Bu protokol, radyobiyolojik çalışmalar için dozimetri ölçümlerinin gerçek hücre ışınlama koşullarına mümkün olduğunca yakın yapılmasına olanak sağlamak için geliştirilmiştir. Bu protokol ile, hücrelerin aldığı tam dozu belirleyebilir ve birçok x-ışını tesisine uygulanabilir hale getirebilir ve tüm parametreleri dikkate alabilir ve dozimetriye çevirebiliriz. Tüm ışınlama parametreleri, fizikçiler ve radyobiyologlar arasında yakın bir işbirliği gerektiren dozimetri ölçümünün optimal bir şekilde elde edilmesine izin vermek için yukarı akışta ayarlanmalıdır.
Işınlama alanı değerlendirmesi yapmak için, ışınlama için kullanılan desteğe kendi kendini geliştiren bir dozimetri filmi yerleştirin ve iyi işaretlenmiş bir ışınlama alanı elde etmek için filmi en az iki gri ile ışınlayın. Özel bir tarayıcı kullanarak kendi kendini geliştiren dozimetri filmini tarayın ve ImageJ'deki doz profilini çizmek için profili analiz edin ve çizin. Ardından, hücre kabının doğru konuma yerleştirileceğine emin olmak için ışınlama destek yüzeyini işaretleyin.
Doz oranı ölçümü yapmak için, modifiye edilmiş bir hücre kabını ışınlama destek muhafazasına yerleştirin ve iyonlaşma odasını destek yüzeyinde yapılan işaretlere göre doğru konumda kabın içine yerleştirin. Tüm ışınlama parametrelerinin uygun şekilde ayarlandığını onaylayın ve iyonlaşma odasını beş dakika boyunca önceden ışınlayın. Elektrometreyi sıfırla ve 10 tane bir dakikalık ölçüm elde edin.
Ardından, hava kermasındaki ortalama doz oranını belirlemek için formülü kullanın. Tüm filmleri aşağı akış tanımlamaları için numaralayın. Işınlamadan en az 24 saat önce, hücre kabının büyüklüğüne göre kendi kendini geliştiren dozimetri filmi parçalarını kesin.
Bir kalibrasyon eğrisi oluşturmak için, ışınlanmamış kontroller için üç parça film ayırın ve ilk filmi hücre kabının içine yerleştirin. Daha sonra, ilk doz noktasını elde etmek için filmi ışınla. Tüm filmler uygun seçilen dozlarda üç taraflı olarak ışınlandığında, bir kalibrasyon eğrisi oluşturulabilir.
Hücre kültürü ortamının zayıflamasını ve saçılmasını ölçmek için, tüm ışınlamalar için aynı ışınlama süresini seçin ve su olmadan kapta kendi kendini geliştiren üç parça dozimetri filmini ışınlayın. Ardından, kabın içine tek bir film parçası yerleştirin ve kabı ışınlanacak ortamın hacmiyle aynı miktarda su ile doldurun. Gerektiğinde küçük bant parçaları kullanarak, kabı muhafazanın içine yerleştirin.
Işınlama tamamlandığında, filmleri emici kağıtla kurulayın ve filmleri ışıktan korumalı olarak saklayın. Işınlamalarından 24 saat sonra, tarayıcıda TIFF formatını 48 bit kırmızı yeşil maviye ve iletim modunu inç başına 150 noktaya ayarlayın ve görüntü düzeltmesi yok'u seçin. Tarayıcıyı ısıtmak için tarayıcıya ışınlanmamış bir film yerleştirin ve taramanın önizlemesini başlatın.
Önizlemenin sonunda, bir zamanlayıcı başlatın ve taramayı başlatmadan önce 30 saniye bekleyin. Taramanın sonunda 90 saniyelik bir zamanlayıcı başlatın. Aynı zamanda, taramayı kaydedin ve görüntüyü ImageJ'de açın.
Taramada ilgi çekici kare bir bölgeyi takip edin ve alanın ortalama kırmızı piksel düzeyini ölçün. 90 saniyenin sonunda, tarayıcıyı ısıtmak ve stabilize etmek için tarama önizlemesini en az 30 kez tekrarlayın. Tarayıcı sabitlendikten sonra, tarayıcı yatağının ortasına bir film yerleştirin ve taramanın önizlemesini başlatın.
Taramaya başlamadan önce 30 saniye bekleyin. Taramanın sonunda, bir sonraki taramayı başlatmadan önce 90 saniye bekleyin. Daha sonra zayıflayıcı kalınlığını tahmin etmek için ölçümler yapıldı ve ışın yoğunluğunu iki kat azaltan kalınlığı bulmak için farklı zayıflayıcı kalınlıkları test edildi.
Bu kalınlık belirlendiğinde sıcaklık ve basınç düzeltme faktörü ile düzeltilen ortalama mRAW değerini değerlendirmek için beş ölçüm yapıldı. Bu konfigürasyon için 0.667 milimetre bakırdan oluşan yarı değerli bir tabaka bulundu. Bu temsili analizde, ışınlama alanının homojen olduğu yüzeyi belirlemek için hücre kabının doğru yerleştirilmesini sağlayan kendi kendini geliştiren bir dozimetri filmi ışınlandı.
Hücreler için tam dozu belirlemek için, ölçülen hava kerma doz oranı, bu analiz için dakikada 0.659 gri olduğu belirlenen foton fluans spektrumu üzerinden değerlendirilen su için ortalama kütle enerjisi emme katsayısının havaya oranı kullanılarak su karmasına dönüştürüldü. Bu hücre kültürü orta zayıflama ve saçılma analizinde, kendi kendini geliştiren dozimetri radyokromik filmler ilk olarak sıfır ile üç gri arasında sıfır ile üç gri arasında 0,25 gri adım ve bir ile üç gri arasında 0,5 gri basamak ile kalibre edilmiştir. Doz noktaları daha sonra dördüncü derece polinom eğrisi ile donatılmıştır.
Burada günlük ölçüm için kullanılan temsili bir tablo gözlemlenebilir. Yapılandırma parametrelerinin tümüne uyulsun, yapma oranının sağ hücre kapsayıcısı içinde ölçüldüğünden ve hücre kültürü ortamının etkisinin değerlendirildiğinden emin olun. Doz referans ölçümü oluşturmak için çeşitli protokoller vardır.
Önemli nokta, özellikle düşük x-ray olanaklarını kullanırken belirli bir uygulama için uygun protokolü seçmektir.
