JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

يوفر هذا البروتوكول نموذجا للفأر لسرطان القولون والمستقيم المرتبط بالتهاب القولون التقرحي الناجم عن الأزوميثان مع كبريتات ديكستران الصوديوم. تم استخدام النموذج لتقييم فعالية مركبات الطب الصيني التقليدي في الوقاية والعلاج من سرطان القولون والمستقيم.

Abstract

سرطان القولون والمستقيم (CRC) هو ورم خبيث شائع في الجهاز الهضمي وأصبح ثالث أكثر الأورام الخبيثة شيوعا في جميع أنحاء العالم والسبب الرئيسي الثاني للوفاة المرتبطة بالأورام الخبيثة. التهاب القولون التقرحي (UC) هو آفة سرطانية ، و CRC (UC-CRC) المرتبطة ب UC هي النوع الفرعي الأكثر شيوعا من CRC. لذلك ، فإن نموذج UC-CRC المعقول هو حجر الزاوية والضمان لتطوير أدوية جديدة. يستخدم الطب الصيني التقليدي (TCM) على نطاق واسع في علاج UC-CRC بسبب فعاليته الجيدة. كوصفة طبية منشط كلاسيكية من الطب الصيني التقليدي ، تم استخدام Liujunzi decoction (LJZD) على نطاق واسع في علاج UC-CRC. في هذه الدراسة ، تم إنشاء نموذج UC-CRC من خلال الجمع بين أزوميثان وكبريتات ديكستران الصوديوم ، وتم إعطاء LJZD. أكدت البيانات أن LJZD يمكن أن يمنع بشكل فعال انتقال السرطان في UC-CRC باستخدام وزن جسم الفأر وطول القولون والمستقيم والعوامل المرضية والالتهابية ووظيفة حاجز القولون والمستقيم وعلامات السرطان. يوفر هذا البروتوكول نظاما لتقييم فعالية الطب الصيني التقليدي في الوقاية والعلاج من UC-CRC.

Introduction

سرطان القولون والمستقيم (CRC) هو ورم خبيث شائع في الجهاز الهضمي ، وهو ثالث أكثر الأورام الخبيثة شيوعا ، وثاني أكثر أسباب الوفاة شيوعا في العالم ، حيث يمثل 10٪ من حالات الإصابة بالسرطان في العالم و 9.4٪ من إجمالي الوفيات المرتبطة بالسرطان 1,2. العوامل الوراثية ، والالتهابات المزمنة ، والنظام الغذائي عالي الدهون ، ومرض السكري ، والنباتات المعوية غير الطبيعية هي عوامل خطر ل CRC 3,4. من بينها ، مرض التهاب الأمعاء ، وخاصة التهاب القولون التقرحي (UC) ، هو عامل خطر واضح ل CRC 5,6. CRC (UC-CRC) المرتبطة بجامعة كاليفورنيا هي عملية انتقالية من الالتهاب وفرط التنسج اللانمطي والسرطان بناء على التهاب مزمن في القولون والمستقيم ، والذي يختلف عن نموذج تطوير الورم الحميد والسرطان الغدي النموذجي لاتفاقية حقوق الطفل 7,8. بالمقارنة مع عامة السكان ، فإن خطر الإصابة ب CRC أعلى بحوالي 10-40 مرة في المرضى الذين يعانون من مرض التهاب الأمعاء9.

حاليا ، لا تزال الجراحة هي العلاج القياسي ل CRC ، واعتمادا على موقع الورم ومرحلته ، فإن العلاج الإشعاعي أو العلاج الدوائي الجهازي أو مزيج من الاثنين ممكنان10. على الرغم من أن طرق العلاج التقليدية هذه قد أحرزت تقدما كبيرا ، نظرا لارتفاع معدل عدم التجانس وتكرار CRC ، إلا أن التشخيص ضعيف ، وتأثير العلاج ليس مثاليا11,12. لذلك ، يعد الكشف المبكر والتشخيص المبكر والعلاج الشامل أمرا أساسيا لتحسين معدل بقاء مرضى CRC ، ومن المهم بشكل خاص الانتباه إلى تحويل UC إلى CRC. على مر السنين ، اجتذب الطب الصيني التقليدي (TCM) الكثير من الاهتمام في علاج UC-CRC أو التهاب المعدة المزمن بسبب آثاره الجانبية المحدودة وفعاليته الكبيرة. استنادا إلى العلاج الجدلي ، ابتكر ممارسو الطب الصيني المشهورون من أجيال مختلفة عددا كبيرا من الوصفات الكلاسيكية ، مثل Huangqi Jianzhong decoction13 و Sijunzi decoction14 و Sishen pill15.

نشأ Liujunzi decoction (LJZD) من أعمال Yi Xue Zheng Zhuan التي تم تجميعها في عهد أسرة مينغ وهي وصفة طبية كلاسيكية في TCM16. كما هو موضح في الجدول 1 ، يتكون LJZD من ستة أعشاب تقليدية ، بما في ذلك Codonopsis pilosula (Franch.) نانف. (دانجشين) ، بوريا كوكوس (شو.) الذئب (فولينغ) ، أتراكتيلوديس ماكروسيفالا كويدز. (بايتشو) ، غليسيرهيزا أورالينسيس فيش. (غانكاو) ، الحمضيات شبكية بلانكو (تشينبي) وبينيليا تيرناتا (ثونب.) Breit (Banxia) ، الذي له تأثير في تجديد تشي وتقوية الطحال ، وتجفيف الرطوبة ، وحل البلغم. في الممارسة السريرية الحديثة ، غالبا ما يستخدم لعلاج التهاب المعدة المزمن وقرحة المعدة وقرحة الاثني عشر. أظهرت الأبحاث الدوائية الحديثة أن LJZD و LJZD المعدل لهما قيمة تطبيق عالية في العلاج المساعد لسرطان UC وسرطان الجهاز الهضمي17،18،19.

في الوقت الحاضر ، هناك العديد من الطرق لبناء نماذج الفئران UC-CRC ، ولكن نموذج الماوس الناجم عن أزوكسي ميثان (AOM) / ديكستران كبريتات الصوديوم (DSS) هو نموذج UC-CRC الأكثر استخداما. أثبتت الأعراض السريرية والملاحظات المورفولوجية والمرضية أن النموذج مشابه جدا ل UC-CRCالبشري 20,21. المبدأ الأساسي هو أولا إحداث التسرطن باستخدام مادة كيميائية مسرطنة AOM ثم تعريض الفئران باستمرار لبيئة التحفيز الالتهابية ل DSS لمحاكاة الضرر المستمر وإصلاح ظهارة الغشاء المخاطي المعوي ، وبالتالي بناء نموذج الماوس UC-CRC22. الهدف من هذه الدراسة هو إنشاء نموذج فأر ل UC-CRC عن طريق الحقن داخل الصفاق ل AOM والتحفيز الدوري ل DSS على المدى القصير وتقييم تأثير الدواء والآلية الجزيئية ل LJZD على UC-CRC من أجل توفير أساس علمي لعلاج UC-CRC.

Protocol

تمت الموافقة على الإجراء الحيواني من قبل لجنة الأخلاقيات بجامعة تشانغتشون للطب الصيني (رقم السجل: 2021214). تم إيواء الفئران C57BL / 6J المحددة الخالية من مسببات الأمراض (8-10 أسابيع ، الوزن 18-22 جم) ، ذكورا وإناثا ، في أقفاص جيدة التهوية عند 22 درجة مئوية ورطوبة نسبية 65٪. بدأت الفئران التجربة بعد 7 أيام من التغذية التكيفية ، والتي كان لديهم خلالها حرية الوصول إلى الماء والنظام الغذائي.

1. إعداد المخدرات

  1. إعداد LJZD
    ملاحظة: تم شراء الدواء الصيني المستخدم من المستشفى التابع لجامعة تشانغتشون للطب الصيني وتم تحديده على أنه دواء صيني حقيقي (انظر الجدول 1).
    1. ضع Dangshen (12 جم) ، Baizhu (12 جم) ، Gancao (6 جم) ، Chenpi (12 جم) ، Jiangbanxia (9 جم) في وعاء خزفي متخصص (انظر جدول المواد). أضف 1000 مل من الماء المقطر وانقعه في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة واحدة (انظر الشكل 1 أ).
    2. مسحوق 12 جم يقلب في مسحوق ناعم بمطحنة وينقع في 300 مل من الماء المقطر في وعاء آخر لمدة 1 ساعة في درجة حرارة الغرفة.
    3. امزج الدواء الصيني أعلاه في وعاء السيراميك المتخصص. اسلقي الخليط ثم اتركيه على نار متوسطة حتى يتبقى 300 مل فقط من ديكوتيون. استخدم الشاش الطبي للترشيح والحفاظ على المرشح في درجة حرارة الغرفة.
    4. أضف 1000 مل من الماء المقطر وكرر عملية ديكوتيون المذكورة أعلاه مرة أخرى. تصفية مرة أخرى باستخدام الشاش الطبي. يمزج المرشح ويغلى حتى يتبقى 150 مل فقط.
    5. قم بطرد السائل المركز عند 10000 × جم لمدة 5 دقائق ، وقم بزيادة تركيز المادة الطافية التي تم الحصول عليها إلى 30 مل على نار متوسطة. انقل المركز النهائي إلى طبق وجففه باستخدام فرن تجفيف كهربائي حتى يبقى المذاب فقط كمسحوق.
    6. قم بوزن المادة الصلبة المذكورة أعلاه وقم بإذابتها في ماء مقطر معقم للحصول على محلول يحتوي على 22.85 مجم من الدواء لكل 0.2 مل (114.16 مجم / مل) ، وهي الجرعة اليومية للفئران.
  2. إعداد 5-حمض الساليسيليك الأمينية
    ملاحظة: حمض الساليسيليك 5-amino (5-ASA ؛ انظر جدول المواد) له تأثير وقائي جيد على UC-CRC ، وقد تم استخدامه كدواء إيجابي في هذه الدراسة23.
    1. قم بإذابة 64 مجم مسحوق 5-ASA في 200 مل من الماء المقطر المعقم للحصول على محلول 1.82 مجم / مل 5-ASA. كانت الجرعة اليومية لفأر واحد 0.2 مل.
  3. تحضير محلول حقن AOM
    1. أضف 2.5 مل من الماء المقطر المعقم إلى مسحوق AOM 25 مجم (انظر جدول المواد) ، واخلطه بواسطة خلاط دوامة (انظر جدول المواد) لعمل محلول مخزون AOM سعة 10 مجم / مل ، واحفظه في -20 درجة مئوية حتى الاستخدام.
    2. تحضير محلول حقن AOM عن طريق تخفيف محلول مخزون AOM بالماء المقطر المعقم عند 10: 1 (1 مجم / مل).

2. إنشاء نموذج UC-CRC

ملاحظة: تم تقسيم التجربة إلى 4 مجموعات: مجموعة التحكم ، والنموذج ، و LJZD ، ومجموعة 5-ASA ، 10 فئران في كل مجموعة. باستثناء المجموعة الضابطة ، عولجت المجموعات الأخرى باستخدام AOM و DSS.

  1. الحقن داخل الصفاق لمحلول حقن AOM
    ملاحظة: بعد التغذية التكيفية لمدة 7 د ، أعطيت الفئران محلول حقن AOM (1 ملغ / مل) عن طريق الحقن داخل الصفاق (انظر الشكل 1B).
    1. امسك الماوس مع بطنه لأعلى ورأسه لأسفل قليلا. أمسك الجلد الخلفي لشد جلد البطن واخترق الجلد حوالي 1 سم إلى يمين تقاطع خط الجذر لكلا الفخذين على خط منتصف البطن باستخدام حقنة سعة 1 مل (انظر جدول المواد).
    2. ادفع إبرة المحقنة سعة 1 مل لمسافة 3-5 مم تحت الجلد ، مع إبقائها موازية لخط الوسط البطني ، وأدخل الإبرة 0.3-0.5 مم في تجويف البطن بزاوية 45 درجة.
    3. بعد مرور الطرف عبر عضلة البطن ، يشعر المشغل بفقدان مفاجئ للمقاومة. بعد ذلك ، اسحب المحقنة للخارج والخلف لمراقبة ما إذا كان تسرب السائل يحدث. إذا لم يكن الأمر كذلك ، ادفع محلول حقن AOM ببطء إلى الفئران عند 0.1 مل / 10 جم.
  2. التحفيز الدوري لمحلول DSS 2٪
    ملاحظة: تم إعطاء كل فأر مستحث ب AOM 500 مل من محلول DSS في الأسابيع 3 و 6 و 9 ، وشربت الفئران بحرية خلال هذه الفترة.
    1. قم بإعداد محلول DSS بنسبة 2٪ بإضافة 500 مل من الماء المقطر المعقم إلى 10 جم DSS (انظر جدول المواد). تخلط مع خلاط دوامة وتحفظ على حرارة 4 درجات مئوية حتى الاستخدام.
    2. يشرب كل فأر مستحث ب AOM 500 مل من محلول DSS 2٪ بحرية لمدة 7 أيام في الأسابيع 3 و 6 و 9 بعد تحريض AOM.

3. العلاج من تعاطي المخدرات

ملاحظة: يحتاج البشر البالغون إلى 63 جم LJZD يوميا. وفقا لصيغة تحويل جرعة الفئران التجريبية والدواء البشري ، كانت الجرعة التجريبية المكافئة للفئران (ملغم / كغم) = الجرعة البشرية (ملغم / كغم) / وزن الجسم (60 كجم) × 9.1 ، كانت الجرعة اليومية من الفئران حوالي 9.6 جم / كجم.

  1. عالج مجموعة LJZD و 5-ASA ب 0.1 مل / 10 جم من محلول LJZD و 5-ASA المحضر عن طريق تجويف المعدة في الأسبوع 7 والأسبوع 15 على التوالي.
    1. للإعطاء داخل المعدة في الفئران ، قم بتنفيذ الإجراء التالي. امسك الماوس في اليد اليسرى ، وفي اليد اليمنى ، أمسك جهاز تروية المعدة. أدخل إبرة المحقنة في الفم وحركها أسفل الجدار الخلفي للبلعوم للفئران. انزلق لأسفل البلعوم بينما تبتلع الفئران واستمر في المضي قدما. عندما يكون هناك شعور بالمقاومة ، ويمكن دفع المحقنة إلى البلعوم ، اسحب الإبرة للخارج وأكمل الحقن.
  2. عالج مجموعة التحكم والطراز بنفس الكمية من المحلول الملحي (انظر جدول المواد).
  3. علاج الفئران في كل مجموعة مع الدواء المناسب مرة واحدة في اليوم في نفس الوقت خلال فترة الإدارة.

4. تقييم نموذج UC-CRC وفعالية LJZD

  1. درجة مؤشر نشاط المرض
    ملاحظة: وفقا للجدول 2 ، تم تقييم درجة مؤشر نشاط المرض (DAI) من خلال الجمع بين فقدان الوزن ولزوجة البراز ونزيف البراز للفئران.
    1. سجل وزن الفئران يوميا من بداية التغذية التكيفية حتى نهاية العلاج بالعقاقير.
    2. راقب اتساق البراز لكل فأر تجريبي بعناية وسجل حركات الأمعاء كواحدة من الحالات الثلاثة: البراز الطبيعي الرخو والإسهال المائي.
    3. سجل النزيف البرازي لحيوانات التجارب كواحد من الشروط الثلاثة: لا نزيف ، نزيف قليل ، ودم مرئي في البراز.
  2. الكشف عن مستوى IL-6 في المصل
    1. علاج الفئران مع LJZD أو 5-ASA لمدة 9 أسابيع. إصلاح الفئران عن طريق الإمساك جلد الرقبة من الماوس باليد اليسرى والضغط بلطف على الطاولة التجريبية لاتخاذ موقف الاستلقاء الجانبي. قطع شعيرات الفئران بالمقص. اقطع شعيرات الفئران بالمقص بعناية (انظر جدول المواد) لمنع تلوث الدم.
      ملاحظة: الفئران التي لا يمكن أن تذبذب بحرية اعتبرت ثابتة بشكل صحيح. إذا لم يحدث هذا ، يجب إصلاح الفئران.
    2. تخدير الماوس عن طريق استنشاق 2 ٪ إيزوفلوران. تعقيم الجلد حول مقلة العين بالإيثانول (انظر جدول المواد). اضغط على جلد العين على الجانب برفق لجعل مقلة العين مزدحمة وبارزة.
    3. المشبك مقلة العين مع ملقط الكوع وإزالة مقل العيون بدقة وبسرعة. اسمح للدم بالتنقيط في أنبوب الطرد المركزي (انظر جدول المواد). في هذه العملية ، اضغط على قلب الفأر لتسريع جمع الدم.
    4. احتفظ بالدم الذي تم جمعه في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة وطرده مركزيا عند 3500 × جم لمدة 10 دقائق. اجمع المادة الطافية واكتشف مستوى IL-6 وفقا لتعليمات مجموعة أدوات اكتشاف محتوى IL-6 (انظر جدول المواد).
  3. فصل أنسجة القولون والمستقيم
    1. القتل الرحيم للفئران بعد أخذ عينات الدم عن طريق استنشاق 5٪ جرعة زائدة من الأيزوفلوران وخلع عنق الرحم (انظر جدول المواد) وفقا لأخلاقيات.
    2. الحفاظ على الفئران في بيئة تشريحية مبردة. شل حركة الفئران في وضع ضعيف. قص شعر أسفل البطن بالمقص وتعقيمه بالإيثانول.
    3. اضغط على نقطة التقاطع بين جذري الفخذ وخط الوسط البطني باستخدام ملقط الجفن (انظر جدول المواد). قطع شق عرضي حوالي 1-1.5 سم بالمقص.
    4. قم بقص شق طولي على طول الخط المتوسط للبطن من منتصف الشق المستعرض باتجاه عملية الخنجري.
    5. قم بإزالة الأنسجة المحيطة بالقولون والمستقيم في اتجاه فتحة الشرج لفصل القولون والمستقيم عن الأنسجة المحيطة. احرص على عدم إتلاف القولون والمستقيم.
    6. ادفع جلد البطن إلى الجانبين لفضح القولون والمستقيم بالكامل. إزالة القولون والمستقيم من تجويف البطن مع ملقط الجفن وقطع الأجزاء من فتحة الشرج إلى الأعور (باستثناء) ؛ الطول الإجمالي حوالي 10 سم. قم بتخزين أنسجة القولون والمستقيم التي تم الحصول عليها في محلول ملحي عند 4 درجات مئوية.
  4. تقييم طول ووزن المستقيم
    1. استخرج المحلول الملحي عند 4 درجات مئوية بإبرة 5 مل (انظر جدول المواد) لشطف القولون والمستقيم من الداخل. ثم ضع القولون والمستقيم على ورق ماص لامتصاص رطوبة الأنسجة.
    2. قم بوزن أنسجة القولون والمستقيم ثم ضعها على ورق A4 لقياس طولها.
  5. قياس عدد الأورام في القولون والمستقيم
    1. قطع القولون والمستقيم بالطول لفتحه بالكامل ومراقبة عدد وحجم الأورام في القولون والمستقيم.
  6. التحليل المرضي للمستقيم
    1. إصلاح القولون والمستقيم في 4 ٪ بارافورمالدهيد لمدة 24 ساعة. قم بتضمين أنسجة المستقيم الثابتة في البارافين المذاب والمقطع بشكل مستمر بسمك 5 ميكرومتر بواسطة ميكروتوم تجميد الأنسجة.
    2. وفقا لإجراء Hou et al.24 ، قم بإزالة الشمع من الأقسام الموجودة في الزيلين ثم قم بتجفيفها بتركيزات تسلسلية من الإيثانول. بعد تلطيخ بمحلول الهيماتوكسيلين لمدة 5 دقائق ، شطف الأقسام بالماء النقي. بعد ذلك ، وصمة عار مع محلول eosin 0.5 ٪ لمدة 1 دقيقة (انظر جدول المواد).
    3. قم بإجراء تجفيف متدرج وعلاج شفاف للزيلين مرة أخرى. أغلق الأقسام وراقبها تحت المجهر الضوئي (انظر جدول المواد) والصورة الفوتوغرافية ، كما وصفها Xie et al.25.
  7. التحليل المناعي الكيميائي للقولون والمستقيم
    1. إزالة الشمع وتجفيف الأقسام وفقا للطريقة المذكورة أعلاه. إصلاح المستضد في الأقسام بتقنية الإصلاح الحراري عالي الضغط ، كما هو موضح بواسطة Gok et al.26.
    2. نقع الأقسام في حاصرات البيروكسيديز الذاتية في درجة حرارة الغرفة لمدة 15 دقيقة. ختم الأقسام بمصل الماعز (انظر جدول المواد).
    3. أضف الجسم المضاد الأساسي ZO-1 (1: 1000) و Occludin (1: 1000) و KI67 (1: 500 ؛ انظر جدول المواد) إلى الأقسام واحتضانها طوال الليل عند 4 درجات مئوية. اشطف الأقسام بمخزن مؤقت PBS (انظر جدول المواد) ، وأضف جسما مضادا ثانويا للأغراض العامة (1: 5000 ؛ انظر جدول المواد) إليه واحتضانه عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.
    4. أضف حل DAB (انظر جدول المواد) إلى الأقسام لتطوير اللون. عكس المقاطع بمحلول الهيماتوكسيلين.
    5. قم بتجفيف الأقسام وشفافيتها وإغلاقها مرة أخرى. مراقبة التعبير عن البروتين بواسطة المجهر الضوئي.

النتائج

تم تحضير ديكوتيون من LJZD وفقا لنسبة تكوين الأدوية في الجدول 1 وطريقة ديكوتيون من TCM في الشكل 1A. وفقا للنقطة الزمنية المشار إليها في الشكل 1B ، تم حقن الفئران داخل الصفاق ب 1 مجم / مل AOMفي اليوم السابع ، وتم منح الفئران حرية الوصول إلى مياه الشرب الت...

Discussion

يعد CRC أحد أكثر أنواع السرطان شيوعا في جميع أنحاء العالم ، مع ما يقرب من 1,148,000 حالة جديدة وأكثر من 576,000 حالة وفاة كل عام. يمكن تقسيم اتفاقية حقوق الطفل إلى ثلاثة أنواع وفقا لأسباب مختلفة ، بما في ذلك وراثية ومتفرقة و UC-CRC31. معدل حدوث CRC في المرضى الذين يعانون من أمراض الأمعاء الالت?...

Disclosures

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

Acknowledgements

تم دعم هذا العمل من قبل إدارة العلوم والتكنولوجيا في مقاطعة جيلين (YDZJ202201ZYTS181).

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
AzoxymethaneSigmaA5486
5-amino salicylic acidKuihua Pharmaceuticals Group Jiamusi Luling Pharmaceutical Co., Ltd3819413
C57BL/6J miceLiaoning Changsheng Biotechnology Co., LtdNO 210726210100853716
Cover slipJiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd10212432C
DAB color development kitJiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd2005289
Dewatering machine Wuhan Junjie Electronics Co., LtdJJ-12J
Dextran sulfate sodiumDalian Meilun Biotechnology Co., LtdMB5535
Embedding machineWuhan Junjie Electronics Co., LtdJB-P5
Hematoxylin-eosin dyeWuhan Hundred Degree Biotechnology Co., LtdB1000
IL-6Jiangsu Meimian Industrial Co., LtdMM-0163M2
IsofluraneRWD Life Science Co., LtdR510-22-10
KI67 primary antibodyGoogle Biotechnology IncGB121141
Neutral gumWuhan Hundred Degree Biotechnology Co., Ltd10004160
Object slideJiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd10212432A
Occludin primary antibodyAffnityDF7504
Orthostatic optical microscopeNikonNikon Eclipse CI
Pathological microtomeShanghai Leica Instrument Co., LtdRM2016
ZO-1 primary antibodyAbcamab221547

References

  1. Sung, H., et al. Global cancer statistics 2020: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 Cancers in 185 Countries. CA Cancer J Clin. 71 (3), 209-249 (2021).
  2. Tsai, K. Y., et al. Novel heavily fucosylated glycans as a promising therapeutic target in colorectal cancer. J Transl Med. 21 (1), 505 (2023).
  3. Chen, X., et al. Smoking, genetic predisposition, and colorectal cancer risk. Clin Transl Gastroenterol. 12 (3), e00317 (2021).
  4. Keum, N., Giovannucci, E. Global burden of colorectal cancer: emerging trends, risk factors and prevention strategies. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 16 (12), 713-732 (2019).
  5. Sninsky, J. A., Shore, B. M., Lupu, G. V., Crockett, S. D. Risk factors for colorectal polyps and cancer. Gastrointest Endosc Clin N Am. 32 (2), 195-213 (2022).
  6. Rivera, A. P., et al. Ulcerative colitis-induced colorectal carcinoma: A deleterious concatenation. Cureus. 14 (2), e22636 (2022).
  7. Faye, A. S., Holmer, A. K., Axelrad, J. E. Cancer in inflammatory bowel disease. Gastroenterol Clin North Am. 51 (3), 649-666 (2022).
  8. Becker, W. R., et al. Single-cell analyses define a continuum of cell state and composition changes in the malignant transformation of polyps to colorectal cancer. Nat Genet. 54 (7), 985-995 (2022).
  9. Choi, J. K., Kim, D. W., Shin, S. Y., Park, E. C., Kang, J. G. Effect of ulcerative colitis on incidence of colorectal cancer: Results from the nationwide population-based cohort study (2003-2013). J Cancer. 7 (6), 681-686 (2016).
  10. Gallo, G., Kotze, P. G., Spinelli, A. Surgery in ulcerative colitis: When? How. Best Pract Res Clin Gastroenterol. 32-33, 71-78 (2018).
  11. Shah, S. C., Itzkowitz, S. H. Colorectal cancer in inflammatory bowel disease: Mechanisms and management. Gastroenterology. 162 (3), 715.e3-730.e3 (2022).
  12. Fabregas, J. C., Ramnaraign, B., George, T. J. Clinical updates for colon cancer care in 2022. Clin Colorectal Cancer. 21 (3), 198-203 (2022).
  13. Hu, J., et al. Pharmacological and molecular analysis of the effects of Huangqi Jianzhong decoction on proliferation and apoptosis in GES-1 cells infected with H. pylori.Front Pharmacol. 13, 1009705 (2022).
  14. Shang, L., et al. Mechanism of Sijunzi decoction in the treatment of colorectal cancer based on network pharmacology and experimental validation. J Ethnopharmacol. 302 (Pt A), 115876 (2023).
  15. Zhang, X. Y., et al. Sishen pill maintained colonic mucosal barrier integrity to treat ulcerative colitis via Rho/ROCK signaling pathway. Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 5536679 (2021).
  16. Wu, X., Dai, Y., Nie, K. Research progress of Liujunzi decoction in the treatment of tumor-associated anorexia. Drug Des Devel Ther. 16, 1731-1741 (2022).
  17. Han, Y., et al. Liujunzi decoction exerts potent antitumor activity in oesophageal squamous cell carcinoma by inhibiting miR-34a/STAT3/IL-6R feedback loop and modifies antitumor immunity. Phytomedicine. 111, 154672 (2023).
  18. Chen, D., Zhao, J., Cong, W. Chinese herbal medicines facilitate the control of chemotherapy-induced side effects in colorectal cancer: Progress and perspective. Front Pharmacol. 9, 1442 (2018).
  19. Wang, M., Wang, S., Su, Q., Ma, T. Effect of combining early chemotherapy with Zhipu Liujunzi decoction under the concept of strengthening and consolidating body resistance for gastric cancer patients and nursing strategy. Contrast Media Mol Imaging. 2021, 2135924 (2021).
  20. Lin, Y., Koumba, M. H., Qu, S., Wang, D., Lin, L. Blocking NFATc3 ameliorates azoxymethane/dextran sulfate sodium induced colitis-associated colorectal cancer in mice via the inhibition of inflammatory responses and epithelial-mesenchymal transition. Cell Signal. 74, 109707 (2020).
  21. Yu, C. T., et al. Identification of significant modules and targets of Xian-Lian-Jie-Du decoction based on the analysis of transcriptomics, proteomics and single-cell transcriptomics in colorectal tumor. J Inflamm Res. 15, 1483-1499 (2022).
  22. Lin, L., Wang, D., Qu, S., Zhao, H., Lin, Y. miR-370-3p alleviates ulcerative colitis-related colorectal cancer in mice through inhibiting the inflammatory response and epithelial-mesenchymal transition. Drug Des Devel Ther. 14, 1127-1141 (2020).
  23. Qiu, X., Ma, J., Wang, K., Zhang, H. Chemopreventive effects of 5-aminosalicylic acid on inflammatory bowel disease-associated colorectal cancer and dysplasia: a systematic review with meta-analysis. Oncotarget. 8 (1), 1031-1045 (2017).
  24. Hou, Y., et al. Longzhibu disease and its therapeutic effects by traditional Tibetan medicine: Ershi-wei Chenxiang pills. J Ethnopharmacol. 249, 112426 (2020).
  25. Xie, N., et al. Rhodiola crenulate alleviates hypobaric hypoxia-induced brain injury via adjusting NF-κB/NLRP3-mediated inflammation. Phytomedicine. 103, 154240 (2022).
  26. Gok, A., et al. Role of reduced Bdnf expression in novel Apc mutant allele-induced intestinal and colonic tumorigenesis in mice. In Vivo. 37 (4), 1562-1575 (2023).
  27. Lin, Y., et al. Pou3f1 mediates the effect of Nfatc3 on ulcerative colitis-associated colorectal cancer by regulating inflammation. Cell Mol Biol Lett. 27 (1), 75 (2022).
  28. Xu, W., Zhao, R., Yuan, B. The therapeutic effect of traditional LiuJunZi decoction on ovalbumin-induced asthma in Balb/C mice. Can Respir J. 2021, 6406295 (2021).
  29. Kaihara, T., et al. Redifferentiation and ZO-1 reexpression in liver-metastasized colorectal cancer: possible association with epidermal growth factor receptor-induced tyrosine phosphorylation of ZO-1. Cancer Sci. 94 (2), 166-172 (2003).
  30. Lei, H. T., et al. Ki67 testing in the clinical management of patients with non-metastatic colorectal cancer: Detecting the optimal cut-off value based on the restricted cubic spline model. Oncol Lett. 24 (6), 420 (2022).
  31. Olén, O., et al. Colorectal cancer in ulcerative colitis: a Scandinavian population-based cohort study. Lancet. 395 (10218), 123-131 (2020).
  32. Arnold, M., et al. Global patterns and trends in colorectal cancer incidence and mortality. Gut. 66 (4), 683-691 (2017).
  33. Biller, L. H., Schrag, D. Diagnosis and treatment of metastatic colorectal cancer: A review. Jama. 325 (7), 669-685 (2021).
  34. Talero, E., et al. Expression patterns of sirtuin 1-AMPK-autophagy pathway in chronic colitis and inflammation-associated colon neoplasia in IL-10-deficient mice. Int Immunopharmacol. 35, 248-256 (2016).
  35. Qian, Z., et al. Mulberry fruit prevents LPS-induced NF-κB/pERK/MAPK signals in macrophages and suppresses acute colitis and colorectal tumorigenesis in mice. Sci Rep. 5, 17348 (2015).
  36. Pothuraju, R., et al. Depletion of transmembrane mucin 4 (Muc4) alters intestinal homeostasis in a genetically engineered mouse model of colorectal cancer. Aging. 14 (5), 2025-2046 (2022).
  37. Perše, M., Cerar, A. Dextran sodium sulphate colitis mouse model: traps and tricks. J Biomed Biotechnol. 2012, 718617 (2012).
  38. Zeng, B., et al. Dextran sodium sulfate potentiates NLRP3 inflammasome activation by modulating the KCa3.1 potassium channel in a mouse model of colitis. Cell Mol Immunol. 19 (8), 925-943 (2022).
  39. Parang, B., Barrett, C. W., Williams, C. S. AOM/DSS model of colitis-associated cancer. Methods Mol Biol. 1422, 297-307 (2016).
  40. Tanaka, T., et al. A novel inflammation-related mouse colon carcinogenesis model induced by azoxymethane and dextran sodium sulfate. Cancer Sci. 94 (11), 965-973 (2003).
  41. Suzuki, R., Kohno, H., Sugie, S., Nakagama, H., Tanaka, T. Strain differences in the susceptibility to azoxymethane and dextran sodium sulfate-induced colon carcinogenesis in mice. Carcinogenesis. 27 (1), 162-169 (2006).
  42. De Robertis, M., et al. The AOM/DSS murine model for the study of colon carcinogenesis: From pathways to diagnosis and therapy studies. J Carcinog. 10, 9 (2011).
  43. Song, J. L., et al. Dietary mixed cereal grains ameliorate the azoxymethane and dextran sodium sulfate-induced colonic carcinogenesis in C57BL/6J mice. J Med Food. 23 (4), 440-452 (2020).
  44. Zou, Y. F., et al. Effects of Huaier extract on ameliorating colitis-associated colorectal tumorigenesis in mice. Onco Targets Ther. 13, 8691-8704 (2020).
  45. Luo, X., et al. Obacunone reduces inflammatory signalling and tumour occurrence in mice with chronic inflammation-induced colorectal cancer. Pharm Biol. 58 (1), 886-897 (2020).
  46. Dai, Y., et al. Liujunzi Decoction ameliorated cisplatin-induced anorexia by inhibiting theJAK-STAT signaling pathway and coordinating anorexigenic and orexigenic neuropeptides in rats. J Ethnopharmacol. 285, 114840 (2022).
  47. Ghosh, D., Dutta, A., Kashyap, A., Upmanyu, N., Datta, S. PLP2 drives collective cell migration via ZO-1-mediated cytoskeletal remodeling at the leading edge in human colorectal cancer cells. J Cell Sci. 134 (18), jcs253468 (2021).
  48. Yan, S., et al. Berberine regulates short-chain fatty acid metabolism and alleviates the colitis-associated colorectal tumorigenesis through remodeling intestinal flora. Phytomedicine. 102, 154217 (2022).
  49. Ma, Y. L., et al. Immunohistochemical analysis revealed CD34 and Ki67 protein expression as significant prognostic factors in colorectal cancer. Med Oncol. 27 (2), 304-309 (2010).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

CRC

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved