Bu çalışma, Araştırma ve Geliştirme Programı, Batı Çin Stomatoloji Hastanesi, Sichuan Üniversitesi (RD-02-202107), Sichuan Eyaleti Bilim ve Teknoloji Destek Programı (2022NSFSC0743) ve Sichuan Doktora Sonrası Bilim Vakfı (TB2022005) tarafından desteklenmiştir.

Bu çalışmadaki tüm hayvan prosedürleri, Sichuan Üniversitesi Batı Çin Stomatoloji Okulu Etik Komitesi tarafından gözden geçirildi ve onaylandı. Bu çalışma için yetişkin C57BL/6 fareler (dişi) kullanıldı.
1. Cerrahi hazırlık
<ol><li>Prosedür için gerekli cerrahi aletleri toplayın: germinatör, oftalmolojik koter, mikrocerrahi makas, mikrocerrahi cımbız, şırınga ve iğneler (26 g x 0.63 inç) (Şekil 1A, B) (bkz. NOT: Cerrahi işlemden önce, oftalmolojik koter, mikrocerrahi cımbız ve mikrocerrahi makas dahil olmak üzere cerrahi aletleri 102.9 kPa (1.05 kg/cm2) ve 121 °C'de 20 dakika otoklavlayın.</li>
	<li>Gerekli cerrahi malzemeleri toplayın: cerrahi örtüler, lateks eldivenler, steril pamuk, steril çarşaflar, steril metal folyo, cerrahi platform olarak köpük levha, lastik bantlar (tıbbi lateks eldivenin yırtılmasıyla elde edilebilir) ve bant (Şekil 1C) (bkz. NOT: Cerrahi alan için şırıngalar ve steril çarşaflar dahil olmak üzere her fare için ayrı bir malzeme seti kullanın.</li>
	<li>Cerrahi alanı ve aparatı (ışık kaynağı, köpük levha ve sıcaklık bakım cihazı, bkz. Malzeme Tablosu) alkollü mendiller kullanarak temizleyin. İşlem sırasında gerekli olabilecek aletlerin topuzlarını ve kollarını steril metal folyo ile kapatın.</li>
	<li>Tek tek aletleri aseptik olarak açın ve cerrahi alana dikkatlice yerleştirin. Prosedür sırasında kullanılacak germinatörü ( Malzeme Tablosuna bakın) ve ışıkları etkinleştirin. Oftalmolojik koteri germinatöre yerleştirin ve 20 dakika boyunca 250 °C'ye ısıtın.</li>
</ol>2. Cerrahi prosedür
<ol><li>Farenin fiksasyonunu gerçekleştirin ve aşağıdaki adımları izleyerek ağız boşluğunu açın.<ol><li>20-25 g ağırlığında ve 8-12 haftalık bir dişi C57BL/6J fare seçin. Herhangi bir işlem yapmadan önce fareyi 7 gün boyunca tutun.</li>
		<li>Fareyi intraperitoneal Zoletil50 (80 mg / kg) ve Xylazine (5 mg / kg) enjeksiyonu ile uyuşturun (bkz. Farenin gözüne oftalmik göz merhemi sürün. Ayak parmağını kıstırma tepkisi kalmayana kadar bekleyin. NOT: Fare, bağımsız olarak dönemediğinde prosedür için hazırdır.</li>
		<li>Fareyi steril çarşaflarla kaplı bir köpük levhaya sabitleyin. Fareyi sırtüstü pozisyonda cerrahi platforma bağlamak için bant kullanın (Şekil 2A).</li>
		<li>Farenin ağız boşluğunu açın. Yörünge kulak düzleminin önüne iki iğne (26 g x 0.63 inç) ve arkasına iki iğne daha yerleştirin. İğnelerin etrafına bir lastik bant yerleştirin ve ağzı açık tutmak için kesici dişleri çaprazlayın. Ağzın köşelerini açmak için mikrocerrahi cımbız kullanın (Şekil 2B). NOT: Sert damağın net bir şekilde açıkta olduğundan emin olun. Sonraki deneyler sırasında görüş alanının engellenmesini ve yanmasını önlemek için dili lastik bandın altına sabitleyin.</li>
	</ol></li>
	<li>Sert damakta oronazal fistül (ONF) oluşturun (Şekil 3A-F).<ol><li>20 dakika boyunca 250 ° C'ye ısıtılmış oftalmolojik koterleri alın. Koter ucunu, damağın orta hattı ile birinci premolar hattının kesişme noktasından 1 mm uzağa yerleştirin ve orta hatta sert damakta tam kalınlıkta bir mukozal yaralanma oluşturun. NOT: Farenin dilini haşlamaktan kaçının.</li>
		<li>Birkaç saniye sonra, koter ucunun etrafındaki mukoza beyazlaştığında oftalmolojik koteri çıkarın.</li>
		<li>Oftalmolojik koteri germinatöre yerleştirin ve 10 dakika boyunca 250 °C'ye ısıtmaya devam edin. Yarayı 2,0 mm uzunluğa ve 1,5 mm genişliğe ulaşana kadar kenarlarda büyütmek için önceki adımı tekrarlayın. NOT: Her uzatma, son yaralanmanın kenarını takip etmelidir. Yaralanmanın uzunluğunu ve genişliğini ölçmek için sürmeli bir kumpas kullanın. Yaralanma damağın %10'unu kaplamalıdır.</li>
		<li>Yaranın etrafındaki fazla denatüre yumuşak dokuyu çıkarmak için mikrocerrahi makas kullanın. Kanamayı durdurmak ve farenin solunmasını önlemek için steril pamuk kullanın. Orta hatta 2.0 x 1.5 mm ölçülerinde tam kalınlıkta sert damak mukozal yaralanması oluşturduğundan emin olmak için yarayı ölçün.</li>
	</ol></li>
</ol>3. Ameliyat sonrası bakım
<ol><li>Ameliyat sonrası uyanma sırasında fareye Meloksikam'ı 3 gün boyunca 5 mg / kg / gün dozunda, deri altındanuygulayın 29.</li>
	<li>Fareyi, bilincini tamamen geri kazanana kadar bir sıcaklık bakım cihazına yerleştirin. NOT: Farenin nefes almayı kolaylaştıracak şekilde yerleştirildiğinden emin olun. Kan birikmesini veya akciğer loblarının çökmesini önlemek için fareleri her 10-15 dakikada bir döndürün. Fare ısındıktan sonra kafesine geri koyun. Farelerin tüketmesi için kafesin dibinde steril jöle ve ışınlanmış yem sağlayın.</li>
</ol>4. Oronazal fistül oluşumunun doğrulanması
NOT: Oronazal fistül (ONF) oluşturma başarısı cerrahi işlemi takip eden 7. günde değerlendirilir.
<ol><li>Gerekli cerrahi malzemeleri hazırlayın: lastik bant, bant, şırıngalar, cerrahi örtüler, lateks eldivenler, steril çarşaflar, steril metal folyo ve köpük levha.</li>
	<li>Aseptik koşulları korumak için cerrahi örtüler ve steril eldivenler giyin. Köpük levhayı, ışık kaynağını ve sıcaklık bakım cihazını alkolle dezenfekte edin.</li>
	<li>Zoletil50'nin (80 mg / kg) intraperitoneal enjeksiyonu ile genel anesteziyi indükleyin. Ayak parmağını kıstırma tepkisi kalmayana kadar bekleyin. Fareyi hareketsiz hale getirmek ve sert damağı ortaya çıkarmak için adım 2.1.3 ve 2.1.4'te açıklanan yöntemin aynısını kullanın.</li>
	<li>Septumun yara bölgesinde hala görünür olduğundan emin olarak anatomik yapısal doğrulama yapın, bu da başarılı ONF oluşumunu gösterir (Şekil 4A, B).</li>
	<li>İşlevsel doğrulama yapın: farenin ağız boşluğunu kapatın ve steril bir şırınga kullanarak ağız boşluğuna steril su enjekte edin. ONF'nin başarılı bir şekilde oluşturulması, farenin burun deliklerinden sıvı aktığında doğrulanır.</li>
	<li>Fareyi, bilinci tamamen yerine gelene kadar sıcaklık bakım cihazına (37 °C) yerleştirin. Kan birikmesini veya akciğer loblarının çökmesini önlemek için fareleri her 10-15 dakikada bir döndürün.</li>
</ol>

Oronazal Fistülleri İncelemek İçin Etkili Bir Fare Modelinin Geliştirilmesi

<ol>
	<li>Alonso, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-layered+repair+with+a+collagen+membrane+and+a+mucosal+rotational+flap+reinforced+with+fibrine+for+palatal+fistula+closure+in+children.">Three-layered repair with a collagen membrane and a mucosal rotational flap reinforced with fibrine for palatal fistula closure in children.</a> International Journal of Pediatric Otorhinolaryngology. 127, 109679 (2019).</li><li>Garg, R., Shah, S., Uppal, S., Mittal, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+statistical+analysis+of+incidence,+etiology,+and+management+of+palatal+fistula.">A statistical analysis of incidence, etiology, and management of palatal fistula.</a> National Journal of Maxillofacial Surgery. 10 (1), 43-46 (2019).</li><li>Mahajan, R. K., Kaur, A., Singh, S. M., Kumar, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+retrospective+analysis+of+incidence+and+management+of+palatal+fistula.">A retrospective analysis of incidence and management of palatal fistula.</a> Indian Journal of Plastic Surgery. 51 (3), 298-305 (2018).</li><li>Huang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+the+Chinese+Velopharyngeal+Insufficiency+Effects+on+Life+Outcomes+Instrument.">Validation of the Chinese Velopharyngeal Insufficiency Effects on Life Outcomes Instrument.</a> Laryngoscope. 129 (11), E395-E401 (2019).</li><li>Sakran, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+Postoperative+Outcomes+in+Two+Cleft+Palate+Repair+Techniques+without+Relaxing+Incisions.">Evaluation of Postoperative Outcomes in Two Cleft Palate Repair Techniques without Relaxing Incisions.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. , (2023).</li><li>Sakran, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+late+cleft+palate+repair+by+a+modified+technique+without+relaxing+incisions.">Evaluation of late cleft palate repair by a modified technique without relaxing incisions.</a> Journal of Stomatology, Oral and Maxillofacial Surgery. 124 (4), 101403 (2023).</li><li>Sakran, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Sommerlad-Furlow+modified+palatoplasty+technique:+postoperative+complications+and+implicating+factors.">The Sommerlad-Furlow modified palatoplasty technique: postoperative complications and implicating factors.</a> Laryngoscope. 133 (4), 822-829 (2023).</li><li>Sakran, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+cleft+palate+repair+by+a+modified+technique+without+relaxing+incisions.">Early cleft palate repair by a modified technique without relaxing incisions.</a> The Cleft Palate-Craniofacial Journal. , (2022).</li><li>Chen, J., Yang, R., Shi, B., Xu, Y., Huang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obturator+manufacturing+for+oronasal+fistula+after+cleft+palate+repair:+a+review+from+handicraft+to+the+application+of+digital+techniques.">Obturator manufacturing for oronasal fistula after cleft palate repair: a review from handicraft to the application of digital techniques.</a> Journal of Functional Biomaterials. 13 (4), 251 (2022).</li><li>Yussif, N., Wagih, R., Selim, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Propylene+mesh+versus+acrylic+resin+stent+for+palatal+wound+protection+following+free+gingival+graft+harvesting:+a+short-term+pilot+randomized+clinical+trial.">Propylene mesh versus acrylic resin stent for palatal wound protection following free gingival graft harvesting: a short-term pilot randomized clinical trial.</a> BMC Oral Health. 21 (1), 208 (2021).</li><li>Miron, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-rich+fibrin+and+soft+tissue+wound+healing:+a+systematic+review.">Platelet-rich fibrin and soft tissue wound healing: a systematic review.</a> Tissue Engineering Part B: Reviews. 23 (1), 83-99 (2017).</li><li>Ballestas, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+hard+palate+wound+healing+using+immune+modulatory+autotherapies.">Improving hard palate wound healing using immune modulatory autotherapies.</a> Acta Biomaterialia. 91, 209-219 (2019).</li><li>Ferreira, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrical+stimulation+enhances+early+palatal+wound+healing+in+mice.">Electrical stimulation enhances early palatal wound healing in mice.</a> Archives of Oral Biology. 122, 105028 (2021).</li><li>Lindley, L. E., Stojadinovic, O., Pastar, I., Tomic-Canic, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biology+and+Biomarkers+for+Wound+Healing.">Biology and Biomarkers for Wound Healing.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 138 (3 Suppl), 18s-28s (2016).</li><li>Xu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+Additive+Manufacturing+of+a+Superlight+Obturator+for+Large+Oronasal+Fistula+in+Pediatric+Patient.">Rapid Additive Manufacturing of a Superlight Obturator for Large Oronasal Fistula in Pediatric Patient.</a> Laryngoscope. 133 (6), 1507-1512 (2022).</li><li>Leenstra, T. S., Kuijpers-Jagtman, A. M., Maltha, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+healing+process+of+palatal+tissues+after+palatal+surgery+with+and+without+implantation+of+membranes:+an+experimental+study+in+dogs.">The healing process of palatal tissues after palatal surgery with and without implantation of membranes: an experimental study in dogs.</a> Journal of Materials Science: Materials in Medicine. 9 (5), 249-255 (1998).</li><li>In de Braekt, M. M., van Alphen, F. A., Kuijpers-Jagtman, A. M., Maltha, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wound+healing+and+wound+contraction+after+palatal+surgery+and+implantation+of+poly-(L-lactic)+acid+membranes+in+beagle+dogs.">Wound healing and wound contraction after palatal surgery and implantation of poly-(L-lactic) acid membranes in beagle dogs.</a> Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 50 (4), 359-365 (1992).</li><li>Suragimath, G., Krishnaprasad, K. R., Moogla, S., Sridhara, S. U., Raju, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+carbonated+drink+on+excisional+palatal+wound+healing:+A+study+on+Wistar+rats.">Effect of carbonated drink on excisional palatal wound healing: A study on Wistar rats.</a> Indian Journal of Dental Research. 21 (3), 330-333 (2010).</li><li>Zhu, T., Park, H. C., Son, K. M., Yang, H. -. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+dimethyloxalylglycine+on+wound+healing+of+palatal+mucosa+in+a+rat+model.">Effects of dimethyloxalylglycine on wound healing of palatal mucosa in a rat model.</a> BMC Oral Health. 15 (1), 60 (2015).</li><li>Kirschner, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repair+of+oronasal+fistulae+with+acellular+dermal+matrices.">Repair of oronasal fistulae with acellular dermal matrices.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 118 (6), 1431-1440 (2006).</li><li>Rohleder, N. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repair+of+oronasal+fistulae+by+interposition+of+multilayered+amniotic+membrane+allograft.">Repair of oronasal fistulae by interposition of multilayered amniotic membrane allograft.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 132 (1), 172-181 (2013).</li><li>Kesting, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repair+of+oronasal+fistulas+with+human+amniotic+membrane+in+minipigs.">Repair of oronasal fistulas with human amniotic membrane in minipigs.</a> British Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 48 (2), 131-135 (2010).</li><li>Ayvazyan, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collagen-gelatin+scaffold+impregnated+with+bFGF+accelerates+palatal+wound+healing+of+palatal+mucosa+in+dogs.">Collagen-gelatin scaffold impregnated with bFGF accelerates palatal wound healing of palatal mucosa in dogs.</a> Journal of Surgical Research. 171 (2), e247-e257 (2011).</li><li>Takao, K., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomic+responses+in+mouse+models+greatly+mimic+human+inflammatory+diseases.">Genomic responses in mouse models greatly mimic human inflammatory diseases.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (4), 1167-1172 (2015).</li><li>Rongvaux, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+function+of+human+innate+immune+cells+in+a+humanized+mouse+model.">Development and function of human innate immune cells in a humanized mouse model.</a> Nature Biotechnology. 32 (4), 364-372 (2014).</li><li>Shan, L., Flavell, R. A., Herndler-Brandstetter, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+humanized+mouse+models+for+studying+human+NK+cells+in+health+and+disease.">Development of humanized mouse models for studying human NK cells in health and disease.</a> Methods in Molecular Biology. 2463, 53-66 (2022).</li><li>Keswani, S. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+salivary+vascular+endothelial+growth+factor+(VEGF)+in+palatal+mucosal+wound+healing.">Role of salivary vascular endothelial growth factor (VEGF) in palatal mucosal wound healing.</a> Wound Repair and Regeneration. 21 (4), 554-562 (2013).</li><li>Amanso, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+delivery+of+FTY720+induces+neutrophil+activation+through+chemokine+signaling+in+an+oronasal+fistula+model.">Local delivery of FTY720 induces neutrophil activation through chemokine signaling in an oronasal fistula model.</a> Regenerative Engineering and Translational Medicine. 7 (2), 160-174 (2021).</li><li>Antiorio, A. T. F. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Administration+of+meloxicam+to+improve+the+welfare+of+mice+in+research:+a+systematic+review+(2000+-+2020).">Administration of meloxicam to improve the welfare of mice in research: a systematic review (2000 - 2020).</a> Veterinary Research Communications. 46 (1), 1-8 (2022).</li></ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.

Araştırmacılar, ONF 10,11,12,13,14,15,16,17'yi tedavi etmek için çeşitli materyaller, ilaçlar ve yeni teknikler araştırdılar. Cerrahi işlemlerdeki gelişmelerle ONF'nin insidansı ve nüksü azalmıştır. Bununla birlikte, hastalığın benzers...

Oral ve nazal boşluklar arasında anormal bir açıklık olan oronazal fistül (ONF), klinik olarak alveoler süreçten uvulaya kadar olan yapısal bir alanda defekt olarak kendini gösterir ve genellikle yarık damak onarımını takiben bir komplikasyon olarak ortaya çıkar1. ONF'li hastalar gıda reflüsü, artikülasyon bozuklukları ve bozulmuş velofaringeal fonksiyon yaşarlarve bu da yaşam kalitelerini önemli ölçüde etkiler 2,3,4. Yarık genişliği, Veau tipi, cerrahi yöntem 5,6,7,8 gibi faktörlere bağlı olarak postoperatif ONF oranı %2,4 ile %55 arasında değişmektedir. Ek olarak, ONF onarımı sonrası nüks oranı yüksektir ve %0 ile %43 arasında değişmektedir9.
Son zamanlarda ONF alanında farklı materyaller, ilaçlar ve yeni tekniklerdahil olmak üzere birçok yeni tedavi umut vaat etmektedir 10,11,12,13,14,15,16,17. Terapötik etkilerin doğru değerlendirilmesi, ONF tedavilerinin seçilmesi ve daha da geliştirilmesi için temel oluşturduğu için esastır. Bununla birlikte, ONF'lerin özellikleri farklı hastalar arasında farklılık gösterdiğinden, ameliyat dışındaki terapötik etkiler için kısa vadede geçerli bir değerlendirme elde etmek zordur. Bu nedenle, bu tedavi yöntemlerinin etkinliğini doğrulamak için bir ONF hastalığı modeli oluşturmak gereklidir.
Birkaç on yıl boyunca, araştırmacılar sıçanlar18,19, domuz yavruları20,21, mini domuzlar 22 ve köpekler23 dahil olmak üzere çeşitli hayvan türlerinde oronazal fistül (ONF) modelini oluşturdular, çünkü bu türler cerrahi manipülasyon için uygun önemli bir sert damağa sahiptir. Bununla birlikte, fareler, insanlarınkine benzer bir genetik diziye ve tüm genoma sahiptir, bu da onları yeni ilaçların araştırılması ve geliştirilmesi için önemli bir model haline getirir24,25,26. Ayrıca, fareler partiden partiye çok az varyasyon sunar, bu da onları ONF modeli 12,13,27'yi oluşturmak için uygun bir seçim haline getirir.
Bununla birlikte, ONF oluşturmak için ayrıntılı adımlar açıklanmadı ve ONF boyutunun kararlılığı dikkate alınmadı. Ek olarak, ONF oluşumunun doğrulanması, ağız ve burun boşlukları arasında doğrudan iletişim sağlamadan yalnızca gözlem28'e dayanıyordu. ONF'nin neden olduğu yeme güçlüğü nedeniyle farenin vücut ağırlığını kaybetmesi gibi başka yollarla gösterilmedi. Ayrıca, yara iyileşmesini destekleyen veya engelleyen ilaçlar veya materyaller üzerinde yapılan çalışmalar için çok önemli olan yara boyutundaki normal varyasyon dikkate alınmamıştır. Bu nedenle, kararlı ve doğrulanmış bir ONF modeli oluşturmaya güçlü bir ihtiyaç vardır.
Bu çalışmanın amacı, bu protokolün damak yara iyileşmesi mekanizmaları ve ONF için yeni tedaviler üzerine gelecekteki araştırmalar için temel oluşturacağı umuduyla, yukarıda belirtilen sorunları ele alan pratik bir ONF modeli geliştirmekti.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Germinator</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences&#160;</td>
			<td>66118-20</td>
			<td>Heating and disinfection equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Latex gloves</td>
			<td>Allmed</td>
			<td></td>
			<td>or similar</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lights</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>A1813</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam</td>
			<td>MedChemExpress</td>
			<td>HY-B0261</td>
			<td>crushed; 5 mg/kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgical instruments (scissors and tweezers)</td>
			<td>Jiangsu Tonghui Medical Devices Co.</td>
			<td>M-Y-0087</td>
			<td>Surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmologic cautery</td>
			<td>Suqian Wenchong Medical Equipment Co.</td>
			<td>1.00234E+13</td>
			<td>Surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile cotton,</td>
			<td>Yancheng Begu Technology Co.</td>
			<td></td>
			<td>or similar</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile metal foil</td>
			<td>Biosharp</td>
			<td></td>
			<td>or similar</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile sheets</td>
			<td>3M</td>
			<td>XH003801129</td>
			<td>or similar</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical drapes</td>
			<td>Yancheng Begu Technology Co.</td>
			<td></td>
			<td>or similar</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes</td>
			<td>Yancheng Begu Technology Co.</td>
			<td>S-015301</td>
			<td>or similar</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tape</td>
			<td>Bkmamlab</td>
			<td></td>
			<td>or similar</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temperature maintenance device</td>
			<td>Harvard Apparatus&#160;</td>
			<td>LE-13-2104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zoletil50</td>
			<td>Virbac</td>
			<td></td>
			<td>80 mg/kg</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

establishment of an oronasal fistula mice model

Bu çalışmada oronazal fistüllerin araştırılmasında uygulanabilir bir model geliştirmek için ısıtılmış oftalmolojik koter kullanılan bir yöntem sunulmuştur. Oronazal fistül (ONF) modelini oluşturmak için C57BL/6 fareler kullanıldı. ONF'yi oluşturmak için fareler uyuşturuldu, hareketsiz hale getirildi ve sert damakları açığa çıkarıldı. Cerrahi işlem sırasında oftalmolojik koter kullanılarak sert damak orta hattında 2.0 x 1.5 mm boyutlarında tam kat mukozal yaralanma indüklendi. Deneyin başarısını sağlamak için ONF'nin boyutunu kontrol etmek ve kanamayı en aza indirmek çok önemliydi. ONF modelinin etkinliğinin doğrulanması, hem anatomik hem de fonksiyonel değerlendirmeleri kapsayacak şekilde ameliyattan sonraki 7. günde gerçekleştirildi. Oral kavite içinde nazal septumun varlığı ve oral kaviteye enjeksiyon üzerine burun deliklerinden steril su çıkışı, ONF modelinin başarılı bir şekilde kurulduğunu doğruladı. Model, düşük mortalite oranı, önemli ağırlık değişiklikleri ve ONF boyutunda minimal varyasyon ile karakterize pratik ve başarılı bir oronazal fistül gösterdi. Gelecekteki çalışmalar, damak yara iyileşmesinin mekanizmalarını aydınlatmak ve oronazal fistüller için yeni tedavileri keşfetmek için bu metodolojiyi benimsemeyi düşünebilir.

Oronasal fistula (ONF), an abnormal opening between the oral and nasal cavities, clinically manifests as a defect in a structural area from the alveolar process to the uvula, which commonly occurs as a complication following cleft palate repair1. Patients with ONF experience food reflux, articulation disorders, and impaired velopharyngeal function, significantly impacting their quality of life2,3,4. The rate of post-operative ONF ranges from 2.4% to 55% due to factors such as cleft width, Veau type, and surgical method5,6,7,8. Additionally, the recurrence rate after ONF repair is high, ranging from 0% to 43%9.
Several novel treatments have recently shown promise in the field of ONF, including different materials, drugs, and novel techniques10,11,12,13,14,15,16,17. Accurate evaluation of therapeutic effects is essential as it provides the basis for selecting and further developing ONF treatments. However, obtaining a valid assessment in the short term for therapeutic effects other than surgery is challenging, as the characteristics of ONFs vary among different patients. Therefore, establishing an ONF disease model is necessary to verify the effectiveness of these treatment methods.
For several decades, researchers have generated the oronasal fistula (ONF) model in various animal species, including rats18,19, piglets20,21, minipigs22, and dogs23, as these species possess a substantial hard palate suitable for surgical manipulation. However, mice have a genetic sequence and whole genome similar to that of humans, making them an important model for researching and developing new drugs24,25,26. Furthermore, mice offer little variation from batch to batch, making them a favorable choice for establishing the ONF model12,13,27.
However, the detailed steps for creating ONF were not described, and the stability of the ONF size was not taken into consideration. Additionally, the verification of ONF formation relied solely on observation28, without ensuring direct communication between the oral and nasal cavities. It was not demonstrated through other means, such as the mouse&#39;s loss of body weight due to difficulties in eating caused by the ONF. Furthermore, normal variation in wound size was not considered, which is crucial for studies on drugs or materials that promote or inhibit wound healing. Therefore, there is a strong need to establish a stable and validated ONF model.
The objective of this study was to develop a practical ONF model that addresses the aforementioned issues, with the hope that this protocol will serve as the foundation for future research on the mechanisms of palatal wound healing and novel treatments for ONF.

Yazar Spotlight: Oronasal Fistüllerin Fare Modellerinde Yara İyileşmesinin Araştırılması 

Oronazal Fistül Fare Modelinin Oluşturulması

Our research has focused on how to establish the stable and standardized mouse model of oronasal fistula. This protocol has also demonstrated the body weight changes, wound size changes, and the histologic features of the oral nasal fistula formation. The current experimental challenges of establishing oronasal fistula models are the mice mortality by suffocation or blood loss as well as the standardization of the wound size.Our protocol significantly reduces the amount of bleeding in mice during surgery relative to the traditional use of a biopsy punch. This reduces the risk of suffocation due to severe bleeding. Additionally, our experimental method is also simpler and less technically sensitive.Our future research aims to focus on observing the inflammatory response during oronasal fistula formation. We also plan on developing novel strategies to reduce the inflammatory response while promoting palatal wound healing to reduce the incidence of oronasal fistula.

Bu deneysel yöntemin fizibilitesini ve stabilitesini değerlendirmek için on fare üzerinde aynı prosedür uygulandı ve mortalite, yara boyutundaki değişiklikler, vücut ağırlığı ve histolojik analiz ile ilgili gözlemler yapıldı. Farelere 7. günde ötenazi uygulandı.
Prosedür düşük bir mortalite oranı sergiledi. Şekil 1A-C'de gösterilen oftalmolojik koter ve germinatör, bu deneyde kullanılan anahtar araçl...

Watch this Scientific Journal Video about Investigating Wound Healing in Mice Models of Oronasal Fistulas at JoVE.com

Bu makale, oronazal fistüllü bir fare modeli oluşturmak için adım adım bir prosedürü özetlemektedir. Oronazal fistül, sert damağın orta hat kısmına zarar vermek için ısıtılmış oftalmolojik koter kullanılarak oluşturulmuştur ve bu da ağız ve burun boşlukları arasında bir açıklık oluşmasına neden olur.

This study presents a method utilizing heated ophthalmologic cautery to develop a viable model for investigating oronasal fistulas. C57BL/6 mice were used ...

Araştırmamız, oronazal fistülün stabil ve standartlaştırılmış fare modelinin nasıl oluşturulacağına odaklanmıştır. Bu protokol aynı zamanda vücut ağırlığı değişikliklerini, yara büyüklüğü değişikliklerini ve oral nazal fistül oluşumunun histolojik özelliklerini de göstermiştir. Oronazal fistül modellerinin oluşturulmasındaki mevcut deneysel zorluklar, farelerin boğulma veya kan kaybı ile mortalitesinin yanı sıra yara boyutunun standardizasyonudur.Protokolümüz, geleneksel biyopsi zımbası kullanımına kıyasla ameliyat sırasında farelerde kanama miktarını önemli ölçüde azaltır. Bu, şiddetli kanama nedeniyle boğulma riskini azaltır. Ek olarak, deneysel yöntemimiz de daha basit ve teknik olarak daha az hassastır.Gelecekteki araştırmalarımız, oronazal fistül oluşumu sırasında inflamatuar yanıtı gözlemlemeye odaklanmayı amaçlamaktadır. Ayrıca, oronazal fistül insidansını azaltmak için damak yara iyileşmesini teşvik ederken inflamatuar yanıtı azaltmak için yeni stratejiler geliştirmeyi planlıyoruz.

establishment-of-an-oronasal-fistula-mice-model

Research

JoVE Journal

Medicine

Establishment of an Oronasal Fistula Mice Model

812 Görüntüleme.  Sichuan University. Araştırmamız, oronazal fistülün stabil ve standartlaştırılmış fare modelinin nasıl oluşturulacağına odaklanmıştır. Bu protokol aynı zamanda vücut ağırlığı değişikliklerini, yara büyüklüğü değişikliklerini ve oral nazal fistül oluşumunun histolojik özelliklerini de göstermiştir. Oronazal fistül modellerinin oluşturulmasındaki mevcut deneysel zorluklar, farelerin boğulma veya kan kaybı ile mortalitesinin yanı sıra yara boyutunun standardizasyonudur.