Nanopartikül şekli hücresel alımı etkiler, ancak polimeromların şeklini değiştirmek için sınırlı çalışma yapılmıştır. Bu protokol, gelişmiş ilaç dağıtım uygulamaları için polimeromların nasıl aşılacağını göstermektedir. Bu teknik, ilaç dağıtımında, sahte hücrelerde veya keşfedilmemiş diğer alanlarda potansiyel uygulamalarla birçok farklı polimerom şekli oluşturabilen basit bir yaklaşım sağlar.
Uzun polimeromlar aynı anda hidrofobik ve hidrofilik ilaçları hücrelere daha kolay teslim edebilir. Bu teknik, büyük bir tıbbi zorluğu ele alarak, kan-beyin bariyeri boyunca mekik ilaçlarına yardımcı olabilir. Başlamak için, 0.015 gram seçilen polyesteri 15 dakika boyunca girdaplayarak bir mililitre DMSO'da çözün ve solvent enjeksiyon cihazını kurun.
Başlangıç plakasını doğrudan dikey şırıngar pompasının altına yerleştirin, ardından karıştırma plakasındaki minyatür bir yıldız çubuğuna bir mililitre tip iki deiyonize su içeren beş mililitrelik bir cam safra yerleştirin. Şırınga pompalarının yüksekliğini, iğne ucunun tip iki deiyonize suya tamamen daldırılmasını sağlayacak şekilde ayarlayın ve şırınga pompasının infüzyon oranını dakikada beş mikrolitreye ayarlayın. Organik çözücü ve polyester çözeltisini 27 kalibrelik bir iğneye çekerek çözücü enjeksiyonu gerçekleştirin.
İğneyi şırınga pompasına yerleştirin ve güvenli olduğundan emin olun. Şırıngan pistonun ucuna dokunmak için itici bloğunu ayarlayın. Karıştırma plakasını, suyun dakikada 100 devirde dönmesi için başlatın ve ardından şırınna pompasını çalıştırın.
Şırıngam pompası organik çözücü ve polimeri suya tamamen aşıladıktan sonra, karıştırma çubuğunu çıkarın ve cam aşağılık kaplayın. Polimeromların dinamik ışık saçılımı veya DLS ile karakterizasyonu için, bir mililitrelik bir cuvette'e küçük bir organik çözücü ve polimer yüzdesine sahip bir mililitre su ekleyin. Cuvette'i sisteme yerleştirerek ve çalıştırmayı ayarlayarak DLS gerçekleştirildi.
Polimerom yoğunluğu ağırlıklı çapı ve polidisperlik indeksini veya PDI'yı okuyun. Üretici tarafından sağlanan protokollere göre 300 kilodalton diyaliz zarını yıkadıktan sonra diyaliz cihazının rezervuarına bir mililitre polimerom çözeltisi ekleyin. Diyaliz cihazını 150 mililitre tip iki deiyonize su ile 250 mililitrelik kabın içine bir karıştırma plakasına yerleştirin.
Karıştırma plakasını diyaliz cihazının hafifçe hareket etmesine izin veren bir hıza ayarlayın ve gece boyunca karıştırmaya bırakın. Diyaliz tamamlandıktan sonra, bir mililitre polimerom çözeltisini diyaliz cihazından çıkarın. Son istenen polimerom özelliklerine dayanarak 50, 100 veya 200 milimolar sodyum klorür konsantrasyonu ile 150 mililitre istenen tuz tamponu oluşturun ve diyaliz cihazının yükünü karıştırmak için 18 saat boyunca 150 mililitre tuz çözeltisinde tutun.
Şekil modülasyonundan sonra DLS ölçümleri gerçekleştirin. PDI'daki bir değişiklik polimeromlarda etkili bir şekil değişikliğine işaret ettiği için ruhsal polimeromlara kıyasla PDI ölçümlerine özellikle dikkat edin. Yöntemin başarısını sağlamak için görüntüleme için uygun kontrolleri, özellikle şekilsiz modüle edilmiş polimeromları kullanın.
PEG-PLA bazlı polimeromların TEM gözlemi, bir zarın göstergesi olan daha kalın bir dış çizgiye sahip genel bir küresel yapıyı gösterir. Polimeromlar, PEG'in dış tabakası gibi bir fırça ile fiziksel yapılar ve SEM olarak bulunur. Suda bir saatlik diyaliz, polimerom çapını azaltarak çözücü çıkarma ile aynı genel ortalama çapa yol açtı.
Daha büyük ilk organik çözücü konsantrasyonları kullanıldığında, daha büyük çapta düşüşler beklenir. PEG-PLA polimeromları yaparken, PDI'da şekil değişikliğine işaret edebilecek mütevazı değişiklikler beklenmektedir. PEG-PLA polimerlerinden biraz daha hidrofobik olan PEG-PLGA polimeromlarını tuza karşı çevirirken, PDI'daki artış, PDI'da artışa yol açan tüm araştırılmış tuz gradyanları ile uzama ile daha tutarlıdır.
Polyester hidrofobiklikten bağımsız olarak şekil değişikliğine neden olmak için 50 milimoler tuz gradyanı kullanırken de benzer sonuçlar gözlenmelidir. Bu arada, 100 ve 200 milimolar sodyum klorür tuz gradyanları, delta PDI'nın artan polyester hidrofobikliği ile arttığı doğrudan eğilimi gösterir. 50 milyon daha düşük sodyum klorür ile dialyzed PEG-PLA polimeromlarının TEM görüntüleri stomatositler ve uzun çubuklarla gösterildi.
Tuz konsantrasyonu 100 milimolar'a yükseldikçe, stomatosit sayısında azalma ile çubuk oluşumunda artış gözlenmiştir. 200 milimoler polimeromlara karşı diyaliz, mütevazı en boy oranlarına sahip prolatları daha tutarlı bir şekilde oluşturmuştur. Bu protokolün en zorlu kısmı polimeromları sürekli hale getirmektir.
Bu yüzden prosedürü uygulamak önemlidir.
