الحث الدوائية من الميلانين البشرة والحماية من حروق الشمس في نموذج انساني ماوس

Summary

هو فعل البشرة الميلانين عن طريق التطبيق الموضعي للforskolin في نموذج الفئران حساسة للأشعة فوق البنفسجية الإنسان ذوي البشرة البيضاء. التلاعب الدوائية من مستويات المخيم في الجلد والبشرة سواد حماية بقوة ضد بوساطة الأشعة فوق البنفسجية التهاب (حروق الشمس) مقاسا الحد الأدنى للجرعة حمامي (MED) مقايسة.

Abstract

عدالة الجلد والحساسية للأشعة فوق البنفسجية وخطر الاصابة بسرطان الجلد عن ربط مع وظيفة الفسيولوجية من مستقبلات ميلانوكورتين 1، وهو يشير البروتين يقترن _G-ق وجدت على سطح الخلايا الصباغية. Mc1r يحفز محلقة أدينيليل والإنتاج المخيم والتي، بدورها، يصل ينظم إنتاج الصباغية الميلانين في الجلد. من أجل دراسة الآليات التي Mc1r إشارات يحمي البشرة من الأشعة فوق البنفسجية الإصابة، تعتمد هذه الدراسة على نموذج الفأر مع "الجلد أنسنة" بناء على البشرة التعبير عن الخلايا الجذعية عامل (SCF). K14-SCF الفئران المعدلة وراثيا تحتفظ الخلايا الصباغية في البشرة، وبالتالي لديها القدرة على أن تودع الميلانين في البشرة. في هذا النموذج الحيواني، النوع البري نتائج الوضع Mc1r في ترسب قوية من الأسود الصباغ السوي (Eumelanin) والنمط الظاهري محمية الأشعة فوق البنفسجية. في المقابل، الحيوانات K14-SCF مع معيبة Mc1r يشير قدرة المعرض على تصبغ أحمر / شقراء، السوي (Eumelanin) القليل جدا في الجلد والنمط الظاهري حساسة للأشعة فوق البنفسجية. المنطق الذي ترسب السوي (Eumelanin) قد يتعزز من خلال وكلاء الموضعية التي تحاكي Mc1r الإشارات، وجدنا أن التطبيق المباشر لاستخراج forskolin على الجلد من الفئران ذوي البشرة البيضاء Mc1r معيبة أدى إلى تحريض قوية السوي (Eumelanin) وحماية للأشعة فوق البنفسجية ^1. نحن هنا تصف طريقة لإعداد وتطبيق استخراج الجذر الطبيعية التي تحتوي على forskolin إلى K14-SCF الفئران ذوي البشرة البيضاء وتقرير طريقة لقياس حساسية للأشعة فوق البنفسجية من خلال تحديد الحد الأدنى من الجرعة حمامية (MED). باستخدام هذا النموذج الحيواني، فمن الممكن لدراسة كيفية تحريض البشرة المخيم والتصبغ في الجلد تؤثر على الاستجابات الفسيولوجية للتعرض للأشعة فوق البنفسجية.

Introduction

حدوث سرطان الجلد، الشكل الأكثر فتكا من سرطان الجلد، ازداد بشكل كبير خلال العقود القليلة الماضية في الولايات المتحدة، وخاصة بين الأفراد ذوي البشرة البيضاء. الأدلة الجزيئية وبائية قوية تورط الأشعة فوق البنفسجية كعامل البيئية المسببة الرئيسية ^2-5. زيادة التعرض للأشعة فوق البنفسجية في شكل التعرض لأشعة الشمس واستخدام دباغة سرير من المرجح أن تكون مسؤولة عن جزء كبير من الزيادة في حالات سرطان الجلد ^6-7. يبدو خطر سرطان الجلد مرتبط بشكل خاص مع حروق الشمس ^8، وخاصة تلك في وقت مبكر من الحياة ^9-10. ويرتبط خطر حروق الشمس، ليس فقط لجرعة وشدة التعرض للأشعة فوق البنفسجية، ولكن أيضا من العوامل الموروثة التي تؤثر على الاستجابة الجلدية للأشعة فوق البنفسجية. الجلد تصبغ هي واحدة من أهم العوامل المحددة للحساسية للأشعة فوق البنفسجية، خطر حروق الشمس ومخاطر الاصابة بالسرطان. يحدث سرطان الجلد حوالي عشرين مرة أكثر تواترا في الأشخاص ذوي البشرة الفاتحة مقارنة individua ذوي البشرة الداكنة^11-13 ليرة سورية.

الميلانين، وهي الصبغة التي تنتجها الخلايا الصباغية في البشرة، هو المحدد الرئيسي للبشرة الجلد. الميلانين يأتي في نوعين رئيسيين: (1) السوي (Eumelanin)، والبني / أسود الصبغة الداكنة فعالية في امتصاص الطاقة من الأشعة فوق البنفسجية، و (2) pheomelanin، المحمر / شقراء أقل فعالية في منع تغلغل الأشعة فوق البنفسجية الفوتونات داخل الجلد الصباغ. لون البشرة، والحساسية للأشعة فوق البنفسجية ومخاطر سرطان الجلد وتحدد إلى حد كبير من المحتوى البشرة السوي (Eumelanin) ^14-15. أكثر السوي (Eumelanin) في البشرة، يمكن للفوتونات الأشعة فوق البنفسجية أقل تخترق الجلد. بسبب المستويات المنخفضة من السوي (Eumelanin) فطرية، والأفراد ذوي البشرة البيضاء هم أكثر عرضة لتأثيرات حادة ومزمنة من الأشعة فوق البنفسجية ^16-18.

تصبغ الجلد، وسرطان الجلد المخاطر والقدرة على "تان" بعد التعرض للأشعة فوق البنفسجية جميع ترتبط مع القدرة إشارة من مستقبلات ميلانوكورتين 1 (Mc1r)، وإلى جانب _ق-G سبعة عبر الغشاء قurface مستقبلات الخلايا الصباغية على ^19-22. عندما يربط Mc1r وما شابه ذلك يجند عالية تقارب المعقودة α الخلايا الصباغية هرمون تحفيز (α-MSH)، وهناك تفعيل محلقة أدينيليل وإنتاج رسول المعسكر الثاني ^23. يتضمن الاستجابة الفسيولوجية الطبيعية من الجلد بعد التعرض للأشعة فوق البنفسجية إنتاج البشرة من α-MSH بواسطة الخلايا الكيراتينية ^24-29. نحن وآخرون نفترض أن المستمدة القرنية α-MSH بربط Mc1r على الخلايا الصباغية البشروية، وبدء الإنتاج المصب من رسول الثانية المخيم من خلال تفعيل أدينيليل محلقة ^30. مستويات المخيم السيطرة على العديد من جوانب التمايز للخلايا الصباغية، بما في ذلك مسارات البقاء على قيد الحياة، وإصلاح الحمض النووي والتوليف الصباغ. إشارات Mc1r ومخيم لحث بوضوح مستويات إنزيم الصباغ السوي (Eumelanin) والإنتاج. عندما Mc1r إشارات غير سليمة ومستويات المخيم الصباغية هي قوية، ويتم إنتاج السوي (Eumelanin) ويظلم الجلد. ومع ذلك، إذا Mc1r الإشارات المعيبة، ولا تزال مستويات منخفضة المخيم حشوية، ويتم إنتاج pheomelanin بدلا ^1. التوليف السوي (Eumelanin) يمكن حفز عقاقيري بواسطة العوامل التي ترفع مستويات المخيم ^{1،14،31-35.}

منذ البروتين Mc1r هو منظم رئيسي من خطر سرطان الجلد لدى البشر ^36-46، ونحن مهتمون في الآليات التي تحمي الخلايا الصباغية Mc1r ضد الأشعة فوق البنفسجية التي يسببها السرطان. كأساس لدراساتنا، ولدت لدينا Mc1r المتغير الفئران المعدلة وراثيا على نموذج محض C57BL / 6 الخلفية الوراثية ^1. في هذا النموذج، وقف عامل الخلية (SCF) يتم التعبير جوهري في البشرة القاعدية ويتم الاحتفاظ البشرة الخلايا الصباغية في الجلد بين الجريبات في جميع مراحل الحياة ^47، وعلى النقيض من الفئران غير المعدلة وراثيا في الخلايا الصباغية التي لتوطين الأدمة في بصيلات الشعر. مع التحوير K14-SCF مسجلة، البشرة تصبح مصطبغة مع بخاصة مميزة الميلانين أصباغ الصباغسلالة من الحيوانات ^1. الفئران K14-SCF على خلفية الوراثية C57BL / 6 مع نوع البرية Mc1r إشارات والجلد أسود كالفحم تتميز بمستويات عالية جدا من السوي (Eumelanin) الصباغ. وليس من المستغرب، وهذه الحيوانات هي شديدة المقاومة للأشعة فوق البنفسجية. في المقابل، المتطابقة وراثيا K14-SCF C57BL / 6 الحيوانات التي تؤوي غير نشط Mc1r متحولة لديهم تقريبا أي السوي (Eumelanin) في البشرة. بدلا من ذلك، هذه الحيوانات "التمديد" (Mc1r ^{ه / ه)} لديهم بشرة الجلد العادلة الناجمة عن ترسب صبغة pheomelanin (الشكل 1A) وأكثر من ذلك بكثير هي حساسة للأشعة فوق البنفسجية ^48-49.

وقد ثبت أن مركبات دوائية مع الخصائص الكيميائية التي تسمح تغلغل داخل الجلد للحث على أكثر قدرة السوي (Eumelanin) في ملحق (Mc1r ^{ه / ه)} نموذج حيواني K14-SCF مباشرة عن طريق التلاعب مستويات المخيم في الخلايا الصباغية في الجلد البشرة. وقد upregulation الميلانين في هذا النموذج صeported عن طريق تفعيل أدينيليل محلقة ¹ وكذلك تثبيط فسفودايستراز 4 ^35. في هذه المقالة، ونحن لشرح إعداد والتطبيق الموضعي للforskolin في ملحق (Mc1r ^{ه / ه)} الحيوانات K14-SCF النموذج الذي حساسة للأشعة فوق البنفسجية الإنسان ذوي البشرة البيضاء. وتبين لنا أن تطبيق مرتين يوميا من العقار يعزز تسارع التصبغ، هو أن سواد الجلد بسبب ترسب الميلانين صبغة البشرة والبشرة التي يسببها الميلانين يحمي من الأشعة فوق البنفسجية التي يسببها حروق الشمس من خلال قياس "جرعة الحد الأدنى من حمامي" (MED) ^48.

Protocol

1. إعداد Forskolin للإدارة موضعي من استخراج الجذر الخام من Plectranthus barbatus (Cohleus فورسكوهلي) النباتية

1. يتبع بروتوكولات للتجارب الفئران المبادئ التوجيهية للسلوك الأخلاقي في رعاية واستخدام الحيوانات وتمت الموافقة من قبل اللجنة المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام في جامعة كنتاكي (بروتوكول 00768M2004 #). يتم استخراج الجذر حتى في الوزن 40٪ / وحدة التخزين في قاعدة جلدية قياسية من الايثانول 70٪، 30٪ بروبيلين غليكول.
2. تزن 200 غرام من forskolin الخام استخراج الجذر وتحويلها إلى دورق. لجعل 500 مل من 40٪ (ث / ت) الحل، في resuspend 200 غرام من forskolin الخام استخراج الجذر بإضافة معظم ولكن ليس كل من حجم السيارة (الايثانول 70٪، و 30٪ البروبيلين غليكول) وتقديم حل ل تقريبا 450 مل.
3. يحرك المزيج لمدة ساعة في درجة حرارة الغرفة. فإن الحل يكون لزج نوعا ما وربما تتطلب التحريض دليل على "رفع" استخراج إلى حل قبلشريط ضجة غير قادرة على تولي المسؤولية.
4. بعد ساعة من التحريك، صب الخليط في الاسطوانة وتحقيق وحدة التخزين إلى 500 مل باستخدام السيارة التي استخدمت ل"التشطيف" الكأس التي تم استخدامها لتحريك الطين (لتحقيق أقصى قدر من الانتعاش forskolin من الدورق) .
5. نقل الطين إلى 50 مل أنابيب البولي بروبلين الطرد المركزي. الطرد المركزي (1،500 x ج، درجة حرارة الغرفة، 15 دقيقة) باستخدام جهاز للطرد المركزي فوق المنضدة. عند هذه النقطة، فإن المواد غير القابلة للذوبان يكون ضغط إلى حد ما، مما يسمح طاف أن سكب بسهولة.
6. تحديد الحل عبر غشاء خلات السليلوز 0.22 ميكرون لإزالة المواد غير القابلة للذوبان أي المتبقية من استخراج. ونحن نستخدم نظام زجاجة أعلى مصممة للثقافة الخلية، جنبا إلى جنب مع استخدام مرشحات قبل أن تأتي مع وحدة لمنع انسداد المبكر للغشاء من مكونات غير قابلة للذوبان من استخراج الجذر. عند اتخاذ كميات كبيرة من استخراج، تصفية ما يقرب من 100 مل في كل مرة، تغيير الرهان قبل التصفيةوين كل وحدة تخزين إضافية.
7. عند تخزينها في درجة حرارة الغرفة، ويحافظ على استخراج نشاط بيولوجي يصل لمدة تصل إلى واحد.

2. إعداد C57BL / 6 K14-SCF الفئران لعلاج موضعي

1. إزالة الفراء الظهرية من الحيوانات عن طريق القص الكهربائية. لفترة وجيزة تخدير الحيوانات مع isoflurane والاستنشاق لتسهيل القص من الفراء الظهرية مع المقصات الكهربائية تجهيزه مع 0.25 مم رئيس التحضيرية الجراحية (فيشر العلمية). ويفضل استخدام نوع واحد فقط من التخدير (مثل الكيتامين / زيلازين) لتقليل خطر جرعة زائدة من مخدر. غرفة استنشاق المشبعة يحمل المخاطر المهنية عند استخدامها خارج غطاء الدخان ويسلم كميات غير معروفة من مخدر للحيوانات. من الناحية المثالية ينبغي أن تستخدم المرذاذ الدقة.
2. لإزالة المتبقي قصبة الشعر، وعلاج الحيوانات مع مزيل الشعر الكيميائية. إدارة التخدير للحيوان مع حقنة IP الكيتامين 40 ملغ / كغ وزيلازين 4 ملغ / كغ
3. مرة واحدة يتم تخدير الحيوانات بشكل كاف (كما تقرره قرصة أخمص قدميه)، تنطبق على كمية الإصبع الحجم من كريم مزيل الشعر لالمنفصمة الجلد الظهري باستخدام إصبع القفاز. فرك كريم في الجلد لمدة 30-60 ثانية أو حتى يمكن أن ينظر إليه بشكل واضح في الشعر كريم كما يتم نقله حولها. ترك الكريم على فقط لمبلغ الحد الأدنى من الوقت المطلوب لإزالة الشعر كما يؤدي التعرض لفترات طويلة لحرق الكيميائي للبشرة، البشرة انهيار وموت من فقدان النزاهة البشرة.
4. مسح الجلد الظهري مع قطع من الشاش غارقة في المياه بشكل متكرر حتى تمت إزالة كل كريم. الحيوانات الجافة باستخدام المناشف الورقية لينة، وتسمح لهم باسترداد في مكان منعزل الدافئة (مثل أقفاص نظيفة وضعها على وسادة الاحترار). يزيل الشعر الحيوانات احدة تلو الأخرى وترصد عن كثب في جميع أنحاء الداخلي.

3. إدارة موضعي من Forskolin أو التحكم في السيارة

1. الحيوانات ينبغي أن يعامل في وقت واحد. تخدير لفترة وجيزة مع الشهيقوقد وضعت د isoflurane وعن طريق وضع الماوس على رأس من النايلون مرشح النموذج المجهزة نفاذية الهواء بموجبها على منشفة ورقية المشبعة في isoflurane وعاء زجاجي بغطاء واضح المشبعة في isoflurane وغطاء الدخان. فضح الماوس لisoflurane ولفترة كافية لقمع حركات العضلات الطوعية ولكن للحفاظ على التنفس العفوي (عادة 10-20 ثانية). وترك الحيوان في isoflurane وقتا طويلا يؤدي إلى قمع الجهاز التنفسي والموت. فمن الأفضل أن يخطئ على جانب من "ضوء يذهب" والحاجة إلى إعادة فضح-الماوس لفترة وجيزة إلى أكثر isoflurane وبدلا من الإفراط في تعريض الحيوان إلى وفاة المخدرات والمخاطر.
2. إزالة الحيوان من غرفة وisoflurane ووضع على وسادة ماصة نظيفة مقاعد البدلاء.
3. باستخدام micropipette 1،000 ميكرولتر تجهيزه مع طرف البولي بروبلين القابل للتصرف، ووضع 400 ميكرولتر من 40٪ استخراج forskolin الخام (لن الحيوانات السيطرة على السيارة تلقي الايثانول 70٪، 30٪ بروبيلين غليكول وحده).
4. نقل على استخراجالخلفي من الحيوان بواسطة نازف وضعها على الجلد ومن ثم، وذلك باستخدام الجانب من طرف ماصة، تشويه استخراج فوق الجلد الظهري حتى تمت تغطية كل الجلد. ليست هناك حاجة لطخة الجلد بعد التطبيق.
5. العودة الماوس لقفصه، ومراقبة بعناية حتى يتعافى من التخدير.
6. من أجل أن عدم الصباغ الآثار المخيم لا ينبغي أن نخلط الأشعة فوق البنفسجية التجارب حساسية، والتوقف عن العلاجات الموضعية 2 أيام قبل التعرض للأشعة فوق البنفسجية (تأثير الصباغ يستمر عدة أيام وراء مشاركة العلاج الموضعي).

4. لون البشرة بواسطة عاكس قياس قياس الألوان

1. لفترة وجيزة تخدير الماوس مع isoflurane واستنشاق (انظر أعلاه).
2. معايرة مقياس الألوان مينولتا عن طريق وضع الرأس المحمولة على السطح الأبيض موحدة المتوفرة مع مقياس الألوان.
3. وضع رئيس القياس المحمولة من تدفق مقياس الألوان مع الجلد الظهري من الحيوان ضمان أن الجولة apertur 1 سم ²يتم الضغط ه تماما على الجلد. تأخذ على الأقل ثلاثة قياسات منفصلة في مناطق مختلفة من الجلد الظهرية.
4. حساب متوسط ​​درجة L * ± SD لكل حيوان ولكل مجموعة العلاج. ويمكن أن يتم قياس الألوان العاكسة في أي نقطة في التجربة.

5. تقرير من الأشعة فوق البنفسجية الحساسية عن طريق حساب "الحد الأدنى من الجرعة الحمامية" (MED)

1. استخدام الحيوانات التي تم علاجها قبل مع أي مركبة أو forskolin كما هو موضح أعلاه. تخدير الحيوانات مع حقن داخل الصفاق من خليط مستوى الكيتامين وزيلازين (انظر أعلاه).
2. إعداد قطعة من الشريط للأشعة فوق البنفسجية الانسداد لاختبار MED. لتوليد ثقوب في الشريط، واستخدام لكمة ثقب الثقيلة مع 1 سم ² انقطاع دائرية (أرقام 2A وباء). وجود ثقوب من حجم المعرفة وترتيب متماثل في الشريط يسهل الاعتراف التغيرات الجلدية بعد التشعيع. على كل حفرة في الشريط، وتطبيق قطعة صغيرة ولكن للانفصال بسهولة من الشريط التي يمكن إزالتها في أوقات محددة أثناء التعرض للأشعة فوق البنفسجية للسماح إعطاء جرعات الأشعة فوق البنفسجية مختلفة.
3. بمجرد مخدرا الحيوانات على نحو كاف، ووضع الشريط على السطح الظهري. وينبغي دائما أن تستخدم مواد التشحيم العين تحت التخدير.
4. بدوره على مصدر للأشعة فوق البنفسجية التي تتكون من اثنين وستنجهاوس F15T8UV-B مصابيح مع ذروة الانتاج من 313 نانومتر وطائفة من 280-370 نانومتر. السماح للمصباح لكي تتوازن لإخراج الأشعة فوق البنفسجية مستمرة إذا ما قيست على مقياس ضوئي للأشعة فوق البنفسجية مع جهاز استشعار الأشعة فوق البنفسجية (يستغرق عادة بضع دقائق للمصابيح في عملية الاحماء).
5. استنادا إلى معدل انتقال الأشعة فوق البنفسجية مقاسا مضواء الأشعة فوق البنفسجية، الأشعة فوق البنفسجية حساب وقت التعرض لكل جرعة المرجوة. على سبيل المثال، UVB تدابير الانتاج مصباح لدينا 2.4 ميغاواط / سم ^2. لذا، لإدارة 5 كج / م ^2، ستحتاج الجلد أن تتعرض ل208 ثانية (والذي هو 3 دقائق و 28 ثانية) من الإشعاع فوق البنفسجية، كما يحسب أدناه:
   upload/50670/50670eq1.jpg "/>
6. وضع مخدرا الحيوانات (كل مع الشريط في مكان الانسداد) بطني السطحية وصولا الى ضمان التعرض للأشعة فوق البنفسجية حتى. لإدارة جرعات اختيار من الأشعة فوق البنفسجية، وإزالة بالتتابع الأشرطة الانسداد صغيرة تغطي الثقوب لفضح 1 سم ² من مناطق الجلد لجرعات صحيحة من الإشعاع. لذا، وذلك باستخدام المثال أعلاه، إذا 40 كج / م ² هي أكبر جرعة في التجربة، ثم الحيوان سيكون تحت المصباح لمدة 27 دقيقة و 47 ثانية ومجموع الجلد في حالة 40 كج / م ² لن يكون لها أي المغطي الشريط طوال الوقت. ومع ذلك، والشريط حالة تغمر 5 كج / م ² سيتم إزالة عندما يكون هناك 208 ثانية المتبقية في التعرض. وينبغي أن يتم توقيت إزالة الشريط بحيث أن كل حالة ينتهي في وقت واحد.
7. بعد التعرض للأشعة فوق البنفسجية، انزع الشريط من الجلد الظهري بعناية، مع الحرص على عدم تمزق الجلد مع الحركات المفاجئة أو مفرطة في قوة. وضع الحيوانات في مكان هادئ دافئ للسماحالتعافي من التخدير.
8. مراقبة الفئران لمدة 24-48 ساعة للبحث عن مناطق سرية من حمامي (احمرار) أو وذمة (تورم) المقابلة لمواقع التشريحية تتعرض لجرعة محددة من الأشعة فوق البنفسجية. توثيق النتائج الجلد فوتوغرافيا.
9. قيمة MED يتوافق مع الحد الأدنى للجرعة من الأشعة فوق البنفسجية التي تسبب التهاب كما هو محدد من قبل حمامي و / أو وذمة من دائرة يتعرض بأكمله من الجلد. نلاحظ أن تصبغ في الجلد يمكن أن تحد تحديد MED، ومع ذلك، حمامي ووذمة لا تزال عموما يتم تقييمها بدقة، ويرجع الفضل في ذلك جزئيا إلى شكل محدد من فتحات في الشريط أثناء التعرض للأشعة فوق البنفسجية.

6. التحليل الإحصائي

تحليل البيانات بين الأفواج من الفئران عن طريق اتجاه واحد أنوفا مع Bonferroni آخر اختبار (الرسم البياني الوسادة PRISM). القيم ع <0.05 تعتبر ذات دلالة إحصائية.

النتائج

تم إنشاؤها C57BL / 6 الفئران على الخلفيات eumelanotic، pheomelanotic أو عديم الميلانين دمج التحوير K14-SCF كما هو موضح (الشكل 1A). أفواج من التمديد ذوي البشرة البيضاء (Mc1r ^{ه / ه،} صور ^{+ / +)} عولجت فئران بجرعات موضعيا مرتين يوميا إما مركبة (70٪ من الإيثانول و 30٪ البروبيل?...

Discussion

باستخدام نموذج حيواني من الإنسان ذوي البشرة البيضاء، نجد أن التطبيق الموضعي لاستخراج الجذر الخام forskolin الغني يظلم بقوة البشرة من خلال تحفيز إنتاج مادة الميلانين في الجلد. التصبغ البشرة يعتمد على التعبير عن عامل الخلايا الجذعية في البشرة القاعدية، كما يحدث في جلد ال?...

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Reagents
Coleus Forskoli extract 20%	Buckton Scott USA Inc.	n/a	Princeton, NJ
Isothesia, Isoflurane , USP	Butler Schein	NCD 11695-6776-1	Dublin, OH, USA
Xylazine	Anased Injection	LA04612	Shenandoah, Iowa, USA
Ketamine HCl, USP	Putney	NDC 26637-411-01	St. Joseph, MO, USA
Ethanol	Decon Labs.	2705
Propylene glycol	Adesco	05751L	Solon, OH, USA
Depilatory cream, Nair	Church Dwight	JF-11 4381322	Priceton, NJ
EQUIPMENT
Germicidal Hg Lamp UV-B	Westinghouse	F15T8UV-B
Radiometer photometer	International light	1LT400A	Peabody, MA,USA
Chromameter	Konica Minolta	CR-400	Ramsey, NJ, USA
Data Processor for Chromameter CR-400	Konica Monilta	DR-400	Ramsey, NJ, USA