JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

פרוטוקול זה מספק מודל עכברי של סרטן המעי הגס הקשור לקולופרוקטיטיס כיבית המושרה על ידי אזומתאן בשילוב עם דקסטרן סולפט נתרן. המודל שימש להערכת היעילות של תרכובות הרפואה הסינית המסורתית במניעה וטיפול בסרטן המעי הגס.

Abstract

סרטן המעי הגס והחלחולת (CRC) הוא ממאירות נפוצה של מערכת העיכול והפך לממאירות השלישית בשכיחותה בעולם ולגורם השני בשכיחותו למוות הקשור לממאירות. קולופרוקטיטיס כיבית (UC) היא נגע טרום סרטני, ו- CRC הקשור ל- UC (UC-CRC) הוא תת-הסוג הנפוץ ביותר של CRC. לכן, מודל UC-CRC סביר הוא אבן הפינה והערובה לפיתוח תרופות חדשות. הרפואה הסינית המסורתית (TCM) נמצאת בשימוש נרחב בטיפול ב- UC-CRC בשל יעילותה הטובה. כמרשם טוניק קלאסי של TCM, מרתח Liujunzi (LJZD) כבר בשימוש נרחב בטיפול UC-CRC. במחקר זה, מודל UC-CRC הוקם על ידי שילוב של אזומתאן ודאקסטרן סולפט נתרן, וניתן LJZD. הנתונים אישרו כי LJZD יכול לעכב ביעילות מעבר סרטן ב- UC-CRC באמצעות משקל גוף עכבר, אורך המעי הגס, גורמים פתולוגיים ודלקתיים, תפקוד מחסום המעי הגס וסמנים סרטניים. פרוטוקול זה מספק מערכת להערכת היעילות של TCM במניעה וטיפול ב- UC-CRC.

Introduction

סרטן המעי הגס והחלחולת (CRC) הוא ממאירות נפוצה במערכת העיכול, הממאירות השלישית בשכיחותה והשנייה בשכיחותה בעולם, המהווה 10% מהיארעות הסרטן העולמית ו-9.4% מכלל מקרי המוות הקשורים לסרטן 1,2. גורמים גנטיים, דלקת כרונית, תזונה עתירת שומן, סוכרת ופלורת מעיים חריגה הם גורמי סיכון ל-CRC 3,4. ביניהם, מחלות מעי דלקתיות, במיוחד קולופרוקטיטיס כיבית (UC), היא גורם סיכון ברור ל- CRC 5,6. CRC (UC-CRC) הוא תהליך מעבר של דלקת, היפרפלזיה לא טיפוסית וסרטן המבוסס על דלקת כרונית של המעי הגס, השונה ממודל התפתחות אדנוקרצינומה טיפוסי של CRC 7,8. בהשוואה לאוכלוסייה הכללית, הסיכון ל-CRC גבוה בערך פי 10-40 בחולים עם מחלות מעי דלקתיות9.

נכון לעכשיו, ניתוח הוא עדיין הטיפול הסטנדרטי עבור CRC, ובהתאם למיקום ולשלב של הגידול, הקרנות, טיפול תרופתי סיסטמי, או שילוב של שניהם אפשריים10. למרות ששיטות הטיפול המסורתיות הללו התקדמו מאוד, בשל ההטרוגניות הגבוהה ושיעור ההישנות של CRC, הפרוגנוזה גרועה, והשפעת הטיפול אינה אידיאלית11,12. לכן, גילוי מוקדם, אבחון מוקדם וטיפול מקיף הם המפתח לשיפור שיעור ההישרדות של חולי CRC, וחשוב במיוחד לשים לב לטרנספורמציה של UC ל- CRC. במהלך השנים, הרפואה הסינית המסורתית (TCM) משכה תשומת לב רבה בטיפול ב- UC-CRC או דלקת קיבה כרונית בשל תופעות הלוואי המוגבלות שלה ויעילותה המשמעותית. בהתבסס על טיפול דיאלקטי, מטפלים מפורסמים ברפואה סינית מדורות שונים יצרו מספר רב של מרשמים קלאסיים, כגון מרתח Huangqi Jianzhong13, מרתח Sijunzi14, וגלולת Sishen15.

מרתח Liujunzi (LJZD) מקורו בעבודותיו של יי שו ג'נג ג'ואן שנאספו בתקופת שושלת מינג והוא מרשם קלאסי ב-TCM16. כפי שניתן לראות בטבלה 1, LJZD מורכב משישה עשבי תיבול מסורתיים, כולל Codonopsis pilosula (Franch.) נאן. (Dangshen), Poria cocos (Schw.) Wolf (Fuling), Atractylodes macrocephala Koidz. (Baizhu), Glycyrrhiza uralensis Fisch. (Gancao), Citrus reticulata Blanco (Chenpi) ו-Pinellia ternata (Thunb.) Breit (Banxia), אשר יש את ההשפעה של חידוש צ 'י וחיזוק הטחול, ייבוש רטיבות, ופתרון ליחה. בפרקטיקה הקלינית המודרנית, הוא משמש לעתים קרובות לטיפול בגסטריטיס כרונית, כיבי קיבה וכיבים בתריסריון. מחקר פרמקולוגי מודרני הראה כי LJZD ו- LJZD שונה יש ערך יישום גבוה בטיפול האדג'ובנטי של UC וסרטן דרכי העיכול 17,18,19.

כיום, ישנן דרכים רבות לבנות מודלים של עכברי UC-CRC, אך מודל העכבר המושרה אזוקסימתאן (AOM)/דקסטרן סולפט נתרן (DSS) הוא מודל UC-CRC הנפוץ ביותר; הסימפטומים הקליניים, התצפיות המורפולוגיות והפתולוגיות הוכיחו כי המודל דומה מאוד ל- UC-CRC20,21 האנושי. העיקרון הבסיסי הוא לגרום תחילה לקרצינוגנזה עם AOM כימי מסרטן ולאחר מכן לחשוף עכברים באופן רציף לסביבת הגירוי הדלקתי של DSS כדי לדמות את הנזק המתמשך והתיקון של אפיתל רירית המעי, ובכך לבנות מודל עכבר UC-CRCמודל 22. מטרת מחקר זה היא לבסס מודל עכברי של UC-CRC על ידי הזרקה תוך צפקית של AOM וגירוי מחזורי של DSS בטווח הקצר ולהעריך את השפעת התרופה והמנגנון המולקולרי של LJZD על UC-CRC על מנת לספק בסיס מדעי לטיפול ב- UC-CRC.

Protocol

הליך בעלי החיים אושר על ידי ועדת האתיקה של אוניברסיטת צ'אנגצ'ון לרפואה סינית (מספר שיא: 2021214). עכברי C57BL/6J ספציפיים נטולי פתוגן (8-10 שבועות, משקל 18-22 גרם), זכר ונקבה, שוכנו בכלובים מאווררים באופן עצמאי בטמפרטורה של 22 מעלות צלזיוס ולחות יחסית של 65%. העכברים החלו את הניסוי לאחר 7 ד' של הזנה אדפטיבית, שבמהלכה הייתה להם גישה חופשית למים ולתזונה.

1. הכנת סמים

  1. הכנת LJZD
    הערה: התרופה הסינית שבה נעשה שימוש נרכשה מבית החולים המסונף של אוניברסיטת צ'אנג-צ'ון לרפואה סינית וזוהתה כרפואה סינית מקורית (ראה טבלה 1).
    1. שים Dangshen (12 גרם), Baizhu (12 גרם), Gancao (6 גרם), Chenpi (12 גרם), Jiangbanxia (9 גרם) לתוך סיר קרמיקה מיוחד (ראה טבלה של חומרים). הוסיפו 1000 מ"ל מים מזוקקים והשרו בטמפרטורת החדר למשך שעה אחת (ראו איור 1A).
    2. אבקה 12 גרם ממלאים לאבקה דקה עם מטחנה ומשרים 300 מ"ל מים מזוקקים במיכל אחר למשך שעה אחת בטמפרטורת החדר.
    3. מערבבים את הרפואה הסינית הנ"ל בסיר הקרמיקה המיוחד. מרתיחים את התערובת ולאחר מכן לשמור על להבה בינונית עד רק 300 מ"ל של מרתח נשאר. השתמש גזה רפואית לסינון ולשמר את התסנין בטמפרטורת החדר.
    4. מוסיפים 1000 מ"ל מים מזוקקים וחוזרים על פעולת המרתח הנ"ל פעם נוספת. סנן שוב באמצעות גזה רפואית. מערבבים את התסנין ומרתיחים אותו עד שנשאר רק 150 מ"ל.
    5. צנטריפוגות את הנוזל המרוכז ב 10,000 x גרם במשך 5 דקות, ועוד לרכז את supernatant המתקבל ל 30 מ"ל על אש בינונית. מעבירים את התרכיז הסופי לצלחת ומייבשים אותו באמצעות תנור ייבוש חשמלי עד שרק המומס נשאר כאבקה.
    6. לשקול את מוצק לעיל ולהמיס אותו במים מזוקקים סטריליים כדי לקבל תמיסה המכילה 22.85 מ"ג של תרופה לכל 0.2 מ"ל (114.16 מ"ג / מ"ל), שהוא המינון היומי של עכברים.
  2. הכנת חומצה סליצילית 5-אמינו
    הערה: לחומצה סליצילית 5-אמינו (5-ASA; ראה טבלת חומרים) יש השפעה מונעת טובה על UC-CRC, והיא שימשה כתרופה חיובית במחקר זה23.
    1. יש להמיס 64 מ"ג אבקת 5-ASA ב-200 מ"ל מים מזוקקים סטריליים לקבלת תמיסת 5-ASA במינון 1.82 מ"ג/מ"ל. המינון היומי לעכבר בודד היה 0.2 מ"ל.
  3. הכנת תמיסת הזרקת AOM
    1. יש להוסיף 2.5 מ"ל מים מזוקקים סטריליים לאבקת AOM במינון 25 מ"ג (ראו טבלת חומרים), ולערבב במערבולת מערבולת (ראו טבלת חומרים) להכנת תמיסת מלאי AOM במינון 10 מ"ג/מ"ל, לאחסן בטמפרטורה של -20°C עד לשימוש.
    2. הכן את תמיסת הזרקת AOM על ידי דילול תמיסת מלאי AOM במים מזוקקים סטריליים ביחס של 10:1 (1 מ"ג/מ"ל).

2. הקמת מודל UC-CRC

הערה: הניסוי חולק ל-4 קבוצות: קבוצת ביקורת, מודל, LJZD וקבוצת 5-ASA, 10 עכברים בכל קבוצה. מלבד קבוצת הביקורת, הקבוצות האחרות טופלו ב-AOM וב-DSS.

  1. הזרקה תוך צפקית של תמיסת הזרקת AOM
    הערה: לאחר הזנה אדפטיבית במשך 7 ד', עכברים קיבלו תמיסת הזרקת AOM (1 מ"ג/מ"ל) באמצעות הזרקה תוך-צפקית (ראו איור 1B).
    1. החזק את העכבר עם בטנו למעלה וראשו מעט למטה. אחזו בעור הגב כדי להדק את עור הבטן ונקבו את העור כ-1 ס"מ מימין להצטלבות קו השורש של שתי הירכיים בקו אמצע הבטן בעזרת מזרק בנפח 1 מ"ל (ראו טבלת חומרים).
    2. דחפו את מחט המזרק 1 מ"ל למרחק של 3-5 מ"מ מתחת לעור, שמרו אותה מקבילה לקו האמצע של הבטן, והכניסו את המחט 0.3-0.5 מ"מ לתוך חלל הבטן ב 45°.
    3. לאחר שהקצה עובר דרך שריר הבטן, המפעיל חש אובדן התנגדות פתאומי. לאחר מכן, משוך את המזרק החוצה ואחורה כדי לבחון אם מתרחשת חלחול נוזלי. אם לא, דחפו את תמיסת הזרקת AOM באיטיות לתוך העכברים ב-0.1 מ"ל/10 גרם.
  2. גירוי מחזורי של 2% פתרון DSS
    הערה: כל עכבר המושרה על ידי AOM קיבל 500 מ"ל של תמיסת DSS בשבועות 3, 6 ו -9, והעכברים שתו בחופשיות במהלך תקופה זו.
    1. הכן תמיסת 2% DSS על-ידי הוספת 500 מ"ל מים מזוקקים סטריליים ל-10 גרם DSS (ראה טבלת חומרים). מערבבים עם מערבל מערבולת ומאחסנים ב-4°C עד לשימוש.
    2. כל עכבר המושרה על ידי AOM שותה 500 מ"ל של תמיסת 2% DSS באופן חופשי במשך 7 d בשבועות 3, 6 ו -9 לאחר השראת AOM.

3. טיפול תרופתי

הערה: בני אדם בוגרים זקוקים ל-63 גרם LJZD ליום. על פי נוסחת ההמרה של מינון ניסיוני של עכברים ותרופות אנושיות, מינון ניסיוני שווה ערך לעכברים (מ"ג/ק"ג) = מינון אנושי (מ"ג/ק"ג)/משקל גוף (60 ק"ג) x 9.1, המינון היומי של עכברים היה כ-9.6 גרם לק"ג.

  1. יש לטפל בקבוצת LJZD ו-5-ASA עם 0.1 מ"ל/10 גרם של תמיסת LJZD מוכנה ו-5-ASA על ידי גבאז' קיבה בשבוע 7 ובשבוע 15, בהתאמה.
    1. עבור ניהול intragastric בעכברים, לבצע את ההליך הבא. החזק את העכבר ביד שמאל, וביד ימין, החזק את מנגנון זילוח הבטן. הכנס את מחט המזרק לפה והחליק אותה במורד הקיר האחורי של הלוע של העכברים. החליקו במורד הלוע כשהעכברים בולעים והמשיכו לנוע קדימה. כאשר הייתה תחושה של התנגדות, וניתן היה לדחוף את המזרק לתוך הלוע, משכו את המחט החוצה והשלימו את ההזרקה.
  2. יש לטפל בקבוצת הבקרה ובקבוצת הדגם באותה כמות של מלח (ראו טבלת חומרים).
  3. לטפל בעכברים בכל קבוצה עם תרופה מתאימה פעם ביום באותו זמן במהלך תקופת הממשל.

4. הערכת מודל UC-CRC ויעילות LJZD

  1. ציון מדד פעילות המחלה
    הערה: על פי טבלה 2, מדד פעילות המחלה (DAI) הוערך על ידי שילוב של ירידה במשקל, צמיגות צואה ודימום צואה של העכברים.
    1. רשום את משקל העכברים מדי יום מתחילת האכלה אדפטיבית ועד סוף הטיפול התרופתי.
    2. שימו לב היטב לעקביות הצואה של כל עכבר ניסוי ותיעדו את תנועות המעיים כאחד משלושת התנאים: צואה רגילה ורכה ושלשול מימי.
    3. רשום את הדימום הצואתי של חיות ניסוי כאחד משלושת התנאים: ללא דימום, דימום מועט ודם גלוי בצואה.
  2. איתור רמת IL-6 בסרום
    1. טפל בעכברים עם LJZD או 5-ASA במשך 9 שבועות. תקן את העכברים על ידי אחיזת עור הצוואר של העכבר ביד שמאל ולחץ בעדינות על שולחן הניסוי כדי לקחת את המיקום decubitus לרוחב. חותכים את השפם של העכברים עם מספריים. חתכו את שפם העכברים במספריים בזהירות (ראו טבלת חומרים) כדי למנוע זיהום דם.
      הערה: עכברים שלא יכלו להתנועע בחופשיות נחשבו לקבועים כראוי. אם זה לא קורה, יש לתקן את העכברים.
    2. מרדימים את העכבר על ידי שאיפה של 2% isoflurane. לעקר את העור סביב גלגל העין עם אתנול (ראה טבלה של חומרים). לחץ על עור העין בצד בעדינות כדי להפוך את גלגל העין צפוף ובולט.
    3. הדקו את גלגל העין בפינצטה למרפק והסירו את גלגלי העיניים בצורה מדויקת ומהירה. תנו לדם לטפטף לתוך הצינור הצנטריפוגלי (ראו טבלת חומרים). תוך כדי כך, הקש על לב העכבר כדי להאיץ את איסוף הדם.
    4. שמור את הדם שנאסף בטמפרטורת החדר במשך 30 דקות וצנטריפוגה אותו ב 3,500 x גרם במשך 10 דקות. אסוף את הסופרנאטנט וזהה את רמת IL-6 בהתאם להוראות ערכת זיהוי התוכן IL-6 (ראה טבלת חומרים).
  3. הפרדת רקמת המעי הגס
    1. יש להרדים את העכברים לאחר דגימת דם על ידי שאיפת איזופלורן 5% ממנת יתר ונקע צוואר הרחם (ראו טבלת חומרים) בהתאם לאתיקה של בעלי חיים.
    2. שמור את העכברים בסביבה אנטומית קריוגנית. לשתק את העכברים במצב שכיבה. חותכים את שיער הבטן התחתונה במספריים ומחטאים אותו באתנול.
    3. צבטו את נקודת ההצטלבות בין שני שורשי הירך לקו האמצע של הבטן בעזרת מלקחיים בעפעפיים (ראו טבלת חומרים). חותכים חתך רוחבי על 1-1.5 ס"מ עם מספריים.
    4. חותכים חתך אורכי לאורך הקו החציוני של הבטן מנקודת האמצע של החתך הרוחבי לכיוון תהליך הקסיפואיד.
    5. הסר את הרקמות peri-colorectal לכיוון פי הטבעת כדי להפריד את המעי הגס מן הרקמה שמסביב. היזהר לא לפגוע במעי הגס.
    6. לדחוף את העור של הבטן לצדדים כדי לחשוף באופן מלא את המעי הגס. הסר את המעי הגס מחלל הבטן עם מלקחיים עפעפיים לחתוך את הקטעים מפי הטבעת אל cecum (לא כולל); אורכו הכולל כ-10 ס"מ. לאחסן את רקמות המעי הגס המתקבל מלוחים ב 4 °C (75 °F).
  4. הערכת אורך ומשקל פי הטבעת
    1. חלצו את המלח בטמפרטורה של 4°C בעזרת מחט בנפח 5 מ"ל (ראו טבלת חומרים) כדי לשטוף את החלק הפנימי של המעי הגס. לאחר מכן, הניחו את המעי הגס על נייר סופג כדי לספוג את לחות הרקמה.
    2. שקלו את רקמות המעי הגס ולאחר מכן הניחו אותן על נייר A4 כדי למדוד את אורכן.
  5. למדוד את מספר הגידולים במעי הגס
    1. חותכים את המעי הגס לאורכו כדי לפתוח אותו במלואו ולהתבונן במספר ובגודל הגידולים בקולורקטום .
  6. ניתוח פתולוגי של המעי הגס
    1. תקן את המעי הגס ב 4% paraformaldehyde במשך 24 שעות. הטמע את הרקמה הרקטלית הקבועה בפרפין מותך וחתך ברציפות בעובי של 5 מיקרומטר על ידי מיקרוטום מקפיא רקמה.
    2. על פי הנוהל של Hou et al.24, שעווה את החלקים בקסילן ולאחר מכן לייבש אותו עם ריכוזים סדרתיים של אתנול. לאחר צביעה בתמיסת המטוקסילין במשך 5 דקות, שטפו את החלקים במים טהורים. לאחר מכן, יש להכתים בתמיסת אאוזין 0.5% למשך דקה אחת (ראו טבלת חומרים).
    3. בצע שוב התייבשות הדרגתית וטיפול שקוף קסילן. אטמו את המקטעים והתבוננו בהם תחת המיקרוסקופ האופטי (ראו טבלת חומרים) והתצלום, כפי שתוארו על ידי Xie et al.25.
  7. ניתוח אימונוהיסטוכימי של קולורקטום
    1. יש להדיח ולייבש את החלקים בהתאם לשיטה הנ"ל. לתקן את האנטיגן בקטעים עם טכניקה תיקון תרמי בלחץ גבוה, כפי שתואר על ידי Gok et al.26.
    2. משרים את החלקים בחוסמי פרוקסידאז אנדוגניים בטמפרטורת החדר למשך 15 דקות. אטמו את החלקים בסרום עיזים (ראו טבלת חומרים).
    3. הוסף את הנוגדן העיקרי ZO-1 (1:1000), אוקלודין (1:1000) ו- KI67 (1:500; ראה טבלת חומרים) למקטעים ודגור לילה ב -4 מעלות צלזיוס. שטפו את המקטעים עם חיץ PBS (ראו טבלת חומרים), הוסיפו לו נוגדן משני לשימוש כללי (1:5000; ראו טבלת חומרים) ודגרו בטמפרטורה של 37°C למשך 30 דקות.
    4. הוסף את פתרון DAB (ראה טבלת חומרים) למקטעים לפיתוח צבע. כתם נגדי את החלקים עם תמיסת hematoxylin.
    5. יש לייבש, לשקוף ולאטום שוב את המקטעים. שימו לב לביטוי של חלבון על ידי המיקרוסקופ האופטי.

תוצאות

המרתח של LJZD הוכן לפי יחס הרכב התרופות בטבלה 1 ושיטת המרתח של TCM באיור 1A. לפי נקודת הזמן המצוינת באיור 1B, עכברים קיבלו הזרקה תוך-צפקית של 1 מ"ג/מ"ל AOMביום השביעי, ולעכברים ניתנה גישה חופשית למי שתייה המכילים 2% DSSבשבועות השלישי, הש?...

Discussion

CRC הוא אחד מסוגי הסרטן הנפוצים ביותר בעולם, עם כ-1,148,000 מקרים חדשים ויותר מ-576,000 מקרי מוות מדי שנה. CRC ניתן לחלק לשלושה סוגים על פי סיבות שונות, כולל תורשתי, ספורדי UC-CRC31. שכיחות CRC בחולים עם מחלות מעי דלקתיות כגון UC גבוהה משמעותית מזו שבאוכלוסייה הכללית. UC מגרה את התפתחות CRC באמצעות ?...

Disclosures

למחברים אין מה לחשוף.

Acknowledgements

עבודה זו נתמכה על ידי מחלקת המדע והטכנולוגיה של מחוז ג'ילין (YDZJ202201ZYTS181).

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
AzoxymethaneSigmaA5486
5-amino salicylic acidKuihua Pharmaceuticals Group Jiamusi Luling Pharmaceutical Co., Ltd3819413
C57BL/6J miceLiaoning Changsheng Biotechnology Co., LtdNO 210726210100853716
Cover slipJiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd10212432C
DAB color development kitJiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd2005289
Dewatering machine Wuhan Junjie Electronics Co., LtdJJ-12J
Dextran sulfate sodiumDalian Meilun Biotechnology Co., LtdMB5535
Embedding machineWuhan Junjie Electronics Co., LtdJB-P5
Hematoxylin-eosin dyeWuhan Hundred Degree Biotechnology Co., LtdB1000
IL-6Jiangsu Meimian Industrial Co., LtdMM-0163M2
IsofluraneRWD Life Science Co., LtdR510-22-10
KI67 primary antibodyGoogle Biotechnology IncGB121141
Neutral gumWuhan Hundred Degree Biotechnology Co., Ltd10004160
Object slideJiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd10212432A
Occludin primary antibodyAffnityDF7504
Orthostatic optical microscopeNikonNikon Eclipse CI
Pathological microtomeShanghai Leica Instrument Co., LtdRM2016
ZO-1 primary antibodyAbcamab221547

References

  1. Sung, H., et al. Global cancer statistics 2020: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 Cancers in 185 Countries. CA Cancer J Clin. 71 (3), 209-249 (2021).
  2. Tsai, K. Y., et al. Novel heavily fucosylated glycans as a promising therapeutic target in colorectal cancer. J Transl Med. 21 (1), 505 (2023).
  3. Chen, X., et al. Smoking, genetic predisposition, and colorectal cancer risk. Clin Transl Gastroenterol. 12 (3), e00317 (2021).
  4. Keum, N., Giovannucci, E. Global burden of colorectal cancer: emerging trends, risk factors and prevention strategies. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 16 (12), 713-732 (2019).
  5. Sninsky, J. A., Shore, B. M., Lupu, G. V., Crockett, S. D. Risk factors for colorectal polyps and cancer. Gastrointest Endosc Clin N Am. 32 (2), 195-213 (2022).
  6. Rivera, A. P., et al. Ulcerative colitis-induced colorectal carcinoma: A deleterious concatenation. Cureus. 14 (2), e22636 (2022).
  7. Faye, A. S., Holmer, A. K., Axelrad, J. E. Cancer in inflammatory bowel disease. Gastroenterol Clin North Am. 51 (3), 649-666 (2022).
  8. Becker, W. R., et al. Single-cell analyses define a continuum of cell state and composition changes in the malignant transformation of polyps to colorectal cancer. Nat Genet. 54 (7), 985-995 (2022).
  9. Choi, J. K., Kim, D. W., Shin, S. Y., Park, E. C., Kang, J. G. Effect of ulcerative colitis on incidence of colorectal cancer: Results from the nationwide population-based cohort study (2003-2013). J Cancer. 7 (6), 681-686 (2016).
  10. Gallo, G., Kotze, P. G., Spinelli, A. Surgery in ulcerative colitis: When? How. Best Pract Res Clin Gastroenterol. 32-33, 71-78 (2018).
  11. Shah, S. C., Itzkowitz, S. H. Colorectal cancer in inflammatory bowel disease: Mechanisms and management. Gastroenterology. 162 (3), 715.e3-730.e3 (2022).
  12. Fabregas, J. C., Ramnaraign, B., George, T. J. Clinical updates for colon cancer care in 2022. Clin Colorectal Cancer. 21 (3), 198-203 (2022).
  13. Hu, J., et al. Pharmacological and molecular analysis of the effects of Huangqi Jianzhong decoction on proliferation and apoptosis in GES-1 cells infected with H. pylori.Front Pharmacol. 13, 1009705 (2022).
  14. Shang, L., et al. Mechanism of Sijunzi decoction in the treatment of colorectal cancer based on network pharmacology and experimental validation. J Ethnopharmacol. 302 (Pt A), 115876 (2023).
  15. Zhang, X. Y., et al. Sishen pill maintained colonic mucosal barrier integrity to treat ulcerative colitis via Rho/ROCK signaling pathway. Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 5536679 (2021).
  16. Wu, X., Dai, Y., Nie, K. Research progress of Liujunzi decoction in the treatment of tumor-associated anorexia. Drug Des Devel Ther. 16, 1731-1741 (2022).
  17. Han, Y., et al. Liujunzi decoction exerts potent antitumor activity in oesophageal squamous cell carcinoma by inhibiting miR-34a/STAT3/IL-6R feedback loop and modifies antitumor immunity. Phytomedicine. 111, 154672 (2023).
  18. Chen, D., Zhao, J., Cong, W. Chinese herbal medicines facilitate the control of chemotherapy-induced side effects in colorectal cancer: Progress and perspective. Front Pharmacol. 9, 1442 (2018).
  19. Wang, M., Wang, S., Su, Q., Ma, T. Effect of combining early chemotherapy with Zhipu Liujunzi decoction under the concept of strengthening and consolidating body resistance for gastric cancer patients and nursing strategy. Contrast Media Mol Imaging. 2021, 2135924 (2021).
  20. Lin, Y., Koumba, M. H., Qu, S., Wang, D., Lin, L. Blocking NFATc3 ameliorates azoxymethane/dextran sulfate sodium induced colitis-associated colorectal cancer in mice via the inhibition of inflammatory responses and epithelial-mesenchymal transition. Cell Signal. 74, 109707 (2020).
  21. Yu, C. T., et al. Identification of significant modules and targets of Xian-Lian-Jie-Du decoction based on the analysis of transcriptomics, proteomics and single-cell transcriptomics in colorectal tumor. J Inflamm Res. 15, 1483-1499 (2022).
  22. Lin, L., Wang, D., Qu, S., Zhao, H., Lin, Y. miR-370-3p alleviates ulcerative colitis-related colorectal cancer in mice through inhibiting the inflammatory response and epithelial-mesenchymal transition. Drug Des Devel Ther. 14, 1127-1141 (2020).
  23. Qiu, X., Ma, J., Wang, K., Zhang, H. Chemopreventive effects of 5-aminosalicylic acid on inflammatory bowel disease-associated colorectal cancer and dysplasia: a systematic review with meta-analysis. Oncotarget. 8 (1), 1031-1045 (2017).
  24. Hou, Y., et al. Longzhibu disease and its therapeutic effects by traditional Tibetan medicine: Ershi-wei Chenxiang pills. J Ethnopharmacol. 249, 112426 (2020).
  25. Xie, N., et al. Rhodiola crenulate alleviates hypobaric hypoxia-induced brain injury via adjusting NF-κB/NLRP3-mediated inflammation. Phytomedicine. 103, 154240 (2022).
  26. Gok, A., et al. Role of reduced Bdnf expression in novel Apc mutant allele-induced intestinal and colonic tumorigenesis in mice. In Vivo. 37 (4), 1562-1575 (2023).
  27. Lin, Y., et al. Pou3f1 mediates the effect of Nfatc3 on ulcerative colitis-associated colorectal cancer by regulating inflammation. Cell Mol Biol Lett. 27 (1), 75 (2022).
  28. Xu, W., Zhao, R., Yuan, B. The therapeutic effect of traditional LiuJunZi decoction on ovalbumin-induced asthma in Balb/C mice. Can Respir J. 2021, 6406295 (2021).
  29. Kaihara, T., et al. Redifferentiation and ZO-1 reexpression in liver-metastasized colorectal cancer: possible association with epidermal growth factor receptor-induced tyrosine phosphorylation of ZO-1. Cancer Sci. 94 (2), 166-172 (2003).
  30. Lei, H. T., et al. Ki67 testing in the clinical management of patients with non-metastatic colorectal cancer: Detecting the optimal cut-off value based on the restricted cubic spline model. Oncol Lett. 24 (6), 420 (2022).
  31. Olén, O., et al. Colorectal cancer in ulcerative colitis: a Scandinavian population-based cohort study. Lancet. 395 (10218), 123-131 (2020).
  32. Arnold, M., et al. Global patterns and trends in colorectal cancer incidence and mortality. Gut. 66 (4), 683-691 (2017).
  33. Biller, L. H., Schrag, D. Diagnosis and treatment of metastatic colorectal cancer: A review. Jama. 325 (7), 669-685 (2021).
  34. Talero, E., et al. Expression patterns of sirtuin 1-AMPK-autophagy pathway in chronic colitis and inflammation-associated colon neoplasia in IL-10-deficient mice. Int Immunopharmacol. 35, 248-256 (2016).
  35. Qian, Z., et al. Mulberry fruit prevents LPS-induced NF-κB/pERK/MAPK signals in macrophages and suppresses acute colitis and colorectal tumorigenesis in mice. Sci Rep. 5, 17348 (2015).
  36. Pothuraju, R., et al. Depletion of transmembrane mucin 4 (Muc4) alters intestinal homeostasis in a genetically engineered mouse model of colorectal cancer. Aging. 14 (5), 2025-2046 (2022).
  37. Perše, M., Cerar, A. Dextran sodium sulphate colitis mouse model: traps and tricks. J Biomed Biotechnol. 2012, 718617 (2012).
  38. Zeng, B., et al. Dextran sodium sulfate potentiates NLRP3 inflammasome activation by modulating the KCa3.1 potassium channel in a mouse model of colitis. Cell Mol Immunol. 19 (8), 925-943 (2022).
  39. Parang, B., Barrett, C. W., Williams, C. S. AOM/DSS model of colitis-associated cancer. Methods Mol Biol. 1422, 297-307 (2016).
  40. Tanaka, T., et al. A novel inflammation-related mouse colon carcinogenesis model induced by azoxymethane and dextran sodium sulfate. Cancer Sci. 94 (11), 965-973 (2003).
  41. Suzuki, R., Kohno, H., Sugie, S., Nakagama, H., Tanaka, T. Strain differences in the susceptibility to azoxymethane and dextran sodium sulfate-induced colon carcinogenesis in mice. Carcinogenesis. 27 (1), 162-169 (2006).
  42. De Robertis, M., et al. The AOM/DSS murine model for the study of colon carcinogenesis: From pathways to diagnosis and therapy studies. J Carcinog. 10, 9 (2011).
  43. Song, J. L., et al. Dietary mixed cereal grains ameliorate the azoxymethane and dextran sodium sulfate-induced colonic carcinogenesis in C57BL/6J mice. J Med Food. 23 (4), 440-452 (2020).
  44. Zou, Y. F., et al. Effects of Huaier extract on ameliorating colitis-associated colorectal tumorigenesis in mice. Onco Targets Ther. 13, 8691-8704 (2020).
  45. Luo, X., et al. Obacunone reduces inflammatory signalling and tumour occurrence in mice with chronic inflammation-induced colorectal cancer. Pharm Biol. 58 (1), 886-897 (2020).
  46. Dai, Y., et al. Liujunzi Decoction ameliorated cisplatin-induced anorexia by inhibiting theJAK-STAT signaling pathway and coordinating anorexigenic and orexigenic neuropeptides in rats. J Ethnopharmacol. 285, 114840 (2022).
  47. Ghosh, D., Dutta, A., Kashyap, A., Upmanyu, N., Datta, S. PLP2 drives collective cell migration via ZO-1-mediated cytoskeletal remodeling at the leading edge in human colorectal cancer cells. J Cell Sci. 134 (18), jcs253468 (2021).
  48. Yan, S., et al. Berberine regulates short-chain fatty acid metabolism and alleviates the colitis-associated colorectal tumorigenesis through remodeling intestinal flora. Phytomedicine. 102, 154217 (2022).
  49. Ma, Y. L., et al. Immunohistochemical analysis revealed CD34 and Ki67 protein expression as significant prognostic factors in colorectal cancer. Med Oncol. 27 (2), 304-309 (2010).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

CRC UCLiujunzi

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved