Wir danken der mongolischen medizinischen Fakultät der Inneren Mongolischen Medizinischen Universität, China, für die Bereitstellung der Instrumente und des Labors. Diese Studie wurde unterstützt von für die Bereitstellung der notwendigen Instrumente und Laboreinrichtungen. Diese Studie wurde finanziell unterstützt von der National Natural Sciences Foundation of China (Grant No. 81760762) und dem Inner Mongolia Medical University Project of China (Grant No. YKD2022MS074) und das Wissenschaftliche Forschungsprojekt für Hochschulbildung in der Inneren Mongolei, China (Grant No. NJZY22661) und das Open Fund Project des Key Laboratory of Chinese and Mongolian Medicine in der Inneren Mongolei Autonomen Region, China (Grant No. MYX2023-K07).

Die Versuchsprotokolle wurden vom Ethics of Animal Trial Care Committee der Medizinischen Universität der Inneren Mongolei (YKD202301172) genehmigt und entsprachen den Richtlinien der National Institutes of Health für Tierpflege und Ethik. Die Lizenznummer für unser Tierzentrum lautet NO.110324230102364187. Vierundzwanzig männliche Sprague-Dawley (SD) Ratten, jeweils 8 Wochen alt (200 g ± 20 g), wurden erworben und in einer kontrollierten Umgebung mit einer Temperatur von 22 °C ± 2 °C und einer Luftfeuchtigkeit von 55 % ± 15 % untergebracht. Füttern Sie die Ratten mit einem Nagetier-Erhaltungsfutter und reinem Wasser mit Maiskolben als Einstreu. Die Ratten wurden vor dem Experiment 1 Woche lang einem 12 h/12 h Hell-Dunkel-Zyklus unterzogen.
1. Etablierung des CUMS-Rattenmodells
<ol><li>Gruppierung<ol><li>Teilen Sie die 24 Ratten nach dem Zufallsprinzip in 2 Gruppen auf: die Kontrollgruppe (CON), die keiner Isolation oder Stress ausgesetzt wird, und die Modellgruppe (MOD). Jede Gruppe enthält 12 Ratten.</li>
		<li>Halten Sie die Ratten in Standardkäfigen mit den Maßen 55 cm x 40 cm x 20 cm mit 6 Ratten pro Käfig. Behalten Sie die Käfigbelegung während der gesamten Eingewöhnungsphase bei, sofern nicht anders angegeben.</li>
		<li>Füllen Sie jeden Aufzuchtkäfig mit frischer Einstreu und tauschen Sie ihn zweimal pro Woche aus.</li>
		<li>Führen Sie eine 1-wöchige Eingewöhnungsphase durch. Ermöglichen Sie den Ratten uneingeschränkten Zugang zu Futter und Wasser, außer während der Anwendung von CUMS-Stressoren. Halten Sie eine konstante Umgebung mit einer Temperatur von 22 °C ± 2 °C, einer Luftfeuchtigkeit von 55 % ± 15 % und einem Hell-/Dunkelzyklus von 12 Stunden/12 Stunden von 08:00 bis 20:00 Uhr aufrecht, sofern nicht anders angegeben.</li>
		<li>Vor Beginn des Experiments sollten die Ratten täglich angefasst werden, um sie an den Forscher zu gewöhnen und zusätzlichen Stress während der Versuchsphase zu minimieren.</li>
	</ol></li>
	<li>Isolation mit chronisch unvorhersehbarem leichtem Stress<ol><li>Platzieren Sie die MOD- und CON-Gruppen gleichzeitig in getrennten Räumen. Halten Sie die MOD-Gruppenratten einzeln unter, während Sie die CON-Gruppenratten zusammen halten. Halten Sie alle anderen Bedingungen konstant.</li>
		<li>Implementieren Sie ein 28-tägiges Stressor-Regime25. Um Gewöhnung zu verhindern und die Unvorhersehbarkeit der Stressoren zu gewährleisten, verabreichen Sie einen zufälligen Stressor pro Tag und vermeiden Sie die Verwendung desselben Stressors an aufeinanderfolgenden Tagen.</li>
		<li>Wenden Sie nach dem Zufallsprinzip einen der folgenden neun Stressoren26,27 an verschiedenen Tagen an: 24 h Wasserentzug, 24 h Nahrungsentzug, nasses Polstern, Käfigneigung, Inversion des Hell-Dunkel-Zyklus, Kälteeinwirkung bei 4 °C, Hitzeeinwirkung bei 45 °C, 1 min Schwanzklemmung oder 15 min Schütteln bei 160 U/min. Das spezifische Design ist in Tabelle 1 dargestellt.</li>
		<li>Beschränken Sie während der Anwendung des Stressors den Zugang zu Nahrung und Wasser auf die MOD-Gruppe, bis der Stress vorüber ist, außer während der Umkehrung des Hell-Dunkel-Zyklus. Die CON-Gruppe war nicht verpflichtet, Einschränkungen bei Wasser und Ernährung zu machen.</li>
	</ol></li>
	<li>Stress-Methoden<ol><li>Beginnen Sie das Experiment, indem Sie Depressionsstimuli in Verbindung mit einer 28-tägigen Isolation auf alle Ratten anwenden, mit Ausnahme der Kontrollgruppe. Halten Sie diese Ratten in einzelnen Käfigen. In Tabelle 2 finden Sie Zustände im Zusammenhang mit Depressionsreizen.</li>
		<li>Um die Schwanzklemmmethode durchzuführen, sichern Sie den Schwanz einer Ratte aus der MOD-Gruppe, indem Sie den Schwanz mit einer Standard-Büroklammer in einem Abstand von 1-2 cm von der Schwanzwurzel der Ratte festklemmen. Messen Sie die Spannzeit für eine Dauer von 1 min (n = 12).</li>
		<li>Bei der Wasserentzugsmethode wird einer Ratte der MOD-Gruppe Wasser vorenthalten, indem man die Wasserflasche entfernt und 24 Stunden lang aufzeichnet. HINWEIS: Der Zeitpunkt des Beginns des Wasserentzugs wurde aufgezeichnet, damit die Endzeit genau berechnet werden konnte. Das Verhalten der Ratten während dieser Zeit wurde beobachtet, einschließlich Aktivität, Appetit und psychischer Verfassung.</li>
		<li>Bei der Methode des Nahrungsentzugs wird einer Ratte der MOD-Gruppe das Futter vorenthalten und 24 Stunden lang aufgezeichnet. HINWEIS: Notieren Sie den Zeitpunkt, zu dem der Nahrungsentzug beginnt, damit die Endzeit genau berechnet werden kann. sicherzustellen, dass die Ratten während dieser Zeit ausreichend mit Flüssigkeit versorgt sind; und beobachten Sie das Verhalten der Ratten während dieser Zeit, einschließlich Aktivität und mentalem Zustand usw.</li>
		<li>Für die Kältestimulation bei 4 °C eine Ratte aus der MOD-Gruppe in einen Eimer mit kaltem Wasser legen und 5 Minuten lang aufnehmen. Stellen Sie sicher, dass die Wassertemperatur während des gesamten Tests konstant bleibt. Trocknen Sie die Ratte am Ende des Versuchs mit einem Gebläse ab und setzen Sie sie wieder in ihren ursprünglichen Käfig ein. HINWEIS: Halten Sie die Temperatur des kalten Wassers mit einem Thermometer und Eiswürfeln auf 4 °C, um die Wassertemperatur zu regulieren, wenn sie steigt. Das Wasser sollte regelmäßig gewechselt werden, um sicherzustellen, dass die Wasserqualität sauber und die Temperatur konstant ist. Beim Schwimmen sollten alle Gliedmaßen und Rüssel der Ratten mit Ausnahme des Kopfes in kaltes Wasser getaucht werden. Die Wassertiefe muss größer sein als die Körperlänge der Ratte, um zu verhindern, dass die Ratte durch Kontakt mit dem Boden des Eimers aus dem Wasser springt.</li>
		<li>Um eine Hitzebelastung von 45 °C zu bewältigen, legen Sie eine MOD-Gruppenratte in einen Inkubator und zeichnen Sie sie 5 Minuten lang auf, um sicherzustellen, dass die Temperatur während des gesamten Tests stabil bleibt.</li>
		<li>Bei der Umkehrung des Hell-Dunkel-Zyklus hüllen Sie den Käfig für 1 h in ein schwarzes Tuch, um die Dunkelheit am Tag zu simulieren. Beleuchten Sie den Käfig anschließend nachts 12 Stunden lang, um das Tageslicht nachzuahmen. Notieren Sie das Verhalten der Ratte, die Nahrungs- und Wasseraufnahme sowie das Schlafverhalten für 24 Stunden.</li>
		<li>Für das Nasspolsterexperiment geben Sie 200 ml Wasser in einen Käfig mit 100 g Polsterung. Halten Sie eine MOD-Gruppenratte im nassen Käfig und zeichnen Sie das Verhalten der Ratten unter nassem Einstreustress auf, einschließlich Aktivität, Appetit, Wasseraufnahme usw. Beobachten Sie, ob es abnormale Verhaltensweisen oder unangenehme Reaktionen gibt, wie z. B. den Haut- und Haarzustand der Ratten, die durch die nasse Polsterung verursacht werden können, und zeichnen Sie diese rechtzeitig für die anschließende Analyse für 24 Stunden auf. Trocknen Sie die Ratte nach dem Test mit einem Gebläse ab und stellen Sie sie wieder in einen Käfig mit frischen Holzspänen.</li>
		<li>Bei der Käfigneigungsmethode wird eine Ratte der MOD-Gruppe in einem Käfig platziert, der in einem Winkel von 45° gegen eine Wand geneigt ist, und 24 Stunden lang aufgezeichnet. Verwenden Sie die Käfigrahmenstruktur, um den Winkel anzupassen und den Käfig an Ort und Stelle zu sichern. HINWEIS: Berechnen Sie die Zeit von Anfang bis Ende und beobachten Sie das Verhalten der Ratten während der Zeit des Kippens des Käfigs, einschließlich Aktivität, Appetit und mentaler Verfassung, und stellen Sie sicher, dass der Winkel des gekippten Käfigs korrekt eingestellt ist und stabil bleibt, um die Genauigkeit und Reproduzierbarkeit des Experiments zu gewährleisten.</li>
		<li>Für das Schütteln mit hoher Geschwindigkeit setzen Sie eine MOD-Gruppenratte in einen mechanischen Shaker, der auf 160 U/min eingestellt ist, und nehmen Sie die Ratte 15 Minuten lang auf. Anschließend werden Verhaltenstestmethoden verwendet, um die erfolgreiche Etablierung des Modells zu bewerten.</li>
		<li>Verschieben Sie nach dem Anwenden von Stressoren die MOD-Gruppenkäfige aus dem CUMS-Raum zurück in den Haltungsraum. Halten Sie die CON-Gruppe während der 4-wöchigen Stressexpositionsphase in ihren Heimkäfigen, die sich im Haltungsraum befinden.</li>
	</ol></li>
	<li>Vorsichtsmaßnahmen während der Versuche<ol><li>Bringen Sie die Käfige der MOD-Gruppe nach dem Anlegen des Stressors im CUMS-Raum zurück in den allgemeinen Haltungsraum.</li>
		<li>Tierüberwachung während der CUMS-Modellierung<ol><li>Während des Schwanzklemmens wird das Tier aufgrund der induzierten Stimulation wahrscheinlich Schwierigkeiten haben. Überwachen Sie während dieser Zeit kontinuierlich die Klemme. Wenn es sich löst, halten Sie den Timer an, setzen Sie die Klemme erneut auf und setzen Sie den Timer dann für 1 Minute fort.</li>
			<li>Verhängen Sie nicht gleichzeitig Wasserentzug und Stressfaktoren für nasse Einstreu. HINWEIS: Die Vermeidung des gleichzeitigen Auferlegens von nasser Polsterung und Wasserentzug trägt zur Aufrechterhaltung der experimentellen Integrität bei, reduziert Störvariablen und fördert den Tierschutz.</li>
			<li>Die Körpertemperatur des Tieres und die Umgebungstemperatur im Raum können die Wassertemperatur beim Schwimmen in kaltem Wasser erhöhen. Passen Sie daher durch Zugabe von Eiswasser oder Eiswürfeln an, um eine konstante Wassertemperatur zu halten.</li>
			<li>Beobachten Sie die Ratten in Abständen von 30 Minuten während der Anwendung von Stressoren, außer während der Tagesumkehr. Achten Sie besonders auf Anzeichen von ungewöhnlichem Stress wie Zittern, Lethargie oder Bewegungsmangel. Wenn solche Symptome beobachtet werden - insbesondere eine mögliche Unterkühlung beim Schwimmen in kaltem Wasser bei 4 °C und nasser Einstreu - entfernen Sie die Ratte sofort aus dem Stressor. HINWEIS: Die Versuchstiere sind aus der Studie zu entfernen, wenn sie gesundheitliche Probleme haben, wie z. B. Infektionen, schwere Traumata, aggressives Verhalten, abnormale Mobilität usw. Die Bedingungen für die Entfernung der Tiere aus der Studie drehen sich in der Regel um den Schutz ihrer Gesundheit und Sicherheit bei gleichzeitiger Gewährleistung der Integrität der Versuchsergebnisse.</li>
			<li>Führen Sie tägliche Inspektionen auf Wunden oder andere körperliche oder Verhaltensauffälligkeiten bei jeder Ratte durch. Wenn Anomalien festgestellt werden, konsultieren Sie den Labortierarzt, um festzustellen, ob die Ratte aus dem Versuch ausgeschlossen werden sollte.</li>
			<li>Wiegen Sie jede Ratte alle 3 Tage. Verliert ein Tier mehr als 20 % seines Basalgewichts vor der Fütterung, muss es vom Versuch ausgeschlossen werden.</li>
		</ol></li>
	</ol></li>
</ol>2. Verhaltenstests
<ol><li>Zu Beginn verabreichen Sie die Depressionsreize in Verbindung mit einer Isolation für 28 Tage an alle Ratten, mit Ausnahme der Kontrollgruppe. Halten Sie die Ratten in einzelnen Käfigen. In Tabelle 2 finden Sie Einzelheiten zu den Zuständen, die bei Depressionsreizen auftreten.</li>
	<li>Für den Freilandtest unterteilen Sie eine Blackbox in 25 quadratische Abschnitte mit gleicher Fläche. Installieren Sie ein Video-Tracking-Analysesystem in der Box. Platzieren Sie die Ratte auf dem zentralen Platz und überwachen Sie ihre horizontalen und vertikalen Aktivitäten für eine Dauer von 5 Minuten. HINWEIS: Die Abmessungen der Box betragen 500 mm x 500 mm x 300 mm. Aktivitätsdaten werden mit Hilfe des Video-Tracking-Systems gesammelt, um angstbedingte Verhaltensweisen bei Nagetieren zu bewerten, wenn sie einer neuen Umgebung ausgesetzt sind.</li>
	<li>Zählen Sie anschließend die Anzahl der Felder, die die Ratte mit allen Pfoten zurückgelegt hat, um die horizontale Aktivität zu quantifizieren. Zählen Sie Fälle von Stehen und Putzen als Indikatoren für vertikale Aktivität. Desinfizieren Sie die Box nach jedem Test mit 75 % Alkohol, um alle verbleibenden Rattengerüche für nachfolgende Tests zu entfernen.</li>
	<li>Als nächstes wird die Anhedonie durch den Saccharose-Präferenztest bewertet. Stellen Sie zwei Flaschen auf den Käfigdeckel: Flasche A enthält reines Wasser, Flasche B 1%ige Saccharoselösung. Erlauben Sie der Ratte ad libitum den Zugang zu beiden Lösungen. Wiegen Sie die Flaschen vor und nach dem Verzehr, um die 60-minütigen Saccharose-Präferenzraten an den Tagen 0, 7, 14, 21 und 28 zu berechnen. Die Formel lautet wie folgt: Saccharoseverbrauch = <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/65889/65889eq01.jpg" style="margin: auto;"> × 100%</li>
	<li>Um das räumliche Gedächtnis und die Lernfähigkeiten zu messen, verwenden Sie den Morris-Wasserlabyrinth-Test. Teilen Sie den Pool in vier Quadranten auf und nummerieren Sie sie von eins bis vier. Stellen Sie eine untergetauchte Ruheplattform 1 cm unter der Wasseroberfläche im dritten Quadranten auf.</li>
	<li>Geben Sie Milch in das Becken, um die Wassertrübung zu erhöhen und eine Wassertemperatur von ca. 23 °C während des gesamten Versuchsverfahrens aufrechtzuerhalten.</li>
	<li>Platziere jede Ratte in verschiedenen Quadranten des Labyrinths, so dass sie 120 Sekunden Zeit hat, die versteckte Plattform zu finden. Die Ratten müssen sich auf ihr räumliches Gedächtnis und ihre Lernfähigkeiten verlassen, um sich den Standort der Plattform zu merken. Sobald sie den Standort der Plattform kennen, können sie direkt dorthin schwimmen. Zeichnen Sie die Latenzzeit mit dem Morris Wasserlabyrinth-Videoverfolgungssystem auf.</li>
	<li>Positionieren Sie die Ratte an einem festen Platz im Pool. Wenn das Subjekt die versteckte Plattform nicht innerhalb von 120 s finden kann, zeichnen Sie die Latenz mit 120 s auf.</li>
	<li>Zum Schluss entfernst du die versteckte Plattform, setzt die Ratte wieder ins Wasser und notierst die Anzahl der Zonendurchquerungen über einen Zeitraum von 120 s.</li>
</ol>3. Statistische Analyse
<ol><li>Um signifikante Unterschiede in den biochemischen Parametern zu bewerten, verwenden Sie eine Einweg-Varianzanalyse (ANOVA), gefolgt von Duncans Post-hoc-Test. Präsentieren Sie die Daten als Mittelwert ± Standardfehlers (SE) und betrachten Sie einen p-Wert von weniger als 0,05 als statistisch signifikant.</li>
</ol>

Etablierung und Validierung eines Modells für chronisch unvorhersehbaren leichten Stress

Die Autoren haben keine Interessenkonflikte offenzulegen.

Depression ist eine psychische Störung, die durch Symptome wie schlechte Stimmung, mangelnde Lust und verminderte Energie gekennzeichnetist 30. Im Bereich der Depressionsforschung ist die Etablierung eines verlässlichen Tiermodells entscheidend, um therapeutische Interventionen voranzutreiben. Unter den verschiedenen Tiermodellen ist das CUMS-Modell besonders bemerkenswert für seine hohe Reliabilität, Validität und Kongruenz mit den Merkmalen der menschlichen Depression31</s...

Die Major Depression (MDD) ist eine weit verbreitete psychische Erkrankung, die weltweit die dritthäufigste Ursache für Behinderungen ist und von der über 300 Millionen Menschen betroffen sind1,2,3. Es wird geschätzt, dass mindestens die Hälfte der Betroffenen keine angemessene Behandlung erhält4. Angesichts dieser Lücke dienen Tiermodelle als wichtiges Instrument, um die Ätiologie von Depressionen zu untersuchen. Bis heute existieren mehr als 20 verschiedene Tiermodelle für Depressionen5. Unter diesen ist das Modell des chronisch unvorhersehbaren milden Stresses (CUMS), das 1987 von Paul Winer verfeinert wurde, das am häufigsten verwendete Modell6. Das CUMS-Modell geht von der Prämisse aus, dass die Exposition von Nagetieren gegenüber einer Vielzahl von sozio-ökologischen Stressoren zu Symptomen führt, die mit Angstzuständen, Anspannung und Depressionen vergleichbar sind. Die Methodik besteht darin, die Tiere über mehrere Wochen hinweg verschiedenen leichten Stressoren auszusetzen, was in einer Reihe von Verhaltensänderungen gipfelt, darunter Anhedonie und depressive Verhaltensweisen7,8. Diese Veränderungen gehen mit Verschiebungen der endokrinen und Neurotransmitterprofile einher, wie z. B. einer Verringerung der 5-HT9,10. Diese Ergebnisse entsprechen weitgehend denen, die bei Menschen mit MDD beobachtet wurden, was den Nutzen des Modells bestätigt. Das CUMS-Modell wird besonders für seine Wirksamkeit bei der Bewertung von Antidepressiva geschätzt und zeigt ein hohes Maß an oberflächlicher, struktureller und prädiktiver Validität11,12. Im Gegensatz zu anderen Modellen reagiert CUMS empfindlich auf die Auswirkungen der chronischen Verabreichung von monoaminergen Antidepressiva. Zum Beispiel hat sich gezeigt, dass selektive Serotonin-Wiederaufnahmehemmer (SSRIs) wie Citalopram, Paroxetin und Fluoxetin Anhedonie unter chronischen Stressbedingungen verhindern und umkehren können12,13. Darüber hinaus haben auch neue schnell wirkende Antidepressiva wie Ketamin in diesem Modell Wirksamkeit gezeigt14,15. Im Gegensatz dazu sind andere Tests wie der Forced Swimming Test (FST) und der Tail Suspension Test (TST) weniger zuverlässig für die Modellierung langfristiger Verhaltensänderungen und spiegeln oft eher Anpassungen an akuten Stress als anhaltende Symptome einer Depression wider16. Diese Merkmale unterstreichen die robuste Validität des CUMS-Modells in der Depressionsforschung. Eines der hervorstechendsten Merkmale des CUMS-Modells, das in der Altertumswissenschaft für seine hohe Zuverlässigkeit anerkannt ist, ist die Anhedonie - die Unfähigkeit, Freude oder Interesse an alltäglichen Aktivitäten zu empfinden17,18. Dieses Phänomen wird häufig mit Saccharose-Präferenztests bewertet, und es wurde gezeigt, dass viele Antidepressiva den reduzierten Saccharosekonsum rückgängig machen. In der CUMS-Literatur werden auch mehrere andere Metriken häufig verwendet, darunter der Open Field Test (OFT), der das willkürliche motorische Verhalten, die explorativen Tendenzen und die Anspannung bewertet und so den Schweregrad der Depression misst19. Andere Tests wie der erhöhte Plus-Labyrinth (EPM) bewerten angstähnliche Verhaltensweisen, der Morris-Wasserlabyrinth-Test (MWM) untersucht die kognitiven Funktionen20, und der FST bewertet die Anfälligkeit für negative Emotionen und Verhaltensverzweiflung20. Darüber hinaus sind die meisten Stressoren, die sich auf den Menschen auswirken, sozialer Natur. Personen mit suboptimalen sozialen Beziehungen, die durch eingeschränkte soziale Aktivitäten, Netzwerke und Unterstützung gekennzeichnet sind, haben ein erhöhtes Risiko für verschiedene Krankheiten21,22. Dies gilt auch für Nagetiere, bei denen es sich um soziale Tiere handelt, die in Gruppen leben. Zum Beispiel weisen Ratten, die in Isolation gehalten werden, Merkmale des sogenannten Isolationssyndroms auf, das sozialen Stress hervorruft und das Auftreten von Depressionen beschleunigt23.
Die mongolische Medizin, ein bedeutender Zweig der chinesischen Medizin, geht davon aus, dass der Ausbruch einer Krankheit ein komplexes Zusammenspiel zwischen intrinsischen und externen Faktoren ist. Zu diesen externen Faktoren, die als die vier Nebenbedingungen bezeichnet werden, gehören der Klimawandel, die Ernährung, der Lebensstil und plötzliche Ereignisse wie Infektionen, überraschende Ereignisse und psychische Störungen. Der Krankheitsprozess wird als eine fortlaufende Interaktion zwischen drei Elementen - die als die drei Arten von Homoren bezeichnet werden - und den sieben körperlichen Bestandteilen in Übereinstimmung mit den vier Hilfsbedingungenkonzeptualisiert 24. Die mongolische Medizin geht davon aus, dass der menschliche Körper als eine integrierte Einheit funktioniert, die durch ein relatives Gleichgewicht zwischen den drei Homorn aufrechterhalten wird. Eine Störung dieses Gleichgewichts wird als Vorläufer der Krankheitangesehen 24. Angesichts der zentralen Rolle von Tierversuchen bei der Brücke zwischen traditioneller und moderner Medizin ist es von entscheidender Bedeutung, Tiermodelle zu entwickeln, die für die Forschung im Bereich der mongolischen Medizin relevant sind. Dementsprechend haben wir eine 28-tägige Isolationsmethodik in Verbindung mit CUMS eingesetzt, um diese physiologischen und psychologischen Stressoren zu simulieren. Wir wählten neun spezifische unvorhersehbare Stressoren aus und versuchten, diese Modellierungsmethode durch die Drei-Homors-Theorie der mongolischen Medizin zu untermauern. Die Etablierung eines robusten Tiermodells ist grundlegend für die Förderung der Grundlagenforschung in der mongolischen Medizin und wird wesentlich zu deren Grundlagenstudien beitragen.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1.5 mL centrifuge tube</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>EP-150-M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 &#181;L Pipette</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>IC021198160223</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 &#181;L pipette tip</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>IC012395160823</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 &#181;L pipette tip</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>TP-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1250 &#181;L pipette tip</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>TP-1250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 mL centrifuge tube</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>EP-200-M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>200 &#181;L pipette tip</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>TP-200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>200 &#181;L pipette tip</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>IC021029160323</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>300 &#181;L Multi-Channel Pipette</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>IC091006161022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 &#181;L Pipette</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>DS35110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automatic plate washing machine</td>
			<td>rayto Life Sciences Co., Ltd</td>
			<td>RT-3100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Benchtop High-Speed Freezing Centrifuge</td>
			<td>dalong construction Co., Ltd</td>
			<td>D3024R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electronic balance</td>
			<td>Mettler Toledo International Trade (Shanghai) Co., Ltd</td>
			<td>ME203E/02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrothermal blast drying oven</td>
			<td>Labotery Experimental Instrument Equipment Co., Ltd</td>
			<td>GEL-70</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Enzyme Label Detector</td>
			<td>BioTeK Co., Ltd</td>
			<td>Epoch</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High Speed Tissue Grinder</td>
			<td>service Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>KZ-<img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/65889/65889eq02.jpg" style="margin: auto;" />-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horizontal Freezer</td>
			<td>Mellow Group Co., Ltd</td>
			<td>BCD-318AT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laboratory Ultrapure Water Machine</td>
			<td>Jinan Aiken Environmental Protection Technology Co., Ltd&#160;&#160;</td>
			<td>AK-RO-C2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Morris water maze video trail analysing system&#160;</td>
			<td>Tai Meng Tech Co., Ltd</td>
			<td>WMT-200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat 5-HT ELISA Kit</td>
			<td>Lian Ke bio Co., Ltd,China</td>
			<td>96T/48T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPF grade Sprague Dawley (SD) rats</td>
			<td>SPF (Beijing) Biotechnology Co&#160;</td>
			<td>SCXK(JING)2019-0010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sprague Dawley rats</td>
			<td>Beijing Biotechnology Co., Ltd, China</td>
			<td>&#160;SCXK (JING) 2019-0010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vertical Refrigerated Display Cabinet</td>
			<td>Xingx Group Co., Ltd</td>
			<td>LSC-316C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>video tracking system</td>
			<td>Tai Meng Tech Co., Ltd</td>
			<td>ZH-ZFT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>vortex mixer</td>
			<td>Servicebio technology Co., Ltd</td>
			<td>MV-100</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

chronic unpredictable mild stress in rats based on the mongolian medicine

Depression ist eine weit verbreitete affektive Störung und stellt eine der Hauptursachen für globale Behinderung dar. Die Einschränkungen der derzeitigen pharmakologischen Interventionen tragen zu der erheblichen gesundheitlichen Belastung bei, die dieser Erkrankung zugeschrieben wird. Es besteht ein dringender Bedarf an einem tieferen Verständnis der zugrunde liegenden Mechanismen der Depression, so dass präklinische Modelle mit translationalem Potenzial sehr wertvoll sind. Die mongolische Medizin, eine Untergruppe der traditionellen Medizin, postuliert, dass das Auftreten von Krankheiten eng mit dem Gleichgewicht von Wind, Galle und Schleim verbunden ist. In dieser Studie stellen wir ein Protokoll für die CUMS-Methode (Chronic Unpredictable Mild Stress) bei Ratten vor. In diesem Rahmen werden Ratten einer Reihe von fluktuierenden, milden Stressoren ausgesetzt, um einen depressionsähnlichen Phänotyp zu induzieren, der die Pathogenese der menschlichen Depression nachahmt. Zu den Verhaltenstests, die in diesem Protokoll verwendet werden, gehören der Saccharose-Präferenztest (SPT), der auf Anhedonie hinweist - ein Kernsymptom der Depression; der Open Field Test (OFT), der das Angstniveau misst; und der Morris Water Maze Test (MWM), der das räumliche Gedächtnis und die Lernfähigkeiten bewertet. Die CUMS-Methode demonstriert die Fähigkeit, Anhedonie zu induzieren und langfristige Verhaltensdefizite zu verursachen. Darüber hinaus orientiert sich dieses Protokoll stärker an der mongolischen Medizintheorie als andere Tiermodelle, die darauf ausgelegt sind, depressionsähnliches Verhalten hervorzurufen. Die Entwicklung dieses Tiermodells und die anschließende Forschung bieten eine solide Grundlage für zukünftige innovative Studien im Bereich der mongolischen Medizin.

Major depressive disorder (MDD) is a prevalent mental illness, ranking as the third leading cause of disability globally and affecting over 300 million people1,2,3. Notably, it is estimated that at least half of the affected individuals do not receive adequate treatment4. Given this gap, animal models serve as a crucial tool for investigating the etiology of depression. To date, more than 20 different animal models for depression exist5. Among these, the chronic unpredictable mild stress (CUMS) model, refined by Paul Winer in 1987, is the most frequently utilized6. The CUMS model operates on the premise that exposing rodents to a diverse range of socio-environmental stressors leads to symptoms akin to anxiety, tension, and depression. The methodology involves exposing animals to various mild stressors over several weeks, culminating in a range of behavioral alterations, including anhedonia and depressive-like behaviors7,8. These changes are accompanied by shifts in endocrine and neurotransmitter profiles, such as a reduction in 5-HT9,10. These outcomes closely mirror those observed in humans diagnosed with MDD, thereby validating the model's utility. The CUMS model is particularly valued for its effectiveness in evaluating antidepressants, manifesting high levels of surface, structural, and predictive validity11,12. Unlike other models, CUMS is sensitive to the effects of chronic administration of monoaminergic antidepressants. For instance, selective serotonin reuptake inhibitors (SSRIs) such as citalopram, paroxetine, and fluoxetine have been shown to prevent and reverse anhedonia under conditions of chronic stress12,13. Additionally, new rapid-acting antidepressants, such as ketamine, have also demonstrated efficacy in this model14,15. In contrast, other tests like the forced swimming test (FST) and tail suspension test (TST) are less reliable for modeling long-term behavioral changes, often reflecting adaptations to acute stress rather than enduring symptoms of depression16. These characteristics underscore the robust validity of the CUMS model in depression research. One of the most salient features of the CUMS model, recognized for its high reliability in classical studies, is anhedonia-the incapacity to experience pleasure or interest in everyday activities17,18. This phenomenon is commonly evaluated using sucrose preference tests, and many antidepressants have been shown to reverse reduced sucrose consumption. Several other metrics are also commonly employed in the CUMS literature, including the open field test (OFT), which assesses voluntary motor behavior, exploratory tendencies, and tension, thereby gauging the severity of depression19. Other tests such as the elevated plus maze (EPM) evaluate anxiety-like behaviors, the Morris water maze test (MWM) examines cognitive functioning20, and the FST assesses susceptibility to negative emotions and behavioral despair20. Furthermore, the majority of stressors that impact humans are social in nature. Individuals with suboptimal social relationships, characterized by limited social activities, networks, and support, are at a heightened risk for various diseases21,22. This is also relevant in the case of rodents, who are social animals living in groups. For example, rats that are housed in isolation exhibit characteristics of what is termed isolation syndrome, which induces social stress and expedites the onset of depression23.
Mongolian medicine, a significant branch of Chinese medicine, posits that the onset of disease is a complex interplay between intrinsic and external factors. These external factors, referred to as the four auxiliary conditions, encompass climate change, diet, lifestyle, and sudden events such as infections, startling incidents, and psychological disorders. The disease process is conceptualized as an ongoing interaction between three elements-referred to as the three types of homors-and the Seven Bodily Constituents in concert with the four auxiliary conditions24. Mongolian medicine holds that the human body functions as an integrated entity, maintained by a relative balance among the three homors. A disruption in this balance is considered to be a precursor to illness24. Given the pivotal role of animal experimentation in bridging traditional and modern medicine, it is crucial to develop animal models that are relevant for research in the field of Mongolian medicine. Accordingly, we employed a 28-day isolation methodology coupled with CUMS to simulate these physiological and psychological stressors. We selected nine specific unpredictable stressors and sought to underpin this modeling method through the Three homors theory of Mongolian medicine. Establishing a robust animal model is fundamental for advancing basic research in Mongolian medicine and will contribute significantly to its foundational studies.

Autor im Rampenlicht: Etablierung eines Nagetiermodells zur Untersuchung von Depressionsfaktoren in der traditionellen mongolischen Medizin

Chronisch unvorhersehbarer milder Stress bei Ratten basierend auf der mongolischen Medizin

Ergebnisse der Verhaltenstests im CUMS-induzierten Rattendepressionsmodell Um die Wirksamkeit des CUMS-Verfahrens bei der Induktion von depressionsähnlichen Verhaltensweisen zu bestätigen, wurde ein Manipulationscheck durchgeführt. Männliche Sprague-Dawley-Ratten (SD) wurden über einen Zeitraum von 4 Wochen nach dem Zufallsprinzip entweder der MOD- oder der CON-Gruppe zugeteilt, wie in Schritt 1.2.3 beschrieben. Anschließend wurden die Ratten getötet und ihre Hippocampi vollständig präpariert...

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Dieses Protokoll skizziert ein CUMS-Modell (Chronic Unpredictable Mild Stress) für Depressionen, das auf der mongolischen medizinischen Theorie basiert, zusammen mit Methoden zur Validierung von Verhaltenstests.

Depression is a prevalent affective disorder and constitutes a leading cause of global disability. The limitations of current pharmacological ...

Der Schwerpunkt unserer Forschung ist die mongolische medizinische Forschung. In dieser Studie untersuchen wir die Faktoren, die in der mongolischen Medizin zu Depressionen beitragen, mit besonderem Schwerpunkt auf der Interaktion zwischen internen Faktoren wie Wind, Biofilm und externen Faktoren. Das Problem der Anpassung an das Fehlen traditioneller mongolischer medizinischer Modelle wurde gelöst.Dieses Protokoll befasst sich mit der Etablierung eines Tiermodells auf der Grundlage der mongolischen Medizintheorie und gibt dann einige Vorschläge für die zukünftige Forschung in der mongolischen Medizin. In einer Studie zu depressiven Störungen ist die Etablierung eines Tiermodells entscheidend für das Verständnis der pathologischen Mechanismen und Wirkungen neuer Medikamente. Im Vergleich zu anderen Techniken steht dieses Protokoll eher im Einklang mit der Pathogenese und den Behandlungsprinzipien der Depression in der traditionellen mongolischen Medizin, was die zukünftige Forschung zur Behandlung von Depressionen in der mongolischen Medizin unterstützen wird.Das Protokoll kann die Beziehung zwischen äußeren und inneren Faktoren aufzeigen, die zusammenwirken, um Krankheiten zu erzeugen, und steht in Übereinstimmung mit dem theoretischen System der mongolischen Medizin. Es wird die Grundlagenforschung der traditionellen Medizin zu Depressionen vorantreiben und einige Empfehlungen geben, die nachfolgenden Forschern helfen werden, traditionelle Medikamente zu erforschen, zu entwickeln und einzusetzen.

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Research

JoVE Journal

Medicine

Chronic Unpredictable Mild Stress in Rats based on the Mongolian medicine

556 Aufrufe.  Inner Mongolia Medical University. Der Schwerpunkt unserer Forschung ist die mongolische medizinische Forschung. In dieser Studie untersuchen wir die Faktoren, die in der mongolischen Medizin zu Depressionen beitragen, mit besonderem Schwerpunkt auf der Interaktion zwischen internen Faktoren wie Wind, Biofilm und externen Faktoren. Das Problem der Anpassung an das Fehlen traditioneller mongolischer medizinischer Modelle wurde gelöst.Dieses Protokoll befasst sich mit der Etablierung eines Tiermodells auf der Grundlage d...

Serie: Autor im Rampenlicht: Etablierung eines Nagetiermodells zur Untersuchung von Depressionsfaktoren in der traditionellen mongolischen Medizin

Depression is a prevalent affective disorder and constitutes a leading cause of global disability. The limitations of current pharmacological interventions contribute to the substantial health burden attributed to this condition. There is a pressing need for a deeper understanding of the underlying mechanisms of depression, making pre-clinical models with translational potential highly valuable. Mongolian medicine, a subset of traditional medicine, posits that disease occurrence is closely tied to the equilibrium of wind, bile, and Phlegm. In this study, we introduce a protocol for the chronic unpredictable mild stress (CUMS) method in rats. Within this framework, rats are subjected to a series of fluctuating, mild stressors to induce a depression-like phenotype, mimicking the pathogenesis of human depression. Behavioral assays employed in this protocol include the sucrose preference test (SPT), indicative of anhedonia-a core symptom of depression; the open field test (OFT), which measures anxiety levels; and the Morris water maze test (MWM), which evaluates spatial memory and learning abilities. The CUMS method demonstrates the capability to induce anhedonia and to cause long-term behavioral deficits. Furthermore, this protocol is more aligned with Mongolian medical theory than other animal models designed to elicit depression-like behavior. The development of this animal model and subsequent research provide a robust foundation for future innovative studies in the realm of Mongolian medicine.

This protocol outlines a chronic unpredictable mild stress (CUMS) model for depression based on Mongolian medical theory, along with methods for validating behavioral tests.