إنشاء نموذج سرطان التهاب القولون والمستقيم في الفئران وتقييم التأثير العلاجي للطب الصيني

Summary

يوفر هذا البروتوكول نموذجا للفأر لسرطان القولون والمستقيم المرتبط بالتهاب القولون التقرحي الناجم عن الأزوميثان مع كبريتات ديكستران الصوديوم. تم استخدام النموذج لتقييم فعالية مركبات الطب الصيني التقليدي في الوقاية والعلاج من سرطان القولون والمستقيم.

Abstract

سرطان القولون والمستقيم (CRC) هو ورم خبيث شائع في الجهاز الهضمي وأصبح ثالث أكثر الأورام الخبيثة شيوعا في جميع أنحاء العالم والسبب الرئيسي الثاني للوفاة المرتبطة بالأورام الخبيثة. التهاب القولون التقرحي (UC) هو آفة سرطانية ، و CRC (UC-CRC) المرتبطة ب UC هي النوع الفرعي الأكثر شيوعا من CRC. لذلك ، فإن نموذج UC-CRC المعقول هو حجر الزاوية والضمان لتطوير أدوية جديدة. يستخدم الطب الصيني التقليدي (TCM) على نطاق واسع في علاج UC-CRC بسبب فعاليته الجيدة. كوصفة طبية منشط كلاسيكية من الطب الصيني التقليدي ، تم استخدام Liujunzi decoction (LJZD) على نطاق واسع في علاج UC-CRC. في هذه الدراسة ، تم إنشاء نموذج UC-CRC من خلال الجمع بين أزوميثان وكبريتات ديكستران الصوديوم ، وتم إعطاء LJZD. أكدت البيانات أن LJZD يمكن أن يمنع بشكل فعال انتقال السرطان في UC-CRC باستخدام وزن جسم الفأر وطول القولون والمستقيم والعوامل المرضية والالتهابية ووظيفة حاجز القولون والمستقيم وعلامات السرطان. يوفر هذا البروتوكول نظاما لتقييم فعالية الطب الصيني التقليدي في الوقاية والعلاج من UC-CRC.

Introduction

سرطان القولون والمستقيم (CRC) هو ورم خبيث شائع في الجهاز الهضمي ، وهو ثالث أكثر الأورام الخبيثة شيوعا ، وثاني أكثر أسباب الوفاة شيوعا في العالم ، حيث يمثل 10٪ من حالات الإصابة بالسرطان في العالم و 9.4٪ من إجمالي الوفيات المرتبطة بالسرطان ^1,2. العوامل الوراثية ، والالتهابات المزمنة ، والنظام الغذائي عالي الدهون ، ومرض السكري ، والنباتات المعوية غير الطبيعية هي عوامل خطر ل CRC ^3,4. من بينها ، مرض التهاب الأمعاء ، وخاصة التهاب القولون التقرحي (UC) ، هو عامل خطر واضح ل CRC ^5,6. CRC (UC-CRC) المرتبط....

Protocol

تمت الموافقة على الإجراء الحيواني من قبل لجنة الأخلاقيات بجامعة تشانغتشون للطب الصيني (رقم السجل: 2021214). تم إيواء الفئران C57BL / 6J المحددة الخالية من مسببات الأمراض (8-10 أسابيع ، الوزن 18-22 جم) ، ذكورا وإناثا ، في أقفاص جيدة التهوية عند 22 درجة مئوية ورطوبة نسبية 65٪. بدأت الفئران التجربة بعد 7 أيام من التغذية التكيفية ، والتي كان لديهم خلالها حرية الوصول إلى الماء والنظام الغذائي.

1. إعداد المخدرات

1. إعداد LJZD
   ملاحظة: تم شراء الدواء الصيني المستخدم من المستشفى التابع لجامعة تشانغتشون للطب الصيني وتم تحديده على أنه دواء صيني حقيقي (انظر الجدول 1).
   1. ضع Dangshen (12 جم) ، Baizhu (12 ج....

النتائج

تم تحضير ديكوتيون من LJZD وفقا لنسبة تكوين الأدوية في الجدول 1 وطريقة ديكوتيون من TCM في الشكل 1A. وفقا للنقطة الزمنية المشار إليها في الشكل 1B ، تم حقن الفئران داخل الصفاق ب 1 مجم / مل AOM^{في اليوم السابع} ، وتم منح الفئران حرية الوصول إلى مياه الشرب الت.......

Discussion

يعد CRC أحد أكثر أنواع السرطان شيوعا في جميع أنحاء العالم ، مع ما يقرب من 1,148,000 حالة جديدة وأكثر من 576,000 حالة وفاة كل عام. يمكن تقسيم اتفاقية حقوق الطفل إلى ثلاثة أنواع وفقا لأسباب مختلفة ، بما في ذلك وراثية ومتفرقة و UC-CRC³¹. معدل حدوث CRC في المرضى الذين يعانون من أمراض الأمعاء الالت?.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Azoxymethane	Sigma	A5486
5-amino salicylic acid	Kuihua Pharmaceuticals Group Jiamusi Luling Pharmaceutical Co., Ltd	3819413
C57BL/6J mice	Liaoning Changsheng Biotechnology Co., Ltd	NO 210726210100853716
Cover slip	Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd	10212432C
DAB color development kit	Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd	2005289
Dewatering machine	Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd	JJ-12J
Dextran sulfate sodium	Dalian Meilun Biotechnology Co., Ltd	MB5535
Embedding machine	Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd	JB-P5
Hematoxylin-eosin dye	Wuhan Hundred Degree Biotechnology Co., Ltd	B1000
IL-6	Jiangsu Meimian Industrial Co., Ltd	MM-0163M2
Isoflurane	RWD Life Science Co., Ltd	R510-22-10
KI67 primary antibody	Google Biotechnology Inc	GB121141
Neutral gum	Wuhan Hundred Degree Biotechnology Co., Ltd	10004160
Object slide	Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd	10212432A
Occludin primary antibody	Affnity	DF7504
Orthostatic optical microscope	Nikon	Nikon Eclipse CI
Pathological microtome	Shanghai Leica Instrument Co., Ltd	RM2016
ZO-1 primary antibody	Abcam	ab221547