إجراء يتم التحكم فيه بالسرعة لتقييم الوظائف الانبساطية المعتمدة على معدل ضربات القلب في نماذج قصور القلب في الفئران

Summary

يصف البروتوكول الحالي الحصول على علاقة الضغط والحجم من خلال تنظيم السرعة عبر المريء ، والذي يعمل كأداة قيمة في تقييم الوظيفة الانبساطية في نماذج الفئران لفشل القلب.

Abstract

فشل القلب مع الكسر القذفي المحفوظ (HFpEF) هو حالة تتميز بالخلل الانبساطي وعدم تحمل التمرين. في حين يمكن استخدام اختبارات الدورة الدموية المجهدة أو التصوير بالرنين المغناطيسي للكشف عن الخلل الانبساطي وتشخيص HFpEF في البشر ، فإن هذه الطرائق محدودة في البحث الأساسي باستخدام نماذج الفئران. يشيع استخدام اختبار تمرين جهاز المشي لهذا الغرض في الفئران ، ولكن يمكن أن تتأثر نتائجه بوزن الجسم وقوة العضلات الهيكلية والحالة العقلية. هنا ، نصف بروتوكول تنظيم السرعة الأذيني للكشف عن التغيرات المعتمدة على معدل ضربات القلب (HR) في الأداء الانبساطي والتحقق من فائدته في نموذج الماوس من HFpEF. تتضمن الطريقة التخدير والتنبيب وإجراء تحليل حلقة حجم الضغط (PV) المصاحب لسرعة الأذينين. في هذا العمل ، تم إدخال قسطرة التوصيل عبر نهج قمي البطين الأيسر ، وتم وضع قسطرة سرعة الأذينية في المريء. تم جمع الحلقات الكهروضوئية الأساسية قبل إبطاء HR باستخدام ivabradine. تم جمع الحلقات الكهروضوئية وتحليلها بزيادات HR تتراوح من 400 نبضة في الدقيقة إلى 700 نبضة في الدقيقة عبر السرعة الأذينية. باستخدام هذا البروتوكول ، أظهرنا بوضوح ضعف الانبساطي المعتمد على HR في نموذج HFpEF المستحث بالتمثيل الغذائي. ساء كل من ثابت وقت الاسترخاء (Tau) وعلاقة الضغط والحجم الانبساطي النهائي (EDPVR) مع زيادة الموارد البشرية مقارنة بالفئران الضابطة. في الختام ، يعد هذا البروتوكول الذي يتم التحكم فيه بالسرعة الأذينية مفيدا للكشف عن اختلالات القلب المعتمدة على HR. يوفر طريقة جديدة لدراسة الآليات الأساسية للخلل الانبساطي في نماذج الفئران HFpEF وقد يساعد في تطوير علاجات جديدة لهذه الحالة.

Introduction

يمثل قصور القلب سببا رئيسيا لدخول المستشفى والوفاة في جميع أنحاء العالم ، ويمثل قصور القلب مع الكسر القذفي المحفوظ (HFpEF) حوالي 50٪ من جميع تشخيصات قصور القلب. يتميز HFpEF بالخلل الانبساطي وضعف تحمل التمرين ، ويمكن اكتشاف تشوهات الدورة الدموية المرتبطة به ، مثل الخلل الانبساطي ، بوضوح من خلال اختبار الدورة الدموية المجهد بالتمرين أو فحوصات التصوير بالرنين المغناطيسي ^1,2.

ومع ذلك ، في النماذج التجريبية ، تكون الطرائق المتاحة لتقييم التشوهات الفسيولوجية المتعلقة ب HFpEF محدودة ^3,4. يستخدم اختبار تمرين جهاز المشي (TMT) لتحديد ....

Protocol

تمت الموافقة على هذا البروتوكول الحيواني من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام واتبع اللوائح الخاصة بالتجارب على والأنشطة ذات الصلة في جامعة طوكيو. بالنسبة للدراسة الحالية ، تم استخدام ذكور الفئران C57 / Bl6J البالغة من العمر 8-12 أسبوعا. تم الحصول على من مصدر تجاري (انظر جدول المواد). تم إنشاء نموذج من HFpEF من خلال إدارة نظام غذائي غني بالدهون لمدة 15 أسبوعا بالتزامن مع إستر ميثيل NG-nitro-L-arginine ، كما هو موضح سابقا¹⁰.

1. الاستعدادات القسطرة ومعايرة الضغط / الحجم

1. ضع قسطرة التوصيل في محلول ملحي عادي ، وقم بإرفاقها بوحدة تتكون من PowerLab 8/35 ووحدة حجم الضغط (وحدة MPV....

النتائج

يتم عرض بيانات حلقة PV الأساسية في الشكل 1 والجدول 1. عند خط الأساس (في غياب السرعة) ، لم تكن هناك فروق ذات دلالة إحصائية في المعلمات الانبساطية مثل ثابت وقت الاسترخاء (Tau) ، والحد الأدنى لمعدل تغير الضغط (dP / dt min) ، و EDPVR بين الفئران الضابطة و HFpEF. ومع ذلك ، أظهرت الفئران HF.......

Discussion

نقدم منهجية لتقييم علاقات الضغط والحجم مع تطبيق سرعة عبر المريء. يعد عدم تحمل التمرين أحد الخصائص الرئيسية ل HFpEF ، ومع ذلك لا توجد تقنيات متاحة لتقييم وظيفة القلب في الفئران أثناء التمرين. يوفر بروتوكول السرعة الخاص بنا أداة قيمة للكشف عن الخلل الانبساطي ، والذي قد لا يكون واضحا في ظل ظروف ?.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
2-0 silk suture, sterlie	Alfresa Pharma Corporation, Osaka, Japan	62-9965-57	Surgical Supplies
2-Fr tetrapolar electrode catheter	Fukuda Denshi, Japan and UNIQUE MEDICAL, Japan	custom-made	Surgical Supplies
Albumin Bovine Serum	Nacalai Tesque, Inc., Kyoto, Japan	01859-47	Miscellaneous
C57/BI6J mouse	Jackson Laboratory		animals
Conductance catheter	Millar Instruments, Houston, TX	PVR 1035
Electrical cautery, Electrocautery Knife Kit	ellman-Japan,Osaka, Japan	1-1861-21	Surgical Supplies
Etomidate	Tokyo Chemical Industory Co., Ltd., Tokyo Japan	E0897	Anesthetic
Grass Instrument S44G Square Pulse Stimulator	Astro-Med, West Warwick, RI		Pacing equipment
Isoflurane	Viatris Inc., Tokyo, Japan	8803998	Anesthetic
Ivabradine	Tokyo Chemical Industory Co., Ltd., Tokyo Japan	I0847	Miscellaneous
LabChart software	ADInstruments, Sydney, Australia	LabChart 7	Hemodynamic equipment
MPVS Ultra	Millar Instruments, Houston, TX	PL3516B49	Hemodynamic equipment
Pancronium bromide	Sigma Aldrich Co., St. Louis, MO	15500-66-0	Anesthetic
PE10 polyethylene tube	Bio Research Center  Co. Ltd., Tokyo, Japan	62101010	Surgical Supplies
PowerLab 8/35	ADInstruments, Sydney, Australia	PL3508/P	Hemodynamic equipment
PVR 1035	Millar Instruments, Houston, TX	842-0002	Hemodynamic equipment
Urethane (Ethyl Carbamate)	Wako Pure Chemical Industries, Ltd., Osaka, Japan	050-05821	Anesthetic
Vascular Flow Probe	Transonic, Ithaca, NY	MA1PRB	Surgical Supplies