محاكاة طريقة لفة دينغ على إصابة العضلات التي يسببها Notexin في الفئران

Summary

يصف هذا البروتوكول جهازا بسيطا يحاكي طريقة لفة دينغ ، وينشئ نموذجا للفئران لإصابة العضلات الهيكلية ، ويستخدم تلطيخ الهيماتوكسيلين-يوزين لمراقبة أمراض الأنسجة التالفة ومقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم للكشف عن التغيرات في علامات تلف المصل.

Abstract

تعد طريقة لفة دينغ واحدة من أكثر عمليات التلاعب شيوعا في عيادات التدليك الصينية التقليدية (Tuina) وواحدة من أكثر عمليات التلاعب المعاصرة تأثيرا في الصين. يعتمد على طريقة الدرفلة التقليدية المستخدمة بشكل شائع في نوع Zen بإصبع واحد ويسمى طريقة لفة Ding. نظرا لآثارها المضادة للالتهابات والمعززة للدورة الدموية ، فإن طريقة دينغ المتدحرجة لها تأثيرات علاجية سليمة على اعتلال عضلي. بسبب المساحة الكبيرة للقوة المطبقة على جلد الإنسان ، فإن طريقة لفة دينغ تمثل تحديا في الأداء على التجارب ذات مناطق الجلد الصغيرة ، مثل الفئران والأرانب. بالإضافة إلى ذلك ، تختلف قوة Tuina المطبقة على جسم الإنسان عن تلك المطبقة على التجارب ، لذلك قد يحدث أن تكون القوة عالية جدا أو منخفضة جدا لتحقيق التأثير العلاجي ل Tuina أثناء التجربة. تهدف هذه التجربة إلى إنشاء مدلك بسيط مناسب للفئران بناء على معلمات التلاعب المتداول الخاصة ب Ding (القوة ، التردد ، مدة Tuina). يمكن للجهاز توحيد التلاعب في التجارب على وتقليل التباين في قوة Tuina المطبقة على المختلفة بسبب عوامل ذاتية. تم إنشاء نموذج فئران لإصابة العضلات الهيكلية التي يسببها notexin ، وتم استخدام علامات إصابة البلازما الكرياتين كيناز (CK) وبروتين ربط الأحماض الدهنية 3 (FABP3) لتقييم التأثير العلاجي لتوينا على إصابة العضلات الهيكلية. أظهرت النتائج أن مدلك Tuina هذا يمكن أن يقلل من مستويات تعبير CK و FABP3 ويبطئ درجة إصابة العضلات الهيكلية. لذلك ، فإن مدلك Tuina الموصوف هنا ، والذي يحاكي طريقة لفة Ding ، يساهم في توحيد معالجة Tuina في البحث التجريبي ويساعد بشكل كبير في الأبحاث اللاحقة حول الآلية الجزيئية ل Tuina للاعتلال العضلي.

Introduction

إصابات العضلات هي إصابات رضحية شائعة في الحياة السريرية واليومية ، ناتجة عن ضربات خارجية (كدمات) أو إجهاد مزمن لألياف العضلات (السلالات) ، وما إلى ذلك ، مما يؤدي إلى خلل وظيفي في العضلات والألم ، حتى يؤثر بشكل خطير على نوعية حياة المريض¹. بدء إعادة التأهيل في أقرب وقت ممكن بعد إصابة إجهاد حاد هو المفتاح لتقليل وقت العودة إلى الرياضة² وفي تقليل الألم ^3,4. في الطب الغربي الحديث ، تتبع الإسعافات الأولية السريرية لإصابات العضلات مبادئ الراحة والجليد والضغط والارتفاع (RICE) لوقف النزيف الضار في الأنسجة العضلية⁵ والعقاقير غير الستيرويدية المضادة....

Protocol

تمت الموافقة على الإجراءات المتعلقة بالحيوانات من قبل لجنة الرعاية المؤسسية والاستخدام في جامعة هونان للطب الصيني.

1. تجميع مدلك المتداول

1. حدد مدلك يتكون من بكرة مطاطية ، وحامل شوكة ، ونابض ، وحاجز حد ، وجبيرة ضبط ، وبرغي ، ومقبض أكريليك (الشكل 1). تأكد من أن الأسطوانة المطاطية يبلغ طولها 3 سم وقطرها 1.6 سم ، ويبلغ طول الزنبرك 3 سم وقطرها 0.9 سم ، ويبلغ طول الحاجز المحدد 3 سم وعرضه 2 سم ، ويبلغ طول المقبض 12 سم وقطره 0.9 سم.
2. التحكم في القوة: وفقا لنتائج الأدبيات²³ ، وجد أن الضغط الهبوطي لطريقة دينغ للأسفل يبلغ حوالي 10٪ من وزن الجسم ، وبالتالي فإن الضغ....

النتائج

من أجل مراقبة الخصائص المورفولوجية لعضلات الهيكل العظمي للفئران بعد الإصابة ، تم تلطيخ عضلة الساق بالهيماتوكسيلين والإيوزين ، وتمت قراءة الصور الملطخة باستخدام برنامج تحليل كما هو موضح في البروتوكول ل 8 فئران لكل مجموعة. في الفئران المصابة بإصابة عضلية في الساق ناتجة عن notexin (مجموعة NTX) ، ?.......

Discussion

هنا وصفنا بروتوكولا لعلاج توينا لإصابة العضلات الهيكلية في الفئران ثم قمنا بتحليل درجة إصابة العضلات الهيكلية بعد العلاج للتحقق من فعالية الطريقة. والجدير بالذكر أن نماذج إصابة عضلات الهيكل العظمي للفئران ، بما في ذلك على سبيل المثال لا الحصر تحريض الدواء (notexin ، bupivacaine) ¹⁶ ، و?.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
1 mL syringe	JIANGXI FENGLIN	20220521
1.5 microtubes	Servicebio	EP-150X-J
15 mL centrifuge tube	Servicebio	EP-1501-J
30G needle	CONPUVON	220318
5 mL blood collection tube	Servicebio	QX0023
Acrylic handle	Guangdong Guangxingwang Plastic Materials Co., Ltd	65643645
Adjustment splint	CREROMEM	20220729
Cotton Swab	INOHV	22080215
Enzyme-labeled Instrument	Rayto	RT-6100
Ethanol	INOHV	211106
Fork holder	Yongkang Kangzhe Health Technology Co., Ltd	JL001
Hair removal cream	Veet, France	LOTC190922002
Hematoxylin dyeing solution set	Wuhan Google Biotech	G1005
Imaging system	Nikon, Japan	Nikon DS-U3
IODOPHOR disfecting solution	Hale&Hearty	20221205
Light microscope	Nikon, Japan	Nikon Eclipse E100
Limit baffle	CREROMEM	20220724
Notexin	Latoxan S.A.S.	L8104-100UG
Pentobarbital sodium	Merck KGaA	P3761
Rat creatine kinase (CK) ELISA kit	LunChangShuoBiotech	YD-35237
Rat fatty acid-binding protein 3 (FABP3) ELISA kit	LunChangShuoBiotech	YD-35730
Rubber roller	Hebei Mgkui Chemical Technology Co.,Ltd	202207
Screw	Weiyan Hardware	B05Z122
Sprague Dawley rats	Hunan Slake Kingda Laboratory Animal Co.	SYXK2019-0009
Spring	Bingzhang Hardware	TH001
Surgical blade	Covetrus	#23
Weigh controller	Iyoys	HY-XSQ