Kronik ağrıyı tedavi etmek için çok sayıda yenilikçi tedavi araştırıldığından, protokolümüz nöropatik ağrıyı indüklemek için gereken ameliyatların standardizasyonu için çok önemli kavramlar sunmaktadır. Kısmi siyatik sinir ligasyonu veya PSNL, nöropatik ağrılı insanlarda gözlenen birçok semptomu yeniden ürettiği için nöropatik ağrıyı incelemek için avantajlı bir modeldir. PSNL, nöropatik ağrısı olan insanlarda gözlenen birçok semptomu yeniden ürettiğinden, bu protokol yeni ağrı yönetimi terapilerini incelemek ve geliştirmek için çok önemli kavramlar sağlar.
Prosedürü gösteren, laboratuvarımda MD doktora adayı olan Kevin Cheng olacak. Başlamak için, fareleri testten önce bir saat boyunca Von Frey test cihazına alıştırın, test odasıyla aynı odada bir tel örgü üzerinde şeffaf pleksiglas kutulara yerleştirin. Asılı tel örgü kafeslerde tutulan hayvanların PSNL ipsilateral arka pençesinin ekici yüzeyine dik olarak bir dizi kalibre edilmiş ince mono filament uygulayın.
Filamentin boyutuna karşılık gelen uyaran gücünü sırayla artırarak veya azaltarak geri çekilme eşiğini belirleyin. Yanıt negatif olduğunda filamentin boyutunu artırın ve hayvan pençesini çektiğinde filamentin boyutunu azaltın. Veri sayfasındaki olumsuz ve olumlu yanıtları bildirin ve ilk olumlu yanıtı takiben aynı pençeyi farklı filamentlerle dört kez test edin.
Fareleri testten önce bir saat boyunca Hargreaves test cihazına alıştırmak, test odasıyla aynı odadaki şeffaf pleksiglas kutulara yerleştirin. Hargreaves aparatını kullanarak temel pençe geri çekilme gecikmelerini belirleyin. Radyant bir ısı kaynağını, PSNL'ye ipsilateral arka pençenin ekici yüzeyine odaklayın ve stimülasyona başlayın.
Hayvan pençesini çektiğinde, bir hareket dedektörünün uyaranı durdurmasını ve zamanlayıcıyı durdurmasını bekleyin. Yaklaşık 10 saniyelik bir pençe çekme gecikmesi temeli elde etmek için ısı kaynağının yoğunluğunu ayarlayın. Ardından, para çekme süresini bir tabloya kaydedin.
Sıcak plakayı 52 santigrat dereceye ayarlayın. Hayvanı test odasına yerleştirin ve bir kronometre başlatın. Nosifensif davranışları gözlemleyin ve nosifensif davranış gözlenir gözlenmez kronometreyi durdurun.
Ardından hayvanı odadan çıkarın ve gecikmeyi bu davranışa kaydedin. Isı uyaranının sıcaklığını etkilemekten kaçınmak için test edilen her hayvan arasındaki herhangi bir idrarın aparatını temizlediğinizden emin olun. Kokuların davranışsal etkisini azaltmak için test odasını hayvanlar arasında% 70 etanol ile temizleyin.
Bir sinir camı kancası yapmak için, bunsen brülörünü açın. Cam çubuğun bir ucunu bir elinizle ateşe tutun. Bu cam çubuk eridikçe, ilk çubuktaki eriyen camı yönlendirmek ve çekmek için diğer elinizde başka bir cam çubuk kullanın.
İlk cam çubuğu ateşten çıkarın ve erimiş kısmın ucunun, ikinci cam çubuğu kullanarak küçük bir top şekli oluşturmak için doğal olarak içe doğru yuvarlanmasına izin verin. Pençe refleksinin yokluğundan emin olmak için ayak parmaklarını cımbızla arka pençeye sıkıştırın ve yağlayıcı oftalmik merhem uygulamadan önce kornea göz kırpma refleksini kontrol edin. Ameliyatın hangi tarafta yapılacağını seçtikten sonra, hayvanın arka bacağını uyluk bölgesi etrafında, patellaya doğru, kalçaya doğru ve femurun üstünde şekillendirin.
Daha sonra, ılık steril salin ile dönüşümlü üç ayrı gazlı bezle bir yönde klorheksidin ile üç kez silin. Ardından, seçilen bacağın etrafında steril bir alan oluşturmak için bacağı 10 x 10 santimetrelik steril bir örtüde yapılmış bir yarıktan geçirin. İnce cerrahi makas kullanarak, uyluğun yanal yönünün orta hattında cildin iki milimetrelik küçük bir kesimini yapın.
Fasyayı kırmak ve kesi alanını genişleterek bir boşluk oluşturmak için makası cildin altına dairesel bir hareketle kaydırın. Daha sonra, bağlama forsepslerinin kullanılması, uyluk kaslarında 90 derecelik bir açıyla dikey olarak keskin bir santimetre derinliğinde bir kesi oluşturur. Daha sonra ince küçük makasları aynı insizyona 90 derecelik bir açıyla yerleştirin ve siyatik sinir görselleşene kadar kasları ayırmak için yavaşça açın.
Dikey uyluğa paralel olarak çalışan siyatik siniri kalçadan dize doğru yerleştirin. Devam etmeden önce bağlama forsepslerindeki makası vücuttan çıkarın. Siniri alttan izole etmek için sinir camı kancasındaki ekstra ince forsepsleri kullanın.
Sinirleri, kalçaya en yakın ve dizden en uzak olan femur trokanterine yakın bir bölgede çevreleyen bağ dokularından dikkatlice serbest bırakın. Sinirin cam çubuk üzerinde durmasına izin verin ve çubuğun ucunun sinirin yuvarlanmasını önlediğinden emin olun. Ortak peroneal, tibial ve sural sinir dallarına bölünmeden önce dokuz sıfır naylon sütür kullanarak siyatik sinirin genişliğinin üçte birini bağlamak için cerrahi bir düğüm yerleştirin.
Düğüm tamamlandıktan sonra siniri cam çubuktan dikkatlice kaydırın ve ayrılmış kasların altındaki seviyede orijinal yerine geri yerleştirin. Daha sonra, emilebilir bir poliglikolik beş sıfır sütür kullanarak kas insizyonunu dikin. Ayrı olarak, emilemeyen bir polipropilen altı sıfır sütür kullanarak cildi dikin.
Ardından ameliyat ve anestezi durma zamanını kaydedin. Fareyi yeni bir temiz kafese döndürmeden önce kurtarma kafesinde tek başına uyanmasına izin verin. Hem termal hem de mekanik aşırı duyarlılığı ve potansiyel tersine çevrilmesini değerlendirmek için Von Frey, Hargreaves veya sıcak plaka testini kullanın.
PSNL ameliyatı geçiren fareler, 28 gün boyunca sahte hayvanlara kıyasla mekanik uyaranlara karşı daha düşük eşikler gösterdi. Termal hipersensitivite değerlendirmesi ile de benzer sonuçlar elde edildi. Radyant ısı uyaranına maruz kaldıktan sonra pençe çekilme gecikmeleri, PSNL hayvanlarında ve hayvanlar 52 santigrat derecelik bir plakaya yerleştirildiğinde geri çekilme gecikmelerinde artmıştır.
İki farklı dozda morfin enjekte edilen gruplar, bir ila iki saat süren aşırı duyarlılığın tersine çevrildiğini gösterdi. Mekanik aşırı duyarlılık, morfin enjeksiyonundan dört saat sonra taban çizgisine geri döndü. Farelere intraperitoneal olarak iki farklı dozda ibuprofen uygulandığında, sonuçlar salin enjekte edilen farelere kıyasla mekanik aşırı duyarlılığın azaldığını göstermiştir.
Sinirdeki ek hasarı sınırlamak, ağrı duyusal eşiklerini etkileyebileceği için önemlidir. Deneyci özellikle dikkat etmeli ve kasıtsız hasarı azaltmak için cam kancayı kullanmalıdır Bu prosedürü takiben, bu kronik nöropatik ağrı modeli, yeni ağrı yönetimi tedavilerinin geliştirilmesine yol açan ilaçların antinosiseptif etkisini tanımlamak ve karakterize etmek için kullanılabilir.
