Karbon-nanopartikül yardımlı paratiroidektomi ile hipoparatiroid sıçanlarının üretimi

Bu protokolün genel amacı, kurulması kolay, karakterde stabil ve tiroid bezlerine zararsız olan edinilmiş hipoparatiroidizmin bir sıçan modelini oluşturmaktır. Bu modelin temel avantajı, karbon nanopartiküllerinin yardımıyla paratiroid bezlerinin hassas bir şekilde çıkarılmasıdır. Modelin hipoparatiroidizm alanındaki birkaç sorunun çözülmesine yardımcı olabileceğini umuyoruz.

Örneğin, tiroidektomi sonrası hipokalsemi riskini azaltmak için ameliyat öncesi kalsiyum ve D vitamini kullanımı. Bu yöntem, kemik döngüsünün PTH analoglarından nasıl etkilendiği ve PTH analoglarının uzun süreli kullanımda vücudu nasıl etkilediği hakkında fikir verebilir. Bu tekniği ilk kez uygulayanlar, stereo mikroskop altında mikro-manipülasyon yapmayı zor bulabilirler.

Stereo mikroskop altında bazı uygulamalar yardımcı olabilir. Başlamak için, anestezi uygulanan sıçanı sırtüstü pozisyona yerleştirin ve ventral boyun bölgesinin kürkünü tıraş edin. Makalede açıklandığı gibi bir kesi yaptıktan sonra, tiroid bezinin loblarını bulun.

30 gauge konik iğne ile donatılmış 10 mikrolitrelik bir şırınga kullanarak, karbon nanopartikül süspansiyonunun bir mikrolitresini tiroid bezi zarının mesial kısmına enjekte edin. Beş dakika sonra, ekstra süspansiyonları temizlemek için bölgeyi tuzlu sulayın. Tiroid bezlerinin siyaha döndüğünden emin olun ve lekesiz paratiroid bezini gözlemleyin.

Lekesiz paratiroid bezlerini bir çift mikrocerrahi forseps ve makas kullanarak kesin ve ardından kesiyi kesilmiş yatay yatak sütürü ile kapatın. Ameliyattan sonra, vücut ısılarını korumak için sıçanları 37 santigrat derecede termostatik bir elektrikli battaniyeye yerleştirin. Yedi gün sonra, kuyruk damarını kullanarak 10 mikrolitre kan alın.

Ticari kitler kullanarak serum kalsiyum, serum inorganik fosfor ve serum paratiroid hormonunu ölçün. Paratiroidektomi yapılan sıçanlarda dört haftalık gözlem süresi boyunca stabil hipokalsemi ve hiperfosfatemi görüldü. Paratiroidektomi yapılan sıçanlarda ameliyattan yedi gün sonra serum paratiroid hormonu saptanmadı.

Serum üre ve kreatinin, ameliyattan yedi gün sonra sahte ve paratiroidektomi grupları arasında karşılaştırılabilirdi. Ameliyattan iki hafta sonra idrar kalsiyum iyonlarında ve inorganik fosfat düzeylerinde azalma gözlendi. Paratiroidektomi ve sahte gruplar arasında 28 gün boyunca vücut ağırlığında anlamlı bir fark gözlenmedi.

Paratiroidektomi yapılan sıçanlarda serum C-telopeptid anlamlı olarak azalmıştır. Serum osteokalsin düzeylerinde anlamlı fark saptanmadı. Bununla birlikte, nanopartikül süspansiyon enjeksiyonu en önemli şeydir ve başarılı bir enjeksiyon, paratiroid bezlerinin tanımlanması ve mevcut çıkarılması için kritik öneme sahiptir.

Diğer yöntemler arasında floresan rehberliğinde cerrahi, PTHcre-iDTR transgenik farelerin difteria toksin enjeksiyonu ve hipertiroidi alanındaki soruların cevaplanmasına yardımcı olabilecek steril paratiroidektomi bulunmaktadır.