Floresan Görüntüleme Kullanılarak Jurkat Eksprese Eden Kimerik Antijen Reseptörünün Hızlı İn Vitro Sitotoksisite Değerlendirmesi

CAR T hücreleri, insan klinik deneylerinde daha iyi yanıtlar elde etmek için sürekli olarak geliştirilmektedir. Bunu, en iyi sonucu veren kombinasyonları taramak için floresan görüntüleme kullanmak gibi tarafsız bir yüksek verimli yöntem kullanarak laboratuvarımızda değerlendirmenin yollarını belirliyoruz. Hücre dışı ve menteşe alanlarının geometrisini değiştirerek herhangi bir tek zincirli değişken parça için tasarlanabilen çeşitli yapı kombinasyonları vardır.

Bu protokolü, Jurkat hücrelerini kullanarak hedef hücreleri ortadan kaldırmada en iyi etkinliğe sahip kombinasyonları belirlemek için tasarladık. Bu, daha sonra geleneksel T hücreleri ile doğrulanan Jurkat hücrelerini kullanarak hedef hücre sitotoksisitesine dayalı olarak CAR yapılarını taramak için hızlı, yüksek verimli bir protokoldür. Bu teknik kullanılarak bir düzine farklı CAR yapısı aynı anda 96 oyuklu bir plakada test edilebilir.

Burada Akhavan Laboratuvarı'nda, birden fazla CAR yapısını taramak için yüksek verimli bir şekilde Jurkat hücrelerini eksprese eden CAR tarafından hedef hücrelerin doğrudan siklozunu mutlak sayılarla ölçüyoruz. Laboratuvarımızın birincil amacı, yüksek dereceli beyin tümörlerine karşı CAR T-hücre tedavisinin klinik çevirisini iyileştirmektir. CAR T hücresi sitotoksisitesini iyileştirmenin yanı sıra tümör mikro çevresini hedeflemek için bir yöntem olarak yüksek verimli ilaç ekranlarından yararlanıyoruz.