Sağlanan enstrümantasyon ve laboratuvar için minnettarız, Çin İç Moğol Tıp Üniversitesi'nin Moğol tıp fakültesine şükranlarımızı sunuyoruz.Bu çalışma, gerekli enstrümantasyon ve laboratuvar olanaklarını sağlamak için desteklenmiştir. Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı'ndan (Hibe No. 81760762) ve Çin İç Moğolistan Tıp Üniversitesi Projesi'nden (Hibe No. YKD2022MS074) ve İç Moğolistan, Çin'deki Yüksek Öğretim Bilimsel Araştırma Projesi (Hibe No. NJZY22661) ve İç Moğolistan Özerk Bölgesi, Çin'deki Çin ve Moğol Tıbbı Anahtar Laboratuvarı Açık Fon Projesi (Hibe No. MYX2023-K07).

Deney protokolleri, İç Moğolistan Tıp Üniversitesi (YKD202301172) Hayvan Deneyi Bakım Etiği Komitesi'nden onay aldı ve hayvan bakımı ve etiği için Ulusal Sağlık Enstitüleri yönergelerine bağlı kaldı. Hayvan merkezimizin lisans numarası NO.110324230102364187'dir. Her biri 8 haftalık (200 ±g ila 20 g) yirmi dört erkek Sprague-Dawley (SD) sıçanı alındı ve 22 ° C ± 2 ° C sıcaklık ve% 55 ± % 15 nem ile kontrollü bir ortamda barındırıldı. Fareleri kemirgen bakım yemi diyeti ve yatak takımları için mısır koçanı ile saf su ile besleyin. Sıçanlar, deneyden önce 1 hafta boyunca 12 saat / 12 saat aydınlık / karanlık döngüsüne tabi tutuldu.
1. CUMS sıçan modelinin kurulması
<ol><li>Grup -landırma<ol><li>24 fareyi rastgele 2 gruba ayırın: izolasyon veya strese maruz kalmayacak kontrol (CON) grubu ve model (MOD) grubu. Her grup 12 sıçan içerir.</li>
		<li>Fareleri, kafes başına 6 sıçan olacak şekilde 55 cm x 40 cm x 20 cm ölçülerinde standart kafeslerde barındırın. Aksi belirtilmedikçe, iklimlendirme süresi boyunca kafes atamasını koruyun.</li>
		<li>Her yetiştirme kafesini yeni yataklarla doldurun ve haftada iki kez değiştirin.</li>
		<li>1 haftalık bir iklimlendirme periyodu gerçekleştirin. CUMS stres etkeni uygulaması dışında, sıçanların yiyecek ve suya sınırsız erişimine izin verin. Aksi belirtilmedikçe, 22°C ± 2°C sıcaklık, %55 ± %15 nem ve 08:00 ile 20:00 arasında 12 saat/12 saat aydınlık/karanlık döngüsü ile sabit bir ortam sağlayın.</li>
		<li>Deneyi başlatmadan önce, fareleri araştırmacıya alıştırmak ve deney aşamasında ek stresi en aza indirmek için günlük olarak kullanın.</li>
	</ol></li>
	<li>Kronik, öngörülemeyen hafif stres ile izolasyon<ol><li>Aynı anda MOD ve CON gruplarını ayrı odalara yerleştirin. CON grubu sıçanları bir arada tutarken, MOD grubu sıçanları ayrı ayrı barındırın. Diğer tüm koşulları sabit tutun.</li>
		<li>28 günlük bir stres rejimi uygulayın25. Alışkanlığı önlemek ve stresörün öngörülemezliğini sağlamak için, aynı stres etkenini ardışık günlerde kullanmaktan kaçınarak günde rastgele bir stres etkeni uygulayın.</li>
		<li>Aşağıdaki dokuz stres faktöründenbirini 26,27 farklı günlerde rastgele uygulayın: 24 saat su yoksunluğu, 24 saat gıda yoksunluğu, ıslak dolgu, kafes eğimi, aydınlık/karanlık döngüsünün tersine çevrilmesi, 4 °C'de soğuğa maruz kalma, 45 °C'de ısıya maruz kalma, 1 dakika kuyruk sıkıştırma veya 160 rpm'de 15 dakika sallama. Spesifik tasarım Tablo 1'de özetlenmiştir.</li>
		<li>Stres etkeninin uygulanması sırasında, aydınlık/karanlık döngüsünün tersine çevrilmesi dışında, stres bitene kadar MOD grubuna yiyecek ve suya erişimi kısıtlayın. CON grubunun su ve diyeti kısıtlamasına gerek yoktu.</li>
	</ol></li>
	<li>Stres yöntemleri<ol><li>Kontrol grubu hariç tüm sıçanlara 28 günlük izolasyon ile birlikte depresyon uyaranları uygulayarak deneyi başlatın. Bu fareleri ayrı kafeslerde barındırın. Depresyon uyaranlarıyla ilgili durumlar için Tablo 2'ye bakın.</li>
		<li>Kuyruk kelepçesi yöntemini gerçekleştirmek için, bir sıçanın kuyruğunu, sıçanın kuyruğunun kökünden 1-2 cm mesafede standart bir ataşla sıkıştırarak MOD grubundan sabitleyin. Sıkıştırma süresini 1 dakikalık bir süre boyunca ölçün (n = 12).</li>
		<li>Su yoksunluğu yönteminde, su şişesini çıkararak bir MOD grubu sıçandan suyu alıkoyun ve 24 saat boyunca kaydedin. NOT: Su yoksunluğunun başlama zamanı, bitiş zamanının doğru bir şekilde hesaplanabilmesi için kaydedilmiştir; Bu dönemde sıçanların davranışları, aktivite, iştah ve zihinsel durum dahil olmak üzere gözlendi.</li>
		<li>Yiyecek yoksunluğu yönteminde, yiyecekleri bir MOD grubu sıçandan alıkoyun ve 24 saat boyunca kaydedin. NOT: Bitiş zamanının doğru bir şekilde hesaplanabilmesi için gıda yoksunluğunun başladığı zamanı kaydedin; bu süre zarfında sıçanların yeterince su içtiğinden emin olun; ve bu süre zarfında farelerin davranışlarını, aktivite ve zihinsel durum vb. dahil olmak üzere gözlemleyin.</li>
		<li>4 ° C'de soğuk stimülasyon için, MOD grubundan bir fareyi bir kova soğuk suya koyun ve 5 dakika kaydedin. Test boyunca su sıcaklığının sabit kaldığından emin olun. Deneyin sonunda, fareyi bir üfleyici ile kurulayın ve orijinal kafesine geri koyun. NOT: Yükseldiğinde su sıcaklığını düzenlemek için bir termometre ve buz küpleri kullanarak soğuk su sıcaklığını 4 °C'de tutun. Su kalitesinin temiz ve sıcaklığın sabit olmasını sağlamak için su düzenli olarak değiştirilmelidir. Yüzerken, sıçanların tüm uzuvları ve gövdeleri baş hariç soğuk suya batırılmalıdır. Kovanın dibiyle temas nedeniyle sıçanın sudan atlamasını önlemek için suyun derinliği sıçanın vücudunun uzunluğundan daha büyük olmalıdır.</li>
		<li>45 ° C ısı stresi uygulamak için, bir MOD grubu sıçanı bir inkübatöre yerleştirin ve sıcaklığın test boyunca sabit kalmasını sağlayarak 5 dakika boyunca kaydedin.</li>
		<li>Aydınlık-karanlık döngüsünün tersine çevrilmesinde, gündüz karanlığını simüle etmek için kafesi 1 saat boyunca siyah bir bezle sarın. Ardından, gün ışığını taklit etmek için kafesi gece boyunca 12 saat aydınlatın. Farenin davranışını, yiyecek ve su alımını ve uyku düzenini 24 saat boyunca kaydedin.</li>
		<li>Islak dolgu deneyi için, 100 g dolgu içeren bir kafese 200 mL su verin. Islak kafeste bir MOD grubu sıçan barındırın ve sıçanların aktivite, iştah, su alımı vb. dahil olmak üzere ıslak yatak stresi altındaki davranışlarını kaydedin. Islak dolgunun neden olabileceği sıçanların cilt ve saç durumu gibi herhangi bir anormal davranış veya rahatsız edici reaksiyon olup olmadığını gözlemleyin ve 24 saat boyunca sonraki analizler için bunları zamanında kaydedin. Testin ardından, fareyi bir üfleyici ile kurulayın ve taze odun talaşı içeren bir kafese geri koyun.</li>
		<li>Kafes eğimi yönteminde, bir MOD grubu sıçanı bir duvara 45 ° açıyla eğilmiş bir kafese yerleştirin ve 24 saat boyunca kaydedin. Açıyı ayarlamak ve kafesi yerine sabitlemek için kafes çerçeve yapısını kullanın. NOT: Baştan sona geçen süreyi hesaplayın ve aktivite, iştah ve zihinsel durum dahil olmak üzere kafesin yatırılma süresi boyunca farelerin davranışlarını gözlemleyin ve eğik kafesin açısının doğru ayarlandığından ve deneyin doğruluğunu ve tekrarlanabilirliğini sağlamak için sabit kaldığından emin olun.</li>
		<li>Yüksek hızlı çalkalama için, 160 rpm'ye ayarlanmış mekanik bir çalkalayıcıya bir MOD grubu sıçan yerleştirin ve sıçanı 15 dakika boyunca kaydedin. Modelin başarılı bir şekilde kurulmasını değerlendirmek için daha sonra davranışsal test yöntemleri kullanılır.</li>
		<li>Stres faktörlerini uyguladıktan sonra, MOD grubu kafeslerini CUMS odasından muhafaza odasına geri taşıyın. 4 haftalık strese maruz kalma süresi boyunca, CON grubunu konut odasında bulunan ev kafeslerinde tutun.</li>
	</ol></li>
	<li>Deneyler sırasında alınacak önlemler<ol><li>CUMS odasında stres etkenini uyguladıktan sonra MOD grubunun kafeslerini genel konut odasına geri aktarın.</li>
		<li>CUMS modellemesi sırasında hayvan izleme<ol><li>Kuyruk kelepçeleme sırasında, hayvanın indüklenen stimülasyon nedeniyle mücadele etmesi muhtemeldir. Bu süre boyunca, kelepçeyi sürekli olarak izleyin. Yerinden çıkarsa, zamanlayıcıyı duraklatın, kelepçeyi yeniden uygulayın ve ardından zamanlayıcıyı 1 dakika devam ettirin.</li>
			<li>Su yoksunluğu ve ıslak yatak stresörlerini aynı anda uygulamayın. NOT: Islak dolgu ve su yoksunluğunun aynı anda uygulanmasından kaçınmak, deneysel bütünlüğün korunmasına yardımcı olur, kafa karıştırıcı değişkenleri azaltır ve hayvan refahını destekler.</li>
			<li>Hayvanın vücut ısısı ve ortam oda sıcaklığı, soğuk suda yüzme sırasında su sıcaklığını yükseltebilir. Bu nedenle, sabit bir su sıcaklığını korumak için buzlu su veya buz küpleri ekleyerek ayarlayın.</li>
			<li>Stresörlerin uygulanması sırasında, günlük tersine çevirme dışında, sıçanları 30 dakikalık aralıklarla gözlemleyin. Titreme, uyuşukluk veya hareket eksikliği gibi olağandışı sıkıntı belirtilerine özellikle dikkat edin. Bu tür semptomlar gözlenirse - özellikle 4 ° C soğuk suda yüzme ve ıslak yatak takımları sırasında potansiyel hipotermi - fareyi derhal stres etkeninden uzaklaştırın. NOT: Enfeksiyon, şiddetli travma, agresif davranışlar, anormal hareketlilik vb. gibi sağlık sorunları olduğunda deney hayvanlarını çalışmadan çıkarın, Hayvanları çalışmadan çıkarma koşulları tipik olarak deney sonuçlarının bütünlüğünü sağlarken sağlıklarını ve güvenliklerini koruma etrafında döner.</li>
			<li>Her sıçanda yaralar veya diğer fiziksel veya davranışsal anormallikler için günlük denetimler yapın. Herhangi bir anormallik gözlenirse, farenin deneyden çıkarılması gerekip gerekmediğini belirlemek için laboratuvar veterinerine danışın.</li>
			<li>Her fareyi her 3 günde bir tartın. Bir hayvan, beslenme öncesi bazal vücut ağırlığının% 20'sinden fazlasını kaybederse, deneyden çıkarılmalıdır.</li>
		</ol></li>
	</ol></li>
</ol>2. Davranış testleri
<ol><li>Başlamak için, depresyon uyaranlarını, kontrol grubu hariç tüm sıçanlara 28 gün boyunca izolasyonla birlikte uygulayın. Fareleri ayrı kafeslerde barındırın. Depresyon uyaran koşullarıyla ilgili ayrıntılar için Tablo 2'ye bakın.</li>
	<li>Açık alan testi için, bir kara kutuyu eşit alanlı 25 kare parçaya bölün. Kutuya bir video izleme analiz sistemi kurun. Fareyi merkezi kareye yerleştirin ve yatay ve dikey aktivitelerini 5 dakika boyunca izleyin. NOT: Kutunun boyutları 500 mm x 500 mm x 300 mm'dir. Aktivite verileri, yeni bir ortama maruz kaldıklarında kemirgenlerde kaygı ile ilgili davranışları değerlendirmek için video izleme sistemi kullanılarak toplanacaktır.</li>
	<li>Daha sonra, yatay aktiviteyi ölçmek için tüm pençeleri kullanarak sıçan tarafından geçilen karelerin sayısını hesaplayın. Dikey aktivitenin göstergeleri olarak ayakta durma ve tımar etme örneklerini sayın. Her testten sonra, sonraki testler için kalan fare kokularını ortadan kaldırmak için kutuyu %75 alkol kullanarak sterilize edin.</li>
	<li>Daha sonra, anhedoni sükroz tercih testi ile değerlendirilir. Kafes kapağına iki şişe yerleştirin: A şişesi saf su içerirken, B şişesi %1 sükroz çözeltisi içerir. Sıçan için her iki çözüme de ad libitum erişimine izin verin. 0, 7, 14, 21 ve 28. günlerde 60 dakikalık sükroz tercih oranlarını hesaplamak için şişeleri tüketmeden önce ve sonra tartın. Formül aşağıdaki gibidir: Sükroz tüketimi = <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/65889/65889eq01.jpg" style="margin: auto;"> × %100</li>
	<li>Uzamsal hafızayı ve öğrenme yeteneklerini ölçmek için Morris su labirenti testini kullanın. Havuzu dört çeyreğe bölün ve bunları birden dörde kadar numaralandırın. Üçüncü çeyrekte su yüzeyinin 1 cm altına batık bir dinlenme platformu yerleştirin.</li>
	<li>Su opaklığını artırmak ve deney prosedürü boyunca yaklaşık 23 ° C'lik bir su sıcaklığını korumak için havuza süt verin.</li>
	<li>Her fareyi labirentin çeşitli kadranlarına yerleştirin ve gizli platformu bulmaları için 120 saniye bekleyin. Fareler, platformun konumunu hatırlamak için uzamsal hafızaya ve öğrenme becerilerine güvenmelidir. Platformun konumunu öğrendikten sonra doğrudan ona yüzebilirler. Morris su labirenti video izleme sistemini kullanarak gecikme süresini kaydedin.</li>
	<li>Fareyi havuzda sabit bir yere yerleştirin. Konu 120 saniye içinde gizli platformu bulamazsa, gecikmeyi 120 saniye olarak kaydedin.</li>
	<li>Son olarak, gizli platformu çıkarın, fareyi tekrar suya yerleştirin ve 120 sn'lik bir süre boyunca bölge geçişlerinin sayısını kaydedin.</li>
</ol>3. İstatistiksel analiz
<ol><li>Biyokimyasal parametrelerdeki önemli farklılıkları değerlendirmek için, tek yönlü varyans analizi (ANOVA) ve ardından Duncan'ın post hoc testini kullanın. Verileri ortalama ± standart hata (SE) olarak sunun ve 0,05'ten küçük bir p değerini istatistiksel olarak anlamlı kabul edin.</li>
</ol>

Kronik, Öngörülemeyen Hafif Stres Sıçan Modelinin Oluşturulması ve Doğrulanması

Yazarların açıklanacak herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Depresyon, düşük ruh hali, zevk eksikliği ve düşük enerji gibi semptomlarla karakterize zihinsel bir bozukluktur30. Depresyon araştırmaları alanında, terapötik müdahaleleri ilerletmek için güvenilir bir hayvan modelinin oluşturulması çok önemlidir. Çeşitli hayvan modelleri arasında, CUMS modeli, yüksek güvenilirliği, geçerliliği ve insan depresyonunun özellikleriyle uyumu nedeniyle özellikle dikkat çekicidir31. Çeşitli ortamlarda uzun bir sü...

Majör depresif bozukluk (MDB), dünya çapında üçüncü önde gelen engellilik nedeni olarak sıralanan ve 300 milyondan fazla insanı etkileyen yaygın bir akıl hastalığıdır1,2,3. Özellikle, etkilenen bireylerin en az yarısının yeterli tedavi almadığı tahmin edilmektedir4. Bu boşluk göz önüne alındığında, hayvan modelleri depresyonun etiyolojisini araştırmak için çok önemli bir araç olarak hizmet vermektedir. Bugüne kadar, depresyon için 20'den fazla farklı hayvan modeli bulunmaktadır5. Bunlar arasında, 1987 yılında Paul Winer tarafından rafine edilen kronik öngörülemeyen hafif stres (CUMS) modeli en sık kullanılanıdır6. CUMS modeli, kemirgenleri çok çeşitli sosyo-çevresel stres faktörlerine maruz bırakmanın anksiyete, gerginlik ve depresyona benzer semptomlara yol açtığı öncülüyle çalışır. Metodoloji, hayvanları birkaç hafta boyunca çeşitli hafif stres faktörlerine maruz bırakmayı içerir ve bu da anhedoni ve depresif benzeri davranışlar da dahil olmak üzere bir dizi davranış değişikliğiyle sonuçlanır7,8. Bu değişikliklere, 5-HT'de bir azalma gibi endokrin ve nörotransmitter profillerindeki kaymalar eşlik eder9,10. Bu sonuçlar, MDB teşhisi konan insanlarda gözlemlenenleri yakından yansıtır ve böylece modelin faydasını doğrular. CUMS modeli, antidepresanları değerlendirmede, yüksek düzeyde yüzeysel, yapısal ve öngörücü geçerlilik gösteren etkinliği nedeniyle özellikle değerlidir11,12. Diğer modellerden farklı olarak, CUMS, monoaminerjik antidepresanların kronik uygulamasının etkilerine karşı hassastır. Örneğin, sitalopram, paroksetin ve fluoksetin gibi seçici serotonin geri alım inhibitörlerinin (SSRI'lar) kronik stres koşulları altında anhedoniyi önlediği ve tersine çevirdiği gösterilmiştir12,13. Ek olarak, ketamin gibi yeni hızlı etkili antidepresanlar da bu modelde etkinlik göstermiştir14,15. Buna karşılık, zorla yüzme testi (FST) ve kuyruk süspansiyon testi (TST) gibi diğer testler, uzun vadeli davranış değişikliklerini modellemek için daha az güvenilirdir ve genellikle depresyon semptomlarına dayanmak yerine akut strese adaptasyonları yansıtır16. Bu özellikler, depresyon araştırmalarında CUMS modelinin sağlam geçerliliğinin altını çizmektedir. Klasik çalışmalarda yüksek güvenilirliği ile tanınan CUMS modelinin en göze çarpan özelliklerinden biri, anhedoni-günlük aktivitelerde zevk veya ilgi duyma yetersizliğidir17,18. Bu fenomen yaygın olarak sükroz tercih testleri kullanılarak değerlendirilir ve birçok antidepresanın azalmış sakaroz tüketimini tersine çevirdiği gösterilmiştir. CUMS literatüründe, istemli motor davranışı, keşif eğilimlerini ve gerginliği değerlendiren ve böylece depresyonun şiddetini ölçen açık alan testi (OFT) dahil olmak üzere bazı başka metrikler de yaygın olarak kullanılmaktadır19. Yükseltilmiş artı labirent (EPM) gibi diğer testler kaygı benzeri davranışları değerlendirir, Morris su labirenti testi (MWM) bilişsel işlevleri inceler20ve FST, olumsuz duygulara ve davranışsal umutsuzluğa duyarlılığı değerlendirir20. Ayrıca, insanları etkileyen stres faktörlerinin çoğu doğası gereği sosyaldir. Sınırlı sosyal aktiviteler, ağlar ve destek ile karakterize edilen optimal olmayan sosyal ilişkilere sahip bireyler, çeşitli hastalıklar için yüksek risk altındadır21,22. Bu aynı zamanda gruplar halinde yaşayan sosyal hayvanlar olan kemirgenler için de geçerlidir. Örneğin, tecrit altında barındırılan sıçanlar, sosyal strese neden olan ve depresyonun başlangıcını hızlandıran izolasyon sendromu olarak adlandırılan özelliklerin özelliklerini sergiler23.
Çin tıbbının önemli bir dalı olan Moğol tıbbı, hastalığın başlangıcının içsel ve dış faktörler arasında karmaşık bir etkileşim olduğunu öne sürüyor. Dört yardımcı koşul olarak adlandırılan bu dış faktörler, iklim değişikliği, diyet, yaşam tarzı ve enfeksiyonlar, şaşırtıcı olaylar ve psikolojik bozukluklar gibi ani olayları kapsar. Hastalık süreci, üç tip homor olarak adlandırılan üç unsur ile dört yardımcı koşulla uyum içinde Yedi Bedensel Bileşen arasında devam eden bir etkileşim olarak kavramsallaştırılır24. Moğol tıbbı, insan vücudunun, üç homor arasında göreceli bir denge ile sürdürülen entegre bir varlık olarak işlev gördüğünü savunur. Bu dengedeki bir bozulmanın hastalığın habercisi olduğu düşünülmektedir24. Hayvan deneylerinin geleneksel ve modern tıp arasında köprü kurmadaki önemli rolü göz önüne alındığında, Moğol tıbbı alanındaki araştırmalarla ilgili hayvan modelleri geliştirmek çok önemlidir. Buna göre, bu fizyolojik ve psikolojik stres faktörlerini simüle etmek için CUMS ile birlikte 28 günlük bir izolasyon metodolojisi kullandık. Dokuz spesifik öngörülemeyen stres faktörü seçtik ve bu modelleme yöntemini Moğol tıbbının Üç homor teorisi aracılığıyla desteklemeye çalıştık. Sağlam bir hayvan modeli oluşturmak, Moğol tıbbındaki temel araştırmaları ilerletmek için esastır ve temel çalışmalarına önemli ölçüde katkıda bulunacaktır.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1.5 mL centrifuge tube</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>EP-150-M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 &#181;L Pipette</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>IC021198160223</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 &#181;L pipette tip</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>IC012395160823</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 &#181;L pipette tip</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>TP-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1250 &#181;L pipette tip</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>TP-1250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 mL centrifuge tube</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>EP-200-M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>200 &#181;L pipette tip</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>TP-200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>200 &#181;L pipette tip</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>IC021029160323</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>300 &#181;L Multi-Channel Pipette</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>IC091006161022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 &#181;L Pipette</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>DS35110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automatic plate washing machine</td>
			<td>rayto Life Sciences Co., Ltd</td>
			<td>RT-3100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Benchtop High-Speed Freezing Centrifuge</td>
			<td>dalong construction Co., Ltd</td>
			<td>D3024R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electronic balance</td>
			<td>Mettler Toledo International Trade (Shanghai) Co., Ltd</td>
			<td>ME203E/02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrothermal blast drying oven</td>
			<td>Labotery Experimental Instrument Equipment Co., Ltd</td>
			<td>GEL-70</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Enzyme Label Detector</td>
			<td>BioTeK Co., Ltd</td>
			<td>Epoch</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High Speed Tissue Grinder</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>KZ-<img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/65889/65889eq02.jpg" style="margin: auto;" />-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horizontal Freezer</td>
			<td>Mellow Group Co., Ltd</td>
			<td>BCD-318AT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laboratory Ultrapure Water Machine</td>
			<td>Jinan Aiken Environmental Protection Technology Co., Ltd&#160;&#160;</td>
			<td>AK-RO-C2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Morris water maze video trail analysing system&#160;</td>
			<td>Tai Meng Tech Co., Ltd</td>
			<td>WMT-200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat 5-HT ELISA Kit</td>
			<td>Lian Ke bio Co., Ltd,China</td>
			<td>96T/48T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPF grade Sprague Dawley (SD) rats</td>
			<td>SPF (Beijing) Biotechnology Co&#160;</td>
			<td>SCXK(JING)2019-0010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sprague Dawley rats</td>
			<td>Beijing Biotechnology Co., Ltd, China</td>
			<td>&#160;SCXK (JING) 2019-0010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vertical Refrigerated Display Cabinet</td>
			<td>Xingx Group Co., Ltd</td>
			<td>LSC-316C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>video tracking system</td>
			<td>Tai Meng Tech Co., Ltd</td>
			<td>ZH-ZFT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>vortex mixer</td>
			<td>Servicebio technology Co., Ltd</td>
			<td>MV-100</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

chronic unpredictable mild stress in rats based on the mongolian medicine

Depresyon yaygın bir duygusal bozukluktur ve küresel engelliliğin önde gelen bir nedenini oluşturur. Mevcut farmakolojik müdahalelerin sınırlamaları, bu duruma atfedilen önemli sağlık yüküne katkıda bulunmaktadır. Depresyonun altında yatan mekanizmaların daha derin bir şekilde anlaşılmasına acil bir ihtiyaç vardır ve bu da translasyon potansiyeline sahip klinik öncesi modelleri son derece değerli kılmaktadır. Geleneksel tıbbın bir alt kümesi olan Moğol tıbbı, hastalık oluşumunun rüzgar, safra ve balgam dengesine yakından bağlı olduğunu öne sürer. Bu çalışmada, sıçanlarda kronik öngörülemeyen hafif stres (CUMS) yöntemi için bir protokol sunuyoruz. Bu çerçevede, sıçanlar, insan depresyonunun patogenezini taklit eden depresyon benzeri bir fenotipi indüklemek için bir dizi dalgalı, hafif stresöre maruz bırakılır. Bu protokolde kullanılan davranışsal testler arasında, depresyonun temel bir belirtisi olan anhedoninin göstergesi olan sükroz tercih testi (SPT); kaygı düzeylerini ölçen açık alan testi (OFT); ve uzamsal hafızayı ve öğrenme yeteneklerini değerlendiren Morris su labirenti testi (MWM). CUMS yöntemi, anhedoniyi indükleme ve uzun vadeli davranışsal eksikliklere neden olma yeteneğini göstermektedir. Ayrıca, bu protokol Moğol tıp teorisi ile depresyon benzeri davranışları ortaya çıkarmak için tasarlanmış diğer hayvan modellerinden daha uyumludur. Bu hayvan modelinin geliştirilmesi ve müteakip araştırmalar, Moğol tıbbı alanında gelecekteki yenilikçi çalışmalar için sağlam bir temel oluşturmaktadır.

Major depressive disorder (MDD) is a prevalent mental illness, ranking as the third leading cause of disability globally and affecting over 300 million people1,2,3. Notably, it is estimated that at least half of the affected individuals do not receive adequate treatment4. Given this gap, animal models serve as a crucial tool for investigating the etiology of depression. To date, more than 20 different animal models for depression exist5. Among these, the chronic unpredictable mild stress (CUMS) model, refined by Paul Winer in 1987, is the most frequently utilized6. The CUMS model operates on the premise that exposing rodents to a diverse range of socio-environmental stressors leads to symptoms akin to anxiety, tension, and depression. The methodology involves exposing animals to various mild stressors over several weeks, culminating in a range of behavioral alterations, including anhedonia and depressive-like behaviors7,8. These changes are accompanied by shifts in endocrine and neurotransmitter profiles, such as a reduction in 5-HT9,10. These outcomes closely mirror those observed in humans diagnosed with MDD, thereby validating the model's utility. The CUMS model is particularly valued for its effectiveness in evaluating antidepressants, manifesting high levels of surface, structural, and predictive validity11,12. Unlike other models, CUMS is sensitive to the effects of chronic administration of monoaminergic antidepressants. For instance, selective serotonin reuptake inhibitors (SSRIs) such as citalopram, paroxetine, and fluoxetine have been shown to prevent and reverse anhedonia under conditions of chronic stress12,13. Additionally, new rapid-acting antidepressants, such as ketamine, have also demonstrated efficacy in this model14,15. In contrast, other tests like the forced swimming test (FST) and tail suspension test (TST) are less reliable for modeling long-term behavioral changes, often reflecting adaptations to acute stress rather than enduring symptoms of depression16. These characteristics underscore the robust validity of the CUMS model in depression research. One of the most salient features of the CUMS model, recognized for its high reliability in classical studies, is anhedonia-the incapacity to experience pleasure or interest in everyday activities17,18. This phenomenon is commonly evaluated using sucrose preference tests, and many antidepressants have been shown to reverse reduced sucrose consumption. Several other metrics are also commonly employed in the CUMS literature, including the open field test (OFT), which assesses voluntary motor behavior, exploratory tendencies, and tension, thereby gauging the severity of depression19. Other tests such as the elevated plus maze (EPM) evaluate anxiety-like behaviors, the Morris water maze test (MWM) examines cognitive functioning20, and the FST assesses susceptibility to negative emotions and behavioral despair20. Furthermore, the majority of stressors that impact humans are social in nature. Individuals with suboptimal social relationships, characterized by limited social activities, networks, and support, are at a heightened risk for various diseases21,22. This is also relevant in the case of rodents, who are social animals living in groups. For example, rats that are housed in isolation exhibit characteristics of what is termed isolation syndrome, which induces social stress and expedites the onset of depression23.
Mongolian medicine, a significant branch of Chinese medicine, posits that the onset of disease is a complex interplay between intrinsic and external factors. These external factors, referred to as the four auxiliary conditions, encompass climate change, diet, lifestyle, and sudden events such as infections, startling incidents, and psychological disorders. The disease process is conceptualized as an ongoing interaction between three elements-referred to as the three types of homors-and the Seven Bodily Constituents in concert with the four auxiliary conditions24. Mongolian medicine holds that the human body functions as an integrated entity, maintained by a relative balance among the three homors. A disruption in this balance is considered to be a precursor to illness24. Given the pivotal role of animal experimentation in bridging traditional and modern medicine, it is crucial to develop animal models that are relevant for research in the field of Mongolian medicine. Accordingly, we employed a 28-day isolation methodology coupled with CUMS to simulate these physiological and psychological stressors. We selected nine specific unpredictable stressors and sought to underpin this modeling method through the Three homors theory of Mongolian medicine. Establishing a robust animal model is fundamental for advancing basic research in Mongolian medicine and will contribute significantly to its foundational studies.

Yazar Spotlight: Geleneksel Moğol Tıbbında Depresyon Faktörlerini Araştırmak İçin Bir Kemirgen Modeli Oluşturma

Moğol tıbbına dayalı Sıçanlarda Kronik Öngörülemeyen Hafif Stres

The scope of our research is Mongolian medical research. In this study, we are investigating the factors contributing to depression in Mongolian medicine, with a particular emphasis on the interaction between internal factors, such as wind, biofilm, and external factors. The problem of conforming to the lack of traditional Mongolian medical models was solved.This protocol addresses the establishment of an animal model based on Mongolian medical theory and then provides some suggestions for future research in Mongolian medicine. In a depressive disorder study, establishing an animal model is crucial for understanding new drugs'pathological mechanisms and effects. Compared with other techniques, this protocol is more in line with the pathogenesis and treatment principles of depression in traditional Mongolian medicine, which will help future research on the treatment of depression in Mongolian medicine.The protocol can demonstrate the relationship between external and internal factors interacting to produce disease and is in accordance with the theoretical system of Mongolian medicine. It will advance the basic research of traditional medicine on depression and provide some recommendations that will help subsequent researchers to research, develop, and utilize traditional medicines.

CUMS ile indüklenen sıçan depresyonu modelindeki davranışsal testlerden elde edilen sonuçlar Depresyon benzeri davranışları indüklemek için CUMS prosedürünün etkinliğini doğrulamak için bir manipülasyon kontrolü yapıldı. Erkek Sprague-Dawley (SD) sıçanları, adım 1.2.3'te belirtildiği gibi, 4 haftalık bir süre boyunca MOD veya CON grubuna rastgele tahsis edildi. Daha sonra, sıçanlar sakrifiye edildi ve hipokampusları, enzime bağlı immünosorbent testi (ELISA) <sup class...

Watch this Scientific Journal Video about Chronic Unpredictable Mild Stress in Rats based on the Mongolian medicine at JoVE.com

Bu protokol, Moğol tıp teorisine dayanan depresyon için kronik öngörülemeyen hafif stres (CUMS) modelini ve davranışsal testleri doğrulama yöntemlerini ana hatlarıyla belirtir.

Depression is a prevalent affective disorder and constitutes a leading cause of global disability. The limitations of current pharmacological ...

Araştırmamızın kapsamı Moğol tıbbi araştırmalarıdır. Bu çalışmada, Moğol tıbbında depresyona katkıda bulunan faktörleri, rüzgar, biyofilm ve dış faktörler gibi iç faktörler arasındaki etkileşime özel bir vurgu yaparak araştırıyoruz. Geleneksel Moğol tıbbi modellerinin eksikliğine uyma sorunu çözüldü.Bu protokol, Moğol tıp teorisine dayalı bir hayvan modelinin kurulmasını ele alır ve daha sonra Moğol tıbbında gelecekteki araştırmalar için bazı öneriler sunar. Bir depresif bozukluk çalışmasında, yeni ilaçların patolojik mekanizmalarını ve etkilerini anlamak için bir hayvan modeli oluşturmak çok önemlidir. Diğer tekniklerle karşılaştırıldığında, bu protokol geleneksel Moğol tıbbındaki depresyonun patogenezi ve tedavi prensipleri ile daha uyumludur ve bu da Moğol tıbbında depresyonun tedavisi ile ilgili gelecekteki araştırmalara yardımcı olacaktır.Protokol, hastalık üretmek için etkileşime giren dış ve iç faktörler arasındaki ilişkiyi gösterebilir ve Moğol tıbbının teorik sistemine uygundur. Geleneksel tıbbın depresyonla ilgili temel araştırmalarını ilerletecek ve sonraki araştırmacıların geleneksel ilaçları araştırmasına, geliştirmesine ve kullanmasına yardımcı olacak bazı öneriler sunacaktır.

chronic-unpredictable-mild-stress-rats-based-on-mongolian

Research

JoVE Journal

Medicine

Chronic Unpredictable Mild Stress in Rats based on the Mongolian medicine

523 Görüntüleme.  Inner Mongolia Medical University. Araştırmamızın kapsamı Moğol tıbbi araştırmalarıdır. Bu çalışmada, Moğol tıbbında depresyona katkıda bulunan faktörleri, rüzgar, biyofilm ve dış faktörler gibi iç faktörler arasındaki etkileşime özel bir vurgu yaparak araştırıyoruz. Geleneksel Moğol tıbbi modellerinin eksikliğine uyma sorunu çözüldü.Bu protokol, Moğol tıp teorisine dayalı bir hayvan modelinin kurulmasını ele alır ve daha sonra Moğol tıbbında gelecekteki araştırmalar içi...