيسر عن طريق الوريد الرئوي.
ثم تغيير اتجاه التدفق عن طريق فتح مقطع أن يُكبس قنية الأذينية التي تؤدي إلى ضخ إلى الأذين الأيسر وتدفق الدم الفسيولوجي في القلب الأيسر. سجل قياسات ديناميكية دموية لمدة 20 دقيقة في وضع القلب العامل ، وجمع قطرات الدم من التاجية مع حقنة ملليلتر لقياس تدفق الشريان التاجي كل خمس دقائق. إجراء قياسات مستمرة لتدفق الأذيني الأيسر وتدفق الأبهر مع مسبار.
إذا لزم الأمر، أدخل قسطرة عالية الدقة إلى الوراء عن طريق الصمام الأبهري في البطين الأيسر وقياس الضغط الانقباضي البطيني الأيسر. اختتم التحليل عن طريق حساب حجم السكتة الدماغية وأعمال القلب الخارجية كما هو موضح في المخطوطة النصية. تم إجراء التخفيضات النسيجية والبقع لإثبات إمكانية استنساخ الإجراء.
كانت الندبة الليفية في MIR والحيوانات المعالجة قابلة للمقارنة مع تشكيل ندبة الحيوانات الصورية في حين كان الفرق في التليف بين مجموعات صورية ومير كبيرًا. بالإضافة إلى ذلك، أظهرت MIR والحيوانات المعالجة عن بعد لكل تكييف انخفاضًا كبيرًا في التليف مقارنة بالحيوانات المعالجة من MIR. في echography vivo تم استخدام لقياس الكسر القذفي، LV نهاية الانبساطي ونهاية الانقباضي أقطار.
أظهر التحليل انخفاضًا كبيرًا في وظيفة القلب بسبب علاج MIR ، ولكن تم الحفاظ على المعلمات الديناميكية الدموية من قبل RIPerc. أظهرت البيانات السابقة vivo hemodynamic فعالية الإجراء كما أظهرت مجموعة مير انخفاضات كبيرة في الضغط الانقباضي LV، إخراج القلب، وحجم السكتة الدماغية، والعمل الخارجي للقلب. عند محاولة هذا الإجراء، من المهم أن نتذكر أن الموضع السليم للخياطة وانسداد من القلب إلى جهاز القلب المعزول زيادة كبيرة في فرصة الحصول على نتائج قابلة للتكرار.
هناك العديد من الطرق لتقييم وظيفة القلب في الحيوان سليمة من خلال أجهزة حادة أو مزمنة أو حتى noninvasively عن طريق تخطيط صدى القلب أو التصوير بالرنين المغناطيسي. ومع ذلك، فإن القلب المعزول الذي أعيد إعادة رسّاه يبقى أداة تحقيق بارزة ويقدم مجموعة كاملة من المزايا الفريدة.
